学术投稿

噬菌体抗原模拟表位的免疫原性研究

徐立;樊代明;徐宏勇;马福成;金伯泉

关键词:肿瘤抗原, 噬菌体表位模拟肽, 免疫原性, 胃肿瘤
摘要:目的通过研究胃癌相关抗原的短肽模拟表位的免疫原性,探讨肿瘤抗原表位的噬菌体模拟肽是否具有免疫原性,为进一步的胃癌疫苗研制奠定实验基础。方法以胃癌单克隆抗体MG7所识别的胃癌相关抗原表位模拟肽为免疫原,免疫Balb/c小鼠,获得免疫血清;用表达MG7单抗所识别的相应抗原的胃癌组织切片,通过免疫组化方法筛选免疫血清;在此基础上,对阳性血清进一步用细胞荧光标记法和ELISA法进行了检测。结果免疫血清经免疫组化筛选和细胞荧光标记法及ELISA法检测,发现其中一个噬菌体呈现的表位模拟肽的免疫血清可与人胃癌组织间呈现特异的免疫反应,由此筛选出具有免疫原性的胃癌相关抗原表位的噬菌体模拟肽。结论用单克隆抗体从随机肽库中筛选得到的部分表位模拟肽具有引发识别原始抗原免疫反应的免疫原性,提示以肿瘤相关抗原的表位模拟肽为基础研制疫苗具有可行性,可望在机体内诱发有效的体液免疫反应。
中华肿瘤杂志相关文献
  • VEGF、bFGF和ER在子宫内膜癌的表达

    目的探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达与子宫内膜癌临床病理参数和预后的关系,以及其与雌激素受体(ER)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达之间的关系。方法采用免疫组化SP法检测66例子宫内膜癌和19例正常子宫内膜的石蜡切片VEGF、ER和bFGF的表达。结果子宫内膜癌VEGF的阳性表达率为80.3%,其表达与组织学分级呈正相关(r=0.402 1,P<0.01);ER表达与组织学分级呈负相关(r=-0.245 5,P<0.05);VEGF与bFGF的表达呈正相关(r=0.293 9,P<0.05)。ER阴性表达比ER阳性表达的患者预后差(P<0.05)。ER表达与VEGF和bFGF的表达无显著相关性。结论 VEGF是子宫内膜癌重要的血管生成因子,ER表达与子宫内膜癌的预后有关,但与bFGF和VEGF的表达无关。

    作者:白晓红;糜若然 刊期: 2001年第03期

  • 改良消减杂交法克隆人乳腺癌MCF-7细胞凋亡相关基因

    目的克隆人乳腺癌MCF-7肿瘤细胞凋亡相关的基因, 分析所克隆基因与凋亡的关系。方法用全反式维甲酸诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡,建立肿瘤细胞凋亡模型;运用基于聚合酶链式反应(PCR)的改良消减杂交技术,克隆肿瘤细胞凋亡的相关基因。结果在筛选出的5个特异表达的基因中,4个是已知基因,1个新基因。在4个已知基因中,3个与凋亡关系密切,其中hsp-90和rb-L3与凋亡的关系文献报道较少。结论维甲酸所诱导的肿瘤细胞凋亡是一个多基因参与的过程,这种基于PCR 的改良消减杂交技术为克隆新基因提供了一个新的方法和思路。

