高华；李玉柱；韩龙才；张华；张海军；林秋全；王磊
目的 建立一种用于低拷贝乙型肝炎病毒(HBV)不同基因型全基因组扩增的巢式聚合酶链式反应(nested PCR)方法及应用评价.方法 通过设计和改良一组对HBV各基因型(A,B,C,D,E,F,G) DNA均具有较高扩增效率的通用巢式简并引物,采用两步法分六段(Ⅰa,Ⅰb,Ⅱa,Ⅱb,Ⅲ,Ⅳ)扩增低拷贝HBV基因组,比较不同反应条件对于PCR扩增产物的影响(退火温度,引物浓度),建立一种适合于低拷贝HBV全基因组扩增的方法;同时采用该方法对57份低浓度HB-sAg乙肝感染者(HBsAg＜10IU/ml)的全基因组进行扩增、测序、拼接并进行评价.结果 该方法的灵敏度可达25IU/ml,重复性好,对57份低浓度HBsAg乙肝感染者进行扩增,其中全基因扩增49例(86.0％),各片段(Ⅰa,Ⅰb,Ⅱa,Ⅱb,Ⅲ,Ⅳ)扩增分别为:53例(93.0％),52例(91.2％),54例(94.7％),54例(94.7％),55例(96.5％)和49例(86.0％),说明该方法适用于慢性低浓度HBsAg乙肝感染者HBV DNA全基因扩增.结论 该文为慢性低浓度HBsAg乙肝感染者的全基因系列分析提供了高灵敏度、高特异度的方法,可在低浓度HBsAg感染者流行病学调查中发挥重要作用,同时为巢氏PCR扩增反应体系的优化提供了参考.
作者：张孟；李倩；周华君；孙长贵；成军；戴玉柱 刊期： 2018年第03期
心脑血管疾病作为临床常见病,具有高发病率、高致残率及高死亡率的特点.研究认为血小板黏附、活化及聚集引起的血管内血栓是导致心脑血管疾病发生的重要原因之一,因此,探索和明确有关血小板活化及血栓形成的因素是预防和控制心脑血管疾病的重要切入点.近的研究显示肠道微生物群作为人体内大复杂的微生态系统参与到血小板功能的调控中.笔者对肠道微生物群参与血栓形成及作为血栓性疾病治疗手段的新进展进行综述,从而为肠道微生物群为基础的治疗方案在心脑血管疾病中的临床应用提供新的思路和理论依据.
作者：曹杨琳；杨剑峰；何杨 刊期： 2018年第03期
目的 探讨山东地区医院获得性嗜麦芽寡养单胞菌(stenotrophomonas maltophilia,SMA)耐药性及相关危险因素分析.方法 收集2015年10月1日～2016年9月30日期间山东省118家医院的送检标本进行细菌培养,分离鉴定得到4 808株SMA菌株,对其分布、耐药性进行分析.共获得2 000例资料完整的SMA感染患者作为观察组;选取2 000例同科室、年龄±3岁且未发生SMA感染的患者作为对照组,并采用logistic多元回归分析分析SMA感染的相关危险因素.结果 SMA的标本来源中62.65％为痰液,17.55％为肺泡灌洗液,56.47％来自ICU,26.87％来自呼吸内科.SMA对左旋氧氟沙星、复方新诺明、米诺环素和环丙沙星有较低的耐药性(＜10％);对氨苄西林、头孢唑林、庆大霉素、亚胺培南和美罗培南的耐药率为60.02％～90.01％;对头孢他啶、头孢呋辛、头孢噻肟、四环素、阿莫西林/克拉维酸和哌拉西林/他唑巴坦的耐药率在37.51％～45.00％之间.单因素分析和Logistic多因素分析表明SMA感染的独立危险因素为:ICU入住(P=0.026)、慢性肺部疾病(P=0.042)、入侵性操作(P=0.005)、使用三种以上抗生素(P=0.003)、免疫抑制剂(P=0.014).结论 ICU和呼吸内科应特别加强对SMA菌群的监控力度,减少不必要的有创诊疗操作,避免广谱抗生素和免疫抑制剂滥用,预防医源性感染的发生,减少交叉感染,降低医院获得性SMA感染率.
