吴勇；张天英；宋浏伟；夏宁邵；袁权
作者： 刊期： 2016年第07期
IL-37是IL-1家族第7个成员( IL-1 family 7, IL-1 F7),初是2000年利用计算机序列分析发现鉴定的一个细胞因子,2010年被 Nold 等人命名为IL-37[1]。人的 IL-37基因定位于第2号染色体上[2],结构与其他IL-1家族成员具有高度同源性。根据其基因片段上外显子的不同可组成五个剪切亚型(IL-37a-e),而每种亚型的表达都有其明显的组织特异性。 IL-37 b是分子量大的亚型,也是其主要的效应亚型,包括6个外显子中的5个(1、2、4、5、6),位于N端的外显子1和2能够编码一种前结构域,它包含了半胱氨酸天冬氨酸酶-1( caspase-1)的酶切位点,在caspase-1的酶切作用下, IL-37 b 由细胞外向细胞核内转移[3], IL-37b含有的外显子4~6能编码β-三叶草二级结构,IL-37b被认为是具有生物学功能的IL-37亚型,有研究表明试验状态下IL-37b能够形成同源二聚体的形式[4],已有研究证明IL-37 b与IL-18、IL-18 BP ( IL-18结合蛋白)和IL-18 Rα( IL-18受体)相互作用,以非竞争性结合形成复合体,抑制了 NF-κB 和 MAPK 等途径,使 IFN-γ的合成下降,对IL-1家族受体后信号传导产生负性调节作用,但是IL-37 b对IL-18的活性并未产生影响[4-6]。成熟的IL-37b还可以进入细胞核与Smad3结合形成复合体,通过调节基因转录抑制促炎因子的产生[7]。因此科学家推测它在细胞内和细胞外均具有生理活性[8]。
作者：高思；黄安斌 刊期： 2016年第07期
目的：：观察哮喘-COPD 重叠综合征( Asthma- COPD overlap syndrome, ACOS )机械通气患者肺泡灌洗液(BALF)中肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)及白介素-8(IL-8)的水平,探讨其对ACOS机械通气患者病情发展影响。方法：38例 ACOS机械通气患者根据入院第1天和第5天的APACHEⅡ评分变化,分为病情加重组(18例),及病情缓解组(20例),收集机械通气1、5 d的肺泡灌洗液,测定BALF中SP-D、IL-8浓度,观察不同预后患者BALF中SP-D、IL-8水平的差异。结果：病情缓解组BALF中SP-D含量逐渐上升,机械通气5 d较1 d明显升高(P<0.05)；与病情缓解组比较,病情加重组机械通气1 d、5 d BALF中SP-D含量均明显降低(P<0.05)。病情缓解组BALF中IL-8含量逐渐下降,病情加重组BALF中IL-8含量逐渐上升(P<0.05)。统计分析结果提示BALF 中IL-8含量与APACHE II评分呈负相关(r为-0.44,P<0.05)；统计分析结果提示BALF中SP-D浓度与APACHE II评分也呈负相关(r为-0.32,P<0.05)。结论：SP-D、IL-8在ACOS患者的发生发展中起重要的作用,BALF中SP-D、IL-8可作为ACOS 机械通气患者病情监测和预后的参考指标。
作者：袁彬凡；吴东；何若云；袁亚莲；吴斌 刊期： 2016年第07期
恶性肿瘤严重影响人类健康,目前肿瘤的治疗手段包括放疗、化疗及分子靶向性治疗[1]。细胞免疫系统对肿瘤细胞的杀伤过程包括：肿瘤细胞的识别、肿瘤抗原被呈递给T细胞、T细胞激活及特异性杀伤肿瘤细胞。在这个过程中,T细胞的激活需要协同刺激信号,而这些信号需要“免疫检查点”的调控[2],“免疫检查点”分子研究较多的有：T细胞免疫球蛋白黏液素3( TIM3)、细胞毒性T淋巴细胞抗原-4(CTLA-4)、程序性细胞死亡因子-1(PD-1)及其配体( PD-L1)等,它们在肿瘤微环境的免疫调节中起重要作用,本文将对其在肿瘤微环境中的作用展开综述。
