沈朝斌；蔡红；郁兰(综述)
细胞微粒（ Microparticles，MPs）是一类在某些生理或病理状况下，从血管内皮细胞或循环血细胞出芽脱落的富含磷脂的直径约为0.1～1.0μm的颗粒，具有生物活性可参与多种免疫性疾病（Immune diseases）的发病［1］。微粒被认为是多功能的亚细胞结构，通过释放生物活性分子和表面抗原与靶细胞的受体相互作用，介导细胞内信号转导，传递分子物质和诱导细胞内信号［2，3］。因此，细胞微粒可能作为自身免疫性疾病新的潜在治疗靶标。
作者：廖焕金；兰巧芬；陈秋华；谢彤；吴平；刘华锋；潘庆军 刊期： 2015年第11期
目的：探讨脊髓挫伤、脊髓横断及持续性占位损伤对大鼠继发性神经细胞凋亡的影响作用。方法：选取健康雄性Wistar大鼠66只，进行编号后采用随机数字表法分为A（18只，脊髓挫伤）、B（18只，脊髓横断）、C（18只，持续性占位）、D（6只、假手术组）、E（6只、对照组）五组，分别观察伤后1、4、7d 各组大鼠的神经细胞凋亡指数、脊髓组织中Bcl-2、Bax、caspase-3蛋白的表达情况。结果：A、B、C三组大鼠在造模后第1天均出现脊髓灰质和白质染色阳性标记，且三组大鼠的灰质、白质神经细胞凋亡指数差异具有统计学意义（ P＜0.05）；在造模后第4、7天三组大鼠的灰质、白质区域脊髓凋亡细胞指数均呈现出增高趋势（P＜0.05）；在造模后第1、4、7天C组大鼠的脊髓灰质、白质区域凋亡细胞指数显著高于A组、B组，B组显著高于A组且差异均具有统计学意义（P＜0.05）。造模后第1、4、7天A、B、C、D、E组五组大鼠的Bcl-2、Bax、caspase-3蛋白表达差异均具有统计学意义（P＜0.05），造模后第1、4、7天A、B、C三组大鼠的Bcl-2、Bax、caspase-3蛋白表达显著高于D组和E组（ P＜0.05）。结论：大鼠脊髓损伤后神经细胞继发性凋亡显著，严重程度与损伤类型有关。
作者：毛敏；张婷；刘滢；贺桂琼；汪克建 刊期： 2015年第11期
食源性致病菌是可以引起食物中毒或以食品为传播媒介的致病性细菌。致病性细菌直接或间接污染食品及水源，人经口感染可导致肠道传染病的发生、食物中毒，及畜禽传染病的流行。常见的食源性致病菌主要有大肠杆菌（ Escherichia coli）、沙门氏菌（ Salmonella ）、副溶血性弧菌（ Vibrio parahaemolyt-icus）、志贺氏菌（ Shigella ）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、李斯特菌（ Listeria monocyt-ogenes）等。
作者：曾海娟；宋春美；吴淑燕；杨标；李建武；邱实；刘箐 刊期： 2015年第11期
目的：探讨血清抗-PLA2 R抗体（ anti-PLA2 R）在特发性膜性肾病（ IMN）诊断中的价值。方法：检索PubMed、Elsevier、Springer、中国期刊全文数据库、中国科技期刊数据库、万方数字化期刊全文数据库等数据库中2009年1月至2013年12月国内外公开发表的关于血清anti-PLA2 R诊断特发性膜性肾病的相关文献，根据纳入和排除标准筛选文献并提取数据，采用诊断精确性研究的质量评估方法（ QUADAS）评价文献质量，通过Meta-Disc和Stata软件进行Meta分析。通过汇总后的敏感度、特异度、似然比及汇总受试者工作曲线（ ROC）综合评价血清anti-PLA2 R对IMN的诊断价值。采用依次减少一篇文献的方法进行敏感性分析，通过Egger漏斗图检验文献发表偏倚。结果：共筛选出7篇文献。累计病例967例，其中IMN患者454例，对照组513例。异质性检验提示不存在阈值效应引起的异质性（Spearman相关系数为0.107，P＝0.819），但存在非阈值效应引起的异质性（Cochrane-Q为16.89，P＝0.0097）。采用随机效应模型合并诊断指标。合并后的灵敏度为69％，95％CI：0.65～0.73，特异度为98％，95％CI：0.96～0.99。汇总阳性似然比16.37，95％CI：4.06～65.95，汇总阴性似然比0.32，95％CI：0.24～0.43。 SROC曲线显示AUC为0.8540，Q*指数为0.7850。敏感性分析显示本研究稳定可信，Egger漏斗图显示无明显发表偏倚。结论：血清anti-PLA2 R对诊断IMN具有重要的临床价值。
