袁彬凡；吴东；何若云；袁亚莲；吴斌
目的：：探讨表达猪H1N1亚型流感病毒三聚体HA的重组慢病毒(rLV-HA-GCN4)对BALB/c小鼠的免疫保护效果。方法：将雌性BALB/c小鼠随机分为重组慢病毒rLV-HA-GCN4组、重组慢病毒rLV-HA组、慢病毒LV空载体对照组及PBS对照组,先后进行质粒和慢病毒2次免疫,间隔为2周,注射部位均为小鼠大腿内侧肌肉；于初次免疫后的第28天,各组小鼠鼻腔滴注50μl 100TCID50的H1N1病毒,采用淋巴细胞转化实验、流式细胞术、间接ELISA和脾肺指数检测各免疫指标。结果：加强免疫后第14天,rLV-HA-GCN4组脾淋巴细胞转化率为0.3±0.11,与 PBS组相比,差异有统计学意义(P<0.01),产生以Th1型CD4+T细胞为主的细胞免疫反应；rLV-HA-GCN4组小鼠IgG抗体效价可达1：8000,攻毒后第14天约为1：7000；攻毒后,rLV-HA-GCN4组脾肺指数小于PBS组,小鼠体重在前3 d略有下降,随后逐渐上升,两个指标与PBS组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论：rLV-HA-GCN4能够诱导小鼠良好的细胞与体液免疫应答,从而有效地保护小鼠抵御猪H1 N1流感病毒的感染。
作者：邓颖琦；李俊峰；曲辉；唐雨博；孙艺学；李鑫；王伟利；丁壮；丛彦龙 刊期： 2016年第07期
miRNA是在真核生物中发现的一类内源性具有免疫调控功能的非编码小分子RNA,长约19~24个核苷酸,由具有发夹结构的约70~90个碱基大小的单链RNA前体经Dicer酶加工而成,在转录后水平调控基因表达。 miRNA主要通过与特定的靶信使RNA( mRNA)的3′非编码区直接结合,降解靶RNA或抑制其翻译,进而影响目的基因的表达[1-3]。
作者：陈倩云；范恒 刊期： 2016年第07期
目的：：检测基质金属蛋白酶-11和14( MMP-11和MMP-14)在乳腺癌中的表达,探讨MMP-11对乳腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响。方法：检测MMP-11和MMP-14在161例浸润性乳腺癌和10例正常乳腺组织中的表达；运用小干扰RNA(siRNA)将高表达MMP-11的MB-231细胞抑制MMP-11,运用Transwell小室测定其迁移和侵袭力。结果：MMP-11和MMP-14在161例乳腺癌组织中高表达(分别为122/161及149/161),两者均与乳腺癌淋巴结转移和TNM分期相关,并且MMP-11与MMP-14呈正相关,差异均有统计学意义(P<0.05)；MMP-11被成功干扰后,MB-231细胞中MMP-11和MMP-14表达同时降低,并且细胞迁移、侵袭能力明显减弱,差异均有统计学意义( P<0.05)。结论：MMP-11和MMP-14均与乳腺癌侵袭转移相关,并且MMP-11被抑制后,能下调MMP-14从而抑制乳腺癌细胞迁移和侵袭能力,它们可能成为判断乳腺癌预后的分子标志物及临床治疗靶点之一。
作者：黄红颜；谭金祥；任国胜 刊期： 2016年第07期
目的：：研究磷脂转运蛋白(PLTP)对香烟诱导人支气管上皮细胞(HBECs)合成白介素8(IL-8)的影响。方法：Wistar大鼠连续3 d被动吸烟,收集支气管肺泡灌洗液( BALF),苏木精-伊红( HE)染色,免疫组织化学法( IHC)检测蛋白表达；体外培养HBECs,不同浓度烟草提取物( CSE)刺激；PLTP siRNA干扰后,进行CSE刺激。 MTT法检测细胞增殖,同时检测IL-8含量及PLTP表达。结果：烟熏组BALF白细胞计数以及分类计数较对照组均明显升高( P<0.01), IHC显示烟熏组PLTP和IL-8蛋白表达高于对照组；高浓度CSE (2%、4%)抑制HBECs增殖( P<0.001)；不同浓度的CSE作用24 h后, IL-8 mRNA及蛋白表达量增加,而PLTP蛋白表达量下降,并且IL-8蛋白分泌呈现时间依赖性；PLTP siRNA处理后,IL-8表达量明显升高(P<0.001)。结论：PLTP基因缺失促进香烟诱导HBECs合成IL-8。
作者：余秀英；黎友伦；巫凤苹；陈亚娟 刊期： 2016年第07期
