目的探讨宫颈癌及其癌前病变中 p53 基因第72位密码子多态性的表达及其与HPV16、18 E6表达之间的关系,以了解 p53 基因第72位密码子多态性是否可以作为预测宫颈癌发生的一项高危因子.方法以PCR法检测81例宫颈鳞癌(高分化13例、中分化24例、低分化44例;Ⅰb期24例、Ⅱa期15例、Ⅱb期37例、Ⅲa期5例)、18例宫颈腺癌、88例宫颈上皮内瘤样病变(CIN Ⅱ 30例、CIN Ⅲ 58例)及60例正常宫颈组织中 p53 基因第72位密码子多态性及HPV16、18 E6的表达.结果 p53 Arg纯合子、 p53 Arg/Pro杂合子及 p53 Pro纯合子在宫颈鳞癌、腺癌和CIN(Ⅱ～Ⅲ)中分别占58.02%、30.86%、11.12%;55.55%、27.78%、16.67%;59.09%、21.59%、19.32%.各组中 p53 Arg纯合子明显高于 p53 Arg/Pro杂合子及 p53 Pro纯合子,且差异有统计学意义( P <0.05; P <0.01).正常宫颈组织中 p53 Arg纯合子、 p53 Arg/Pro杂合子及 p53 Pro纯合子分别为23.33%、40.00%、36.67%,三者间无统计学意义( P >0.05).宫颈癌组(鳞癌及腺癌)、CIN(Ⅱ～Ⅲ)组中 p53 Arg纯合子均高于正常对照组中 p53 Arg纯合子,且差异有统计学意义( P <0.05);宫颈鳞癌中HPV16、18E6(+)亚组中 p53 Arg纯合子显著高于HPV16、18E6(-)亚组及HPV16、18E6(+)正常对照组亚组( P <0.05, P <0.01).各组中 p53 Arg纯合子均高于 p53 Pro纯合子( P <0.05); p53 Arg纯合子及等位基因均未随宫颈癌临床分期及分化程度而变化,与宫颈癌前病变程度亦无关系.结论 p53 Arg纯合子可作为预测宫颈癌及其癌前病变的一项高危因子,与高危型HPV E6同时检测可提示宫颈病变的发展趋势; p53 Arg纯合子与宫颈癌临床分期及分化程度无明显相关性.
作者：侯敏敏；郄明蓉；曹泽毅；杨开选；孙芝琳 刊期： 2006年第03期
目的探讨贯叶连翘提取物(HP)在百草枯(PQ)诱导的大鼠肺微血管内皮细胞(rPMVECs)急性损伤中的作用和对活性氧族物质(ROS)产生的影响.方法原代培养rPMVECs,分为PQ中毒组、HP干预组以及空白对照组.同时向PQ中毒组和HP干预组加入PQ溶液(0.1 mmol/L)0.5 h后开始计时,再向HP干预组分别添加三种不同浓度的HP溶液(250 mg/L、10 mg/L、1 mg/L).采用四氮唑盐(MTT)比色法观察不同时间点(3、12、24、48、72 h)和不同浓度的HP对rPMVECs生长抑制率的影响,同时用分光光度比色法测定相应的细胞上清液中总超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.结果在0.1 mmol/L的PQ诱导rPMVECs损伤后,随着HP浓度的增高和作用时间的增长, HP可明显减缓rPMVECs生长抑制率的升高;三种浓度的HP几乎在各个时间点均能明显减缓总SOD的活力的下降( P <0.05);72 h时,三种浓度的HP均能明显减缓MDA含量的增加( P <0.05),而在其它时间点,三种浓度的HP几乎不能明显减缓MDA含量的增加.结论 HP对PQ诱导的急性rPMVECs损伤具有保护作用.
作者：魏薇；何庆 刊期： 2006年第03期
目的高效表达结核分枝杆菌6kDa早期分泌性抗原靶(6kDa early secretory antigenic target,ESAT6) 和培养滤液蛋白10(culture filtrate protein 10,CFP10)的融合蛋白,通过免疫动物,获得CFP10-ESAT6融合蛋白的多克隆抗体.方法以结核分枝杆菌标准株 H37Rv 基因组DNA为模板,扩增 cfp10-esat6 融合基因,将其与表达质粒pET32a(+)构建成重组质粒pET-cfp10-esat6.在大肠杆菌BL21(DE3)中表达带组氨酸标签的融合蛋白,经亲和层析得到纯化CFP10-ESAT6蛋白.用该蛋白免疫成年家兔,获得的抗CFP10-ESAT6融合蛋白的多克隆抗体,作Western-blot和ELISA分析.结果重组质粒pET-cfp10-esat6构建成功,融合蛋白CFP10-ESAT6大量表达,多克隆抗体制备成功(1∶106).结论成功构建并表达了CFP10-ESAT6融合蛋白,制备了大量的CFP10-ESAT6融合蛋白的多克隆抗体,为发展新型结核病疫苗和临床血清学检测奠定了实验基础.
作者：王晓樱；鲍朗；赵明才；张会东；龙洋 刊期： 2006年第03期
目的在大肠杆菌中表达重组沙门菌侵袭蛋白A,并对表达产物进行分离和纯化.方法提取沙门菌基因组模板,PCR扩增侵袭因子 invA 基因目的片段,插入表达质粒载体pET-30c(+)中,构建pET-invA重组子,经双酶切和测序证实后,转化表达宿主大肠杆菌BL21(DE3),异丙基-β-D硫代半乳糖(IPTG)诱导重组蛋白表达,镍琼脂糖凝胶亲和层析纯化重组蛋白,SDS-PAGE和Western blot检测鉴定表达蛋白.结果成功构建了沙门菌pET-invA大肠杆菌表达重组子,实现了该蛋白在大肠杆菌中的高效表达,分离纯化的表达产物纯度达到电泳纯.结论沙门菌侵袭蛋白A的成功表达和分离纯化,为该蛋白的免疫学性能研究、相应抗体的制备以及沙门菌快速检测方法的建立奠定了基础.
作者：周爱萍；张祖昌；许欣；樊学军；占利；孙敏；裴晓方 刊期： 2006年第03期
目的探讨流体剪切力作用下大鼠极化破骨细胞的形态变化.方法机械分离培养大鼠极化破骨细胞,对破骨细胞鉴定后,采用本课题组自行研制的流体剪切力装置在0.29 Pa条件下,观察流体剪切力作用0、15、30、45、60、75、90、105、120 min时破骨细胞的形态变化.结果大鼠极化破骨细胞抗泊石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色阳性,吸收试验阳性,细胞形态较大,直径约30 μm,形状不规则以类圆形多见,核3～20个,可见空泡,周边大量细胞丝.随流体剪切力作用时间的延长,极化破骨细胞面积、直径均有增大趋势,30 min组、105 min组与0 min组(对照组)间差异有统计学意义( P <0.05).结论在本试验条件下,随流体剪切力作用时间的增加,SD-大鼠极化破骨细胞的形态呈波动性变化,直径和面积均有增大的趋势.