作者：吕刚飞；刘海洋；赵乔妹 刊期： 2018年第03期
目的 探讨外周血C反应蛋白(CRP),白细胞(WBC)和中性杆状核粒细胞(Nst)比值单独及联合检测在儿科细菌感染性疾病中的诊断价值.方法 回顾性分析内江市第二人民医院2016年7～11月临床诊断为细菌性感染患儿54例(细菌组)、非细菌性感染患儿103例(非细菌组)以及健康体检儿童56例(对照组),对所有选取对象进行CRP,WBC以及Nst比值检测并进行统计学分析.结果 细菌组CRP,WBC和Nst比值水平分别为25.27±27.13 mg/L,(11.06±5.89)×109/L和(8.87±4.29)％,明显高于非细菌组和对照组,差异均有统计学意义(均P＜0.05);联合检测(CRP+ Nst组合)ROC曲线下面积为0.955,与WBC+CRP+ Nst组合ROC曲线下面积相当,优于单独检测CRP,WBC和Nst比值和其它联合检测组合指标,差异均有统计学意义(P＜0.05);联合检测(CRP+ Nst组合)诊断细菌性感染的灵敏度为96.3％,高于其它单独及WBC+ CRP+ Nst联合检测组合指标.结论 联合检测(CRP+ Nst组合)在儿科细菌感染性疾病中诊断价值较大,适合临床推广应用.
作者：周振忠；汪永强；袁平宗；张丹 刊期： 2018年第03期
目的 探讨血清miR-765与CA153联合检测对乳腺癌的诊断价值.方法 收集乳腺癌患者58例,乳腺良性疾病患者28例及体检健康者30例,应用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-765的表达水平,受试者工作特征曲线分析单一和联合检测对早期乳腺癌的诊断价值.结果 乳腺癌患者血清miR-765相对表达量均显著低于乳腺良性疾病患者和健康对照者(F=35.97,均P＜0.01);单独检测miR-765的ROC曲线下AUC为0.843(95％CI:0.767～0.919),灵敏度为87.9％,特异度为81.0％;miR-765与CA153联合检测的ROC曲线下AUC为0.903(95％CI:0.844～0.962),灵敏度为89.7％,特异度为86.2％;CA153＜25U/ml的乳腺癌患者血清miR-765的ROC曲线下AUC为0.840(95％CI:0.746～0.934),灵敏度为87.5％,特异度为82,4％.结论 miR-765对乳腺癌的诊断具有一定价值,与CA153联合检测可为临床提供一种潜在的辅助方法.
作者：洪宏；袁建芬；喻海忠 刊期： 2018年第03期
目的 了解四川省绵阳地区1～16岁健康儿童维生素A,25-羟基维生素D[(25-(OH)D)]和维生素E水平.方法 以2017年1～12月在绵阳市中心医院儿保门诊接受健康体检的750例健康儿童作为研究对象,按年龄分为3组:婴幼儿1～3岁481例,学龄前(3～6岁)儿童132例,青少年(6～16岁)137例,采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法检测血清维生素A,25-(OH)D和维生素E水平.结果 血清维生素A,25-(OH)D和维生素E平均水平分别为0.45±o.25 mg/L,27.27±11.38 ng/mL及9.18±5.75 mg/L.血清维生素A水平无年龄差异(x2=1.002,P=0.606),血清25-(OH)D水平(x2=6.843,P=0.033)与维生素E水平(x2=14.922,P=0.001)在不同年龄组差异有统计学意义.维生素A构成比在年龄上差异有统计学意义(x2=35.471,P＜0.01),在各年龄组中均存在过量情况,且随着年龄增长呈增加趋势;血清25-(OH)D构成比在年龄上差异有统计学意义(x2=20.900,P＜0.01),其缺乏率和不足率随着儿童年龄增长呈增加趋势;维生素E构成比无年龄差异(x2=7.054,P=0.133),其在各年龄组缺乏率与不足率均较明显,其中学龄前组总体缺乏为严重,达74.2％.结论 四川省绵阳地区1～16岁健康儿童维生素A,25-(OH)D和维生素E的营养状况不容乐观,应提高对脂溶性维生素的监测、预防意识,增加富含维生素A,25-(OH)D和维生素E的食物摄入,必要时在医生指导下及时补充维生素制剂.