疟疾是以疟原虫为病原体、以按蚊为媒介的严重威胁人类健康的寄生虫病，目前流行于100多个国家和地区，已被世界卫生组织列为优先防治的三大感染性疾病之一[1]。2000年，全球用于疟疾防控的资金接近1亿美金，至2012年跃升到18.4亿美金，加之耐药疟原虫和耐杀虫剂蚊媒的大量出现，全球的疟疾防治仍然面临严峻的挑战。据统计，目前全球每年有2亿以上疟疾病例，导致60余万人死亡。如何安全高效地控制疟疾的感染和传播是世界各国亟待解决的难题，疟疾的防控已被写入联合国千年发展目标。
作者：李明洋；朱晓彤 刊期： 2016年第07期
目的：：研究IL-17对病毒性心肌炎小鼠的作用。方法：随机挑选20只野生型BALB/c小鼠为对照组,20只IL-17A-/-小鼠为IL-17A-/-组,20只L-17A-/-小鼠为IL-17组。每只小鼠腹腔注射柯萨奇病毒B3(Coxsackie virus B3,CVB3)建立VMC模型。收集小鼠外周血利用ELISA法检测血清中IL-17水平,利用流式细胞术检测血清中Th17细胞水平。 CVB3处理3 d后,对照组和L-17A-/-组腹腔注射100μg IgG抗体,IL-17组注射100μg IL-17mAb。分别于CVB3处理第3、7、14天收集小鼠心肌组织。将小鼠心肌切片并H&E染色进行病理学检查。检测小鼠心肌组织中病毒滴度。利用酶联免疫吸附法检测心肌组织IL-17、IL-23、IL-6和TNF-α的含量。结果：成功构建病毒性心肌炎小鼠。对第14天收集的组织进行分析发现, IL-17组小鼠血清中IL-17和Th17水平均显著低于对照组和IL-17-/-组。对照组小鼠心肌组织损伤程度明显高于IL-17A-/-组和IL-17组,IL-17小鼠心肌组织损伤程度高于IL-17A-/-组。对照组病毒滴度高于IL-17A-/-组和IL-17组,且随着CVB3处理时间增加而增加。在补充IL-17抗体后IL-17组病毒滴度高于IL-17A-/-组。在IL-17-/-组和IL-17组的IL-17、IL-23、IL-6和TNF-α水平均显著低于对照组。在补充IL-17抗体后IL-17组IL-17、IL-23、IL-6和TNF-α水平均显著高于IL-17-/-组(P<0.05)。结论：IL-17是参与病毒性心肌炎的重要炎症因子,而IL-17缺失可保护小鼠心肌免受病毒性心肌炎损伤。
作者：张晓玲；余宗林；任劲松；刘福川 刊期： 2016年第07期
作者： 刊期： 2016年第07期
纳曲酮( Naltrexone,NTX)为二氢吗啡酮衍生物的一种,由环丙甲基取代二氢吗啡酮 N 位点的甲基,是一种有效的非选择性阿片受体激动剂竞争性拮抗剂,特定剂量时对μ-、δ-、κ-阿片受体,尤其μ-受体,有明显阻断作用[1]。相比于其他种类阿片受体,具有长效、强效、可口服、高亲和性、无依赖性、不产生耐受性等特点。
作者：张涵茵；单风平 刊期： 2016年第07期
作者：《中国免疫学杂志》编辑部 刊期： 2016年第07期
目的：：分析术前PRA水平与肾移植长期存活之间的关系。方法：收集我中心2001年1月至2014年6月间,接受首次肾移植术的1162例受者临床资料,根据受者术前PRA水平分组,将PRA≤10%分为阴性组,PRA>10%为阳性组,并对其进行回顾性分析。结果：术前 PRA 阴性者1、5、10年人存活率为96.8%、89.4%、78.6%,阳性者为93.5%、81.6%、65.4%,而术前PRA阴性者1、5、10年肾存活率为95.9%、84.8%、63.1%,阳性者为92.3%、74.1%、51.9%,两组移植人/肾间生存曲线均有统计学差异(人/肾log-rank检验χ2=9.623/11.019,P=0.002/0.001)。 Cox多因素回归分析显示PRA水平是影响人/肾存活的重要因素(P<0.001),PRA与术后急性排斥反应发生相关(OR=8.25,95% CI=2.86-5.72,P<0.001)。术前PRA阴性受者术后5年、10年血肌酐均较术前PRA阳性者低,具有统计学差异(P<0.05),而两者术后1年血肌酐无统计学差异。此外,PRA与术后抗供体特异性抗体(DSA)出现相关(OR=6.89,95% CI=4.52-9.17,P<0.05)。结论：PRA是肾脏移植术前筛选致敏受者的重要指标,术后更应注重PRA阳性受者急性排斥反应及DSA的监测和诊断。