作者：张庆鸿；梁星；董强；陈明；徐凌；夏露 刊期： 2006年第03期
目的观察胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)在正常猫、部分去背根猫及针刺部分去背根猫的L6手术侧背根节(DRG)表达的时空变化,以了解IGF-Ⅰ与针刺促进脊髓可塑性的关系.方法 25只成年健康雄猫随机分为5组:即正常组、备用根术后7 d组与14 d组(动物行单侧部分去背根手术,即切除一侧L1～L5、L7～S2背根节,保留L6为备用根)、针刺备用根术后7 d组与14 d组(动物行单侧部分去背根术后针刺L6脊神经外周支配区内的两组穴位).动物于术后7 d、14 d分别处死,取各组(手术侧)L6背根节,-20 ℃恒冷箱切片,片厚20 μm,用兔抗IGF-Ⅰ(1∶200)抗体行免疫组化ABC法染色.观察、计数并比较各组背根节IGF-Ⅰ阳性神经元的分布、含量及时空变化.结果针刺备用根7 d组,DRG IGF-Ⅰ阳性神经元数较术后7 d组明显增加( P <0.05),但仍低于正常水平;针刺14 d,DRG阳性神经元比术后14 d亦增多( P <0.01),且恢复至正常水平.与针刺7 d组比较,DRG IGF-Ⅰ阳性神经元在针刺14 d时明显增多( P <0.05).结论针刺可增加针刺侧DRG内IGF-Ⅰ阳性中小神经元数.提示针刺后IGF-Ⅰ在背根节的表达变化可能与针刺促进脊髓可塑性有关.
作者：刘芬；王廷华；张弈；洪孙权；宋新波 刊期： 2006年第03期
目的探讨中国扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy, DCM)人群中是否存在 Desmin 基因外显子8上的一个错意突变(Ile451Met)及检测血小板活化因子乙酰水解酶(platelet-activating factor acetylhydrolase, PAF-AH) 基因G994→T错义突变发生频率,以及它们与DCM的关系.方法通过聚合酶链反应、限制性内切酶酶切、聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染技术,结合DNA测序分析89例DCM患者和110例对照组 Desmin 基因及 PAF-AH 基因可能突变位点(Ile451Met,Val279Phe).结果通过上述方法检测后未能发现两组中存在 Desmin 基因(Ile451Met)突变, PAF-AH 基因突变(Val279Phe)发生频率在病例组及对照组间的差异无统计学意义( P ＞0.05).结论在小样本中国成都地区扩张型心肌病患者中,未发现 Desmin 基因第8外显子存在Ile451Met突变,并且与 PAF-AH 基因突变(Val279Phe)无明显相关.
作者：王斌；饶莉；张林；周斌；王宇平；陈新云 刊期： 2006年第03期
目的研究成骨生长肽(OGP)在体外对成骨细胞样细胞增殖分化的影响.方法在体外培养的新生大鼠颅盖骨成骨细胞样细胞中加入不同浓度的OGP(10-11 mol/L～10-7 mol/L),用MTT法检测细胞增殖,酶联免疫法检测细胞内碱性磷酸酶(ALP)的表达,RT-PCR法检测核心结合因子1( Cbfa1 ) mRNA的表达.结果 OGP对成骨细胞样细胞增殖有促进作用( P <0.05),大效应浓度为10-9 mol/L;能增加细胞内ALP活性( P <0.05),大效应浓度为10-8 mol/L;可促进 Cbfa1 mRNA的表达( P <0.05),其佳促进表达浓度为10-8 mol/L, Cbfa1 mRNA与β-actin mRNA像素值比值为0.89±0.02.结论 OGP可促进成骨细胞样细胞增殖,增强 Cbfa1 mRNA的表达水平.
作者：徐凌；梁星；黄姣；董强；夏露；胡建；张庆鸿；李小玉 刊期： 2006年第03期
目的研究壬基酚(NP)对断乳期子代雄性SD大鼠睾丸组织发育及凋亡影响的机制.方法对母鼠孕期第7 d直至产后断乳期染毒NP(50、100、200 mg/kg), 每个剂量组处死F1雄性子代大鼠10只,股动脉取血,测定NP浓度,取雄性子代睾丸进行组织病理学观察,并对睾丸进行Bax、Bcl-2和Caspase-3免疫组织化学分析.结果 F1子代大鼠断乳期血清NP浓度在100、200 mg/kg NP剂量组高于对照组( P <0.05), 组织病理学观察可见200 mg/kg NP组睾丸生精小管与对照组相比显著缩小.免疫组化结果显示,NP组睾丸生精小管Bax和Caspase-3的表达增强,Bcl-2表达减弱.结论母鼠孕期和哺乳期染毒NP能够影响断乳期子代雄性SD大鼠睾丸的正常发育.
作者：张浩；龙冬梅；詹立；吴德生 刊期： 2006年第03期
目的探讨肿瘤相关基因( CAGE )在颅脑肿瘤发生发展中的意义及其应用价值.方法采用半定量RT-PCR方法,检测8种共17例正常组织,35例脑膜瘤和63例胶质瘤组织 CAGE 基因的表达.结果 CAGE 基因在除睾丸以外的正常组织中不表达;4例脑膜瘤(11.3%)和57例胶质瘤(90.5%)中 CAGE 基因表达阳性,该基因在两类肿瘤中表达差异有统计学意义( P <0.001).胶质瘤Ⅰ级 CAGE 基因表达量为内对照的0.5±0.11倍,Ⅱ级为0.86±0.23倍,Ⅲ级为1.85±0.37倍,Ⅳ级为2.7±0.46倍,基因表达量与病理组织学分级呈正相关( r =0.82).结论 CAGE 在脑胶质瘤细胞转化和癌变过程中起着重要作用,它可能成为胶质瘤的肿瘤特异性抗原.
