学术投稿

基因芯片对人乳头瘤病毒的快速检测和分型

黄庆;府伟灵;周玉;张雪;黄君富;陈斌

关键词:HPV, 基因芯片, GD-PCR, 反向点杂交
摘要:目的针对HPV DNA亚型的异质性,建立HPV DNA亚型的基因芯片快速检测方法,为HPV感染病例提供诊断依据.方法18种HPV DNA亚型(HPV6 、16、18、31、33、35、39、11、45、51、52、53、56、58、42、59、66、68)特异性探针,固定于硝酸纤维素膜制备成基因芯片,生物素标记引物经通用引物介导PCR(GD-PCR)扩增HPV DNA,PCR产物与基因芯片经反向点杂交检测HPV亚型;同时采用荧光定量PCR检测HPV6、11、16和18亚型.结果31例标本中,基因芯片的阳性检出率为74.2%,其中HPV6/18、HPV11/16、HPV33/58和HPV6/11/33多重感染各1例(3.2%);荧光定量PCR阳性检出率为67.7%,与前种方法相比较,漏诊率为6.5%.结论HPV分型基因芯片可1次检测HPV多种亚型,灵敏度高和特异性强,有利于对HPV多重感染的诊断.
中华医院感染学杂志相关文献
  • 洁芙柔消毒凝胶消毒效果观察

    目的了解洁芙柔消毒凝胶对微生物的杀灭效果.方法采用悬液定量杀菌试验和现场消毒效果进行观察.结果该消毒凝胶对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌作用1 min杀灭率均为100%;洁芙柔消毒凝胶对手上自然菌作用3 min,杀灭率为99.02%.结论洁芙柔消毒凝胶是一种凝胶状醇类消毒剂,杀菌力强,且具护肤成分,消毒后手感干爽,是一种较为理想的外科手消毒剂.

    作者:李春梅;钟晓祝;杨金城 刊期: 2005年第04期

  • 介绍一种B-D测试的方法

    B-D测试是专门用于预真空压力蒸汽灭菌器冷空气排除效果的检测.本院采用自制测试包监测,以往因B-D测试纸直接贴于布面,经高温蒸汽后图案的部分染料粘在布面上,引起图案不均匀白色斑点,误认为试验失败.工作中经反复试验观察,发现了一种切实可行办法,既提高了B-D测试的成功率,又保证了灭菌的安全性,现将真体方法和优点介绍如下.

    作者:杜晓丽 刊期: 2005年第04期

  • 供应室护理组织管理模式的调整

    我院在2002年8月实施了病区护理组织管理改革,营造了一个整齐、清洁、安全的工作环境,提高了工作效率和质量,减少了故障和差错的发生,使无菌物品合格率和临床服务满意度均达100%.

    作者:郑柏湘;戴李中 刊期: 2005年第04期

  • 医院楼梯扶手消毒前后细菌学监测与措施

    医院内楼梯扶手的细菌学污染,是医院感染管理(特别是基层医院)的薄弱环节,为引起广大同行重视,预防交叉感染的机会,笔者对医院内楼梯扶手进行细菌学监测,并采取了相应的措施,现报道如下.

    作者:袁凯 刊期: 2005年第04期

  • 儿童泌尿道感染病原菌分析及抗菌药物应用探讨

    目的探讨小儿泌尿道感染常见病原菌变化以及抗菌药物的应用.方法对我院38例泌尿道感染患儿进行回顾性分析,用K-B法进行药敏分析,并按NCCLS标准判断细菌耐药性.结果病原菌以革兰阴性杆菌为多,大肠埃希菌占42.1%,革兰阳性球菌感染比例有上升趋势,占26.3%;细菌对常用抗菌药物产生多重耐药性,氨苄西林耐药性高,头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、万古霉素、亚胺培南是目前敏感抗菌药物.结论重视泌尿道感染病原菌耐药性检测,以药敏试验选用抗菌药物进行治疗十分重要.