    作者:晏伟;李青;朱峰;柴玉波;王成济;路凡;赵忠良;岳文 刊期: 2001年第03期

  • 噬菌体抗原模拟表位的免疫原性研究

    目的通过研究胃癌相关抗原的短肽模拟表位的免疫原性,探讨肿瘤抗原表位的噬菌体模拟肽是否具有免疫原性,为进一步的胃癌疫苗研制奠定实验基础。方法以胃癌单克隆抗体MG7所识别的胃癌相关抗原表位模拟肽为免疫原,免疫Balb/c小鼠,获得免疫血清;用表达MG7单抗所识别的相应抗原的胃癌组织切片,通过免疫组化方法筛选免疫血清;在此基础上,对阳性血清进一步用细胞荧光标记法和ELISA法进行了检测。结果免疫血清经免疫组化筛选和细胞荧光标记法及ELISA法检测,发现其中一个噬菌体呈现的表位模拟肽的免疫血清可与人胃癌组织间呈现特异的免疫反应,由此筛选出具有免疫原性的胃癌相关抗原表位的噬菌体模拟肽。结论用单克隆抗体从随机肽库中筛选得到的部分表位模拟肽具有引发识别原始抗原免疫反应的免疫原性,提示以肿瘤相关抗原的表位模拟肽为基础研制疫苗具有可行性,可望在机体内诱发有效的体液免疫反应。

    作者:徐立;樊代明;徐宏勇;马福成;金伯泉 刊期: 2001年第03期

  • 青年人与老年人贲门癌临床及手术治疗结果分析

    我们对在我院手术的83例青年人和125例老年人贲门癌的治疗结果、临床及预后方面的特点及差异进行了分析比较,现报告如下。 一、材料与方法 采用STATA 5.0统计软件,对1958年10月~1994年1月在我院开胸手术的83例青年人(<40岁)及125例老年人(≥70岁)的贲门癌资料建立数据库,并进行统计分析。随访均已满5年,失随访率为8.5%。两组之间率差异的显著性检验用χ2检验。生存率用寿命表法计算,两组间生存率差异的显著性检验用Logrank检验。

    作者:方德康;汪良骏;张汝刚;张大为;张德超 刊期: 2001年第03期

  • 原发性鼻咽癌中高频率的4q增多和1p丢失

    目的阐明中国广东籍患者原发性鼻咽癌(NPC)的遗传学变化。方法用比较基因组杂交技术(CGH)检测17例原发性NPC遗传物质的增多和丢失情况。结果在半数以上患者中发现4q增多和1p丢失。其他较为常见的染色体变化是12q、1q、2q、3q和8q增多,以及3p、11q、14q、15q、13q、Xq、9q、10p、10q和16q丢失。结论广东原发性NPC的遗传学改变为4q、12q和1 q增多以及1p、3p、11q和14q丢失,这些区域可能含有与NPC发病有关的癌基因与抑癌基因。

    作者:鄢践;方阓;梁启万;黄贻学;李辉梅;曾益新 刊期: 2001年第03期

  • p16蛋白在直肠癌组织中的表达及其临床意义

    近年来国内外学者经过大量研究发现,p16基因及其编码合成的p16蛋白的生物学功能与细胞增殖周期关系密切,是细胞增殖的负调控因子。其缺失在很多肿瘤的形成和发展中起重要作用,且在不同肿瘤组织中的表达各不相同。为探讨p16蛋白在直肠癌组织中的表达及其临床意义,我们设计并进行了以下研究。 一、材料与方法 1.一般资料:收集我院1997~1999年间资料完整的直肠癌术后石蜡包埋标本57例,取其中46例距肿瘤下边缘2 cm以内的直肠组织标本作为癌旁对照;同时对20例非直肠癌患者的正常直肠组织进行检测。在57例直肠癌中,高中分化腺癌46例,低分化腺癌4例,黏液腺癌7例。

    作者:王小强;张远;王建华;王金柱;闫立昆 刊期: 2001年第03期

  • bax基因在子宫内膜癌中的表达及意义

    目的研究bax基因在子宫内膜癌发生发展中的作用。方法采用RT-PCR方法检测8例正常增殖期子宫内膜、6例子宫内膜单纯及复合增生、6例子宫内膜不典型增生及42例子宫内膜癌组织中bax基因mRNA的表达。结果以8例正常增殖期子宫内膜为表达参照,在1例子宫内膜复合增生、2例子宫内膜非典型增生和27例(64.3%)子宫内膜癌中,bax基因mRNA过表达,其余为中度表达。在子宫内膜癌中,随着临床分期及组织学分级的增加、肌层侵袭的加深以及淋巴结的转移,bax基因mRNA过表达阳性率逐渐增加(除临床分期P>0.05外,其余均P<0.05)。结论 bax基因参与子宫内膜细胞增殖与凋亡过程,与子宫内膜癌的发生发展有关,可作为评估子宫内膜癌高危因素和恶性生物学行为的重要参考指标之一。