作者：高飞；由田；吕晶玉；王运杰 刊期： 2006年第03期
目的探讨正畸牙移动骨改建过程中成骨细胞调控破骨细胞分化成熟的机制.方法分离培养大鼠股骨骨髓间充质干细胞来源的成骨细胞,采用膜式动态张应力加载体系进行体外细胞加力,RT-PCR 技术检测不同强度、不同性质、不同作用时间张应力对成骨细胞 ICAM-1 mRNA 表达的影响.结果张应力刺激对成骨细胞 ICAM-1 mRNA的表达有明显抑制作用,强度越大抑制作用越强,(依次为静、动态5 kPa组,静、动态3 kPa组,静态1 kPa组,对照组);静态张应力抑制效应明显弱于动态张应力(静态3 kPa、5kPa组分别弱于动态3 kPa、5 kPa组); ICAM-1 mRNA的表达在动态张应力作用后3 h即显著降低,12 h低(降至未加力时的23%),后有所回升但仍维持在一较低水平,具有时效性.结论机械张应力刺激通过抑制成骨细胞 ICAM-1 mRNA的表达限制破骨细胞的分化成熟.
作者：江凌勇；赵志河；王军；樊瑜波 刊期： 2006年第03期
目的考察高强度牙科陶瓷(A型)与松风Vintage AL饰面瓷之间的界面结合及匹配性,为其临床应用奠定基础.方法制作5 mm×5 mm×10 mm的高强度牙科陶瓷(A型)20个,分为两组,分别在端面上烧结松风Vintage AL和Vitadur alpha饰面瓷,剪切实验测定其剪切结合强度;另制作一双层瓷试件,界面做扫描电子显微镜(SEM)和能谱分析;制作上中切牙全瓷单冠10个,作热休克实验考察其抗瓷裂能力.结果高强度牙科陶瓷(A型)与Vintage AL的剪切结合强度为(55.52±14.64) MPa,与Vitadur alpha结合强度为(59.37±13.93)MPa,两者差异无统计学意义;扫描电镜观察及能谱分析,二者紧密接合,并有元素的扩散;全瓷冠的热休克温度为(179±15) ℃,裂纹多出现于牙冠唇面的饰面瓷.结论高强度牙科陶瓷(A型)与松风Vintage AL化学匹配及热匹配性良好,完全满足临床需要.
作者：崔军；巢永烈；孟玉坤 刊期： 2006年第03期
目的探讨Rho激酶(ROCKⅠ和ROCKⅡ)在慢性低氧大鼠肺小动脉产生和表达的变化及其在低氧性肺动脉高压形成过程中的作用.方法将36只健康雄性SD大鼠随机分为正常组、低氧1 d、3 d、1周、2周和3周组,每组6只.低氧处理为常压间断低氧,每天8 h,各低氧组分别低氧1 d、3 d、1周、2周和3周.采用微导管法测定大鼠平均肺动脉压(mPAP).分离和称量大鼠右心室(RV)及左心室加室间隔(LV+S)重量,计算出RV/(LV+S).应用免疫组化法测定大鼠肺组织Rho激酶蛋白的表达,原位杂交法测定Rho激酶mRNA的表达.结果大鼠mPAP、RV/(LV+S)随低氧时间延长出现升高趋势( P <0.05).正常组与各低氧组的肺小动脉壁的管壁厚度占外径的百分比(WT%)和管壁面积占血管总面积的百分比(WA%)均随低氧时间的延长出现升高趋势,低氧3周组大鼠的WT%和WA%均高于正常组 ( P <0.05).ROCKⅠ、ROCKⅡ免疫组化阳性染色强度和ROCKⅠ mRNA、ROCKⅡ mRNA原位杂交阳性染色强度随着低氧时间的延长均出现升高趋势,低氧3周组ROCKⅠ、ROCKⅡ免疫组化阳性染色和ROCKⅠ mRNA、ROCKⅡ mRNA原位杂交阳性染色均显著高于正常组( P <0.05).ROCKI免疫组化、ROCKⅠ mRNA原位杂交、ROCKⅡ免疫组化及ROCKⅡ mRNA原位杂交阳性染色强度均与mPAP、WA%和WT%呈正相关( r 分别为0.404、0.267和0.263;0.500、0.263和0.260;0.490、0.295和0.286;0.579、0.251和0.254, P 均<0.05).结论低氧可导致Rho激酶产生和表达增加.Rho激酶可能通过促进肺小动脉收缩和肺小动脉重构参与低氧性肺动脉高压的发生.
作者：杨莉；程德云；陈小菊；苏巧俐；夏秀琼 刊期： 2006年第03期
目的研究骨质疏松对老年大鼠牙移动的影响.方法 82只三月龄雌性未育健康SD大鼠随机分为骨质疏松组和健康对照组(各42只);每组大鼠再随机分为0、1、3、5、7、10和14 d加力组.测量不同加力时间段牙移动距离,切片HE染色观察组织学变化、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)酶组织化学染色计数破骨细胞.结果骨质疏松组牙移动速度和移动距离都大于对照组( P <0.05),骨质疏松大鼠牙移动第一快速期比对照组长,且移动距离更大,停滞期比对照组短.破骨细胞数量和转化聚集速度大于对照组( P <0.05).结论骨质疏松会加速老年大鼠牙移动.
作者：谭理军；王军；赵志河；江凌勇；邹睿 刊期： 2006年第03期
目的研究镁对离体培养的缺氧大鼠脑皮质神经元的影响.方法将大鼠皮质神经元分别给予MgSO4和Mg2+-ATP处理后连续给予97.5%N2和2.5%CO2混合气体,制成大鼠皮质神经元体外缺氧试验模型,分别观察缺氧后1、2、4 h不同时间神经元死亡率、神经细胞内Ca2+浓度(Fluo-3标记,激光共聚焦显微镜检测)的动态变化和培养液中LDH、K+、NSE浓度的变化.结果 MgSO4和Mg2+-ATP能减少缺氧状态下的脑皮质神经元钙内流( P <0.05),降低培养液中LDH、K+、NSE浓度( P <0.05),明显降低神经元死亡率( P <0.05).结论镁对离体培养的皮质神经元缺氧损伤有肯定的保护作用.
作者：郑洪波；罗祖明；羊洁；邹晓毅；孔双艳；张杰；曾虹；何俐 刊期： 2006年第03期
目的探讨生长抑素 (SST) 及其类似物奥曲肽对急性呼吸窘迫综合征 (ARDS) 大鼠的治疗作用.方法百草枯灌胃法制作大鼠ARDS模型, 灌注百草枯后24 h,经尾静脉输入SST(1 mg/kg)、奥曲肽(0.1 mg/kg)或注射地塞米松(1 mg/kg),观察动物肺组织病理学、血气、肺系数等改变,同时测定大鼠血浆、肺泡灌洗液 (BALF) 及小肠组织匀浆液肿瘤坏死因子α(TNF-α) 及白细胞介数6 (IL-6) 的含量.结果输注SST、奥曲肽或注射地塞米松后,与ARDS模型组相比,大鼠肺组织炎症病变明显减轻,动脉血氧分压 (PaO2) 有升高趋势(升高75%～84%),二氧化碳分压有降低趋势(降低17%～22%),血浆pH值回升,肺系数有降低趋势(降低13%～15%).血浆TNF-α水平与ARDS模型组比较,有降低趋势,但差异无统计学意义 ( P >0.05).肺泡灌洗液及小肠匀浆液TNF-α水平SST组、奥曲肽组及地塞米松组较ARDS模型组降低 ( P <0.05).SST组、奥曲肽组及地塞米松组肺泡灌洗液IL-6水平较ARDS模型组均有降低趋势,但差异无统计学意义 ( P >0.05),血浆及小肠匀浆液IL-6水平各组间差异无统计学意义.结论 SST及其类似物奥曲肽有改善ARDS症状,减低肺炎症病变及TNF-α含量的作用,可作为ARDS治疗的辅助药物.