    作者:纪泽泉;黄翠雯;李敏 刊期: 2005年第04期

  • 压电免疫传感器再生能力的试验研究

    目的采用SPA法在镀金电极表面进行抗体固定,探索压电免疫传感器再生使用的佳条件.方法对压电免疫传感器的检测时间、特异性,及再生试验的佳试剂、时间进行实验研究.结果构建的压电免疫传感器检测时间为15min,无交叉反应;NaOH溶液再生10次后,频率响应下降为原有的75%.结论所构建的压电免疫传感器检测时间短,特异性好,可用于临床标本的检测,NaOH溶液用于石英晶体再生的效果较好,极大地降低了使用成本.

    作者:姚春艳;府伟灵 刊期: 2005年第04期

  • 乙型肝炎病毒靶序列浓度对新型肽核酸压电基因传感器阵列的影响

    目的探索乙型肝炎病毒(HBV)靶序列浓度值对肽核酸压电基因传感器阵列杂交效应的影响.方法压电基因传感器阵列表面先固定上1.5μmol/L的bis-PNA探针,观察终浓度为1pg/L至100μg/L的HBV DNA与探针,进行杂交所引起的频率变化及反应所需时间.并对频率下降值与靶序列浓度做线性回归,确定其线性范围.结果靶序列浓度为1pg/L时,传感器未能检测出任何频率的改变.随着浓度从10 pg/L增加到100μg/L,杂交反应引起的频率下降值呈先增加后趋于缓和的趋势,以10μg/L为分界线,而杂交平衡时间并没有显现出一定的变化趋势.在10pg/L到10μg/L的浓度范围内,浓度与频率下降值的线性回归方程为lgC=-2.7455+0.0691×△F,相关系数r=0.9923.结论随着靶序列浓度的升高,杂交反应引起的频率下降值呈典型饱和曲线趋势,靶序列浓度的线性检测范围为10pg/L~10μg/L.

    作者:陈鸣;府伟灵;蔡国儒;俞丽丽;刘明华;陈庆海;张波;蒋天伦;吴蓉;王丰 刊期: 2005年第04期

  • 医院对临床抗菌药物合理使用的管理

    临床抗菌药物的滥用已成为公共卫生领域的重要问题,受到了各级部门、各类团体的高度重视.为此,我院采取了一系列的管理措施.

    作者:何雪芬 刊期: 2005年第04期

  • 加强医院感染管理与监测

    当前很多医院较为重视患者与医务人员之间直接感染的预防,忽略了通过空气、物品、医务人员手间接感染的预防.所以我们于2002年开始对本院13个科室进行了空气、物品、医务人员手的细菌监测,现报道如下.

    作者:肖志明 刊期: 2005年第04期

  • 外科病房医院感染常见病原菌监测及耐药性分析

    目的监测外科病房医院感染发生部位、病原菌分布特点,分析其耐药性,为医院感染的预防和控制提供参考.方法外科病房送检标本进行细菌培养、鉴定及药物敏感实验;对细菌培养阳性病例参照<医院感染诊断标准>,医院质控科确诊为医院感染的病例进行分析.结果外科病房医院感染以伤口或创口、呼吸道、泌尿道的发生率高;474例医院感染病原菌中,居前3位的依次为葡萄球菌属、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌;药物敏感性实验显示,外科病房医院感染病原菌对亚胺培南、美罗培南和多黏菌素抗菌药物敏感性较好(98%),但产β-内酰胺酶的菌株较多,对其他常规抗生素耐药性严重.结论外科病房医院感染因疾病不同,其感染部位、病原菌及其耐药性均有所不同,因此,加强医院感染病原学监测,针对各相关环节和因素采取相应的预防和控制措施,对于减少外科病房医院感染的发生具有重要意义.

    作者:张波;府伟灵;张晓兵;廖扬 刊期: 2005年第04期

  • 手卫生所致医院感染的预防和控制措施的探讨

    目的手卫生所致医院感染的预防和控制措施.方法总结实践经验与相关文献报道.结果标准化手卫生术语,正确评价手卫生指标;充分了解手卫生机制,规避手卫生观念误区;倡导使用手凝胶,树立手卫生新观念.结论加强手卫生观念与实施力度可有效降低医院感染发生率.