作者：陶景莲；李丽娟；邵宗鸿 刊期： 2016年第07期
作者：《中国免疫学杂志》编辑部 刊期： 2016年第07期
目的：：获得具有阻断PD-1/PD-L1结合活性的Anti-PD-L1单克隆抗体,并在体内和体外模型中初步探索其应用于慢性HBV感染治疗的潜力。方法：利用大肠杆菌原核表达系统和离子交换柱层析纯化手段,表达纯化获得具有体外结合活性的人源和鼠源的PD-1/PD-L1蛋白,采用纯化后的人PD-L1蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,制备小鼠抗人PD-L1的单克隆抗体杂交瘤细胞株,基于间接化学发光免疫法评估了这些抗体与人源和鼠源重组蛋白的结合活性,并定量评估它们对PD-L1体外相互作用的阻断活性。利用慢乙肝病人PBMC体外刺激方法评估其对T细胞功能的促进作用,在HBV转基因小鼠中评估其抑制HBV的效果。结果：本研究获得了8株稳定分泌Anti-PD-L1的单克隆抗体杂交瘤细胞株,其中Anti-PD-L1 Ab5和Ab6两株单抗与人和小鼠的PD-L1具有较强的交叉反应性,且均可阻断人和小鼠的PD-1/PD-L1结合活性。在慢乙肝病人PBMC刺激培养实验中,Ab5和Ab6可促进γ干扰素水平升高；在HBV转基因小鼠中单剂注射Ab6,48 h后血清HBV DNA水平降低20倍,血清HBsAg水平降低至基线水平的30%。结论：获得了2株具有阻断人和小鼠PD-1/PD-L1结合活性的单克隆抗体,其在PBMC体外刺激培养系统中可促进慢乙肝病人的T细胞功能,在HBV转基因小鼠中具有显著的抗病毒效果,具备一定的治疗应用潜力。
作者：吴勇；张天英；宋浏伟；夏宁邵；袁权 刊期： 2016年第07期
近年来,随着业内对B 细胞研究的不断深入,一类具有免疫调节功能的B细胞亚群--调节性B细胞( Regulatory B cell,Breg)逐渐被认识。类似于调节性T细胞( Regulatory T cell,Treg),Breg在维持外周免疫耐受的过程中起关键作用。1996年人们首次在自身免疫性脑脊髓膜炎的小鼠模型中发现了Breg,并在随后的一系列疾病研究中发现Breg可能由Toll样受体( TLRs )、CD40 L 等多种因素刺激活化,通过分泌IL-10、TGF-β等细胞因子发挥免疫调节的作用。越来越多的研究表明, Breg 与炎症、感染、癌症、移植及自身免疫性疾病等均具有密切联系。本文就Breg与自身免疫病的新研究进展作一综述。
作者：吴华仙；田广俊；陈曲波 刊期： 2016年第07期
目的：：制备孕激素受体A型单克隆抗体,为后期应用到免疫组化实验提供支持。方法：选择无缝克隆的方法将目的基因与载体连接到一起,通过诱导表达收集蛋白,经过免疫后细胞融合获得单克隆抗体。将该单克隆抗体经免疫组化验证。结果：将融合后筛选的阳性细胞制备获得的单克隆抗体7 C7经免疫组化验证,发现其在乳腺癌、子宫肌瘤组织中呈现阳性,在直肠癌组织、平滑肌组织中呈现阴性,符合目的抗体的要求。结论：该方法获得的孕激素受体A型单克隆抗体较常规方法周期短,获得的抗体在不同组织间结果符合预判,对后期研究区别PR-A、PR-B,临床推广具有重要意义。
作者：赵小磊；翟晋豫；刘玲玲；梁永波；牛银银；李三华；齐华 刊期： 2016年第07期