作者：刘瑞；王春晖；黄明慧；李献；强欧；唐承薇 刊期： 2006年第03期
目的探讨孕激素(P)通过其受体(PR)及类胰岛素样生长因子结合蛋白1-3(IGFBP 1-3)介导,对胚泡着床的影响.方法选取早孕5～7周行人流术的健康成年妇女蜕膜和绒毛标本共48例,每一孕周分早、中、晚三个时期,每个时期5～6例.以分泌中期(月经周期第21 d)宫内膜标本为对照.采用放射免疫法测定血清P水平;采用免疫组化LsAB法和计算机图像分析法检测IGFBP 1-3和PR在围着床期子宫内膜、蜕膜和绒毛滋养层细胞中的表达.结果血清P值从分泌中期逐渐上升,在孕5～6周时呈现一峰值,高于分泌中期水平( P <0.05).PR在宫内膜腔上皮和蜕膜细胞中表达与血清P存在相关性,但在腺上皮及胚胎滋养层细胞中的表达与血清P无相关性.IGFBP 1-3在子宫内膜腺、腔上皮和蜕膜细胞中的表达与血清P具相关性.但胚胎滋养层细胞中的表达与血清P无相关性.结论 P对早期妊娠发生与维持具有重要作用,其作用可能是通过胎盘界面PR及IGFBP 1-3的介导来完成的.
作者：靳松；李尚为；龙江；李蕾；谭宗建 刊期： 2006年第03期
目的探讨针刺对备用背根节(dorsal root ganglion,DRG)NP-1表达的影响.方法将25只成年雄猫分为5组,即假手术组、单侧备用背根手术7 d组、单侧备用背根手术并针刺7 d组、单侧备用背根手术14 d组和单侧备用背根手术并针刺14 d组.通过免疫组化ABC法,观察各组备用DRG中NP-1的免疫反应神经元数目.结果在假手术组,NP-1阳性神经元主要定位于部分中小神经元及少数大神经元胞浆中;部分背根切断7 d后NP-1阳性中小神经元数较假手术组明显减少( P ＜0.05),NP-1阳性大神经元数与假手术组者差异无统计学意义( P >0.05);而术后14 d,NP-1阳性中小神经元数较7 d组明显增多( P ＜0.05),且回升至假手术组水平,NP-1阳性大神经元数与手术7 d组差异无统计学意义( P >0.05);针刺7 d组较手术7 d组NP-1阳性中小神经元数增多( P ＜0.05),但尚未回升至假手术组水平,NP-1阳性大神经元数减少( P ＜0.05);针刺14 d组各类阳性神经元数目与手术14 d组及针刺7 d组差异均无统计学意义( P >0.05).结论针刺可上调NP-1在备用DRG中小神经元的表达.
作者：黄倩；周雪；丁艳；彭谨；赵伟；章为 刊期： 2006年第03期
目的探讨利维爱、倍美力和补佳乐在骨质疏松性骨折愈合中的作用及对子宫内膜的影响.方法将6月龄雌性SD大鼠分为假手术(SHAM)组、去势(OVX)组、利维爱组、倍美力组和补佳乐组.除SHAM组外其余各组均切除双侧卵巢建立绝经后骨质疏松动物模型.去势后8周各组行右股骨骨折建立骨折模型,同时利维爱组、倍美力组、补佳乐组开始服药.五组均在骨折后第2、4、6、8周处死大鼠后行HE染色观察骨痂骨小梁面积,成、破骨细胞的形态计量,以及宫内膜HE染色及形态计量.结果①骨痂形态计量:骨折后骨小梁面积利维爱组>倍美力组>补佳乐组,且在4周时明显.三个用药组骨小梁表面成骨细胞增多,破骨细胞减少.在第2、4周时各用药组的破骨细胞数明显少于OVX组,与SHAM组的差异无统计学意义.成骨细胞数除用药组中补佳乐组6周时低于其他各组外,用药组与SHAM组、OVX组在各时段的差异无统计学意义.②子宫内膜形态计量:骨折后第2～6周各组间的差异无统计学意义.第8周时OVX组内膜薄,上皮细胞低柱状,腺体数明显减少;用药组中利维爱组内膜上皮细胞和腺体增生不明显,明显低于SHAM组,补佳乐组和倍美力组与SHAM组相似.结论本实验结果显示雌激素对于促进绝经后骨质疏松性骨折的愈合是有效的.不同的雌激素由于成分不同效果有差异.8周时形态计量上尚未发现补佳乐、倍美力和利维爱对宫内膜的增生作用.
作者：田雨；徐克惠；乔林 刊期： 2006年第03期
目的观察结核分枝杆菌ESAT-6与CFP-10蛋白间的相互作用.方法采用PCR技术克隆结核分枝杆菌 ESAT-6与CFP-10 基因,构建酵母双杂交载体质粒pGBKT7-ESAT-6和pGADT7-CFP-10,经酶切分析和DNA测序证实连接片断的正确性后,采用醋酸锂法顺序转染酵母菌AH109.结果共转染pGBKT7-ESAT-6和pGADT7-CFP-10的酵母菌AH109可以在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp培养基上生长,β-半乳糖苷酶活性实验阳性.结论结核分枝杆菌ESAT-6与CFP-10蛋白可以相互作用.
作者：李岩；鲍朗；张会东；王晓樱；朱海龙；李娅莎 刊期： 2006年第03期
目的构建人的新基因( PCIA 1)的真核表达载体,并将其载体稳定转染到HeLa细胞株中.方法以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)总RNA为模板,通过RT-PCR扩增 PCIA 1基因编码区cDNA, 并将扩增的cDNA片段插入pcDNA3.1(+)真核表达质粒,构建重组质粒pcDNA- PCIA 1,重组子经酶切分析及测序鉴定后,用脂质体转染技术将该表达载体导入到HeLa细胞中, 经G418筛选并建立稳定的转染细胞株,用RT-PCR和Western blot检测 PCIA 1基因在HeLa细胞中的表达.结果经RT-PCR及Western blot检测,证实真核表达重组质粒pcDNA- PCIA 1构建成功, PCIA 1基因已经稳定转染到了HeLa细胞中并表达PCIA1蛋白.结论成功建立了人新基因 PCIA 1的稳定转染细胞株,为进一步研究 PCIA 1的功能奠定了基础.