    作者:游建萍;黄庆;府伟灵;张雪 刊期: 2005年第04期

  • 基因芯片对人乳头瘤病毒的快速检测和分型

    目的针对HPV DNA亚型的异质性,建立HPV DNA亚型的基因芯片快速检测方法,为HPV感染病例提供诊断依据.方法18种HPV DNA亚型(HPV6 、16、18、31、33、35、39、11、45、51、52、53、56、58、42、59、66、68)特异性探针,固定于硝酸纤维素膜制备成基因芯片,生物素标记引物经通用引物介导PCR(GD-PCR)扩增HPV DNA,PCR产物与基因芯片经反向点杂交检测HPV亚型;同时采用荧光定量PCR检测HPV6、11、16和18亚型.结果31例标本中,基因芯片的阳性检出率为74.2%,其中HPV6/18、HPV11/16、HPV33/58和HPV6/11/33多重感染各1例(3.2%);荧光定量PCR阳性检出率为67.7%,与前种方法相比较,漏诊率为6.5%.结论HPV分型基因芯片可1次检测HPV多种亚型,灵敏度高和特异性强,有利于对HPV多重感染的诊断.

    作者:黄庆;府伟灵;周玉;张雪;黄君富;陈斌 刊期: 2005年第04期

  • 留置针感染的检验与诊断

    随着留置针的不断应用,留置针的感染问题也日益受到重视.笔者将导致留置针感染的相关微生物、血样标本及导管标本采集、检验结果判断等问题作一总结,以供参考.

    作者:胡洁 刊期: 2005年第04期

  • 肝病患者医院感染细菌特征及其耐药性

    目的了解肝病患者院内细菌感染的特征及耐药性,为临床合理用药提供依据.方法分析2001~2003年传染病医院肝病患者细菌感染的类型、分布、产酶率及耐药并加以分析比较.结果39个属105个种,共1 374株;革兰阴性杆菌为主,厌氧菌的感染率低;败血症22.1%、自发性腹膜炎21.8%、尿路感染19.3%、呼吸道感染33.4%等是肝病常见的细菌感染并发症;革兰阴性杆菌耐药率较低的为头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、阿米卡星和头孢哌酮/舒巴坦;革兰阳性球菌耐药率较低的包括万古霉素、阿米卡星、头孢吡肟、头孢唑林、替考拉宁、头孢曲松、阿莫西林/克拉维酸;大肠埃希菌产ESBLs率18.09%,克雷伯菌产ESBLs率19.75%,葡萄球菌产β-内酰胺酶率67.06%,肠球菌产β-内酰胺酶率25.68%.结论临床经验用药必须综合分析肝病患者细菌感染的部位、菌属(种)分布及其耐药性,做到有理有据.

    作者:曲芬;毛远丽;鲍春梅;崔恩博;李永利;郭桐生;姜素椿 刊期: 2005年第04期

  • RNA包膜病毒的光诱导灭活

    目的以亚甲蓝(MB)为光敏剂,研究RNA包膜病毒光诱导灭活的影响因素.方法以登革热病毒为指示病毒,以单波长点阵式发光二极管为光源,将指示病毒与不同浓度的MB工作液混合后,收集不同光照时间和距离的MB/病毒混合液,空班法测定病毒滴度.结果MB<10 mg/ml时,病毒灭活效果并不理想;MB≥1.0 mg/ml时,在5min的光照时间内即可完全灭活2.5 m光照距离内的病毒,当光照距离≥3.0 m时,较高浓度的MB(2.0 mg/ml)可在较短时间内(20 min)完全杀灭病毒,而较低浓度的MB(1.0 mg/ml)则需要更长的光照时间(25 min)才可完全杀灭指示病毒.结论MB工作浓度和光源光强度、光照时间和距离是影响RNA包膜病毒光诱导灭活效果的4个关键因素,前三者与病毒灭活效果正相关,后者则负相关.