补体系统是机体固有免疫的重要组成部分,可通过经典途径、凝集素途径和替代途径而被激活,发挥其生物学效应[1,2]。启动凝集素途径活化的第一个补体组分是甘露糖结合凝集素( Mannan-binding lection,MBL)/纤维胶原素( Ficolin,FCN)与MBL-相关丝氨酸蛋白酶( Mannose-binding lectin associated serine protease, MASP)结合形成的复合物。 MASP家族由MASP-1、MASP-2、MASP-3丝氨酸蛋白酶及MAp19和MAp44非酶蛋白组成,其中MASP-2是参与凝集素途径活化的重要组分。 MAp19是MASP-2的剪切体,其氨基酸序列分析显示仅比MASP-2羧基端前两个功能区多四个氨基酸残基。 MAp19能与MBL结合,但无催化功能,它是否与MASP-2存在竞争抑制作用尚待进一步研究证实。此外发现MAp19与肾病、骨髓瘤以及SARS等疾病存在一定相关性。
作者：李婷；李萍 刊期： 2016年第07期
目的：：分析术前PRA水平与肾移植长期存活之间的关系。方法：收集我中心2001年1月至2014年6月间,接受首次肾移植术的1162例受者临床资料,根据受者术前PRA水平分组,将PRA≤10%分为阴性组,PRA>10%为阳性组,并对其进行回顾性分析。结果：术前 PRA 阴性者1、5、10年人存活率为96.8%、89.4%、78.6%,阳性者为93.5%、81.6%、65.4%,而术前PRA阴性者1、5、10年肾存活率为95.9%、84.8%、63.1%,阳性者为92.3%、74.1%、51.9%,两组移植人/肾间生存曲线均有统计学差异(人/肾log-rank检验χ2=9.623/11.019,P=0.002/0.001)。 Cox多因素回归分析显示PRA水平是影响人/肾存活的重要因素(P<0.001),PRA与术后急性排斥反应发生相关(OR=8.25,95% CI=2.86-5.72,P<0.001)。术前PRA阴性受者术后5年、10年血肌酐均较术前PRA阳性者低,具有统计学差异(P<0.05),而两者术后1年血肌酐无统计学差异。此外,PRA与术后抗供体特异性抗体(DSA)出现相关(OR=6.89,95% CI=4.52-9.17,P<0.05)。结论：PRA是肾脏移植术前筛选致敏受者的重要指标,术后更应注重PRA阳性受者急性排斥反应及DSA的监测和诊断。
作者：郭予和；陈伟翔；尹威；潘光辉；马俊杰；陈正 刊期： 2016年第07期
目的：：探讨TNFAIP8与胃癌耐药性的关系。方法：选取47例进行新辅助化疗患者手术前后的标本,免疫组化检测TNFAIP8蛋白的表达；Western blot检测胃癌细胞株SGC-7901及其顺铂耐药细胞株SGC7901/DDP中TNFAIP8蛋白表达差异,利用RNA干扰技术降低顺铂耐药细胞株中TNFAIP8的蛋白表达后,MTT检测其对顺铂的敏感性有无变化。结果：TNFAIP8在新辅助化疗前后的表达差异不大,在新辅助化疗无效组中的表达较有效组高( P<0.05)；SGC7901/DDP细胞中TNFAIP8蛋白的表达高于SGC7901细胞,siRNA-TNFAIP8质粒转染SGC7901/DDP细胞后蛋白表达显著下降,MTT结果显示降低TNFAIP8蛋白表达,细胞对顺铂的IC50较SGC7901/DDP显著下降( P<0.05),敏感性提高。结论：TNFAIP8参与了胃癌的化疗耐药性。
作者：李莉娜；毕志彬；王金胜 刊期： 2016年第07期