    作者:晁红霞;孙建衡;陆士新 刊期: 2001年第03期

  • 食管癌综合治疗与单一手术治疗的比较

    目的评价Ⅱ、Ⅲ期食管癌术前化疗的价值。方法对50例Ⅱ、Ⅲ期食管癌患者进行以顺铂为主的联合化疗,并与同期内50例单纯手术患者进行比较分析,进一步探讨提高Ⅱ、Ⅲ期食管癌患者的远期疗效。结果单纯手术组5年生存率为32.0%,术前化疗组5年生存率为46.0%,两组差异有显著性(P<0.05)。结论术前化疗复发率及转移率低,术前化疗组5年生存率高于单纯手术组。

    作者:王春利;丁悌;常林宝;赵进明;郭慧 刊期: 2001年第03期

  • β-榄香烯诱导K562白血病细胞凋亡

    目的探讨β-榄香烯诱导人红白血病K562细胞株凋亡作用的机制。方法采用Hoechst 33342和 PI荧光染色法、电镜、DNA电泳、免疫组化以及流式细胞术分析法,对K562细胞凋亡的定性与定量以及凋亡抑制基因编码蛋白bcl-2在肿瘤细胞内的表达进行检测。结果经β-榄香烯处理的K562细胞出现核固缩,染色质边集,凋亡小体形成,琼脂糖凝胶电泳呈现出细胞凋亡特征性的DNA梯状带。凋亡细胞发生率与药物浓度和作用时间呈正相关,即药物浓度为40 μg/ml(48 h),凋亡细胞的发生率从2.3%上升至58.4%。经β-榄香烯处理的K562细胞内bcl-2表达较对照组降低。结论β-榄香烯对肿瘤细胞的杀伤主要是通过诱导细胞凋亡,其抑制细胞内Bcl-2的表达,是诱发肿瘤细胞凋亡的主要机制之一。

    作者:邹丽娟;刘伟先;于丽敏;杨佩满 刊期: 2001年第03期

  • 欧必亭与康泉预防化疗引起恶心呕吐的临床疗效

    目的观察欧必亭(Tropisetron)预防化疗所致恶心呕吐的疗效和不良反应,并与康泉(Kytril)进行对比研究。方法采用临床随机自身对照方法,将34例接受联合化疗(19例含顺铂)的患者随机分为AB、BA两组,均接受两个周期相同方案的化疗。AB组第1周期用欧必亭,第2周期用康泉;BA组第1周期用康泉,第2周期用欧必亭。结果化疗第1天欧必亭组止吐的有效率为97.1%,中位呕吐次数为4.5次;康泉的有效率为94.1%,中位呕吐次数为3次,经统计学处理,两组差异无显著性。对迟发性呕吐和副作用也进行了对比,欧必亭和康泉差异亦无显著性。结论欧必亭为预防化疗所致恶心呕吐的有效药物,其不良反应轻微。