作者：王瑞；邓洪新；王国庆；严飞；彭枫 刊期： 2006年第03期
目的构建β防御素2(BD2)融合血管内皮钙粘附素(VE-Cadherin)胞外段重组质粒,以期探讨其免疫后抗肿瘤血管生成作用.方法 PCR扩增成熟BD2片段和VE-Cadherin胞外段.以连接肽连接成熟BD2片段和VE-Cadherin胞外段,通过重叠PCR构建融合分子.将所得三种片段插入到pSecTag2B真核表达质粒.转染CT26肿瘤细胞,RT-PCR检测其表达.取转染COS细胞后的上清液做趋化实验,检测融合分子对树突状细胞(DC)的趋化作用.所得质粒经肌肉注射免疫小鼠后,皮下植入包裹CT26肿瘤细胞的藻酸盐微球,检测血管生成情况.结果测序证实三种质粒构建正确,能在真核细胞中顺利表达.BD2融合重组质粒和未融合的BD2质粒转染细胞后的上清液趋化DC的能力相近( P >0.05).与其余各组质粒免疫相比,融合重组质粒免疫后能够显著抑制藻酸盐微球中肿瘤细胞诱导的血管生成( P <0.01).结论 BD2融合血管生成相关分子后的重组质粒免疫动物后能在体内有效地打破机体对肿瘤新生血管的免疫耐受.
作者：王国庆；王永生；王瑞；吴杨；杜小波；徐建容；刁鹏 刊期： 2006年第03期
目的探讨脑源性神经营养因子(BDNF)对体外培养大鼠胚脑皮质神经元在低氧适应过程的保护作用.方法对胚鼠皮质神经元进行体外培养, 观察透射电镜下缺氧诱导大鼠胚脑皮质神经元损伤的超微结构变化;采用MTT比色法检测正常对照组(A组)、不同缺氧时间点皮质神经元缺氧对照组(B组)及缺氧培养前24 h和缺氧即刻加入不同剂量外源性BDNF实验组(C组)神经细胞存活率差别;4'、6-二脒基-2-苯基吲哚盐酸染色法结合凋亡细胞的原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡.结果遭受缺氧损伤的大鼠胚脑皮质神经元超微结构显示缺氧可以诱导神经细胞坏死、凋亡和混合型细胞死亡;以神经元缺氧为敏感的0～10 h为研究时间,C组在缺氧0～6 h时细胞活性显著高于缺氧对照组B组( P <0.05),凋亡神经细胞百分率低于缺氧对照组B组( P <0.05).结论缺氧可诱导体外培养大鼠胚脑皮质神经元死亡,早期加入外源性BDNF可以使神经元对低氧的耐受性增强而发挥其对神经元的保护作用.
作者：罗小丽；毛萌；周晖；孙小妹；李胜富 刊期： 2006年第03期
目的克隆人乳头瘤病毒-16型(HPV-16) E4 基因( E4 ),构建E4蛋白表达重组工程菌,探索表达条件和鉴定表达产物特性.方法以临床HPV-16阳性宫颈炎患者上皮细胞提取物为模板,PCR扩增 E4 完整基因,并定向克隆到pET32a(+)原核表达质粒中,经双酶切和测序鉴定后转入大肠杆菌BL-21(DE3),获得工程菌(BL-21/E4).经IPTG诱导,表达蛋白用SDS-PAGE和Western blot鉴定.结果克隆到完整 E4 基因为342 bp,与HPV-16东亚型的同源性为99%,与其他HPV16型的同源性高于97%.在28 ℃和37 ℃,0.1 mmol/L的IPTG诱导18 h时,重组蛋白(rE4)表达量分别占菌体总蛋白的12.2%和12.8%;SDS-PAGE和Western blot证明rE4蛋白与表达载体的标签蛋白形成相对分子质量约34×103的可溶性融合蛋白(rE4/His).结论成功构建了表达带标签的融合重组蛋白(rE4/His)的重组大肠杆菌BL-21/E4表达系统,这为高纯度HPV-16 E4蛋白的制备和相关研究奠定了基础.
作者：王保宁；施桥发；李虹；张卫东；庄永华；杨靖；蒋忠华；李明远 刊期： 2006年第03期
目的探讨子宫胎盘界面绒毛外滋养细胞(EVCT)上血管细胞粘附分子(VCAM-1)及E-选择素(E-selectin)的表达特点以及与妊娠期高血压疾病的关系.方法采用免疫组织化学法观察20例重度子痫前期胎盘(妊高征组)以及孕周相配的20例正常妊娠胎盘(对照组)子宫胎盘界面蜕膜中绒毛外滋养细胞VCAM-1、 E-selectin的表达;光镜下计算EVCT阳性染色强度,并用医学图象分析软件测定EVCT阳性染色的平均光密度值(MOD).结果与正常对照比较,子痫前期患者子宫胎盘界面EVCT上VCAM-1、 E-selectin的染色强度及MOD值均降低,差异有统计学意义( P <0.05、 P <0.01).结论子痫前期子宫胎盘界面EVCT上血管内皮细胞特性的粘附分子VCAM-1、 E-selectin的表达减少,可能引起滋养细胞对子宫壁和血管的浸润性降低,导致子宫胎盘血管形成障碍.
作者：邢爱耘；刘淑芸；游泳；杨开选 刊期： 2006年第03期
目的探讨血栓闭塞性脉管炎(Buerger病)患者病变血管中雌激素受体(ER)、补体调节蛋白(CD59)及IgG表达及其意义.方法采用免疫组织化学染色SP法检测30例男性Buerger病患者截肢肢体动脉血管和30例正常男性(对照组)外伤截肢肢体动脉血管内皮细胞膜ER、CD59和IgG抗体的表达水平,并采用直线相关分析方法分析其相关性.结果 Buerger病患者动脉血管内皮细胞ER和CD59表达均强于对照组( P <0.05),动脉血管内皮细胞膜IgG表达弱于对照组( P <0.05),而动脉血管内皮细胞膜下IgG表达强于对照组( P <0.05).ER和CD59分别与IgG抗体的表达呈负相关.结论 Buerger病患者体内血管内皮细胞中ER和CD59表达均上调,可能与Buerger病血管病变机制相关.
