学术投稿

改良消减杂交法克隆人乳腺癌MCF-7细胞凋亡相关基因

晏伟;李青;朱峰;柴玉波;王成济;路凡;赵忠良;岳文

关键词:乳腺肿瘤, 细胞凋亡, 维甲酸, 聚合酶链反应
摘要:目的克隆人乳腺癌MCF-7肿瘤细胞凋亡相关的基因, 分析所克隆基因与凋亡的关系。方法用全反式维甲酸诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡,建立肿瘤细胞凋亡模型;运用基于聚合酶链式反应(PCR)的改良消减杂交技术,克隆肿瘤细胞凋亡的相关基因。结果在筛选出的5个特异表达的基因中,4个是已知基因,1个新基因。在4个已知基因中,3个与凋亡关系密切,其中hsp-90和rb-L3与凋亡的关系文献报道较少。结论维甲酸所诱导的肿瘤细胞凋亡是一个多基因参与的过程,这种基于PCR 的改良消减杂交技术为克隆新基因提供了一个新的方法和思路。
中华肿瘤杂志相关文献
  • 术中超声对早期诊断消化道肿瘤肝转移的价值

    目的探讨术中超声对早期诊断消化道肿瘤肝转移的价值。方法应用术中超声对176例确诊为消化道恶性肿瘤患者行术中肝脏超声检查,并与术前经腹壁超声、CT肝脏扫描以及外科手术探查等进行对比观察,所有肝内转移病灶均经手术切除或穿刺活检组织学确诊。全部病例于术后随访。结果 176例消化道肿瘤于手术时发现肝内转移43例(24.4%),计81个结节。其中术中超声诊断率为97.7%,显著高于术前经腹壁超声的86.0%、CT扫描的79.1%和外科直接探查的69.8%(P<0.05,P<0.01),尤其是对24个直径<2 cm的结节,术中超声、术前超声、CT扫描和外科探查的诊断率分别为95.8%、58.3%、41.7%和25.0%,术中超声显著优于其他方法(P<0.01)。结论术中超声对早期诊断消化道肿瘤肝内转移有极高的敏感性,对提高消化道肿瘤外科手术的治愈率,延长患者生存率有重要价值。

    作者:林礼务;叶真;薛恩生;高上达;何以敉;俞丽云 刊期: 2001年第03期

  • 两种黑色素瘤抗原基因在肝细胞癌中的表达

    目的检测黑色素瘤抗原MAGE-4和MAGE-10 mRNA在中国人肝细胞癌(HCC)中的表达,为用这两种基因编码蛋白作为疫苗对HCC患者进行免疫治疗提供依据。方法用RT-PCR方法对48例HCC患者癌组织和相应癌旁肝组织、10例肝硬化组织和10例正常肝组织的MAGE-4和MAGE-10 mRNA表达情况进行研究,并对RT-PCR扩增产物中目的基因片段进行cDNA序列测定。结果 48例HCC患者中,有15例(31.3%)表达MAGE-4,14例(29.2%)表达MAGE-10 mRNA;而相应癌旁肝组织、肝硬化和正常肝组织均不表达。cDNA测序进一步证明,PCR产物中的目的基因片段为MAGE-4和MAGE-10 cDNA序列,两种MAGE基因的表达与肿瘤大小、甲胎蛋白(α-FP)水平等临床指标无相关关系。结论 MAGE-4和MAGE-10在HCC组织中呈特异性的表达,而在癌旁非瘤性肝组织中均不表达,这使得以此抗原用于HCC患者的免疫治疗成为可能。

    作者:蔡胜利;冷希圣;彭吉润;程继华;杜如昱;王宇;丛旭;芮静安;陈慰峰 刊期: 2001年第03期

  • 绿色荧光蛋白质粒DNA作为活细胞标记基因的研究

    绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)来源于可自发荧光的海洋水母,其cDNA所编码的蛋白质受到蓝光或紫外光照射时可自发的发出绿色荧光。我们将GFP质粒DNA转染不同类型的细胞,利用GFP蛋白标记活细胞。 一、方法 我们采用的GFP真核表达质粒pEGFP-N1购自Clontech公司,GFP由人巨细胞病毒即刻早期抗原基因启动子(CMV)所调控。此外,pEGFP-N1还有neo编码基因,其表达由猴肉瘤病毒SV40抗原基因启动子控制。