    作者:王金万;杨林;崔成旭;屈涛;王兴元;李玉升;王佳玉;储大同 刊期: 2001年第03期

  • 两种黑色素瘤抗原基因在肝细胞癌中的表达

    目的检测黑色素瘤抗原MAGE-4和MAGE-10 mRNA在中国人肝细胞癌(HCC)中的表达,为用这两种基因编码蛋白作为疫苗对HCC患者进行免疫治疗提供依据。方法用RT-PCR方法对48例HCC患者癌组织和相应癌旁肝组织、10例肝硬化组织和10例正常肝组织的MAGE-4和MAGE-10 mRNA表达情况进行研究,并对RT-PCR扩增产物中目的基因片段进行cDNA序列测定。结果 48例HCC患者中,有15例(31.3%)表达MAGE-4,14例(29.2%)表达MAGE-10 mRNA;而相应癌旁肝组织、肝硬化和正常肝组织均不表达。cDNA测序进一步证明,PCR产物中的目的基因片段为MAGE-4和MAGE-10 cDNA序列,两种MAGE基因的表达与肿瘤大小、甲胎蛋白(α-FP)水平等临床指标无相关关系。结论 MAGE-4和MAGE-10在HCC组织中呈特异性的表达,而在癌旁非瘤性肝组织中均不表达,这使得以此抗原用于HCC患者的免疫治疗成为可能。

    作者:蔡胜利;冷希圣;彭吉润;程继华;杜如昱;王宇;丛旭;芮静安;陈慰峰 刊期: 2001年第03期

  • 上海市胸科医院近六年肺癌手术死亡的研究

    为探讨影响肺癌术后5年生存率的因素,我们对我院近6年肺癌手术死亡病例资料进行了分析研究,现报告如下。 一、临床资料 我院自1992年1月至1997年12月,共施行胸外科手术4910例,其中肺癌手术2295例(46.7%)。同期胸外科收治肺癌患者2 434例,住院期间死亡56例,住院死亡率2.3%;手术死亡(术后30 d内死亡)39例,手术死亡率1.6%。死亡的39例中,男36例,女3例。年龄48~78岁,平均65.1岁,70岁以上7例。术后病理诊断腺癌16例(41.0%),鳞癌12例(30.8%)。

    作者:吴怀申;周允中;韩文彬;黄平;丁征中 刊期: 2001年第03期

  • 促纤维组织增生性小细胞肿瘤一例

    患者女,54岁,绝经5年。自1999年11月始,反复出现下腹部坠痛、腰酸痛、阴道分泌物增多及直肠刺激症状,于2000年7月3日入我院妇科。查体:子宫如孕12周大小,直肠窝结节感。阴道前壁尿道口下方1 cm可见有一直径0.5 cm的暗红色结节,无触痛。于7月4日行剖腹探查术。先将阴道前壁结节送冰冻病理检查,报告为分化差的恶性肿瘤;后开腹探查,见子宫如孕12周大小,质地硬,后壁被肿瘤侵犯,子宫直肠窝呈溃烂状,行肿瘤、子宫、双附件及转移肿瘤切除。病理检查见子宫增大,后壁粗糙,局部破碎,子宫切面见后壁从浆膜到浅肌层均有大小不等的灰白或灰黄色结节,融合成片,大小为6.5 cm×6.5 cm,与周围界限欠清。

    作者:龚晓明;刘珠凤;周旭东 刊期: 2001年第03期

  • 柔红霉素在耐药细胞株K562/ADR内的异常分布

    目的了解化疗药物在糖蛋白(Pgp)耐药细胞株K562/ADR亚细胞结构的异常分布及其与耐药的关系。方法采用共聚焦激光扫描显微镜、荧光法和RT-PCR等方法, 研究柔红霉素(DNR)在K562/ADR细胞亚细胞结构的分布及其与耐药的关系,以及维拉帕米尔(verapamil)、布雷菲尔得菌素(brefeldin A)、氯喹对细胞内DNR异常分布的影响。将3种特异染色线粒体、高尔基体、溶酶体的荧光物质Rh123、NBD-ceramide、中性红作为探针,鉴定分隔储留DNR的细胞器。结果在K562/ADR细胞中,DNR荧光主要集中在核周和周边胞浆,核内及胞浆其他部位荧光很少。这种分布方式与Rh123荧光在该细胞的分布极其相似,与DNR在敏感细胞K562/S细胞核、浆均匀分布不同。verapamil可逆转DNR在K562/ADR的异常分布,而氯喹、brefeldin A无此作用。结论 DNR在耐药细胞的异常分布参与了肿瘤细胞耐药的形成,Pgp在此过程中发挥了重要作用。

