学术投稿

环介导等温扩增检测弓形虫方法的建立

陈道桢;许飞;葛海燕;徐兰兰;潘淑静;朱斌

关键词:环介导等温扩增, 弓形虫, 基因诊断, 定量检测
摘要:目的 建立环介导等温扩增(LAMP)检测弓形虫DNA的方法.方法 以构建的弓形虫B1基因质粒为阳性模板,建立LAMP检测弓形虫的方法,并进行特异性和敏感性评估,在此基础上建立LAMP检测弓形虫的定量体系及通过显色反应直接判断结果的简便方法,后应用建立的方法对57例孕妇外周血标本进行检测.结果 建立的方法仅对弓形虫DNA扩增出特有的梯状条带,酶切结果与预期相符;检测下限为每反应管10拷贝.以重组质粒制作的标准曲线,阳性反应时间与模板浓度有良好的线性关系.57例孕妇标本检测,发现2例阳性.结论 本方法特异性强、敏感性高、简便快速且成本低,有望在临床检测中发挥一定的作用.
中国实验诊断学杂志相关文献
  • 感染性心内膜炎患者血培养检出副嗜沫嗜血杆菌1例

    1 临床资料1.1 病史摘要患者,男,27岁.20年前体检发现心脏杂音,自觉无胸闷气喘症状,未予进一步诊治.一月前受凉后出现发热,高体温达39℃,当地医院予以头孢哌酮等药物抗感染治疗,体温降至正常,但停药后又反复发热,当地心脏彩超示:室间隔缺损.2010年6月29日来我院门诊就医,拟诊:先天性心脏病,室间隔缺损,感染性心内膜炎.当天收住心脏内科病房.入院查体:体温36.8℃,心率73次/分,律齐,呼吸20次/分,血压130/70 mmHg,神志清楚,口唇无紫绀,颈静脉无怒张,双肺呼吸音清,心前区无隆起,心界不大,左第3、4肋间可闻及收缩期3-4级粗糙杂音,无心包摩擦音,肝脾肋下未扪及,腹平软,无压痛.

    作者:张之烽;秦芳 刊期: 2011年第10期

  • SHP-1基因的研究进展

    含有SH2结构域的酪氨酸磷酸酶SHP-1主要表达于造血细胞,作为关键的调控因子调节细胞内的磷酸化水平.SHP-1已被认为是在淋巴瘤、白血病和其他肿瘤中的抑癌基因,SHP-1基因甲基化导致SHP-1蛋白表达的减少和缺失被认为是淋巴瘤、白血病细胞株和其他肿瘤细胞的典型特征.相反,SHP-1蛋白在非肿瘤细胞中可以表现为正常表达或过度表达.SHP-1调节机能障碍可导致细胞的过渡增长,从而表现为各种肿瘤的发生.

    作者:韩颖 刊期: 2011年第10期

  • 人乳头瘤病毒(HPV)-DNA分型检测在30岁以下妇女宫颈病变诊断中的价值

    宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤之一,发病率较高,仅次于乳腺癌,居女性恶性肿瘤的第2位.近年来子宫颈癌的研究表明,人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染是宫颈癌及宫颈上皮内瘤变(CIN)的主要危险因素,分子生物学研究结果显示,90%以上的宫颈癌患者伴有HPV感染[1],HPV是宫颈癌的主要致病因子,根据其能否导致恶性病变,将HPV分为高危型及低危型.

    作者:谢军 刊期: 2011年第10期

  • 类风湿关节炎实验诊断指标的比较分析

    目的 调查抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体和类风湿因子在类风湿关节炎实验诊断中的敏感性、特异性和结果相关性.方法 对健康体检者102例、类风湿关节炎患者128例和非类风湿关节炎患者151例的抗CCP抗体和类风湿因子检测结果进行统计分析.抗CCP抗体采用ELISA法检测,类风湿因子采用免疫比浊法检测.结果 抗CCP抗体和类风湿因子对于类风湿关节炎的敏感性分别为76.6%、86.7%(P<0.05),特异性分别为94.9%、69.9%(P<0.01).类风湿关节炎患者抗CCP抗体和类风湿因子定量检测结果之间的相关系数为0.187(P>0.05).抗CCP抗体、类风湿因子阳性率在不同性别或年龄之间均无显著性差别(P>0.05).结论 抗CCP抗体对类风湿关节炎的特异性明显优于类风湿因子,而敏感性略低;抗CCP抗体与类风湿因子定量检测结果间无显著相关性.