作者：邱杰山；李青华；沈水娟；王时敏；朱晓玲 刊期： 2015年第11期
机体为应对外来病原体进行防御和有效的应答，不同的免疫细胞必须进行互相间的交流。细胞间的交流分3类。（1）直接接触，通过膜上的受体和配体；（2）通过自分泌、旁分泌和内分泌等释放可溶性分子，作用于靶细胞受体。（3）通过EV释放信号分子［1，2］。随着EV组成和功能的深入研究，揭示了第3类广泛的细胞间交流方式。目前已有成熟的EV研究方法，可以了解其作为转运载体在细胞间的信息交换，EV包含了不同的生物学活性分子，包括蛋白、脂质和核酸（主要是小RNA）［2］。通过囊泡的细胞间交流能调节生理和病理过程［3］。 EV在免疫细胞的作用值得重视，已有许多体内外研究结果提供了充分的证据［4］。
作者：沈朝斌；蔡红；郁兰(综述) 刊期： 2015年第11期
目的：探讨亥茅酚苷对脂多糖（ LPS）诱导的小鼠巨噬细胞株RAW264.7炎症介质及细胞因子（ NO、IL-6）释放的影响。方法：应用LPS（1μg／ml）刺激RAW264.7细胞，采用不同浓度亥茅酚苷（20、40、80μg／ml）干预，Griess试剂法测定NO释放量；酶联免疫吸附试验（ ELISA）测定IL-6释放，用免疫印迹法（ Western blot）检测细胞一氧化氮合酶（ iNOS）的表达，实时荧光定量反转录聚合酶链反应（ RT-PCR ）技术分析iNOS、IL-6 mRNA的表达。结果：亥茅酚苷各剂量组（20、40、80μg／ml）均能抑制LPS诱导的RAW264.7细胞NO、IL-6的释放（P＜0.01），并下调iNOS蛋白、iNOS mRNA、IL-6 mRNA的表达。结论：亥茅酚苷对LPS诱导的巨噬细胞NO、IL-6释放和iNOS表达有抑制作用，具有一定的抗炎活性。
作者：罗超；沈立；吕昌 刊期： 2015年第11期
目的：观察雷公藤多甙对NOD小鼠的治疗作用及可能机制。方法：选择8周龄雌性非肥胖型糖尿病（ Non-obese diabetic，NOD）小鼠，随机分为模型组（ NOD组）及雷公藤多甙干预组（ Tripterygium组）。另纳入8只雌性BALB／c小鼠作为正常对照组（Control组）。 Tripterygium组小鼠接受雷公藤多甙治疗（0.07 mg／kg隔日腹腔注射，共12周），其余两组接受生理盐水治疗。观察雷公藤对NOD小鼠唾液腺炎及周围神经的治疗效果及机制。结果：Tripterygium组小鼠在16周龄及20周龄唾液流率均显著低于Control组（P＜0.05）；但均显著高于NOD组小鼠（P＜0.05）。 Tripterygium组小鼠唾液腺Aquaporins-1及Aquaporins-5的表达均显著高于NOD组小鼠（P＜0.05）。 Tripterygium组小鼠唾液腺内炎症细胞凋亡比例显著高于对照组及NOD组小鼠，差异均具有统计学意义（ P＜0.05）。 Tripterygium组小鼠唾液腺TNF-α、IL-6及IL-1β水平显著高于Control组小鼠，但显著低于NOD组小鼠，差异均具有统计学意义（ P＜0.05）。 Tripterygium组小鼠唾液腺SHIP-1表达显著高于NOD组小鼠（P＜0.05），Mir-155表达显著低于NOD组小鼠（P＜0.05）。干预结束时Tripterygium组小鼠神经传导潜伏期及神经传导速度两项指标均显著优于NOD组小鼠（P＜0.05）。结论：雷公藤多甙可显著改善NOD小鼠的唾液腺功能及周围神经功能，可能是通过激活SHIP-1／Mir-155信号通路而改善了局部的炎症反应。
作者：陈娟；郑龙；孟祥武；向诗非；袁林；张朝贵；黄淼；瞿昌华；李青 刊期： 2015年第11期