    作者:黄倩;李川源 刊期: 2001年第03期

  • 食管癌综合治疗与单一手术治疗的比较

    目的评价Ⅱ、Ⅲ期食管癌术前化疗的价值。方法对50例Ⅱ、Ⅲ期食管癌患者进行以顺铂为主的联合化疗,并与同期内50例单纯手术患者进行比较分析,进一步探讨提高Ⅱ、Ⅲ期食管癌患者的远期疗效。结果单纯手术组5年生存率为32.0%,术前化疗组5年生存率为46.0%,两组差异有显著性(P<0.05)。结论术前化疗复发率及转移率低,术前化疗组5年生存率高于单纯手术组。

    作者:王春利;丁悌;常林宝;赵进明;郭慧 刊期: 2001年第03期

  • nm23基因表达与乳腺癌远处转移及预后相关性的研究

    目的探讨nm23基因表达与乳腺癌远处转移的关系及其预后意义。方法选取两组共169例乳腺癌患者,应用免疫组化和RT-PCR方法检测nm23基因表达。结果 nm23基因表达与乳腺癌远处转移及腋淋巴结转移呈显著负相关,与生存率呈正相关。第1组病例发生远处转移的9例腋淋巴结阴性患者中,7例为nm23蛋白低表达;而29例未发生远处转移的腋淋巴结阳性患者中,nm23蛋白中表达及高表达者为24例(82.8%)。第2组发生复发和远处转移的6例患者其nm23 mRNA均低表达。nm23基因表达与腋淋巴结转移、肿瘤大小均为影响预后的因素。结论 nm23基因作为一个独立的预后指标应用,可弥补常规指标的不足,具有重要的临床应用价值。

    作者:刘红;方志沂;李树玲;毛慧生;傅西林;冯玉梅;范宇 刊期: 2001年第03期

  • 乳腺癌哨位淋巴结活检的临床意义

    目的探讨哨位淋巴结(sentinel lymph node, SLN) 活检术(SLN biopsy, SLNB) 指导临床腋淋巴结阴性(cN0)乳腺癌腋窝淋巴结清除范围的可行性。方法使用专利蓝或美蓝对1999年4月~2000年8月的96例cT1~3N0M0期乳腺癌患者进行SLNB,随后行包括全腋淋巴结清除的乳腺癌手术。结果确定SLN 91例,成功率为94.8%。SLN为1个者54例,占59.3%;2个者23例,占25.3%;3个以上者14例,占15.4%。91例中,24例(26.4%)SLN阳性,其中13例(54.2%)仅有SLN 转移。SLNB的灵敏度为87.5%,特异度为100%,阳性结果预测值为100%,阴性结果预测值为95.7%。术中印片细胞学检查的准确率为92.1%,假阴性率为10.0%,假阳性率为7.1%;术中快速病理检查准确率为98.7%,假阴性率为5.0%,假阳性率为0。免疫组化未发现常规病理检查阴性的SLN有阳性结果。结论 SLN转移状况基本可反映乳腺癌腋淋巴结转移的状况;SLNB有望成为指导cN0期乳腺癌腋淋巴结清除范围的手术方法;国产美蓝对SLN标识效果与专利蓝相似。

    作者:左文述;王永胜;李敏;王磊;于志勇;刘奇 刊期: 2001年第03期

  • 柔红霉素在耐药细胞株K562/ADR内的异常分布

    目的了解化疗药物在糖蛋白(Pgp)耐药细胞株K562/ADR亚细胞结构的异常分布及其与耐药的关系。方法采用共聚焦激光扫描显微镜、荧光法和RT-PCR等方法, 研究柔红霉素(DNR)在K562/ADR细胞亚细胞结构的分布及其与耐药的关系,以及维拉帕米尔(verapamil)、布雷菲尔得菌素(brefeldin A)、氯喹对细胞内DNR异常分布的影响。将3种特异染色线粒体、高尔基体、溶酶体的荧光物质Rh123、NBD-ceramide、中性红作为探针,鉴定分隔储留DNR的细胞器。结果在K562/ADR细胞中,DNR荧光主要集中在核周和周边胞浆,核内及胞浆其他部位荧光很少。这种分布方式与Rh123荧光在该细胞的分布极其相似,与DNR在敏感细胞K562/S细胞核、浆均匀分布不同。verapamil可逆转DNR在K562/ADR的异常分布,而氯喹、brefeldin A无此作用。结论 DNR在耐药细胞的异常分布参与了肿瘤细胞耐药的形成,Pgp在此过程中发挥了重要作用。