    作者:邵耀明;倪芳颖;陈国千 刊期: 2011年第10期

  • 二维斑点追踪显像技术评价甲状腺功能减退症患者左室功能

    甲状腺功能减退症(简称甲减),是由于甲状腺激素(thyroid hormone ,TH)合成及分泌减少,或其生理效应不足所致机体代谢降低的一种疾病.发病率呈逐年增高趋势,可累及多个系统,心脏是其受累的主要靶器官之一,目前已有相关甲减患者的心功能方面的研究报道[1].STI是实时追踪心肌内回声斑点的空间运动,则相邻2个斑点间距离的相对改变就反映了局部心肌的形变[2],即二维应变和应变率.

    作者:王莹莹;杨晓英;梅丽;许冰 刊期: 2011年第10期

  • 四川汉族血小板献血者HPA-9基因频率调查

    随着成分输血的不断深入推广应用,血小板输血已成为临床输血治疗的重要手段之一,在血小板质量和数量存在问题的疾病治疗中发挥了重要的作用.人类血小板同种抗原(human platelet alloantigens,HPA)位于血小板膜糖蛋白上,这些蛋白是由遗传决定的,HPA的基因频率在不同种族、不同区域中的分布是不同的.在临床血小板输血过程中,如果血小板同种抗原不相匹配[1],可导致受血者机体产生血小板同种抗体,引起同种免疫血小板减少综合症、输血后紫癜、血小板输注无效等.

    作者:蒿广德;刘敏;齐文玲;蒲丽蓉 刊期: 2011年第10期

  • Real Time PCR监测慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因的临床意义

    目的 通过Real Time PCR实时监测慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因的表达,探讨其在诊断及预后评价价值.方法 采用荧光定量Real Time PCR反应技术检测39例慢性粒细胞白血病及其它血液系统疾病20例的bcr/abl融合基因表达水平.结果 骨髓原始、外周血原始与bcr/abl融合基因拷贝数有显著相关性,初诊慢性粒细胞的bcr/abl融合基因表达水平普遍明显增高,经羟基脲±干扰素治疗后表达明显下降,复发或加速期患者可提前2-4个月左右早期发现,格列卫或移植治疗后,多数bcr/abl融合基因可转阴性.结论 bcr/abl融合基因检测对诊断慢性粒细胞白血病有重要价值,同样是慢性粒细胞白血病治疗和预后观察的决定性指标.

    作者:王祥财;廖长风;张庭龙;梁艳;李海亮;黄莉;刘礼平;许明君;李树芳 刊期: 2011年第10期

  • 血清CA15-3、CA125、CEA检测在乳腺癌诊断中的临床意义

    目的 探讨血清中CA15-3、CA125、CEA浓度在乳腺癌诊断中的临床意义.方法 以乳腺癌患者76例、乳腺良性疾病患者58例、健康对照60例样本为试验材料,采用电化学发光免疫分析法检测血清中CA15-3、CA125、CEA浓度.结果 乳腺癌组中血清CA15-3、CA125、CEA浓度均显著高于乳腺良性疾病患者和健康对照组(P<0.05),而在乳腺良性疾病患者和健康对照组间无显著差异.单项指标检测时CA125Youden指数高(0.678),相应的敏感度和特异性为73.7%和94.1%.将CA15-3/CA125/CEA三个指标联合检测时,对乳腺癌诊断的敏感性、特异性和Youden指数分别达到81.6%、90.7%和0.723.结论 血清中CA15-3、CA125、CEA浓度可以作为乳腺癌临床诊断的分子标志物,且联合检测比使用单一指标能显著提高检测效能.