目的：探讨HLA-DRB1基因多态性与系膜增生性IgA肾病（ MsPGN）的临床相关性。方法：164例IgA MsPGN患者和164例健康受试者常规检查肾功能，采用PCR法测定HLA-DRB1基因分型，比较IgA MsPGN患者和健康受试者的肾功能及HLA-DRB1基因分型，并且分析IgA MsPGN患者HLA-DRB1基因分型与肾功能的关系。结果：（1）IgA MsPGN患者和健康受试者24 h尿蛋白、血清肌酐和血清尿素氮差异具有统计学意义（P＜0.01）；（2）在IgA MsPGN患者中，HLA-DRB1高频等位基因为DRB1*04、DRB1*07、DRB1*09、DRB1*11、DRB1*14和DRB1*15；（3）与健康受试者相比，DRB1*09和DRB1*11在IgA MsPGN患者的分布频率显著升高（P＜0.01或P＜0.05）；（4）DRB1*09和DRB1*11类型患者24 h蛋白尿、血清肌酐及血清尿素氮较HLA-DRB1其他基因类型的患者显著升高（ P＜0.01）。结论：HLA-DRB1基因多态性与系膜增生性IgA肾病相关，DRB1*09和DRB1*11类型可增加系膜增生性IgA肾病的风险，并且与患者肾小球肾炎严重程度有关。
作者：赖寒；甘华 刊期： 2015年第11期
胚胎携带父方的MHC单元型，相对于母体犹如同种异体移植，母胎免疫耐受是妊娠建立与维持的前提，机体免疫系统在其中发挥着复杂而精细的调控作用。 T淋巴细胞是机体免疫调节的主体，主要包括辅助性T淋巴细胞（ Th cell）及调节性T淋巴细胞（ Treg），在抵御外界病原体感染、维持机体内环境稳定过程中发挥着重要作用。随着生殖免疫学研究的不断深入，已证实不同T淋巴细胞亚群在诱导与维持母胎免疫耐受中发挥着不同作用，其亚群失衡将打破母胎免疫耐受状态，导致流产及其他妊娠相关疾病的发生。复发性自然流产（ RSA）是指自然流产连续发生2次或2次以上，其发病率约为妊娠总数的3％～5％［1］。 RSA发病原因复杂，除内分泌因素、解剖因素、染色体因素外，约80％病因不明，成为困扰育龄妇女生殖健康的难题，对其病因与防治的研究成为生殖医学领域的重点、热点与难点。T淋巴细胞在母胎免疫耐受中发挥着重要作用，其中T淋巴细胞亚群失衡在其发病中的作用日益受到关注。本文通过分析近15年国内外相关研究报道，探讨T淋巴细胞亚群在妊娠维持与丢失中的作用，以期进一步揭示RSA的发病机制，为临床诊断与防治提供科学依据。
作者：彭莉(综述)；李霞(审校) 刊期： 2015年第11期
目的：探讨RNAi沉默NRP-1基因对人T细胞白血病细胞株增殖与凋亡的影响。方法：将我们前期构建好的pLB-NRP-1／shRNA重组慢病毒质粒，感染至Jurkat细胞中，用CCK-8法检测各组细胞的增殖情况及化疗药物表柔比星（ EPI）处理后细胞增殖情况；用AV／PI法结合流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期。结果：细胞增殖结果：在48、72、96 h时间点NRP-1／shRNA干扰组的OD值均低于相应对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），而阴性对照组与空白对照组差异无统计学意义（P＞0.05）；细胞凋亡率结果：与对照组比较，NRP-1／shRNA干扰组细胞的凋亡率明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；对化疗药物表柔比星（ EPI）敏感性检测结果：EPI浓度为0.025、0.05、0.1、0.2、0.4μg／ml时， NRP-1／shRNA干扰组的细胞生长抑制率较相应对照组高，差异皆有统计学意义（ P＜0.05），并且选择IC50进行EPI诱导后，NRP-1／shRNA干扰组的细胞凋亡率明显升高，与对照组比较差异有统计学意义（ P＜0.05）；WB结果显示：与对照组相比，NRP-1／shRNA干扰组Bcl-2蛋白的表达水平明显下降， Bax的表达水平明显升高，差异均具有统计学意义（P＜0.05）；细胞周期结果：与对照组比较，NRP-1／shRNA干扰组G0／G1期细胞的比例增高，S期细胞的比例明显降低，差异均有统计学意义（ P＜0.05）。结论：RNAi沉默NRP-1基因可抑制Jurkat细胞增殖，促进其凋亡，提高对化疗药物的敏感性，其机制可能涉及Bcl-2／Bax途径的调节；并可将细胞周期阻滞在G0／G1期，降低细胞的增殖水平，诱导细胞进入凋亡期。