作者：郭予和；陈伟翔；尹威；潘光辉；马俊杰；陈正 刊期： 2016年第07期
高等药学教育的目标是培养药学专业高层次人才，从事药物研究及开发等相关领域的工作。免疫学是药学专业学生的必修课程之一，不仅理论体系完整，而且技术应用广、实用性强，与药学学科有着广泛交叉和渗透。近年来学校不断探索和优化针对药学专业《免疫学概论》课程的教学改革和课程设计，我们通过对教材选用、课程设置、教学方法以及考核方法等方面进行优化和调整，不仅显著地提高了药学专业学生对免疫学课程的学习兴趣，而且一定程度上拓展了学生的知识，明显提升了学生的思考能力。以下结合具体教学实践，浅谈对药学专业免疫学教学内容改革的一些体会和思考。
作者：马樱；金伯泉 刊期： 2016年第07期
目的：：获得具有阻断PD-1/PD-L1结合活性的Anti-PD-L1单克隆抗体,并在体内和体外模型中初步探索其应用于慢性HBV感染治疗的潜力。方法：利用大肠杆菌原核表达系统和离子交换柱层析纯化手段,表达纯化获得具有体外结合活性的人源和鼠源的PD-1/PD-L1蛋白,采用纯化后的人PD-L1蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,制备小鼠抗人PD-L1的单克隆抗体杂交瘤细胞株,基于间接化学发光免疫法评估了这些抗体与人源和鼠源重组蛋白的结合活性,并定量评估它们对PD-L1体外相互作用的阻断活性。利用慢乙肝病人PBMC体外刺激方法评估其对T细胞功能的促进作用,在HBV转基因小鼠中评估其抑制HBV的效果。结果：本研究获得了8株稳定分泌Anti-PD-L1的单克隆抗体杂交瘤细胞株,其中Anti-PD-L1 Ab5和Ab6两株单抗与人和小鼠的PD-L1具有较强的交叉反应性,且均可阻断人和小鼠的PD-1/PD-L1结合活性。在慢乙肝病人PBMC刺激培养实验中,Ab5和Ab6可促进γ干扰素水平升高；在HBV转基因小鼠中单剂注射Ab6,48 h后血清HBV DNA水平降低20倍,血清HBsAg水平降低至基线水平的30%。结论：获得了2株具有阻断人和小鼠PD-1/PD-L1结合活性的单克隆抗体,其在PBMC体外刺激培养系统中可促进慢乙肝病人的T细胞功能,在HBV转基因小鼠中具有显著的抗病毒效果,具备一定的治疗应用潜力。
作者：吴勇；张天英；宋浏伟；夏宁邵；袁权 刊期： 2016年第07期
目的：：了解胰岛素自身免疫综合征的临床特点,提高诊治水平。方法：以“胰岛素自身免疫综合征”为关键词,通过中国知网对近15年文献报告的IAS病例71例,进行回顾性分析,统计其病史、临床表现、胰岛素水平、治疗及预后等。结果：71例IAS中有甲状腺功能亢进症病史40例,发病前服用甲巯咪唑有31例；低血糖发作有明显规律的43例,其中有30例在夜间或凌晨发作；有35例出现意识障碍,该类患者的发作时血糖水平较低,胰岛素水平较高；36例予激素治疗,26例仅停服诱发药物,激素治疗的IAA转阴时间较短；缓解的有69例,1例因自动出院预后不详,1例因合并胸膜间皮瘤死亡。结论：IAS是引起严重自发性低血糖的重要病因之一,临床较为少见,常合并自身免疫性疾病及服用羟基药物诱发,出现意识障碍的患者应及时激素治疗,正确治疗一般预后良好。
作者：徐太军 刊期： 2016年第07期
目的：：探索预防性IL-27滴鼻给药治疗哮喘小鼠气道炎症的佳干预方式，并直接从组织蛋白水平进行相关研究。方法：将96只雌性C57/6J小鼠随机分成对照组、哮喘组、IL-27滴鼻预防组Ⅰ和 IL-27滴鼻预防组Ⅱ。在卵白蛋白( OVA)腹腔注射致敏与滴鼻激发诱导的小鼠哮喘模型基础上，加用IL-27干预，一种为“致敏前IL-27小剂量、多次预防模型”，一种为“致敏后激发前IL-27小剂量、多次预防模型”。取半数小鼠激发后处死，做气道炎症水平评估；取半数小鼠，激发前一天处死进行肺组织信号转导与转录激活子1(STAT1)和STAT1磷酸化水平的Western blot检测。结果：致敏前IL-27小剂量、多次预防给药，可以明显降低哮喘小鼠BAL中IL-5和IL-13的水平(P<0.05)，抑制支气管及血管周围的炎症细胞浸润，炎症评分明显低于哮喘组(P<0.05)，而激发前致敏后给药则无明显的统计学意义(P>0.05)。哮喘小鼠体内STAT1的磷酸化在激发前就已明显受损，致敏前的IL-27给药能扭转这种损伤，而激发前致敏后给药则不能。结论：致敏前IL-27小剂量、多次预防给药通过逆转哮喘小鼠体内STAT1磷酸化的受损能明显改善哮喘小鼠的气道炎症，而致敏后激发前的小鼠则由于在致敏阶段STAT1磷酸化就已受损而对IL-27的作用产生耐受，这种耐受可能是由于致敏后小鼠气道的CD4+T细胞就已大部分转化为Th2细胞。