    作者:龚玉萍;王燕婷;陈芳源;韩洁英;邵念贤;欧阳仁荣 刊期: 2001年第03期

  • 三氧化二砷诱导骨髓瘤细胞凋亡机制研究

    目的了解三氧化二砷(As2O3) 诱导多发性骨髓瘤细胞(MM)凋亡的可能机制及其与维甲酸和干扰素的相互作用。方法联合应用As2O3和巯基还原剂(DTT)、谷胱甘肽耗竭剂(BSO)、全反式维甲酸(ATRA)或干扰素(IFN-α)处理MM细胞系RPMI8226和U266细胞;应用台盼蓝拒染法计数细胞活力,经细胞形态学和流式细胞仪等判定细胞凋亡的程度;通过测定细胞内荧光染料Rhodamine 123的色强度分析线粒体跨膜电位(ΔΨm)。结果 BSO可加强As2O3诱导的RPMI8226和U266细胞线粒体ΔΨm下降和凋亡,而DTT则有部分拮抗的作用。ATRA诱导RPMI8226细胞凋亡,但它和As2O3之间无协同效应。ATRA并不诱导U266细胞凋亡。此外,IFN-α既不抑制RPMI8226和U266细胞的生长和活力,也不改变As2O3对这些细胞的作用。结论 As2O3诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡和巯基有关,但ATRA或干扰素和As2O3无协同效应。

    作者:周宇红;黄晓臖;袁弥满;蔡循;沈玉雷;贾培敏;余韵;周励;陈国强;张学光 刊期: 2001年第03期

  • p16蛋白在直肠癌组织中的表达及其临床意义

    近年来国内外学者经过大量研究发现,p16基因及其编码合成的p16蛋白的生物学功能与细胞增殖周期关系密切,是细胞增殖的负调控因子。其缺失在很多肿瘤的形成和发展中起重要作用,且在不同肿瘤组织中的表达各不相同。为探讨p16蛋白在直肠癌组织中的表达及其临床意义,我们设计并进行了以下研究。 一、材料与方法 1.一般资料:收集我院1997~1999年间资料完整的直肠癌术后石蜡包埋标本57例,取其中46例距肿瘤下边缘2 cm以内的直肠组织标本作为癌旁对照;同时对20例非直肠癌患者的正常直肠组织进行检测。在57例直肠癌中,高中分化腺癌46例,低分化腺癌4例,黏液腺癌7例。

    作者:王小强;张远;王建华;王金柱;闫立昆 刊期: 2001年第03期

  • 食管癌高发区HPV检测及与p53的关系

    目的探讨食管癌高发区中人乳头瘤病毒(HPV)、爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)与食管癌发病的关系,并初步研究HPV感染与p53过表达之间的关系。方法设计了多对引物进行PCR、原位杂交及原位PCR、免疫组化,并对30例高发区食管癌进行检测。结果用PCR检出HPV-L1阳性率10.0%,HPV-16-E6阳性率60.0%,HPV-16-E7阳性率63.3%,HPV-18-E6及EBV的检出率分别为6.7%和0,p53蛋白的检出率为73.3%。用原位杂交和原位PCR检出HPV-16-E6阳性率均为53.3%。HPV-L1的低检出率及HPV-16-E6、HPV-16-E7基因的较高检出率可能提示,在肿瘤细胞中HPV常以部分丢失的形式整合,而E6、E7常在整合中保留。结论 HPV-16型可能与高发区食管癌发生密切相关,而HPV-18、EBV则关系不大。p53突变在食管癌的发病中起重要作用,但其与HPV感染之间的关系不大。