作者：王红梅；徐振媛；杜秀平；李滔涛；韩正祥 刊期： 2015年第11期
作者： 刊期： 2015年第11期
膜联蛋白A2（ ANXA2）是众所周知的钙离子依赖性磷脂结合蛋白，广泛分布于各种真核细胞的胞核、胞质及细胞外膜。它作为功能多样的蛋白质影响多种细胞和分子功能活动。 ANXA2的表达或调节失常涉及一系列疾病，包括自身免疫性疾病、神经系统退行性变、抗磷脂抗体综合征、炎症、糖尿病及各种肿瘤。大量研究证实ANXA2异常表达于多种肿瘤样本中，并可通过不同方式影响肿瘤细胞黏附、增殖、凋亡、侵袭和转移，以及肿瘤新生血管生成等［1］。然而，目前对于ANXA2参与肿瘤进展的机制研究仍不完整。本文系统回顾了ANXA2在肿瘤发生发展中的作用及机制，以求对其作用有深入了解，从而为肿瘤治疗提供潜在有效靶点。
作者：侯俊杰；周颖；谭岩；方艳秋；许一多 刊期： 2015年第11期
目的：选取毒力因子多、毒性强的嗜水气单胞菌株（ Aeromonas hydrophil）制成灭活疫苗，研究疫苗的免疫保护效果。方法：采用甲醛灭活制备疫苗，对银鲫进行腹腔注射，设立免疫组和对照组，然后进行血清抗体效价检测、病理切片分析和攻毒保护试验。结果：银鲫在经注射免疫后，各免疫时间均有抗体产生，抗体效价在第6周检测时达到高峰，而对照组在整个试验过程中均没有检测到抗体；病理切片也表明，该疫苗能够对鲫鱼靶器官产生很好的保护作用；攻毒保护试验中，免疫组的免疫保护率达100％，且免疫保护期长达6个月以上。结论：嗜水气单胞菌灭活疫苗对银鲫有显著的免疫保护效应，可作为预防细菌性败血症感染的疫苗。
作者：关建义；毛会丽；贺文旭；杨利敏；符运栋；张敬梅；吴佳静；宁黔冀 刊期： 2015年第11期
血小板（ Platelet，PLT）是来源于骨髓巨核细胞前体的细胞碎片，其寿命仅8～10 d。血小板可以通过其黏附、聚集、释放反应及促发凝血而完成其正常的止血功能。在原发免疫性血小板减少症（ Primary immune thrombocytopenia， ITP ）及系统性红斑狼疮（ Systemic lupus erythematosus，SLE）等自身免疫性疾病中，血小板是自身免疫的靶标。近的研究令人惊奇的发现，血小板不但是自身免疫的受害者，还可以通过其自身表达的分子主动参与炎症、免疫及败血症等过程［1］。本文将对血小板在免疫调节功能方面的研究进展作一综述。
作者：顾雪萍(综述)；周泽平(审校) 刊期： 2015年第11期
目的：探讨体外沉默葡萄糖调节蛋白GRP78／BIP表达对膀胱癌T24细胞侵袭及迁移的影响及可能机制。方法：设计、合成靶向GRP78基因的小干扰RNA，利用脂质体Liopfecta mineRNAIMAX转染入膀胱癌T24细胞，分别采用Real-time PCR、Western blot在mRNA和蛋白水平检测细胞内GRP78、MMP2、MMP9、Timp-2表达，采用Transwell实验及细胞划痕实验检测沉默GRP78表达对膀胱癌T24细胞侵袭及迁移的影响。结果：实验（ siRNA-GRP78） T24细胞中GRP78表达显著降低，细胞侵袭迁移能力明显受到抑制，MMP2、MMP9表达降低，而Timp-2表达增高，差异均有统计学意义（ P＜0.05）。结论：沉默GRP78能明显抑制人膀胱癌细胞的侵袭、迁移能力，其机制可能与影响MMP2、MMP9、Timp-2表达相关。
作者：伍家燕；樊建军；曾帆；李海玉；李韵；张寒韬；白鑫；刘革力；宋方洲 刊期： 2015年第11期