作者：王晶；王欢欢；张绍城 刊期： 2018年第03期
目的 探究Ⅱ型成对免疫球蛋白样受体(paired immunogobin-like type 2 ceceptor alpha,PILRα)在隐球菌脑膜炎患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中的表达情况,初步讨论其临床意义.方法 收集2014年5月～2016年11月到长海医院就诊的30例隐球菌脑膜炎患者外周血作为实验组,诊断标准为脑脊液染色新生隐球菌阳性或培养阳性,同期体检的30例健康人外周血作为对照组.以密度梯度离心法获得标本PBMCs,以PCR检测PBMCs中PILRα的基因表达情况,以ELISA法检测血浆中PILRα及相关细胞因子的表达情况.以独立样本t检验进行两组间变量的比较,以Pearson相关系数表示两变量间的相关性.结果 实验组与对照组PBMCs中PILRα相对mRNA水平为2.49±0.74 vs 1.77±0.69(t=3.898,P=0.000 3),血浆中PILRα的蛋白表达水平为33.81±10.21 ng/ml vs 20.01±6.74 ng/ml,差异均具有统计学意义(t=6.178,P＜0.000 1).实验组血浆中PILRα的蛋白表达量与IL-1,IL 6和IFN-γ呈正比(r=0.456,0.521,0.467,P＜0.05),差异具有统计学意义.结论 PILRα可能参与了隐球菌脑膜炎的免疫炎症过程,是该病潜在的监测标志物和治疗靶点.
作者：李腾达；刘鹏；龙曙萍；刘云；黄元兰；张薇薇；郭杰；谷明莉；邓安梅 刊期： 2018年第03期
目的 分析脑脊液生化检测项目室内质量控制不精密度及Westgard西格玛规则在葡萄糖项目室内质量控制(IQC)中的应用.方法收集2014～2017年参加卫生部临床检验中心室间质量评价(EQA)单位回报的IQC数据,依据1/3TEa(室间质量评价限),1/4TEa计算得到满足两种标准的实验室比例.根据1QC所使用的检测系统进行分组统计,并按两个评价标准计算各组的通过率.随机选择2017年10家同时上报葡萄糖项目EQA和IQC的实验室,以EQA中的百分差值作为偏倚(bias)估计值,以IQC的累积变异系数作为不精密度估计值,以EQA计划中的允许总误差TEa作为质量规范,依据公式d=[(TEa-| bias|)/CV]计算σ值.结果 2014～2017年间清蛋白、总蛋白、氯化物3个项目达到两种标准的不精密度性能规范的实验室比例较低.葡萄糖、乳酸脱氢酶、IgA,IgG,IgM和乳酸6个项目通过率相对较高,且各项目的通过率略有上升趋势.使用不同检测系统的通过率比例参差不齐,并无规律.使用Westgard西格玛规则为葡萄糖项目选择合适的质控规则.3号实验室d值＞6,6d质量应选择13s规则;2,5,7号d值分别为4.84,4.47和4.72,4σ质量水平应选择13s/22s/Rs/41s规则;其余实验室σ值均＜4,选用13s/22s/R4s/41s/8x规则.结论 各项目的IQC不精密度水平存在很大差距,各实验室应建立严格的IQC程序,积极参与IQC数据实验室间比对,进一步提高脑脊液生化检测的水平,并通过Westgard西格玛规则为实验室检测项目选择正确的质控规则.