    作者:陆哲明;郭梅;李涛;柯杨;陈克能;邢海平;梅强;杨怀华 刊期: 2001年第03期

  • 鼻咽癌咽旁间隙受侵对预后的影响

    目的探讨鼻咽癌咽旁间隙受侵对患者预后的影响。方法 1987年1月~1994年12月间对197例初程治疗的鼻咽癌患者进行CT扫描检查,利用SPSS 8.0软件进行单因素和多因素分析影响预后的因素。结果咽旁间隙受侵对实际生存、无瘤生存及局部控制有影响(P=0.011 5,P=0.003 5,P=0.036 7)。咽旁间隙阴性患者的5年实际生存率、无瘤生存率和局部控制率分别为87.9%、88.0%和96.9%,茎突前间隙受侵分别为75.0%、71.2%和93.7%,茎突后间隙受侵分别为60.5%、57.7%和86.8%。结论咽旁间隙受侵影响生存及局部控制,当茎突后间隙明显受侵时,远处转移的机会增加。

    作者:肖光莉;徐国镇;高黎;李素艳;肖建平;蔡伟明;秦德兴 刊期: 2001年第03期

  • 改良消减杂交法克隆人乳腺癌MCF-7细胞凋亡相关基因

    目的克隆人乳腺癌MCF-7肿瘤细胞凋亡相关的基因, 分析所克隆基因与凋亡的关系。方法用全反式维甲酸诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡,建立肿瘤细胞凋亡模型;运用基于聚合酶链式反应(PCR)的改良消减杂交技术,克隆肿瘤细胞凋亡的相关基因。结果在筛选出的5个特异表达的基因中,4个是已知基因,1个新基因。在4个已知基因中,3个与凋亡关系密切,其中hsp-90和rb-L3与凋亡的关系文献报道较少。结论维甲酸所诱导的肿瘤细胞凋亡是一个多基因参与的过程,这种基于PCR 的改良消减杂交技术为克隆新基因提供了一个新的方法和思路。

    作者:晏伟;李青;朱峰;柴玉波;王成济;路凡;赵忠良;岳文 刊期: 2001年第03期

  • 非小细胞肺癌纵隔淋巴结跳跃性转移的研究

    目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)纵隔淋巴结跳跃性与非跳跃性转移的临床特点及预后的差异。方法以1982~1994年间我院行手术治疗的176例ⅢA期有纵隔淋巴结转移的NSCLC患者为研究对象,其中53例不伴有肺门淋巴结转移,称为跳跃组;123例伴有肺门淋巴结转移,称为非跳跃组。将纵隔淋巴结分为3个区域,分析两组患者淋巴结转移范围及其与生存率的关系。结果在跳跃组中,有49例(92.5%)纵隔淋巴结转移局限于1个区域(L1),而在非跳跃组中有45例(36.6%)纵隔淋巴结转移扩至2或3个区域(L2或L3)。跳跃组的5年生存率为29.3%,高于非跳跃组(12.2%,P=0.038),且在同一L1上,跳跃组5年生存率(32.1%)亦高于非跳跃组(15.3%,P=0.042)。结论 NSCLC患者纵隔淋巴结跳跃性转移为纵隔淋巴结转移病变中独特的一个亚群。

    作者:王思愚;吴一龙;区伟;杨学宁 刊期: 2001年第03期

  • 噬菌体抗原模拟表位的免疫原性研究

    目的通过研究胃癌相关抗原的短肽模拟表位的免疫原性,探讨肿瘤抗原表位的噬菌体模拟肽是否具有免疫原性,为进一步的胃癌疫苗研制奠定实验基础。方法以胃癌单克隆抗体MG7所识别的胃癌相关抗原表位模拟肽为免疫原,免疫Balb/c小鼠,获得免疫血清;用表达MG7单抗所识别的相应抗原的胃癌组织切片,通过免疫组化方法筛选免疫血清;在此基础上,对阳性血清进一步用细胞荧光标记法和ELISA法进行了检测。结果免疫血清经免疫组化筛选和细胞荧光标记法及ELISA法检测,发现其中一个噬菌体呈现的表位模拟肽的免疫血清可与人胃癌组织间呈现特异的免疫反应,由此筛选出具有免疫原性的胃癌相关抗原表位的噬菌体模拟肽。结论用单克隆抗体从随机肽库中筛选得到的部分表位模拟肽具有引发识别原始抗原免疫反应的免疫原性,提示以肿瘤相关抗原的表位模拟肽为基础研制疫苗具有可行性,可望在机体内诱发有效的体液免疫反应。