    作者:张璞 刊期: 2011年第10期

  • 妊娠早期妇女血清性激素水平及与先兆流产的关系

    目的 探讨血清人绒毛膜促性腺激素(HCG)、孕酮(P)和雌二醇(E2 )水平在妊娠早期(4-10周)中的浓度变化;以及先兆流产出血组与正常妊娠组这三种性激素的浓度差异.方法 选择在北京妇产医院妇幼保健院就诊妊娠4-10周的妇女279例,B超监测至看到原始心血管搏动后定期产科检查.将其分为两组:正常妊娠组213例和先兆流产出血组66例;再按孕周分为6个亚组(9-10周为一组).采用化学发光分析法检测孕妇血清中HCG、孕酮、雌二醇水平.结果 两组HCG、E2水平与孕周均呈正相关,孕酮水平与孕周无相关性.正常妊娠组与先兆流产出血组HCG:4-7孕周水平无明显差异,但≥8周两组存在明显差异.孕酮:4孕周和大于8孕周水平差异无统计学意义,5至8孕周水平差异有统计学意义;雌二醇:各孕周水平差异有统计学意义.结论 先兆流产出血组孕妇各孕周血清HCG、E2 水平虽能与孕周成正相关,但r值均低于正常组,同时HCG>8孕周两组有差异,提示先兆流产出血组胚胎活性低于正常组.两组孕酮与雌二醇t-检验结果,提示孕酮、雌二醇水平都是维持早期妊娠的重要因素,先兆流产出血组E2低于正常组显著.妊娠早期进行HCG和孕酮联合雌二醇浓度监测能预测先兆流产病情的危险性,合适的雌孕激素比值是保持良好妊娠结局的重要素.

    作者:朱英哲;徐泽媚;杨晓葵 刊期: 2011年第10期

  • 脂联素基因突变-11377C/G检测方法建立及与2型糖尿病关系的研究

    目的 建立脂联素基因(aPM1)-11377C/G点突变的检测方法,探讨aPM1-11377C/G点突变单核苷酸多态性(SNP)与血清脂联素(APN)水平及2型糖尿病(T2DM)的相关性.方法 构建含aPM1-11377C/G点突变的野生型和突变型质粒标准品,采用等位基因特异性PCR(ARMS-PCR)方法,结合荧光探针(TaqMan Prob),通过对引物3′端正配与错配扩增效率差别的比较,建立ARMS-TaqMan检测aPM1-11377C/G点突变的方法.同时,分别对156例(男87/女69)糖尿病患者(T2DM组)和89例(男21/女68)健康对照者(NC组)的aPM1-11377C/G基因频率,以及APN、各种生化指标以及临床基本资料进行检测和调查.结果 T2DM组APN水平显著低于NC组(P<0.05).aPM1-11377位点CC、CG、GG基因的APN水平呈趋势性降低(P<0.001).T2DM组与对照组间的aPM1-11377位点CC、CG、GG基因频率差异有显著性(P<0.05).T2DM组的aPM1-11377 G等位基因频率显著高于NC组(24.36% vs.19.11%,P>0.05).结论 ARMS-TaqMan方法检测aPM1-11377C/G基因点突变具有准确、经济和适合高通量检测的特点.aPM1-11377C/G多态性与血清脂联素水平和T2DM相关.

    作者:裴林;乔博明;贾玫;张旗 刊期: 2011年第10期

  • TET2突变检测在血液肿瘤中的临床价值

    1 TET2基因的起源与结构TET家族中包括TET1、TET2及TET3.TET1位于染色体10q22,在急性髓系白血病(AML)相关的染色体易位t(10;11)(q22;q23)中作为混合性白血病(MLL)的融合配体出现在少数AML中.TET1编码2-酮戊二酸和二价铁离子依赖性的双加氧酶,它们可以在胚胎干细胞中催化5-甲基胞嘧啶与5-羟甲基胞嘧啶的转化,而这种转化可能促进DNA的去甲基化[1].

    作者:罗婧 刊期: 2011年第10期

  • 踝臂指数与颈动脉粥样硬化斑块及冠心病的关系研究

    随着我国经济水平的发展,人民生活水平日益提高,饮食结构的改变,心脑血管疾病已成为人类的第一杀手.探寻评估冠状动脉粥样硬化的指标和方法已成为临床研究的热点.踝臂指数又称踝肱指数或踝肱压力指数,是指踝动脉与肱动脉收缩压的比值,它是诊断外周动脉缺血的一种准确、简便、无创的方法.随着周围动脉疾病研究的渐渐深入,人们发现其与心脑血管事件、糖尿病等密切相关.而颈动脉粥样硬化与冠状动脉粥样硬化有其共同病理基础和危险因素[1],因此,本研究通过观察踝臂指数与颈动脉粥样硬化斑块的相关性,探讨ABI与冠心病的关系.