    作者:龚玉萍;王燕婷;陈芳源;韩洁英;邵念贤;欧阳仁荣 刊期: 2001年第03期

  • 多西紫杉醇诱导骨肉瘤凋亡的实验研究

    目的研究多西紫杉醇对骨肉瘤细胞生长抑制及诱导凋亡作用。方法应用细胞计数、形态学观察、蛋白含量测定、流式细胞术和电镜等方法对多西紫杉醇诱导的骨肉瘤进行检测和观察。结果多西紫杉醇在浓度为4 μg/ml时,对骨肉瘤细胞有明显的生长抑制作用,并且存在着时间依赖关系和一定范围内的剂量依赖关系。多西紫杉醇可将骨肉瘤细胞阻断于G1期,并诱导凋亡,其凋亡细胞具有典型凋亡细胞特征。用流式细胞仪测定细胞周期,可见明显的凋亡峰。电镜观察染色质沿皱缩的核膜下凝聚,细胞表面出现凋亡小体,基质呈絮状致密化。在紫杉醇短时间作用去除后再培养比持续作用更易促使细胞凋亡。同时,多西紫杉醇对荷瘤小鼠也有明显的抑制作用。结论多西紫杉醇对骨肉瘤细胞的细胞毒作用是诱导其凋亡的结果,这种诱导凋亡的能力是紫杉醇疗效的基础,在对骨肉瘤的治疗中,紫杉醇有着巨大的潜力。

    作者:彭磊;王臻;王庆良;朱德生;施新猷;王喆;李强;张志培 刊期: 2001年第03期

  • 头颈部恶性黑色素瘤的临床及病理研究

    目的研究头颈部恶性黑色素瘤的临床,病理及免疫组织化学特征,以提高临床和病理诊断率。方法收集头颈部恶性黑色素瘤(除脉络膜外)68例,其中原发于鼻腔和口腔黏膜33例,头颈部皮肤 35例。发病高峰年龄为41~60岁。52例为手术切除标本,16例为活检(咬取、切除)标本。复习所有患者的临床及病理资料,并对42例进行S-100、HMB45和NSE免疫组织化学观察。结果在68例中,手术切除者52例,其中有13例行补充放疗,21例进行了化疗;单纯放疗10例;拒绝治疗6例。在获得随诊的56例中,存活5年以上者12例,其中头颈部皮肤恶性黑色素瘤9例,占75.0%;鼻腔及口腔黏膜者3例,占25.0%。结论恶性黑色素瘤在组织学结构上的改变具有重要意义;免疫组织化学对恶性黑色素瘤诊断和鉴别诊断有重要价值;发生于鼻腔和口腔黏膜的恶性黑色素瘤的预后明显比发生在头颈部皮肤的差。

    作者:罗定泰;夏和顺 刊期: 2001年第03期

  • 雄激素受体基因微卫星CAG多态性与前列腺癌的分期分级

    目的研究雄激素受体(AR)基因三核苷酸CAG微卫星多态性与前列腺癌(PC)分期和分级的关系,探讨其与肿瘤生物学特性的相关性。方法运用聚合酶链反应-单链构象多态性分析法(PCR-SSCP),对37例PC标本的AR基因CAG微卫星数量进行测定,并进行不同病变期别、分化级别间的比较及统计学分析。结果 AR基因CAG微卫星数量在病变B期与C~D期分别为25.04±1.88和22.14±2.64(P=0.002);其短的AR基因CAG(数量<22)的分布为:B期13.0%(3/23),C~D期28.6%(4/14);其长的AR基因CAG(数量≥22)的分布为:B期87.0%(20/23),C~D期71.4%(10/14),差异有显著性(P=0.029)。AR基因CAG微卫星数量随PC病变分化程度的增高而增加,低分化为23.64±2.56,中分化为24.29±3.45,高分化为25.6±1.67,在高分化与低分化间差异有显著性(P=0.047)。短组CAG微卫星的分布比例随病变分化程度的升高而降低,长组CAG微卫星的分布比例随病变分化程度的升高而增加。结论 AR基因CAG微卫星数量的多少可能是构成前列腺癌不同生物学特性的因素之一,短的CAG微卫星的AR基因可能与恶性度较高的前列腺癌表型有关。