作者：刘佳丽；王薇；何法霖；钟堃；袁帅；张志新；杜雨轩；王治国 刊期： 2018年第03期
目的 通过Logistic回归和ROC工作曲线综合分析糖链抗原153(CA153)、组织多肽特异抗原(TPS)、细胞角质蛋白19片段(cytokeratin 19 fragment antigen 21-1,CYFRA21-1)联合检测在乳腺癌诊断中的临床价值.方法 采用罗氏全自动电化学发光仪检测50例乳腺癌患者(乳腺癌组)、30例健康者(对照组)血清CA153,TPS和CYFRA21-1水平,分析比较乳腺癌组与对照组三项指标水平的差异,两组三项指标单项及联合检测阳性率比较;两组血清CA153,TPS,CY-FRA21-1单项与联合检测对乳腺癌诊断试验的评价指标比较;通过Logistic回归建立回归模型,用ROC工作曲线分析CA153,TPS和CYFRA21-1对乳腺癌的诊断价值.结果 ①乳腺癌组患者血清CA153,TPS和CYFRA21-1水平较对照组明显升高,差异具有统计学意义(t=3.30,P=0.001;t=2.78,P=0.007;t=4.31,P=0.000 05);②单项检测的阳性率从高到低依为:CYFRA21-1(60.0％)＞TPS(54.0％)＞CA153(50.0％),CA 153+TPS+ CYFRA21-1的阳性率为70.0％,比单项检测显著升高;③单项检测中CYFRA21-1的敏感度较高,CA153的特异度较高,单项检测与三项联合检测比较敏感度由50.0％升高到70.0％,符合率由67.5％升高到77.5％,阴性预测值由53.7％升高到64.3％,特异度、阳性预测值略有下降;④通过Logistic回归得乳腺癌的概率预测回归模型Y=1/[1 +EXP(0.099X1+0.038X2+0.578X3-9.694)],三项联合检测的ROC曲线下面积明显大于CA153,TPS,CYFRA21-1单独检测的ROC曲线下面积.结论 联合检测血清CA153,TPS,CYFRA21-1在乳腺癌早期诊断中具有重要的临床价值.
作者：高华；李玉柱；韩龙才；张华；张海军；林秋全；王磊 刊期： 2018年第03期
目的 构建人乳头瘤病毒58型L1/E7“假病毒”疫苗,并研究其免疫学特性.方法 采用sf9昆虫-杆状病毒表达系统表达HPV58 L1蛋白,体外解离重组病毒颗粒,向已经解离的衣壳中加入mE7-pcDNA3.1+质粒,CaCl2室温透析促使病毒样颗粒(VLP)重新聚合,用“假病毒”颗粒滴鼻免疫小鼠,检测小鼠血清IgG,IgA中和抗体以及脾淋巴细胞IFN-γ的分泌水平和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应.结果 SDS-PAGE,Western blot和红细胞凝集实验证实sf9昆虫-杆状病毒表达系统有效表达有功能活性的HPV58 L1蛋白,HPV58 L1蛋白能够有效的折叠、解聚以及再折叠为VLP.小鼠免疫保护实验发现,用包含有mE7-pcDNA3.1+质粒的HPV58 L1“假病毒”免疫小鼠,抗HPV58L1特异性IgG,IgA明显升高(P＜0.001),“假病毒”免疫组产生的IFN-γ明显高于VLP免疫组(P＜o.001);“假病毒”免疫过的小鼠脾淋巴细胞可以特异性杀伤Tc-1细胞,引起CTL反应.结论 成功制备了人乳头瘤病毒58型L1/E7“假病毒”疫苗,能诱发免疫动物较强的体液免疫反应,激发保护性抗体的产生.