作者：苏孝琼；陈智鸿；王向东 刊期： 2016年第07期
目的：：研究慢性荨麻疹与幽门螺杆菌( Helicobacter pylori ,HP)感染的相关性,探讨HP检测在慢性荨麻疹患者诊疗中的意义。方法：选取2014年4月至2015年7月门诊治疗的慢性荨麻疹患者420例,并随机选取同期体检中心健康体检者450例为健康对照组,采用胶体金法检测患者及健康体检者血清HP尿素酶抗体,分析慢性荨麻疹组和健康对照组两组HP的阳性情况；同时将162例慢性荨麻疹HP阳性患者分为实验组88例和对照组74例,对照组患者应用常规荨麻疹治疗,实验组患者在对照组治疗基础上增加抗HP三联疗法,分析HP检测阳性的慢性荨麻疹患者采用不同治疗方法的临床疗效。结果：慢性荨麻疹组HP阳性率为38.6%,健康对照组HP阳性率为14.4%,差异有统计学意义( P<0.05)；HP检测阳性患者实验组临床疗效有效率显著高于对照组的有效率,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：慢性荨麻疹与HP感染之间存在密切的相关性, HP检测对慢性荨麻疹患者的诊疗具有重要的临床意义。
作者：王春苗；吴慰师；朱锦宏；周茂华；王蔚莎 刊期： 2016年第07期
目的：：了解登革病毒Ⅱ型(Dengue virus Type 2,DENV-2)感染原代人真皮微血管内皮细胞(Primary Human dermal micro-vascular endothelial cells,pHDMECs)引起细胞通透性改变的机制。方法：用103 TCID50的DENV-2感染pHDMECs；于4、8、12、24、48 h Real time-PCR、免疫荧光法及流式细胞术检测DENV-2 NS1部分序列及蛋白；Transwell法检测细胞通透性；Real time -PCR和双抗体夹心ELISA法检测IL-6和IL-8的变化；流式细胞术检测24、48、72 h细胞凋亡。结果：DENV-2感染的pHDMECs病毒NS1基因相对表达上调,但未检测到病毒NS1蛋白；DENV-2感染的pHDMECs通透性在24、48 h显著升高；pHDMECs被感染72 h后凋亡也无明显变化；IL-6和IL-8 mRNA分别在8、24 h相对表达上调[IL-6：(2.49±0.5)倍,P<0.05；IL-8：(6.82±1.69)倍,P<0.05]；对照组和感染组分泌的IL-6于8 h分别为(869.6±50.7)、(1248.8±86.9)pg/ml,P<0.05；IL-8于48 h分别为(967.6±156.6)、(1331.0±86.3)pg/ml,P<0.05。结论：DENV-2能感染pHDMECs；pHDMECs被DENV-2感染后,细胞的通透性增加与凋亡无关,与促炎性细胞因子IL-6和IL-8明显上调关系密切。
作者：赵军；左丽；戴雪婷；裴华；袁静；孔维莹 刊期： 2016年第07期
补体系统是机体固有免疫的重要组成部分,可通过经典途径、凝集素途径和替代途径而被激活,发挥其生物学效应[1,2]。启动凝集素途径活化的第一个补体组分是甘露糖结合凝集素( Mannan-binding lection,MBL)/纤维胶原素( Ficolin,FCN)与MBL-相关丝氨酸蛋白酶( Mannose-binding lectin associated serine protease, MASP)结合形成的复合物。 MASP家族由MASP-1、MASP-2、MASP-3丝氨酸蛋白酶及MAp19和MAp44非酶蛋白组成,其中MASP-2是参与凝集素途径活化的重要组分。 MAp19是MASP-2的剪切体,其氨基酸序列分析显示仅比MASP-2羧基端前两个功能区多四个氨基酸残基。 MAp19能与MBL结合,但无催化功能,它是否与MASP-2存在竞争抑制作用尚待进一步研究证实。此外发现MAp19与肾病、骨髓瘤以及SARS等疾病存在一定相关性。