    作者:徐立;樊代明;徐宏勇;马福成;金伯泉 刊期: 2001年第03期

  • 头颈部恶性黑色素瘤的临床及病理研究

    目的研究头颈部恶性黑色素瘤的临床,病理及免疫组织化学特征,以提高临床和病理诊断率。方法收集头颈部恶性黑色素瘤(除脉络膜外)68例,其中原发于鼻腔和口腔黏膜33例,头颈部皮肤 35例。发病高峰年龄为41~60岁。52例为手术切除标本,16例为活检(咬取、切除)标本。复习所有患者的临床及病理资料,并对42例进行S-100、HMB45和NSE免疫组织化学观察。结果在68例中,手术切除者52例,其中有13例行补充放疗,21例进行了化疗;单纯放疗10例;拒绝治疗6例。在获得随诊的56例中,存活5年以上者12例,其中头颈部皮肤恶性黑色素瘤9例,占75.0%;鼻腔及口腔黏膜者3例,占25.0%。结论恶性黑色素瘤在组织学结构上的改变具有重要意义;免疫组织化学对恶性黑色素瘤诊断和鉴别诊断有重要价值;发生于鼻腔和口腔黏膜的恶性黑色素瘤的预后明显比发生在头颈部皮肤的差。

    作者:罗定泰;夏和顺 刊期: 2001年第03期

  • IE期鼻腔非霍奇金淋巴瘤预后的多因素分析

    目的探讨影响IE期鼻腔非霍奇金淋巴瘤患者预后的因素。方法 71例原发于鼻腔非霍奇金淋巴瘤IE期患者,其中37例病灶局限于鼻腔(IE局限组),34例有鼻腔外侵犯(IE超腔组)。44例为单纯放疗,27例为放疗加化疗。生存统计采用Kaplan-Meier法,组间比较采用Log-rank检验。多因素分析采用Cox模型。结果放疗后肿瘤完全消失者5,10年生存率分别为71.9%和59.7%,放疗后残留者均为13.9%(P=0.000 4)。IE局限组5,10年生存率分别为69.8%和56.7%,IE 超腔组分别为40.7%和35.6%,二者差异有显著性(P=0.004 7)。年龄≤44岁患者的预后明显好于年龄>44岁者(P=0.000 3)。IE局限放疗加化疗组和单纯放疗组的10年生存率分别为75.0%和52.0%,IE超腔组则分别为45.0%和37.6%(P=0.064 4)。有无B症状对生存率无显著影响(P=0.792)。Cox多因素分析显示,放疗近期疗效、肿瘤超腔和年龄是影响预后的独立因素。结论鼻腔IE期淋巴瘤的治疗以放疗为主,加上化疗能提高远期生存率。放疗近期疗效、临床分期和年龄对预后有显著影响。

    作者:胡伟汉;陈明;汪惠云;毛志达;卢泰祥;陈茹琴;骆福添;孙颖 刊期: 2001年第03期

  • 青年人与老年人贲门癌临床及手术治疗结果分析

    我们对在我院手术的83例青年人和125例老年人贲门癌的治疗结果、临床及预后方面的特点及差异进行了分析比较,现报告如下。 一、材料与方法 采用STATA 5.0统计软件,对1958年10月~1994年1月在我院开胸手术的83例青年人(<40岁)及125例老年人(≥70岁)的贲门癌资料建立数据库,并进行统计分析。随访均已满5年,失随访率为8.5%。两组之间率差异的显著性检验用χ2检验。生存率用寿命表法计算,两组间生存率差异的显著性检验用Logrank检验。