    作者:石红梅 刊期: 2011年第10期

  • 磷脂酰肌醇蛋白多糖-3在肝细胞肝癌的表达及其与术后复发的相关性

    目的 探讨磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(GPC-3)mRNA在肝细胞癌(HCC) 癌组织及癌旁组织的表达及其与术后复发的相关性.方法 用逆转录聚合酶链反应测定60例HCC癌组织及癌旁组织中GPC-3 mRNA的表达.PCR产物经凝胶电泳,比较HCC组织及癌旁组织中GPC-3与β-actin条带的灰度值之比,半定量分析GPC-3 mRNA的表达水平,分析术后3年不易复发HCC患者的癌组织GPC-3 mRNA的表达水平.结果 GPC-3 mRNA在HCC癌组织中高度表达,阳性率为68.3%,癌旁组织中低表达或未见表达,术后3年内未复发的HCC患者癌组织中GPC-3 mRNA呈现低表达水平,GPC-3 mRNA表达与肿瘤大小、肿瘤数目、有无包膜、门静脉癌栓、HBsAg及AFP水平无明显相关.结论 GPC-3 mRNA在HCC癌组织中的表达明显高于癌旁组织,可能是HCC的一种新的潜在的肿瘤特异标志物;癌组织中GPC-3 mRNA低表达的HCC患者不易复发,可能是判断HCC进展和评价预后的一个潜在重要指标.

    作者:蒋国华;廖维甲;覃理灵;梅铭惠;陈谦;袁晟光;刘杰 刊期: 2011年第10期

  • 吸入NO对重叠综合征患者肺动脉压及血凝状态的影响

    目的 探讨吸入一氧化氮对重叠综合征患者肺动脉压及血凝状态的影响.方法 经肺功能及多导睡眠监测筛选入组患者18例,随机分对照组及一氧化氮吸入组.治疗后观察肺动脉压、D-二聚体、血浆GMP-140的改变情况.结果 吸入一氧化氮后测定肺动脉压降低、D-二聚体及血浆GMP-140均较治疗前下降.结论 小剂量一氧化氮短时吸入对重叠综合征患者可降低肺动脉压、改善血凝状态、降低血小板活化.

    作者:阎琦;张泽明;尹娟;刘良义;冯欣;杜宇;尹文斌 刊期: 2011年第10期

  • 辛伐他汀联合氢氯吡咯雷对急性冠脉综合征患者超敏C反应蛋白的影响

    急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)是由急性心肌缺血引起的临床综合征,以冠状动脉粥样硬化斑块破溃,继发完全或不完全闭塞性血栓的形成为病理基础.研究表明急性冠脉综合征(ACS)与斑块内炎症反应密切相关,而超敏C-反应蛋白(hs-CRP)作为炎性反应的重要标志物,被认为是急性冠脉事件发生的强有力的预测指标[1].本研究旨在研究辛伐他汀联合氯吡咯雷对hs-CRP的影响.

    作者:张丽;刘玉梅;朱昆;张力 刊期: 2011年第10期

  • 颌面损伤诊断及利用猪皮离体完成颌面整形实验教学的体会

    口腔颌面部外伤目前常发病于临床上,现代社会各交通工具多样且数目众多,发展迅捷,使人们颌面部创伤骨折的发生几率增大.颌面部复杂的三维结构使得对其定量的测量和定性的描述都相当困难,常用的方法如二维的横断CT及x线头颅定位以、扫描都不能满意的记录和评价这一空间的复杂性.目前口腔医学不仅仅是口腔临床能力的提高,同时也要具备终身学习能力及良好职业素质,三者相结合[1].因此教学实验动手能力的培养十分重要.