作者：邓靖宇；时德；何生；陈波 刊期： 2006年第03期
目的研究甘露聚糖修饰的靶向纳米脂质体的抗肿瘤作用.方法用胆固醇氯甲酸酯和N,N-二甲基乙二胺反应生成 3β[N-(N',N'-二甲基氨基乙烷)-氨基甲酰]胆固醇(DC-chol),以DC-chol、二棕榈磷脂酰基乙醇胺 (DOPE)和N-[2-(胆固醇氧羰基氨基)乙基]用氨酰甲基化革露聚糖(chol-AECM-mannan)为原料合成甘露聚糖修饰的靶向纳米脂质体, 检测脂质体粒径大小.应用C57小鼠制备移植性肺癌模型,静脉给予各种纳米脂质体(实验纳米脂质体,无革露聚糖修饰的包裹有EGFR的纳米脂质体、空纳米脂质体)及对照EGFR,观察小鼠的一般情况及肿瘤生长情况;行ELISA和Western Blotting检测小鼠血清中抗体滴度差别.结果脂质体粒径大小为132.6 nm.ELISA和Western Blotting检测均显示实验组小鼠血清有抗体产生而且抗体滴度远大于其他对照组.实验组肿瘤体积明显小于对照组(EGFR及空白脂质体组, P <0.05).结论研究结果表明实验组小鼠肿瘤生长受到抑制,甘露聚糖修饰的靶向纳米脂质体对小鼠肺癌有一定疗效.
作者：杨莉；成丽；田聆；范琳玉；尹红梅；魏于全 刊期： 2006年第03期
目的探讨金黄色葡萄球菌的耐药性及耐药机制.方法按NCCLS推荐的琼脂平皿对倍稀释法测定分离鉴定的198株金黄色葡萄球菌对苯唑西林的耐药性(MIC值);用Nitrocephin纸片法测定各菌株产酶情况,统计对苯唑西林不同耐药水平的金黄色葡萄球菌产酶率并分析其耐药水平和产酶率的相关关系; PCR 测定各菌株含 mecA 基因情况.结果 198株金黄色葡萄球菌对苯唑西林的耐药率为64.65%;128株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)中,高耐菌株为118株(92.19%),低耐株为10株(7.81%).敏感株产酶率为58.57%(41株),高耐株产酶率53.39%(63株),低耐株产酶率40.00%(4株),苯唑西林敏感株与高耐株之间产β-内酰胺酶的差别有统计学意义,前者高于后者;含 mecA 基因的高耐株占95.76%(113/118)、低耐株占60.00%(6/10)、敏感株占10.00%(7/70),高耐株与敏感株含 mecA 基因的差别有统计学意义,前者高于后者.结论金黄色葡萄球菌耐药机制主要是产β-内酰胺酶和 mecA 基因的表达.
作者：李晓芳；范昕建；过孝静；冯萍；吕晓菊；高燕愈；熊亚莉；俞汝佳；丁霞 刊期： 2006年第03期
目的研究鼓室注射 (intratympanic injection, IT) 地塞米松磷酸钠 (DSP) 温度敏感原位凝胶的体内分布特征,探讨载药凝胶经圆窗膜吸收的规律,为其临床应用提供理论依据.方法制备DSP 温度敏感原位凝胶.建立在外淋巴 (perilymph, PL)、脑脊液(cerebrospinal fluid, CSF) 和血中DSP 及地塞米松 (Dex) 的HPLC测定方法.经鼓室注射DSP 凝胶,并与溶液剂相比较,测定药物的体内分布和在PL 中的药代动力学参数.结果鼓室注射DSP 原位凝胶,Dex在内耳组织的局部生物利用度显著提高,AUC 是静脉注射溶液的593.7倍;药物作用时间明显延长,同鼓室注射溶液相比,t 1/2高28.6倍,MRT增加了近5倍.而且,当采用鼓室注射时,药物在体内其他部位分布甚少,在血和CSF中的浓度均远远低于PL.结论经鼓室给药的DSP原位凝胶对耳蜗具有明显的定位释药作用和缓释效果.
作者：陈钢；侯世祥；刘军；栾建刚；张瑜 刊期： 2006年第03期
目的从鼻咽癌组织中克隆EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)与热休克蛋白90 β(HSP90 β)基因,构建其真核双表达质粒pIRES-LMP1-HSP90 β,并检测其在体外的表达.方法提取鼻咽癌组织总RNA,逆转录PCR获得 LMP1 基因片段和 HSP90 β基因片段,将二者连接于真核双表达质粒pIRES中,测定序列后,用脂质体包裹转染COS细胞,采用RT-PCR和Western blot检测 LMP1和HSP90 β的表达.结果核酸序列测定证实本实验所构建的质粒正确,该双表达质粒在体外转染COS细胞后可表达LMP1和HSP90 β分子.结论实验所构建的pIRES-LMP1-HSP90 β双表达质粒能在体外同时表达LMP1和HSP90 β分子.
作者：赵菊梅；刘涛；田聆；魏于全；文艳君 刊期： 2006年第03期
目的研究树突状细胞(DC)吞噬包被有甲胎蛋白HLA-A2限制性表位肽(AFP 218-226, LLNQHACAV) 的聚乳酸微球(PLA-AFP 218-226)后诱导的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对肝癌细胞株HepG2和负载有AFP 218-226的T2细胞株的毒性作用.方法用GM-CSF和IL-4诱导HLA-A2+的健康志愿者外周血单核细胞,LPS诱导成熟,使其分化为高纯度DC,在诱导过程中加入PLA-AFP 218-226微球,用吞噬了PLA-AFP 218-226微球的DC诱导自身T淋巴细胞,使其成为肝细胞癌(HCC)特异性CTL.用流氏细胞仪检测DC膜分子标志,T2细胞与AFP 218-226结合实验检测HLA-A2分子与AFP 218-226之间的亲合力,MTT法检测特异性CTL杀伤HepG2和T2细胞株的能力.结果 AFP 218-226与HLA-A2分子具有较高的亲合力,吞噬微球后的成熟DC高表达CD83、CD86、CD40等膜分子,其诱导的特异性CTL对HepG2和负载有AFP 218-226的T2细胞株具有强的细胞毒作用.结论 PLA-AFP 218-226被DC细胞吞噬后,能够诱导HCC特异性CTL的产生,可能成为一种新型的抗肿瘤表位肽疫苗,在肝癌的防治中得到应用.