    作者:李长岭;吕宁;董金堂;关维民;万仪增 刊期: 2001年第03期

  • 经直肠超声检查前列腺癌100例

    目的评价经直肠超声(TRUS)检查前列腺癌(PCA)的临床价值。方法回顾性分析TRUS检查并经穿刺活检证实的100例PCA声像图和临床资料。结果 59例声像图显示为单发癌肿,17例为弥漫性癌肿,其中35例PCA瘤体大径线≤1.5 cm。TRUS对前列腺癌的诊断率为76.0%,特异性89.4%,假阳性率10.6%,阴性预测值88.9%。前列腺特异抗原(PSA)随癌肿大径线增加而升高(P<0.05),且低分化组PSA明显高于高分化组(P<0.05)。结论 TRUS操作方便,无需特殊准备,有助于提高早期PCA的确诊率。

    作者:唐杰;李颂;徐建宏;李俊来;罗渝昆;董宝玮;杨玉英 刊期: 2001年第03期

  • 螺旋CT在喉及下咽癌的临床应用价值

    目的探讨螺旋CT多平面重组 (MPR)、三维重建 (3D) 和仿真喉镜 (CTVL) 在喉及下咽癌的临床应用价值。方法 24例喉及下咽癌患者进行轴位螺旋CT扫描,同时做MPR、3D和CTVL成像,并与纤维喉镜和手术所见进行对照分析。结果螺旋CT轴位结合MPR图像对术前肿瘤分期和诊断颈部淋巴结转移的准确性均为96%;25%的患者MPR显示肿瘤侵犯的范围优于轴位,3D重建可立体显示肿瘤的侵犯范围及其与血管、气管的关系;头端CTVL显示的喉及下咽部腔内肿瘤的部位、大小及侵犯范围与纤维喉镜所见相似,4例从足侧观察肿瘤与声带和前联合的关系弥补了纤维喉镜的不足。结论螺旋CT轴位结合MPR、3D和CTVL图像可以更完整地提供喉及下咽癌的全面资料。

    作者:王东;张挽时;熊明辉;徐家兴 刊期: 2001年第03期

  • 乳腺癌哨位淋巴结活检的临床意义

    目的探讨哨位淋巴结(sentinel lymph node, SLN) 活检术(SLN biopsy, SLNB) 指导临床腋淋巴结阴性(cN0)乳腺癌腋窝淋巴结清除范围的可行性。方法使用专利蓝或美蓝对1999年4月~2000年8月的96例cT1~3N0M0期乳腺癌患者进行SLNB,随后行包括全腋淋巴结清除的乳腺癌手术。结果确定SLN 91例,成功率为94.8%。SLN为1个者54例,占59.3%;2个者23例,占25.3%;3个以上者14例,占15.4%。91例中,24例(26.4%)SLN阳性,其中13例(54.2%)仅有SLN 转移。SLNB的灵敏度为87.5%,特异度为100%,阳性结果预测值为100%,阴性结果预测值为95.7%。术中印片细胞学检查的准确率为92.1%,假阴性率为10.0%,假阳性率为7.1%;术中快速病理检查准确率为98.7%,假阴性率为5.0%,假阳性率为0。免疫组化未发现常规病理检查阴性的SLN有阳性结果。结论 SLN转移状况基本可反映乳腺癌腋淋巴结转移的状况;SLNB有望成为指导cN0期乳腺癌腋淋巴结清除范围的手术方法;国产美蓝对SLN标识效果与专利蓝相似。

    作者:左文述;王永胜;李敏;王磊;于志勇;刘奇 刊期: 2001年第03期

中华肿瘤杂志

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