目的：研究人参皂苷Rh2对HepG2细胞的作用机制。方法：用pLOV-EF1a-MCS-3FLAG-β-catenin慢病毒感染HepG2细胞，运用荧光显微镜观察细胞荧光强度变化。通过CCK-8法检测细胞增殖反应。采用FCM检测细胞周期及凋亡变化；利用ELISA法检测细胞产生Gsk-3β活性；用PCR法检测细胞Gsk-3β、β-catenin、Bcl2、CyclinD1、Bax、MMP3基因的表达；用CHIP法检测细胞Bcl2、CyclinD1、Bax、MMP3基因的表达；运用Western blot法检测细胞Gsk-3β、β-catenin、Bcl2、CyclinD1、Bax、MMP3蛋白的表达。结果：用pLOV-EF1a-MCS-3FLAG-β-catenin慢病毒感染HepG2细胞，被感染的HepG2细胞命名为HepG2-β-catenin；CCK-8分析结果显示，加药组给予（10～160μmol／L） Rh2后HepG2及HepG2-β-catenin细胞的增殖受到抑制，且Rh2对肝癌HepG2-β-catenin和HepG2细胞的生长抑制呈剂量和时间依赖。在HepG2细胞中48、72 h半数抑制率分别为100μmol／L，58.12μmol／L，在HepG2-β-catenin细胞中48、72 h半数抑制率分别是129.2μmol／L，83.33μmol／L，故Rh2作用于HepG2-β-catenin细胞浓度均高于HepG2细胞，与HepG2细胞组比较差异具有统计学意义（P＜0.01）。 FCM检测结果显示，Rh2可诱导HepG2和HepG2-β-catenin细胞周期阻滞在G0／G1期，HepG2＋Rh2组G0／G1期（64.57±0.65），而HepG2-β-catenin＋Rh2组G0／G1期（58.61±2.01）；FCM检测结果显示，Rh2可诱导HepG2和HepG2-β-catenin细胞早期凋亡，HepG2＋Rh2组凋亡率（17.27±2.77），而HepG2-β-catenin＋Rh2组凋亡率（9.02±1.76）。 ELISA结果显示，Rh2作用HepG2细胞12、24、48、72 h后，Gsk-3β的活性随着作用时间延长，逐渐升高，在48 h高，随后其活性开始降低。 Rh2诱导HepG2和HepG2-β-catenin细胞48 h，与对照组相比，Gsk-3β的活性均增高，而加入Bio后其活性降低，HepG2＋Rh和HepG2-β-catenin＋Rh2组间无明显差异；PCR、CHIP、WB结果显示，人参皂苷Rh2诱导HepG2和HepG2-β-catenin细胞后，Gsk-3β、Bax基因及蛋白表达增加，而β-catenin、CyclinD1、Bcl2、MMP3基因及蛋白表达水平下调。与HepG2-β-catenin＋Rh2组相比，HepG2＋Rh2组除Gsk-3β外各基因及蛋白的表达变化更为显著。结论：过表达β-catenin可削弱人参皂苷Rh2对肝癌HepG2细胞的药理作用。人参皂苷Rh2通过激活Gsk-3β降解β-catenin，影响下游基因的表达，促进肝癌细胞的凋亡及抑制其转移。
作者：石庆强；左国伟；冯子强；赵绿翠；罗念；游智梅；夏菁；李丹阳；李静；陈地龙 刊期： 2015年第11期
目的：鉴定RA相关自身抗原COMP的一株特异性单克隆抗体15A11的表位特征。方法：选用随机十二肽噬菌体库对mAb 15A11进行三轮筛选，随机挑取40个单噬菌斑，提取DNA，测序；ELISA检测每个噬菌体克隆与mAb 15A11结合的特异性；通过ClustalW2对特异性结合的噬菌体展示的十二肽和COMP进行氨基酸序列比对，PyMOL分析一致氨基酸所在肽链的二级结构及表位氨基酸之间的距离，初步确定mAb 15A11的表位；变性和非变性Western blot、EDTA螯合Ca2＋后ELISA分析以及合成多肽的ELISA实验进一步确定表位序列。