作者：张兵；陈玮；董薇；蔡美英 刊期： 2006年第03期
报道罕见的女性A型血友病1例,并对其凝血因子Ⅷ进行基因突变分析.患者,女, 65岁,因为跌倒后右胸痛2 d入院,院内查体提示胸壁皮下血肿,双下肢等长,髋屈曲及内旋受限.测定凝血指标提示APTT61.3 s,正常血浆纠正后为41.3 s,而PT、FIB、TT均正常.有既往出血史.FⅧ活性为2%,FⅨ活性为200%,vWF:Ag为120%, vWF:RCof 100%, vWF:CBA128%,FⅧ结合分析正常;髋关节X片提示:双侧髋臼发育不良,髋关节骨关节炎.临床诊断为血友病A型.提取该患者外周血DNA,根据NM000132之凝血因子FⅧ基因序列设计合成了其第14外显子特异的引物,行聚合酶链反应扩增,并对扩增产物进行测序分析,测序结果与标准序列进行比较,发现该患者出现4111A→C杂合突变,使1314位氨基酸由苏氨酸变为脯氨酸,产生一错意突变,该突变未见其它文献报道.
作者：周静；闫乃红；贾永前；卢亦路；余江；曹桂群；陈清英；王玲；张发强；夏庆杰 刊期： 2006年第03期
目的探讨分泌型脑膜瘤的临床病理和免疫表型特点.方法对9例分泌型脑膜瘤分别进行HE、过碘酸-希夫(PAS)和PAS酶消化后(PAS-D)染色;用免疫组织化学SP法检测ER、PR、CEA、CK、EMA和MIB-1等标记;1例肿瘤进行电镜观察.结果 9例分泌型脑膜瘤分别位于碟骨嵴、左顶部或额部;5例有明显的肿瘤周围水肿;9例中7例随访时间6～88月,未见复发;组织学特点:细胞质内或细胞间均可见大小不等的透明包涵体,血管周细胞增生;9例包涵体PAS染色及PAS-D染色均呈阳性;免疫表型检测显示9例肿瘤细胞PR阳性,8例ER阴性,7例包涵体和周围细胞CEA、CK、EMA阳性.1例MIB-1阳性率为5%,余8例MIB阳性率不超过2%.电镜观察见细胞间腔隙形成及含有粘液的细胞.结论分泌型脑膜瘤是一种少见的颅内脑膜瘤亚型,显示腺上皮分化,复发率低,预后较好.
作者：李新军；张红英；郎志强；魏兵；陈卉娇；步宏 刊期： 2006年第03期
儿童食管化学性烧伤是引起儿童食管良性狭窄较常见的原因之一.其治疗应根据腐蚀剂的性质、量、浓度、食管损伤程度,以及伤后就诊时间等采取不同的措施,早期救治包括急救处理、急诊手术及预防食管瘢痕性狭窄,对已形成食管瘢痕性狭窄者需行食管重建术.1996年10月至2004年12月我科共收治41例食管化学性烧伤患者,现将治疗经验报道如下.
作者：刘敏；罗启成；刘洁；杜新萍 刊期： 2006年第03期
目的探讨人类端粒酶逆转录酶( hTERT )基因表达上调与儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)髓系抗原表达的关系.方法采集42例ALL患儿的骨髓标本,分别进行细胞形态学及细胞化学染色,确定其FAB类型,运用一组相关的单克隆抗体,采用流式细胞仪及直接免疫荧光标记技术进行免疫分型,采用吉姆萨G显带技术进行核型分析;同时,采用半定量RT-PCR方法检测其外周血 hTERT 的表达水平.结果儿童ALL髓系抗原表达阳性率26.19%,髓系抗原表达的ALL hTERT -mRNA表达水平高于无髓系抗原表达的ALL,而正常对照组无或低表达 hTERT -mRNA.结论伴髓系抗原表达的儿童急性淋巴细胞白血病 hTERT -mRNA表达上调.
作者：李熙鸿；王晓阳；熊珍玉；刘柏林；张燕 刊期： 2006年第03期
目的观察喉上动脉变异支的走行、分布和入喉位置及在临床中的意义.方法在27具(54侧)成人尸体头颈部标本上观察、测量喉上动脉及变异支的走行、入喉点.显微解剖喉上动脉变异支在喉内的分支、走行.结果 27具中国成人尸体中有7具(男6具,女1具)喉上动脉穿甲状软骨翼孔,其中左侧3具,右侧2具,双侧2具;3具(男)喉上动脉直接发于颈外动脉,左侧2具,右侧1具;1具(男)左侧喉上动脉起源于甲状腺下动脉.喉上动脉的变异率为40.7%(11/27),位置变异率24.1%(13/54).结论喉上动脉的变异并非少见.本研究对喉切除手术及其它颈部手术在喉部血管的处理方面有一定的指导意义.
作者：刘加林；项涛；梁传余；王力红；刘世喜；羊惠君 刊期： 2006年第03期
目的建立测定红细胞内6-甲基-巯基嘌呤(6-MMP)浓度的HPLC法,换算出红细胞和肝组织中硫嘌呤甲基转移酶(TPMT)活性,探讨猪与人肝脏TPMT酶活性的差异.方法使用岛津2010C系列高效液相色谱仪,Symmetry C 18(150 mm×3.9 mm,5 μm)色谱柱.样品用乙酸乙酯萃取后进样,0.1%的乙酸∶甲醇为流动相梯度洗脱,总流速1.0 mL/min,280 nm波长检测,内标法定量.结果标准曲线在6.25～100 nmol/mL范围内有良好线性,方法回收率为98.08%～100.05%,萃取回收率为88.1%～92.4%,批内RSD为1.0%～1.5%,批间RSD为1.0%～4.4%.测定显示人TPMT活性为(17.45±3.62)U,家猪TPMT活性为(7.65±1.35) U,版纳猪TPMT活性为(8.73±1.55) U.结论本方法适用于临床和科研中测定人和猪红细胞和肝组织TPMT活性.实验结果提示猪对嘌呤类药物的代谢能力低于人类.
作者：王莉娜；张璘；南峰；程惊秋；步宏；梁茂植；陆燕蓉 刊期： 2006年第03期
目的建立一种检测人类补体 C8A DNA多态性的新方法.方法 C8A 多态性的分子基础是 C8A 基因在第三外显子碱基发生了C→A的突变,通过特异性扩增 C8A 基因第三外显子,采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)方法结合DNA序列分析检测成都地区98份无血缘关系样本DNA C8A 基因型.结果共发现3种基因型, C8A*AA、C8A*BB和C8A*AB, 观测到的基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡定律.结论 PCR-SSCP检测 C8A 多态性快速、简便、可靠、成本低,适用于大样本的筛选,在群体遗传学及法医学实践中有较好的应用价值.