作者：王亚婷；李文生；闫小飞；齐宗利；郭华 刊期： 2018年第03期
目的 解决布鲁克microflex LT MALDI-TOF质谱仪在临床微生物学实验室丝状真菌鉴定中样本处理技术操作繁琐,耗时较长的弊端,建立一种快速、简便的丝状真菌质谱鉴定样本前处理方法.方法 以2017年1月～2018年3月陕西省人民医院门诊及住院患者临床标本分离到的各种丝状真菌为研究对象,采用“双甲酸夹心”法进行上机前处理,即于96孔不锈钢靶板上用无菌微量吸头滴加1μl甲酸,再选取培养基上生长的丝状真菌菌落(幼龄菌丝体好)用蘸取少许甲酸溶液的无菌牙签挑取菌丝体与甲酸溶液混合并进行充分研磨,待其自然干燥后在其表面再次滴加1μl的甲酸溶液,干燥后再加1μl基质液(仪器配套),待干燥后即可上机.对检测结果采用形态学和基因测序方法进行确证.结果 新建方法前处理鉴定的丝状真菌有曲霉菌、青霉菌、拟青霉、镰刀菌、皮肤癣菌、接合菌、暗色真菌、双向真菌,并且对一些形态不典型或少见丝状真菌都能正确鉴定到种,如裂褶菌、红色单囊菌等.共鉴定菌株158株,其中113株可鉴定到种,31株鉴定到属,无法鉴定14株.结论 新建立的丝状真菌样本快速前处理方法,大大缩短了样本前处理实验流程,具有快速、简便、高效、极低实验成本、鉴定正确率较高的特点,可快速为临床提供丝状真菌鉴定结果,使患者得到及时有效的抗真菌治疗.
作者：苍金荣；王翠；王曦；陈苗；魏喆敏；张利侠；马娟；李玲 刊期： 2018年第03期
目的 探讨高通量测序(NGS)技术对常染色体隐性Alport综合征(AS)家系不同临床表型个体的实验诊断作用.方法 应用靶序列捕获联合高通量测序的方法对2个AS两家系的先证者进行致病基因突变分析,并通过Sanger测序法对先证者及家系其他成员进行验证,综合分析家系成员临床表现、肾脏病理组织学检查与基因检测结果.结果 2例先证者分别检测到COLAA3 c.3769G＞A和COL4A4 c.1715G＞C纯合突变.先证者父母及同胞均为相应突变的杂合子.先证者均表现为典型的AS;除了家系2的1名成员外,其他杂合子成员均表现为良性家族血尿.结论 研究明确了2个AS家系致病机理,发现COL4A3,COLA4基因突变杂合携带者往往表现为良性家族血尿,NGS技术可在常染色体隐性遗传AS家系不同遗传特征的病因诊断中发挥重要作用,对进一步探索疾病发病机制及规范化诊疗有重要意义.
作者：李昂；吴维青；吕辛；崔英霞；夏欣一；刘志红；李晓军 刊期： 2018年第03期
目的 探讨北京地区EBV A73基因外显子区A157154C多态性与胃癌的相关性.方法 采用病例-对照研究方法,以聚合酶链反应(PCR)联合DNA测序检测29例EBV IgM+胃癌患者和40例同期健康体检者EBV A73基因外显子157154 nt位点的基因型和等位基因频率.结果 胃癌组A157154C C等位基因频率和CC基因型频率明显高于对照组(x2=8.997,P=0.003;x2 =6.801,P=0.033).C等位基因携带者患胃癌的风险是A等位基因携带者的2.95倍(OR=2.95,95％ CI=1.44～6.04).胃癌组男性患者C等位基因频率显著高于女性患者(x2=5.392,P＝ 0.020).两组间比较显示A157154C不同基因型与年龄、性别、吸烟、饮酒和临床分期均无相关性.结论 EBV A73基因A157154C CA+CC基因型可能是中国北方地区汉族人群胃癌发病的危险因素.