作者：李婷；李萍 刊期： 2016年第07期
目的：：探讨不同剂量小柴胡汤对体外培养的C6胶质瘤细胞的抑瘤作用及其作用机理。方法：将C6胶质瘤细胞分别接种于96孔、24孔及6孔培养板中，每种培养板均分为4组：对照组、小柴胡汤低剂量组、中剂量组和高剂量组，待细胞铺满培养板底80%~90%，开始加药，培养24小时后终止培养。采用CCK-8、活体染色、ELISA、免疫细胞化学及流式细胞仪检测细胞增殖活性、细胞存活率、ESM-1和VEGF的蛋白含量及蛋白阳性表达强度和细胞的早期、晚期凋亡状况。结果：CCK-8法检测显示小柴胡汤低、中、高剂量组对C6胶质瘤细胞的生长均有抑制作用； ELISA和免疫细胞化学法显示，小柴胡汤低、中、高剂量组均能降低ESM-1和VEGF的蛋白阳性表达强度及蛋白含量水平；流式细胞仪检测显示小柴胡汤低、中、高剂量组均能促进细胞凋亡；倒置显微镜观察可见随剂量增加细胞排列逐渐松散、萎缩，细胞漂浮死亡数量增多；各种检测法均显示随剂量增加抑制作用增强且具有剂量依赖性，组间差异均有统计学意义( P<0.01)。结论：小柴胡汤对C6胶质瘤细胞的生长具有明显的抑制作用，它可能通过下调ESM-1和VEGF蛋白水平、促进细胞凋亡，从而发挥抑瘤作用。
作者：于慧玲；麻春杰；韩雪梅；赵鹏伟；赵灵燕 刊期： 2016年第07期
目的：：探讨miR-126与VEGF在乳腺癌中的表达情况,及miR-126发挥的抗肿瘤效果。方法：以qRT-PCR检测和Western blot分析miR-126与VEGF在乳腺癌组织和细胞中的表达情况；以miR-126 mimics转染乳腺癌细胞株MDA-MB-231,检测miR-126对VEGF的表达影响,MTT法和细胞划痕实验验证miR-126对肿瘤细胞的增殖和迁移能力的影响。结果：miR-126在乳腺癌组织和细胞中呈低表达,VEGF表达与其呈负相关,上调miR-126可以降低VEGF的表达,抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移能力。结论：miR-126可以通过下调VEGF表达来实现降低乳腺癌细胞的增殖和迁移能力,从而发挥抗肿瘤效果。
作者：米旭光；李首庆；刘多；魏海峰；江显卓；方艳秋 刊期： 2016年第07期
目的：：观察哮喘-COPD 重叠综合征( Asthma- COPD overlap syndrome, ACOS )机械通气患者肺泡灌洗液(BALF)中肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)及白介素-8(IL-8)的水平,探讨其对ACOS机械通气患者病情发展影响。方法：38例 ACOS机械通气患者根据入院第1天和第5天的APACHEⅡ评分变化,分为病情加重组(18例),及病情缓解组(20例),收集机械通气1、5 d的肺泡灌洗液,测定BALF中SP-D、IL-8浓度,观察不同预后患者BALF中SP-D、IL-8水平的差异。结果：病情缓解组BALF中SP-D含量逐渐上升,机械通气5 d较1 d明显升高(P<0.05)；与病情缓解组比较,病情加重组机械通气1 d、5 d BALF中SP-D含量均明显降低(P<0.05)。病情缓解组BALF中IL-8含量逐渐下降,病情加重组BALF中IL-8含量逐渐上升(P<0.05)。统计分析结果提示BALF 中IL-8含量与APACHE II评分呈负相关(r为-0.44,P<0.05)；统计分析结果提示BALF中SP-D浓度与APACHE II评分也呈负相关(r为-0.32,P<0.05)。结论：SP-D、IL-8在ACOS患者的发生发展中起重要的作用,BALF中SP-D、IL-8可作为ACOS 机械通气患者病情监测和预后的参考指标。
作者：袁彬凡；吴东；何若云；袁亚莲；吴斌 刊期： 2016年第07期
中国免疫学杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国免疫学会,吉林省医学期刊社