目的：：了解登革病毒Ⅱ型(Dengue virus Type 2,DENV-2)感染原代人真皮微血管内皮细胞(Primary Human dermal micro-vascular endothelial cells,pHDMECs)引起细胞通透性改变的机制。方法：用103 TCID50的DENV-2感染pHDMECs；于4、8、12、24、48 h Real time-PCR、免疫荧光法及流式细胞术检测DENV-2 NS1部分序列及蛋白；Transwell法检测细胞通透性；Real time -PCR和双抗体夹心ELISA法检测IL-6和IL-8的变化；流式细胞术检测24、48、72 h细胞凋亡。结果：DENV-2感染的pHDMECs病毒NS1基因相对表达上调,但未检测到病毒NS1蛋白；DENV-2感染的pHDMECs通透性在24、48 h显著升高；pHDMECs被感染72 h后凋亡也无明显变化；IL-6和IL-8 mRNA分别在8、24 h相对表达上调[IL-6：(2.49±0.5)倍,P<0.05；IL-8：(6.82±1.69)倍,P<0.05]；对照组和感染组分泌的IL-6于8 h分别为(869.6±50.7)、(1248.8±86.9)pg/ml,P<0.05；IL-8于48 h分别为(967.6±156.6)、(1331.0±86.3)pg/ml,P<0.05。结论：DENV-2能感染pHDMECs；pHDMECs被DENV-2感染后,细胞的通透性增加与凋亡无关,与促炎性细胞因子IL-6和IL-8明显上调关系密切。
作者：赵军；左丽；戴雪婷；裴华；袁静；孔维莹 刊期： 2016年第07期
目的：：探讨表达猪H1N1亚型流感病毒三聚体HA的重组慢病毒(rLV-HA-GCN4)对BALB/c小鼠的免疫保护效果。方法：将雌性BALB/c小鼠随机分为重组慢病毒rLV-HA-GCN4组、重组慢病毒rLV-HA组、慢病毒LV空载体对照组及PBS对照组,先后进行质粒和慢病毒2次免疫,间隔为2周,注射部位均为小鼠大腿内侧肌肉；于初次免疫后的第28天,各组小鼠鼻腔滴注50μl 100TCID50的H1N1病毒,采用淋巴细胞转化实验、流式细胞术、间接ELISA和脾肺指数检测各免疫指标。结果：加强免疫后第14天,rLV-HA-GCN4组脾淋巴细胞转化率为0.3±0.11,与 PBS组相比,差异有统计学意义(P<0.01),产生以Th1型CD4+T细胞为主的细胞免疫反应；rLV-HA-GCN4组小鼠IgG抗体效价可达1：8000,攻毒后第14天约为1：7000；攻毒后,rLV-HA-GCN4组脾肺指数小于PBS组,小鼠体重在前3 d略有下降,随后逐渐上升,两个指标与PBS组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论：rLV-HA-GCN4能够诱导小鼠良好的细胞与体液免疫应答,从而有效地保护小鼠抵御猪H1 N1流感病毒的感染。
作者：邓颖琦；李俊峰；曲辉；唐雨博；孙艺学；李鑫；王伟利；丁壮；丛彦龙 刊期： 2016年第07期
目的：：探讨纳曲酮( Naltrexone,NTX)对小鼠腹膜巨噬细胞表型,分泌细胞因子及吞噬功能的影响。方法：本实验利用新型四唑化合物比色法测得 NTX 对 RAW264.7细胞作用的佳剂量；再将培养的腹膜巨噬细胞分为3组, RPMI1640空白对照组、脂多糖( LPS)阳性对照组和NTX处理组,采用流式细胞术检测CD206、CD64的阳性表达率及对葡聚糖的吞噬能力；ELISA法检测白介素10(IL-10)、白介素6(IL-6)、白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌表达。结果：10-11 mol/L剂量可显著促进RAW264.7细胞的增殖；NTX(10-11 mol/L)处理可明显提高腹膜巨噬细胞表面CD64的阳性表达,减少CD206的表达；提高对葡聚糖的吞噬能力；TNF-α、IL-6、IL-1β的表达显著增加,IL-10的表达无明显差异。结论：低剂量纳曲酮可改变巨噬细胞表型及功能,起免疫调节作用。