    作者:黄庆;府伟灵;周来新;黄君富;陈鸣;姚春艳 刊期: 2005年第04期

  • 季节性时间序列分析在医院感染中的应用

    目的为了研究医院感染人数与不同季节的关系.方法利用季节性时间序列的线性模型对1996~2002年的数据建模,并比较各个模型对2003年的数据预测能力,从而总结出佳模型.结果后得到4个模型,各模型的P值均<0.0001,说明新建立的模型是可靠的;预测的结果表明后一个模型的效果好.结论季节性时间序列的线性模型能较好的模拟医院感染人数同季节的关系,并有较强的预测能力,从而为医院感染人数的预测提供了有效的工具.

    作者:罗阳;丁国英;府伟灵;郭波涛;张雪;黄君富 刊期: 2005年第04期

  • 乡镇卫生院医院感染管理现状及对策

    目的调查我区乡镇卫生院的医院感染管理现状,提出改进措施.方法采用统一的问卷调查表及现场查看方式,对27所乡镇卫生院的医院感染管理,包括组织管理、消毒隔离、一次性医疗用品的使用、垃圾分装、污水处理等进行调查和评价.结果27所乡镇卫生院均无组织管理体系,消毒隔离、垃圾分装工作不到位且无专人负责监管.结论乡镇卫生院应健全组织、完善制度、落实人员、强化培训、提高意识;卫生执法部门应加强对乡镇卫生院医院感染管理的督查.

    作者:俞琬如;许淑琴;单东良;张彩凤;孙迎芳;张莲娣;沈小娟 刊期: 2005年第04期

  • 持续静脉给药治疗过程中青霉素的稳定性

    青霉素钠(benzyl penicillin)在家中静脉给药的治疗方法已被广泛使用,患者在家中可进行长期的治疗,这种家中静脉治疗方案可减少患者在医院的时间且已为广大患者所认可.

    作者:Vella-Brincat JWA;陈宜鸿 刊期: 2005年第04期

  • 洋葱综合征患者终末消毒方法

    洋葱伯克霍尔德菌原属假单胞菌属,引起的重症肺炎往往导致呼吸衰竭,国外因为这种由洋葱伯克霍尔德菌引起的严重感染常常导致快速进展的肺炎而称为洋葱(cepacia)综合征,该病被认为是致命的而且难以治愈的.2004年10月我院收治一男性,78岁发热患者,因肺部大面积感染、反复细菌培养为洋葱伯克霍尔德菌而诊断为临床罕见的洋葱综合征.由于该菌对多种抗生素天然耐药,患者终治疗无效死亡.这种耐药性强的细菌,如果引起病区的流行,后果将十分严重.我们对该病室进行了严格的终末消毒并对消毒效果进行了检测,报道如下.

    作者:黄朝晖;袁凤京;王华生 刊期: 2005年第04期

  • HIV流行形势及医院感染防范措施

    目的了解HIV的流行形势、评估当前流行形势对我院输血安全和HIV医院感染的影响并探讨应对措施.方法对1995~2004年6月期间从门诊患者、住院患者和献血者中检出HIV抗体阳性者的情况进行分析.结果HIV抗体阳性者检出情况:1995年从患者中检出1人,1997年从患者和献血者各检出1人,1999年从患者中检出4人,2000年从献血者中检出1人,2001年从献血者中检出2人,2002年从患者和献血者中各检出5人,2003年从患者中检出10人、从献血者中检出1人,2004年(1~6月)从患者中检出11人、从献血者中检出6人;累计检出48人,其中患者32人、献血者16人,男性32人、女性16人.结论在2001年及以前,HIV感染呈零星散发现象,2002年开始,HIV呈暴发趋势;献血者HIV检出率随整个人群HIV感染率的升高而升高,输血安全问题面临新的压力,医务人员HIV职业暴露面临更大的危险,HIV的医院感染问题必须引起高度重视.

    作者:蒋天伦;李兵;黎儒青;刘佳;肖瑞卿;赵树铭;林武存;府伟灵 刊期: 2005年第04期

中华医院感染学杂志

中华医院感染学杂志

主管:中国人民解放军总医院

主办:中华预防医学会 中国人民解放军总医院