韩振祥
目的 探讨重组干扰质粒对口腔腺样囊性癌多药抗性细胞株(Acc-3/CDDP)细胞中Bcl-2基因表达的干扰效率.方法 按siRNA设计原则设计针对Bcl-2基因的Oligo DNA,体外化学合成Oligo DNA,Oligo DNA退火、连接、转化、筛选克隆,构建针对Bcl-2基因的表达重组RNA干扰质粒(psiB1、psiB2、psiB3),细胞脂质体转染多药抗性Acc-3/CDDP细胞,Realtime RT-PCR的标准曲线、扩增曲线和熔解曲线的数据收集处理,采用荧光定量RT-PCR方法检测重组干扰质粒对多药抗性Acc-3/CDDP细胞中Bcl-2基因表达的干扰效率.结果 实时荧光定量RT-PCR方法检测psiB1、psiB2、psiB3质粒脂质体转染后Bcl-2基因的表达情况结果显示:psiB1、psiB3相对于对照组无明显干扰效果,psiB2的干扰程度达66.20%.结论 针对Bcl-2基因的表达重组RNA干扰质粒psiB2(CCgggAgATAgTgATgAA)能有效沉默多药抗性Acc-3/CDDP细胞中Bcl-2基因的表达.
作者:张福军;季平;李庆姝;张劲松 刊期: 2007年第05期
目的 观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对外周血内皮祖细胞(EPCs)血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/KDR)mRNA表达的影响.方法 密度梯度离心法获取外周血单个核细胞(MNCs),培养7天后,收集贴壁细胞并加入不同浓度AngⅡ(10-5 mol/L,10-7 mol/L,10-9 mol/L)干预一定时间(6h,12h,24h和48h).多波长激光共聚焦显微镜鉴定FITC-UEA-Ⅰ和DiIacLDL双染色细胞为正在分化的EPCs,流式细胞仪检测其表面标志进一步鉴定EPCs,倒置荧光显微镜下计数.然后,收集贴壁细胞,Trizol法提取总RNA,以RT-PCR法对EPCs的KDR mRNA表达进行半定量测定,并观察缬沙坦(valsartan)对此的影响.结果 AngⅡ呈浓度依赖方式诱导KDR mRNA的表达增加;10-5 mol/L的AngⅡ作用6h,EPCs的KDR mRNA表达即有显著增加(P<0.01),随着时间延长,KDR mRNA表达逐渐增加,至48h达高峰.而缬沙坦可显著抑制AngⅡ诱导的KDR mRNA的表达增加,使之接近于正常水平.结论 AngⅡ可显著增加EPCs的KDR mRNA表达,并呈浓度和时间依赖性.此作用可被AT1受体拮抗剂缬沙坦所阻断,提示AngⅡ通过AT1受体介导上调EPCs的KDR mRNA的表达.
作者:袁红;孙金栋;於华敏;谢旭东 刊期: 2007年第05期
基于全球工业化的发展、军事装备的提高,包括角膜化学烧伤、视网膜光损伤在内的特种眼外伤发病率明显提高.由于目前对此类疾病的发生、发展和转归的病理机制尚不明确,临床治疗中存在着许多难题.
作者:燕振国;岳红云;孙熠 刊期: 2007年第05期
目的 从分子遗传学方面初步探讨两例17α-羟化酶/17,20碳链裂解酶缺陷症(17OHD)患者的突变性质.方法 用患者外周血白细胞DNA进行CYP17A1基因的8个外显子PCR扩增,并通过序列测定确定突变位置和性质.结果 两患者均为CYP17A1基因突变的遗传复合体.病例1为Y329K,418X/P428L,病例2为Y329K,418X/P409R,Y329K,418X为插入缺失突变(TAC329AA),导致移码突变,在418位产生终止密码提前终止了蛋白质翻译.结论 通过CYP17A1基因突变分析,确诊了两例17OHD患者.