作者：靳庆娥；苏建荣 刊期： 2018年第03期
目的 探讨《HDN产后免疫血液学试验推荐方案》中增强试验在临床实验室早期诊断ABO系统新生儿溶血病(HDN)中的应用效果.方法 可疑ABO-HDN患儿274例,检测母亲ABO,RhD血型和IgG抗-A/B效价及患儿ABO,RhD血型和三项溶血试验,采用经典抗球蛋白试验(对照组)和《HDN产后免疫血液学试验推荐方案》中的三种增强试验分别是酶处理细胞增强试验(试验组1)、添加低离子强度(LISS)溶液(试验组2)、添加聚乙二醇(PEG)溶液(试验组3)检测游离抗体和放散液抗体,比较四种方法的临床诊断效果.结果 274例患儿确诊ABO-HDN 161例(58.8％),其中A型87例(54.0％),B型74例(46.0％),不同血型患儿HDN患病率差异无统计学意义(x2 =0.089,P＞0.05).161例ABO-HDN患儿中直抗阳性25例(15.5％).对照组放散试验漏检率为5.8％(16/274).试验组游离试验和放散试验检出率均高于对照组,其中试验组1检出率高,试验组3次之,试验组2低于1,3组(x2游离 =46.438,x2放散=37.534,均P＜0.05).HDN发病例数和总胆红素水平随着酶处理细胞增强试验放散液抗体效价增高而增加(x2=18.931,F=12.624,P＜0.05).结论 酶处理细胞增强试验检出效果佳,能为实验室早期诊断ABO-HDN提供可靠的依据.
作者：李君；侯金友；张慧；卢焱坤；邹红蕊；张晓磊；张秀梅 刊期： 2018年第03期
目的 探讨白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)基因启动子区域-572C＞G和-174G＞C基因多态性与宿迁汉族人群冠心病(coronary heart disease,CHD)的关系.方法 参考2010卫生部CHD诊断标准(WS319-2010),选择2017年1～12月在宿迁市第一人民医院心内科确诊的CHD患者,应用聚合酶链-限制性片段长度多态性(Polymerase chain reaction-re-striction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)方法检测266例CHD患者和192例体检健康人群(对照组),分析其IL-6-572C＞G和IL-6-174G＞C基因多态性,并进行Hardy-Weinberg平衡检验,检测血糖、血脂等生化指标.结果 IL-6-572C＞G基因型和等位基因频率在两组间分布差异有统计学意义(x2=11.1,19.5,22.4,均P＜0.05),CHD组GG型和CG型OR值分别是CC型的4.88倍(95％CI:2.31～～10.31)和1.96倍(95％ CI:1.32～2.91);-174G＞C基因型和等位基因频率在两组间分布差异无统计学意义(x2=0.024,0.027,均P＞0.05).结论 IL-6-572G等位基因可能是宿迁汉族CHD的易感基因,IL-6-174G＞C基因多态性可能与宿迁汉族人群CHD没有相关性.
作者：王跃帮；吴娟；崔倩；王飞；常珊碧 刊期： 2018年第03期
目的 探讨聚乙二醇(PEG)沉淀预处理的实验影响因素,建立一种高效的PEG沉淀体系用于血清循环免疫复合物(CIC)前处理.方法 对PEG沉淀预处理的实验条件(溶液基质、离子强度、pH值和渗透压)优化,沉淀血清(制备标准HBsAg-anti-HBs CIC)中的CIC后,采用自主研制的免疫复合物解离剂进行解离,然后再用化学发光法检测游离HBsAg.通过计算解离量来比较适沉淀体系,后分别采用传统沉淀和优化后的沉淀条件结合自主研发的解离技术,对335份五种乙肝血清标志物模式(HBV-M)标本进行HBsAg-CIC检测.结果 基质溶液为0.15 mol/L,pH8.2,500 mOsm/kg的硼酸盐缓冲液的70 g/L PEG 6000沉淀剂,4℃过夜沉淀后选择离心力为18 009×g,离心温度4℃,离心时间为10 min,其沉淀分离效果佳;五种乙肝血清标志物模式(HBV-M)标本分别采用传统和改良法检测免疫复合物,其中改良法的阳性率高于传统法分别为:0,95.2％,87.2％,80％和8.7％,另外在HBV-M 2,3,4组中改良法的沉淀CIC含量高于传统法且差异存在统计学意义(P＜0.05).结论 PEG沉淀被广泛用于血清CIC检测及前处理,受到多重因素的影响,其中基质溶液及渗透压的选择也十分重要.该文为提高血清中循环免疫复合物(CIC)的检出率及缩短沉淀时间提供了理论基础.