    作者:方德康;汪良骏;张汝刚;张大为;张德超 刊期: 2001年第03期

  • 《中华肿瘤杂志》1999年度优秀论文评选结果

    继首次优秀论文评选活动之后,本刊1999年度优秀论文揭晓。有9篇论文获优秀论文奖,6篇论文获提名奖。 获优秀论文奖的论文如下: 食管癌前病变阻断治疗的远期效果(中国医学科学院肿瘤研究所肿瘤医院,丁镇伟、高峰、林培中等);中国1990~1992年原发性肝癌死亡调查分析(中国医学科学院肿瘤研究所肿瘤医院,张思维、李连弟、鲁凤珠等);c-erbB-2癌基因特异性核酶的体外切割作用(第四军医大学西京医院全军消化疾病研究所,毕锋、张学庸、樊代明等);Genistein抑制乳腺癌细胞生长的机制(上海医科大学肿瘤医院外科分子生物实验室,邵志敏、沈镇宙);应用mRNA差异显示方法克隆维甲酸诱导的人肺腺癌GLC-82细胞分化相关基因(中国医学科学院肿瘤研究所肿瘤医院分子肿瘤国家重点实验室,孟祥文、王丽华等);人类错配基因在HNPCC家系中的突变研究(浙江医科大学肿瘤研究所,袁瑛、黄建、郑树);肝动脉化疗栓塞结合外放射治疗肝癌的研究(上海医科大学肿瘤医院,郭伟剑、宋明志、于尔辛等);β-榄香烯诱导的抗肿瘤免疫保护作用机理初探(上海医科大学附属肿瘤医院肝癌研究所,吴伟忠、刘康达、汤晓雷等);中国高发区肝细胞癌p53基因热点突变的规律性(中国医学科学院肿瘤研究所肿瘤医院,明利华、袁宝珠、Thorgeirsson等)。 获提名奖的论文如下: VEGF的单抗制备及胃癌细胞MGC803表达VEGF的鉴定(北京市肿瘤研究所北京医科大学临床肿瘤学院,田学军、吴健、孟麟等);一个具有肿瘤转移抑制基因活性的人DNA序列(军事医学科学院基础医学研究所,葛学铭、陆应麟、付生法等);三磷酸苷对人胃癌细胞恶性表型的去恶化作用(北京医科大学临床肿瘤学院,郝纯毅、吕桂芝、蔡险峰等);MAL基因在人食管癌中表达显著下调(中国医学科学院肿瘤研究所肿瘤医院分子肿瘤学重点实验室,许智雄、王明荣、蔡岩等);细胞图像分析预测食管上皮增生转归的研究(中国医学科学院肿瘤研究所肿瘤医院,周彬、丁镇伟、郭黎平等);基于97分期的非小细胞肺癌术后分期和生存研究(中山医科大学肿瘤医院胸科,吴一龙、黄植蕃、戎铁华等) 我们谨向以上作者表示祝贺,并将向获优秀论文奖作者颁发证书。本刊编辑部

    作者: 刊期: 2001年第03期

  • VEGF、bFGF和ER在子宫内膜癌的表达

    目的探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达与子宫内膜癌临床病理参数和预后的关系,以及其与雌激素受体(ER)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达之间的关系。方法采用免疫组化SP法检测66例子宫内膜癌和19例正常子宫内膜的石蜡切片VEGF、ER和bFGF的表达。结果子宫内膜癌VEGF的阳性表达率为80.3%,其表达与组织学分级呈正相关(r=0.402 1,P<0.01);ER表达与组织学分级呈负相关(r=-0.245 5,P<0.05);VEGF与bFGF的表达呈正相关(r=0.293 9,P<0.05)。ER阴性表达比ER阳性表达的患者预后差(P<0.05)。ER表达与VEGF和bFGF的表达无显著相关性。结论 VEGF是子宫内膜癌重要的血管生成因子,ER表达与子宫内膜癌的预后有关,但与bFGF和VEGF的表达无关。

    作者:白晓红;糜若然 刊期: 2001年第03期

  • 原发性鼻咽癌中高频率的4q增多和1p丢失

    目的阐明中国广东籍患者原发性鼻咽癌(NPC)的遗传学变化。方法用比较基因组杂交技术(CGH)检测17例原发性NPC遗传物质的增多和丢失情况。结果在半数以上患者中发现4q增多和1p丢失。其他较为常见的染色体变化是12q、1q、2q、3q和8q增多,以及3p、11q、14q、15q、13q、Xq、9q、10p、10q和16q丢失。结论广东原发性NPC的遗传学改变为4q、12q和1 q增多以及1p、3p、11q和14q丢失,这些区域可能含有与NPC发病有关的癌基因与抑癌基因。

    作者:鄢践;方阓;梁启万;黄贻学;李辉梅;曾益新 刊期: 2001年第03期

中华肿瘤杂志

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