结果：得到的40个测序噬菌体中，共有5个噬菌体克隆，ELISA确定克隆1和克隆2与mAb 15A11特异性结合，其他克隆均为非特异性结合的噬菌体；氨基酸序列比对，在COMP上未发现与克隆1和克隆2噬菌体相同的连续氨基酸序列，提示mAb 15A11的抗原表位可能为非线性表位；PyMOL分析表位氨基酸在COMP上的定位及距离，显示构象表位的合理性；变性Western blot分析为阴性，而非变性Western blot条件下为阳性；EDTA螯合Ca2＋破坏COMP的构象后不能与mAb 15A11结合，而未经处理的与mAb 15A11结合，均说明mAb 15A11表位是构象表位；合成多肽与mAb 15A11的ELISA结果进一步确定了mAb 15A11的构象表位序列。结论：鉴定了mAb 15A11的表位是构象表位序列，且确定了该构象表位的氨基酸组成，为研究COMP抗体与抗原反应机制具有重要理论价值，并对类风湿性关节炎的检测有重要应用意义。
作者：王瑞玲；韩冬；韩魏巍；邓灵福；袁永泽；熊丽；刘德立；耿辉 刊期： 2015年第11期
细胞自噬（ Autophagy ）是通过细胞质中的酸性溶酶体对异常细胞器、蛋白质以及病原体的吞噬、降解，从而形成一种胞内环境分解代谢的平衡机制。细胞自噬对机体的保护与防御尤为重要，特别在免疫系统中发挥重要的生物学作用，是链接先天性免疫与适应性免疫的重要组成部分。当抗原表达时，细胞自噬还可通过先天免疫与适应性免疫的交叉途径而潜在的获得抗原，并在胸腺中调节CD4＋T细胞的克隆，除此以外，树突细胞交叉激活CD8＋T细胞，促进淋巴细胞尤其是T细胞的存活，骨髓B细胞发育以及细胞因子的产生。
作者：崔玉琳；齐翀；王春凤；杨桂连 刊期： 2015年第11期
目的：构建HSPC238诱饵载体，筛选与HSPC238相互作用的目标蛋白。方法：基因合成法合成HSPC238基因，sfiIA和sfiIB双酶切后与pGBKT7诱饵载体连接，获得诱饵质粒pGBKT7-HSPC238，经测序鉴定后与酵母双杂交空质粒pGBKT7共同转化到酵母菌株AH109，在营养缺陷培养基中观察pGBKT7-HSPC238的自激活作用，进一步从人胎肝cDNA文库中筛选与HSPC238相互作用的目标蛋白。结果：诱饵载体pGBKT7-HSPC238构建成功，经表型筛选检测无自激活作用，经酵母双杂交技术结合文献分析，从人胎肝cDNA文库中初步筛选发现核糖体蛋白L5（Ribosomal protein L5，RPL5）可能是HSPC238相互作用的目标蛋白之一。结论：成功构建pGBKT7-HSPC238诱饵质粒载体，且经酵母双杂交技术结合文献分析发现RPL5可能是与HSPC238相互作用的目标蛋白之一。
作者：陈敬林；黄湘；谭家余；钟裕恒；万志丹 刊期： 2015年第11期
目的：制备和初步鉴定人睾丸特异性新基因hTSC29（ GenBank 登录号： BC032957）合成肽的单克隆抗体（ mAb）。方法：利用生物信息学方法对hTSC29的蛋白质序列进行分析和预测，根据免疫原性、表露性、亲疏水性及柔韧性4个参数，合成一段由18个氨基酸组成的多肽，并以此为抗原免疫BALB／c小鼠，取其脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合后，通过有限稀释法筛选阳性克隆，采用ELISA法、Western blot、免疫组化和免疫荧光法鉴定hTSC29 mAb的特异性。结果：获得了1株稳定分泌hTSC29 mAb的杂交瘤细胞株，分泌的抗体属IgG2b（κ）亚型，杂交瘤细胞培养上清效价达到1∶104；Western blot鉴定表明，制备hTSC29 mAb可特异性地识别人睾丸总蛋白中Mr约为60000处的蛋白；免疫组织化学和免疫荧光结果显示hTSC29蛋白主要定位在正常人睾丸组织中的精母细胞和精子细胞。结论：成功建立了1株稳定分泌抗hTSC29 mAb的杂交瘤细胞株，其分泌的抗体效价高、特异性强，为进一步研究hTSC29的功能提供了特异的检测工具。
作者：颜秋霞；陈彩蓉；李介华；周秀琴；冼英杰；陈润强；蔡志明；唐爱发 刊期： 2015年第11期
中国免疫学杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国免疫学会,吉林省医学期刊社