作者：徐国萍；成军；孙长贵；戴玉柱 刊期： 2018年第03期
目的 探讨钙调蛋白依赖性激酶Ⅱγ(CaMK Ⅱγ)在慢性粒细胞白血病患者从慢性期到急变期过渡的表达及其分子机制.方法 59例来自不同时期慢性粒细胞白血病患者的骨髓,通过Ficoll分离液分离单个核细胞,裂解蛋白进行Western blot检测CaMK Ⅱγ的表达,并初步探讨其分子机制.结果 CaMK Ⅱγ在慢粒加速和急变期患者中高表达,而慢性期患者表达量低或不表达,其表达与β-catenin基本一致.结论 CaMK Ⅱγ在慢性粒细胞白血病慢性期到加速期过渡中发挥重要作用,可通过调控β-catenin的表达影响白血病干细胞的自我更新.
作者：张文静；郑维威；宋闿迪；朱俊锋；王保龙 刊期： 2018年第03期
目的 探讨血清微小RNA(microRNA,miRNA)-124和miRNA-210表达在中重度颅脑损伤并发外伤性脑梗死中的临床应用价值.方法 收集商洛市中心医院和西安市第八医院住院治疗的57例中重度颅脑损伤患者的血清及临床资料,依据是否发生外伤性脑梗死分为梗死组22例,未梗死组35例,并设立对照组(24例),采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time-PCR,RT-PCR)技术检测血清miRNA-124和miRNA-210的表达.比较分析血清miRNA-124和miRNA-210的变化与外伤性脑梗死的关系.结果 血清miRNA-124和miRNA-210在梗死组、未梗死组和对照组的表达分别为(0.90±0.18,0.39±0.07,0.18±0.03)和(0.95±0.20,0.42士0.10,0.21±0.04).与对照组比较,血清miRNA-124和miRNA-210在未梗死组和梗死组的表达显著上调,差异均有统计学意义(t=22.99,23.67,均P＜0.01;t=35.37,36.93,均P＜0.01).两标志物在梗死组的表达显著高于未梗死组,差异均有统计学意义(t=23.27,25.12,均P＜0.01).大脑前动脉(ACA)、大脑中动脉(MCA)及大脑后动脉(PCA)在梗死组、未梗死组和对照组的平均流速分别为(36.9±7.6,45.3±8.6,33.9±5.5)cm/s,(60.3±7.9,79.2±12.7,49.6±7.2)cm/s,(51.3±7.7,70.5±11.9,43.1±6.9) cm/s.ACA,MCA及PCA在未梗死组的平均流速与对照组比较明显增快,差异有统计学意义(t=12.23,13.10,13.16,均P＜0.01).ACA,MCA和PCA在梗死组的平均流速分别与未梗死组及对照组比较明显减慢,差异有统计学意义[(t=11.30,12.67,12.09,均P＜0.01),(t=11.37,11.52,11.09,均P＜0.01)].miRNA-124和miRNA-210在梗死组的表达具有正相关性(r=0.629,均P＜0.01),它们分别与梗死组ACA,MCA和PCA的平均流速具有负相关性[(r=-0.653,-0.620,-0.613,均P＜0.01),(r=-0.679,-0.656,-0.637,均P＜0.01)],而与未梗死组ACA,MCA和PCA的平均流速则具有正相关性[(r=0.640,0.596,0.607,均P＜0.01),(r=0.676,0.625,0.638,均P＜0.01)].结论 检测血清miRNA-124和miR-NA-210的表达可预测外伤性脑梗死的发生及判断其危险程度,估计病情的发展状况.