作者：杨志惠；张林；周斌；王闯；贾静 刊期： 2006年第03期
目的建立保健食品中甘露醇的毛细管气相色谱分析方法.方法用去离子水超声波提取样品中的甘露醇,经乙酸酐衍生化为沸点较低的甘露醇六乙酯,用SPB-608毛细管色谱柱分离,火焰离子化检测器(FID)进行检测.色谱柱温度为180 ℃、进样口和检测器的温度均为210 ℃,氮气流速30 mL/min.结果优化了样品衍生化和色谱分析条件,实现了葡萄糖、肌醇和山梨醇与甘露醇的分离,排除了它们对甘露醇测定的干扰.本方法的线性范围为(0.05～10.00) mg/mL,检出限为0.01 mg/mL,日内精密度RSD为4.4%,日间精密度RSD为7.3%～7.6%,平均加标回收率为84.6%～107.6%.结论本方法操作简单、灵敏、可靠,能满足保健食品中甘露醇定量分析的要求.
作者：王和兴；黎源倩；李磊 刊期： 2006年第03期
目的设计研制生物节律测控及分析系统,并以该系统为技术平台研究外环境的改变对动物的生物节律的影响.方法生物节律测控及分析系统采用分布式控制方案,由测控计算机和授时因子发生仪组成.动物活动性检测部分及授时因子发生部分采用模块化设计,根据实验不同要求进行配置.并且通过对饲养在不同的光暗循环周期的小鼠进行生物节律的研究来检测系统的性能及动物对工作平台的适应性.结果该系统选配光线授时因子模块后,显示系统按设计要求完成数据采集及通信、光线调控、数据处理分析.在使用期间没有发生故障.结论系统功能完善,扩展性好,动物适应性好,操作简单,可靠性高,为时间生物学的研究工作提供了可靠的研究平台.
作者：杨波；刘延友；李颖；廖玍；王晓佳；王正荣 刊期： 2006年第03期
目的制备EB病毒GST-Rta150融合蛋白的单克隆抗体并鉴定其特性.方法取经GST-Rta150融合蛋白免疫小鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞常规融合,依次进行阳性杂交瘤细胞株的筛选及亚克隆,接种杂交瘤细胞至小鼠腹腔,收集腹水并纯化.制备的单克隆抗体以琼脂双向扩散法鉴定抗体类及亚类.间接ELISA法测定抗体的效价,Western-blot检测抗体的特异性.结果获得一株稳定分泌抗GST-Rta150融合蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株1A9,细胞培养上清效价为10-3,腹水效价为10-5,纯化的抗体效价为10-6.经鉴定GST-Rta150融合蛋白单克隆抗体的亚类为IgG1.Western-blot结果显示此单克隆抗体能特异结合GST-Rta150融合蛋白.将杂交瘤细胞株在液氮中冻存3个月后复苏,其分泌的单克隆抗体效价不变.结论通过上述方法制备出来的单克隆抗体特异性强,稳定性好,为研究EB病毒立即早期基因产物Rta蛋白以及EB病毒相关疾病的诊断和治疗奠定了基础.
作者：朱银华；梁伟波；吕梅励；徐永春；贾静；张林 刊期： 2006年第03期
目的探索激光捕获显微切割技术(laser capture microdissection, LCM)定位分离心房细胞,并对提取的微量RNA进行β-actin 及 GAPDH 基因扩增.方法首先验证预做LCM样品的完整性,然后常规制备冰冻切片,采用改进的HE快速染色脱水法染色,提取刮片组织的RNA验证其质量,确保在切片染色过程中RNA的完整性.后进行LCM分离纯化心房细胞,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增β-actin 及 GAPDH 基因.结果经快速HE染色心房细胞形态学清晰;预做LCM的样品和染色后组织刮片可提取出高质量的RNA,紫外分光光度计测定吸光度值A 260/A 280为1.9～2.0之间.甲醛变性凝胶电泳显示清晰的28S rRNA和18S rRNA条带;捕获细胞提取的微量RNA经RT-PCR后进行凝胶电泳显示有300 bp及357 bp的扩增条带.结论 LCM可以分离出纯度较高的心房细胞,提取的微量RNA可以扩增出管家基因β-actin和GAPDH.
作者：欧妍；牛小麟；黄辰；任付先；陈伟 刊期： 2006年第03期
目的应用实时荧光定量PCR技术检测NK/T细胞淋巴瘤核糖体蛋白S13( RPS13 )基因的表达.方法提取石蜡包埋NK/T细胞淋巴瘤组织总RNA,逆转录为cDNA.应用实时荧光定量PCR技术检测NK/T细胞淋巴瘤 RPS13 表达水平.结果 20例NK/T细胞淋巴瘤 RPS13 表达水平明显低于对照.结论 RPS13 基因表达水平明显低于正常人外周血淋巴细胞,这可能在NK/T细胞淋巴瘤发生、发展中起到一定作用.
作者：杨帆；刘卫平；何妙侠；唐琼兰；赵莎；张文燕；夏庆杰；李甘地 刊期： 2006年第03期
患者女,51岁.因发热2月,体重减轻2周入院.无恶心呕吐、腹痛、背痛、肩部疼痛及黄疸等.既往无烟酒嗜好及手术史.实验室检查:肝肾功能、血常规、凝血功能、尿常规、血清生化均正常.肿瘤标志物:甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、癌抗原125及癌抗原19-9水平均不升高.腹部B超可探及肝脏S2-4区有3 cm×3 cm低回声包块及肝内胆管积气,同时经CT及核磁共振检查证实.腹部及胸部影像学和内窥镜检查未发现肿瘤.
作者：彭兵；杜景平；邓兵；寸碧芸；蒋丽丽；张尚福 刊期： 2006年第03期
患者女,58岁,农民.因乏力、心悸、体重下降2月,反复发作性出汗、手抖伴意识丧失1月于2003年5月收入院.入院前2月,患者因怕热多汗、心悸、乏力、多食易饥,伴体重下降就诊于当地医院,查空腹血糖正常,血清FT4, FT3升高,TSH降低,诊断为Graves' 病,给予甲巯咪唑(他巴唑)30 mg/d治疗,4周后上述症状逐渐缓解.入院前1月,患者在劳动中(下午5时左右)突感心悸、手抖、大汗淋漓、视物模糊,继而意识丧失.约2 h后患者神志自行恢复,无偏瘫及失语等.此后上述症状反复发作,约2～3 d发作一次,发作时间多在餐后3～5 h,但清晨空腹时从未有过类似发作.近1周发作频率增加,每天发作1～2次,为求进一步诊治收入我院.患者既往体健,不嗜烟酒,家族史无特殊.
作者：余叶蓉；李洁 刊期： 2006年第03期