作者：郭胜男；李岩；王晓楠；单风平 刊期： 2016年第07期
目的：：探讨miR-126与VEGF在乳腺癌中的表达情况,及miR-126发挥的抗肿瘤效果。方法：以qRT-PCR检测和Western blot分析miR-126与VEGF在乳腺癌组织和细胞中的表达情况；以miR-126 mimics转染乳腺癌细胞株MDA-MB-231,检测miR-126对VEGF的表达影响,MTT法和细胞划痕实验验证miR-126对肿瘤细胞的增殖和迁移能力的影响。结果：miR-126在乳腺癌组织和细胞中呈低表达,VEGF表达与其呈负相关,上调miR-126可以降低VEGF的表达,抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移能力。结论：miR-126可以通过下调VEGF表达来实现降低乳腺癌细胞的增殖和迁移能力,从而发挥抗肿瘤效果。
作者：米旭光；李首庆；刘多；魏海峰；江显卓；方艳秋 刊期： 2016年第07期
目的：：研究慢性荨麻疹与幽门螺杆菌( Helicobacter pylori ,HP)感染的相关性,探讨HP检测在慢性荨麻疹患者诊疗中的意义。方法：选取2014年4月至2015年7月门诊治疗的慢性荨麻疹患者420例,并随机选取同期体检中心健康体检者450例为健康对照组,采用胶体金法检测患者及健康体检者血清HP尿素酶抗体,分析慢性荨麻疹组和健康对照组两组HP的阳性情况；同时将162例慢性荨麻疹HP阳性患者分为实验组88例和对照组74例,对照组患者应用常规荨麻疹治疗,实验组患者在对照组治疗基础上增加抗HP三联疗法,分析HP检测阳性的慢性荨麻疹患者采用不同治疗方法的临床疗效。结果：慢性荨麻疹组HP阳性率为38.6%,健康对照组HP阳性率为14.4%,差异有统计学意义( P<0.05)；HP检测阳性患者实验组临床疗效有效率显著高于对照组的有效率,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：慢性荨麻疹与HP感染之间存在密切的相关性, HP检测对慢性荨麻疹患者的诊疗具有重要的临床意义。
作者：王春苗；吴慰师；朱锦宏；周茂华；王蔚莎 刊期： 2016年第07期
高等药学教育的目标是培养药学专业高层次人才，从事药物研究及开发等相关领域的工作。免疫学是药学专业学生的必修课程之一，不仅理论体系完整，而且技术应用广、实用性强，与药学学科有着广泛交叉和渗透。近年来学校不断探索和优化针对药学专业《免疫学概论》课程的教学改革和课程设计，我们通过对教材选用、课程设置、教学方法以及考核方法等方面进行优化和调整，不仅显著地提高了药学专业学生对免疫学课程的学习兴趣，而且一定程度上拓展了学生的知识，明显提升了学生的思考能力。以下结合具体教学实践，浅谈对药学专业免疫学教学内容改革的一些体会和思考。
作者：马樱；金伯泉 刊期： 2016年第07期