    作者:郑泉洲 刊期: 2011年第10期

  • 64排螺旋CT低剂量筛查肾上腺肿瘤的实验研究

    目的 探索适用于64层螺旋CT肾上腺成像筛查肾上腺肿瘤的低剂量扫描参数,以有利于该技术在临床上更广泛应用.方法 选择2009年6月至2010年6月吉化集团公司总医院确诊的肾上腺肿瘤30例,男15例,女15例.平均年龄38 岁,年龄范围在28 岁-67 岁之间.肾上腺肿瘤共36个,其中所有病例均经手术病理证实.对照组:健康自愿者 10例.一同使用64层螺旋CT在自动管电流模式下以不同的扫描参数组合扫描:噪声指数(NI)分别采用8、12、15、18、21、24、27、30、33;管电压(TV) 分别采用140 kV、120 kV、100 kV、80 kV;球管旋转时间(RT) 分别采用0.4 s和0.5 s.将所得数据经0.625 mm重建后传至GE ADW4.3工作站.运用肾上腺成像专用软件重组出肾上腺的图像,由1名有20年放射经验的医师对各扫描参数组合所得图像进行评分,记录各扫描参数组合的放射剂量(DLP),采用偏相关分析探讨放射剂量及图像质量与噪声指数、管电压、球管旋转时间的关系.结果 DLP与NI的偏相关系数为-0.613,P<0.0l;DLP与TV的偏相关系数为0.198,P>0.05;DLP与RT的偏相关系数为-0.054,P>0.05.结论 自动管电流法模式下扫描,NI取值21,管电压120 KV,球管旋转时间0.4 s为64层螺旋CT筛查肾上腺肿瘤的优剂量扫描参数组合,其放射剂量约为固定管电流法CT肾上腺成像的18.6%.上述扫描参数可作为64层螺旋CT筛查肾上腺肿瘤的低剂量扫描参数.

    作者:亓波;王小红 刊期: 2011年第10期

  • 血清GAD-Ab、ICA、IAA联合检测在糖尿病诊断及分型中的意义

    糖尿病是临床内分泌科的常见疾病,是由不同病因引起的胰岛素β细胞胰岛素分泌不足和(或)周围组织细胞对胰岛的产生抵抗性或耐受所致.2009年3月至2010年3月,我院对98例糖尿病患者血清中抗谷氨酸脱羧酶抗体(GAD-Ab)、胰岛细胞抗体(ICA)、胰岛素抗体(IAA)进行检测,并观察其在1、2型糖尿病中的变化,现将结果报道如下.

    作者:李泉;曾建涛;刘钉宾;柏艳;张小芹 刊期: 2011年第10期

  • NGF预处理对AMI大鼠心肌VEGF及其受体KDR/flk-1表达的影响

    目的 研究神经生长因子(NGF)预处理对急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌中VEGF及其受体KDR/flk-1表达的影响.方法 雄性成年Wistar大鼠60只,随机分为3组:NGF预处理组和非NGF预处理组和对照组(每组20只).大鼠NGF预处理使用注射用鼠神经生长因子(0.5 μg/kg)尾静脉注射.采用电凝烧灼左冠状动脉前降支制作大鼠急性心肌梗死动物模型.观察各组大鼠心肌损伤的病理改变;以RT-PCR方法检测大鼠心肌组织中血管内皮生长因子(VEGF)及其受体KDR/flk-1的表达情况.结果 大鼠心肌坏死面积组间比较差异有统计学意义(F=12.13,P<0.01),NGF预处理组(25.41±9.06)%明显少于非NGF组(40.08±11.38)%,P<0.01.大鼠心肌VEGF、KDR/flk-1 mRNA表达组间比较差异有统计学意义(F=18.23,14.10,P均<0.01);NGF预处理组VEGF(45.41±11.54)、KDR/flk-1(47.40±7.83)均高于非NGF组VEGF(32.34±8.10)、KDR/flk-1(31.09±7.88),P均< 0.01.大鼠心肌VEGF mRNA表达与其受体KDR/flk-1 mRNA表达呈正相关关系(r=0.691,P<0.01).结论 NGF预处理可能通过上调VEGF及其受体表达,增加大鼠心肌中新生血管密度,减轻AMI大鼠心肌损伤.

    作者:李颖;孙新;郭华涛;熊英;翟羽佳;徐雷 刊期: 2011年第10期

  • 渗透教学在临床药学专业中的实践应用

    临床药学专业的知识面涉及到基础学科和临床学科,如免疫学药代动力学、生物化学、病理生理学、营养学、内外科等,是一门多学科交叉渗透的学科.在教学中要求学生既要有扎实的药理学概念,又要了解一定的临床医学知识.交叉渗透式教学方法以病例作为每次课程开课前的导言,以临床实际和教学内容紧密相连,达到更佳的教学效果.笔者对交叉渗透教学的探讨如下.

    作者:常一丁 刊期: 2011年第10期

中国实验诊断学杂志

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主管:中华人民共和国教育部

主办:吉林大学中日联谊医院 上海交通大学医学院附属瑞金医院