作者：程永红；肖小平 刊期： 2018年第03期
目的 探讨血浆miRNA-1和miRNA-155检测在心房颤动患者复律后复发预测中的临床应用价值.方法 收集2015年10月～2017年11月于西安市第八医院和咸阳市中心医院心内科住院治疗的110例房颤患者的血液及临床资料(复律组110例,复发组30例,未复发组80例),比较分析三组患者血浆miRNA-1和miRNA-155表达水平的变化与房颤复发的关系.两标志物的表达采用实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测.应用心动超声仪评价患者的左房内径及左心室射血分数.采用罗氏MODULARPS00全自动生化分析仪检测患者的空腹血糖及总胆固醇水平.建立受试者工作特征曲线(ROC曲线)评价miRNA-1和miRNA-155在房颤复发中的临床意义.结果 血浆miRNA-1和miRNA-155在未复发组、复律组和复发组的水平分别为0.38±0.09,0.39±0.08,0.82±0.15和0.87±0.17,0.85±0.18,0.21±0.05.它们在复发组的表达与未复发组和复律组分别比较明显上调、下调(t=21.37,20.57,均P＜0.01;t=18.77,11.71,均P＜0.01),而在未复发组与复律组的表达比较差异无统计学意义(t=0.67,0.54,均P＞0.05).房颤患者的收缩压、血清总胆固醇水平(TC)、左房内径、空腹血糖水平(FBG)和左室射血分数(EF)分别在未复发组、复律组和复发组的检测结果为(133±7mmHg,3.87±0.73 mmol/L,44.97±6.82 mm,4.13±0.57 mmol/L,61.20％±7.38％),(134±6mmHg,3.98±0.70 mmol/L,45.50±6.72 mm,4.17±0.46 mmol/L,61.07％±7.19％),(145±7 mmHg,4.03±0.71 mmol/L,58.97±7.33 mm,4.20±0.50 mmol/L,60.30％±7.21％).复发组的左心房内径和收缩压分别与复律组和未复发组比较显著增高(t=6.69,10.23,P＜0.01;t=8.42,15.53,P＜0.01);而复律组的两项指标分别与未复发组比较差异均无统计学意义(t=0.73,0.27,均P＞0.05);各组间的TC,FBG和EF比较,差异均无统计学意义(t=0.58,0.61,0.52,均P＞0.05;t=0.65,0.58,0.41,均P＞0.05;t=0.61,0.41,0.52,均P＞0.05).在复发组中,miRNA-1和miRNA-155表达具有负相关(r=-0.673,P＜0.01),且它们分别与左心房内径、收缩压也具有相关性(r=0.528,-0.537),均P＜0.01.ROC曲线的分析中,复发组分别以复律组和未复发组为参照,血浆miRNA-1的AUC分别为0.743(95％CI:0.627～0.839),P＜0.01;0.730(95％CI:0.21～0.826),P＜0.01,血浆miRNA-155的AUC分别为0.703(95％CI:0.628～0.837),P＜0.01;0.685(95％CI:0.603～0.813),P＜0.01.结论 血浆miRNA-1和miRNA-155检测可应用于房颤患者复律后复发的预测,并成为房颤复发有效的预警标志物和干预靶点.
作者：姚少侠；罗文强 刊期： 2018年第03期
目的 在真核生物酵母细胞中表达人Toll样受体2(TLR2)胞外区基因.方法 以重组质粒pAdTrack-TLR2为模板,应用PCR方法扩增TLR2胞外区基因,克隆到pMD18-T载体中并测序鉴定,酶切回收后连接到酵母表达质粒pG-BKT7中并转化酵母菌Y187,测定其在Y187中的自激活现象及毒性,提取酵母蛋白质,行SDS-PAGE电泳和Westernblot分析.结果 成功扩增出TLR2胞外区基因,测序结果与GenBank中序列一致.酶切回收的目的基因成功克隆入酵母表达载体pGBKT7中并转化酵母菌Y187后证实无重组质粒的自激活作用,Western blot分析显示该基因在酵母细胞中表达.结论 成功构建了TLR2胞外区基因的酵母表达载体,并在酵母细胞Y187中正确表达,为后续研究奠定了基础.
作者：孙守勋；刘静；解立威；柏雪婷；单娜；孟冬娅 刊期： 2018年第03期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