作者:姚凤霞;韩娟娟;刘勇;施惠萍;黄尚志 刊期: 2007年第05期
目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)不同组合模式的HBeAg、HBeAb与血清、唾液HBV-DNA之间关系及其在临床、流行病学上的意义.方法 用荧光聚合酶链反应(FQ-PCR)精确定量、配对检测200例慢性乙型肝炎患者血清、唾液HBV-DNA含量;以电化学发光免疫法检测血清HBeAg、HBeAb水平.结果 HBeAg(+)、HBeAb(-)模式血清、唾液HBV-DNA检出率分别为96.75%、83.22%,均值为7.02±1.31、4.92±1.44 log copies/ml,与其余模式比较均有明显差异(P<0.001).HBeAg水平与血清、唾液HBV-DNA水平间呈明显正相关(r分别为0.48、0.40;P均<0.001);HBeAg(-)、HBeAb(+)模式中,血清、唾液HBV-DNA检出率分别为67.44%、39.53%,均值为4.84±1.89、3.51±1.29 log copies/ml.HBeAg(-)、HBeAb(-)模式中,血清HBV-DNA检出率也达到66.67%,均值为4.64±2.06 log拷贝/ml.结论 HBeAg(-)、HBeAb(+)CHB患者,其血清、唾液中有很高的HBV-DNA检出率,临床、流行病学上仅以HBeAg作为复制的血清学指标,来判断HBV复制和评估传染性有明显局限性,需结合HBV-DNA的检测.
作者:谌翠容;潘红英;张永乐;娄国强;叶荣夏;施军平;李冰茹;卢德荣 刊期: 2007年第05期
目的 观察生殖道局部抗精子抗体对精子穿越宫颈黏液及精卵结合的影响.方法 酶联免疫法测定宫颈黏液及精液中抗精子抗体,宫颈黏液穿透试验及精子去透明带仓鼠卵穿透试验.结果 精子在宫颈黏液抗精子抗体阳性组中游动明显受阻与缓慢(P<0.01),精液抗精子抗体阳性组与精液抗精子抗体阴性组比较,穿卵率及每个卵子中含精子的均数有显著差异(P<0.01).结论 女性宫颈黏液抗精子抗体阳性及男性精液抗精子抗体阳性均可影响生殖过程,对于不孕不育夫妇生殖道局部抗精子抗体检测应引起重视.
作者:杨华;张美云;蒋幼芳;任娟;杨培娟 刊期: 2007年第05期
胃食管反流病(GERD)是消化系常见病,可引起严重症状并导致Barrett食管及食管癌等并发症,近年此类疾病的发病率显著升高,但GERD发病机制及并发Barrett食管、食管腺癌的机制仍未阐明,导致GERD诊治和并发症防治困难,国内研究更是欠缺.本项目通过临床研究及动物实验两大方面,在不同层次对GERD及其并发Barrett食管、食管腺癌的机制进行全面、系统、深入的研究.
作者:王雯;李兆申;许国铬;于凤海;文晓冬;李达周 刊期: 2007年第05期
目的 研究足月窒息新生儿的血清S100B含量对于新生儿HIE诊断和新生儿窒息预后判断的临床价值.方法 采用电化学发光免疫法检测74例足月窒息新生儿在出生后前3天的血清S100B含量,做出HIE诊断,并跟踪2年,观察预后结果,对血清S100B检测结果与新生儿HIE诊断结果和新生儿窒息预后结果之间的关系进行ROC分析.结果 窒息新生儿在出生后第1天的血清S100B含量>7.86μg/L,可以诊断为中度或重度HIE,灵敏度为61%,特异性为95%;高于9.28μg/L,其预后结果很可能是脑瘫或死亡,灵敏度为61%,特异性为92%.结论 血清S100B可以用作新生儿HIE诊断和新生儿窒息预后判断的辅助性生物化学标志物.
作者:吕静娟 刊期: 2007年第05期
本文所说的人类基因组研究是广义的,包括对人类基因组自身的研究(例如对人类基因组的测序和绘图,以及对其功能、调控的研究),以及与人类基因组相关的研究(例如人类遗传数据库).
作者:邱仁宗 刊期: 2007年第05期
自20世纪90年代以来,医院获得性肺炎中需氧革兰阳性菌感染发病率呈上升趋势,尤其是在医院血行感染中更为明显,凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌和肠球菌感染已居医院血行感染病原菌的1~3位[1].
作者:李敏;张健 刊期: 2007年第05期
女性卵巢的主要功能就是产生成熟的卵母细胞生育后代,卵巢还有内分泌功能,主要是促进性成熟和生育能力.现已证明几种属于转化生长因子β(TGF-β)超家族的生长因子及其受体和分子内的信号分子、Smad,是卵巢发挥重要作用所必需的.