目的：：探索预防性IL-27滴鼻给药治疗哮喘小鼠气道炎症的佳干预方式，并直接从组织蛋白水平进行相关研究。方法：将96只雌性C57/6J小鼠随机分成对照组、哮喘组、IL-27滴鼻预防组Ⅰ和 IL-27滴鼻预防组Ⅱ。在卵白蛋白( OVA)腹腔注射致敏与滴鼻激发诱导的小鼠哮喘模型基础上，加用IL-27干预，一种为“致敏前IL-27小剂量、多次预防模型”，一种为“致敏后激发前IL-27小剂量、多次预防模型”。取半数小鼠激发后处死，做气道炎症水平评估；取半数小鼠，激发前一天处死进行肺组织信号转导与转录激活子1(STAT1)和STAT1磷酸化水平的Western blot检测。结果：致敏前IL-27小剂量、多次预防给药，可以明显降低哮喘小鼠BAL中IL-5和IL-13的水平(P<0.05)，抑制支气管及血管周围的炎症细胞浸润，炎症评分明显低于哮喘组(P<0.05)，而激发前致敏后给药则无明显的统计学意义(P>0.05)。哮喘小鼠体内STAT1的磷酸化在激发前就已明显受损，致敏前的IL-27给药能扭转这种损伤，而激发前致敏后给药则不能。结论：致敏前IL-27小剂量、多次预防给药通过逆转哮喘小鼠体内STAT1磷酸化的受损能明显改善哮喘小鼠的气道炎症，而致敏后激发前的小鼠则由于在致敏阶段STAT1磷酸化就已受损而对IL-27的作用产生耐受，这种耐受可能是由于致敏后小鼠气道的CD4+T细胞就已大部分转化为Th2细胞。
作者：苏孝琼；陈智鸿；王向东 刊期： 2016年第07期
目的：：建立兔成纤维样滑膜细胞悬浮组织块分离培养法。方法：取正常兔膝关节滑膜组织,用悬浮组织块法分离培养兔成纤维样滑膜细胞,观察细胞生长状况及形态特征,取第3代对数期细胞,CCK-8法绘制其生长曲线,免疫荧光法检测波形蛋白的表达情况,并与组织块贴壁法进行比较。结果：两种方法体外培养得到的兔成纤维样滑膜细胞形态为长梭形纤维样,细胞生长力较旺盛,生长曲线为典型的“S”形,免疫荧光检测显示第3代细胞强表达波形蛋白。结论：悬浮组织块法可以分离培养出兔成纤样维滑膜细胞,方法简便,效率高,为体外分离培养兔成纤维样滑膜细胞提供了一种新的方法。
作者：刘琴；王丽平；陈芳；陈利锋；张宜 刊期： 2016年第07期
目的：：研究IL-17对病毒性心肌炎小鼠的作用。方法：随机挑选20只野生型BALB/c小鼠为对照组,20只IL-17A-/-小鼠为IL-17A-/-组,20只L-17A-/-小鼠为IL-17组。每只小鼠腹腔注射柯萨奇病毒B3(Coxsackie virus B3,CVB3)建立VMC模型。收集小鼠外周血利用ELISA法检测血清中IL-17水平,利用流式细胞术检测血清中Th17细胞水平。 CVB3处理3 d后,对照组和L-17A-/-组腹腔注射100μg IgG抗体,IL-17组注射100μg IL-17mAb。分别于CVB3处理第3、7、14天收集小鼠心肌组织。将小鼠心肌切片并H&E染色进行病理学检查。检测小鼠心肌组织中病毒滴度。利用酶联免疫吸附法检测心肌组织IL-17、IL-23、IL-6和TNF-α的含量。结果：成功构建病毒性心肌炎小鼠。对第14天收集的组织进行分析发现, IL-17组小鼠血清中IL-17和Th17水平均显著低于对照组和IL-17-/-组。对照组小鼠心肌组织损伤程度明显高于IL-17A-/-组和IL-17组,IL-17小鼠心肌组织损伤程度高于IL-17A-/-组。对照组病毒滴度高于IL-17A-/-组和IL-17组,且随着CVB3处理时间增加而增加。在补充IL-17抗体后IL-17组病毒滴度高于IL-17A-/-组。在IL-17-/-组和IL-17组的IL-17、IL-23、IL-6和TNF-α水平均显著低于对照组。在补充IL-17抗体后IL-17组IL-17、IL-23、IL-6和TNF-α水平均显著高于IL-17-/-组(P<0.05)。结论：IL-17是参与病毒性心肌炎的重要炎症因子,而IL-17缺失可保护小鼠心肌免受病毒性心肌炎损伤。
作者：张晓玲；余宗林；任劲松；刘福川 刊期： 2016年第07期
中国免疫学杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国免疫学会,吉林省医学期刊社