作者:曲玉芳;侯丽辉;吴效科 刊期: 2007年第05期
多囊卵巢综合征(PCOS)是育龄期妇女常见的内分泌性疾病,通常在月经初潮后发生,以月经紊乱、雄激素过多和胰岛素抵抗为特征.
作者:魏丽娜;丛晶;吴效科 刊期: 2007年第05期
目的 探讨主动脉夹层动脉瘤患者行人工血管置换术的围术期监护.方法 收治主动脉夹层动脉瘤28例,给予绝对卧床,术前严密观察疼痛的性质及进展、控制血压在适当水平、做好心理护理保持情绪稳定,以有效预防动脉瘤破裂,为患者赢得手术时机;均实施人造血管置换术,术后加强各系统功能监护,密切观察病情,严格控制高血压,预防并发症.结果 围术期监护(3.3±2.2)天,27例患者经围术期监护安返病房,1例死于多脏器功能衰竭.结论 围术期监护是保证患者手术成功的重要环节.
作者:柴琼霞 刊期: 2007年第05期
目前有关应激与细胞凋亡关系的研究较为深入,至今已有许多关于热休克蛋白抑制细胞凋亡方面的报道,笔者拟从HSP在不同组织器官表达的角度对HSP表达及其对细胞凋亡影响的研究进展做一概述.
作者:郁洁;易受乡 刊期: 2007年第05期
所谓敏感问题,是指涉及到个人(或单位)的隐私的问题,它们或者与个人的利益有关,或者涉及到道德或法律.因此,在问卷调查中,被调查者往往拒绝回答敏感问题,或者给出相反的答案[1].这大大增加了调查结果的误差,降低了结果的可信度,并且这种误差往往无法估计.
作者:周泽宇;吴尊友 刊期: 2007年第05期
目的 建立简便有效的人妊娠子宫平滑肌细胞的原代培养方法.方法 人妊娠子宫平滑肌组织经剪切后接种,原代培养子宫平滑肌细胞,并通过免疫细胞化学方法检测平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin,SMA)进行细胞鉴定.结果 培养的细胞呈典型的梭状肌细胞样生长,SMA免疫细胞化学染色为阳性.结论 该方法简便经济,可获得状态良好的纯净的子宫平滑肌细胞.
作者:戴凌;游兴姬;沙金燕;倪鑫 刊期: 2007年第05期
人类基因组计划启动至今,为科学家寻找致病基因和探究发病机制发挥了关键性作用.1990年人类基因组计划尚未启动之时,人类仅仅发现了不到100种疾病.2003年这个数据跃升至990种,在990种疾病中,有639种可以开展临床治疗,而其余的351种则正在寻找发病机制.
作者:黎彬 刊期: 2007年第05期
目的 研究浙江地区汉族人凝血酶活化的纤溶抑制物基因编码区中与其血浆水平相关的C1040T基因多态性的特点.方法 应用PCR技术结合Spe Ⅰ酶切分析,研究了126名浙江地区汉族人凝血酶活化的纤溶抑制物基因编码区C1040T基因的多态性.结果 浙江地区汉族人等位基因C1040与等位基因T1040的频率分别为0.798和0.202;基因型1040C/C纯合子、1040C/T杂合子及1040T/T纯合子的频率分别为0.667、0.262和0.071.结论 浙江地区汉族人凝血酶活化的纤溶抑制物C1040T基因多态性的分布与其他人种有显著性差异.
作者:江明华;谭映霞;李向阳;陶红群;吴连拼;温怀凯 刊期: 2007年第05期
IL-6(cytokine)与BSF-2(B细胞刺激因子)是同一种物质,于1988年正式命名为IL-6,它是由活化的单核-吞噬细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞及其他细胞分泌的分子质量为26kU的细胞因子,具有复杂生物功能,参与机体的炎症反应过程,还是能量代谢平衡的重要调节因子,通过控制凋亡而调节脂肪和肌肉组织的总量.
作者:关丽波;唐弃 刊期: 2007年第05期
丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是丙型肝炎的致病体.目前对HCV的预防和治疗缺乏有效手段,常规的干扰素单用或者IFN联用病毒唑治疗的总体应答率比较低,治疗费用颇高,且具有明显的毒副作用.
作者:望朔;彭小忠 刊期: 2007年第05期