学术投稿

HLJ1高表达对结直肠癌细胞周期和侵袭能力的影响

王舰梅;张熙曦;周铁军;倪江涛;刘勇

关键词:结直肠肿瘤, HLJ1, 细胞周期, 侵袭
摘要:目的 构建并鉴定pCDNA3.0-HLJ1真核表达质粒,检测HLJ1基因表达上调对结直肠癌细胞周期和侵袭能力的影响.方法 利用反转录PCR法钓取HLJ1基因片段并与pCDNA3.0载体连接,酶切及测序鉴定pCDNA3.0-HLJ1重组质粒.在结直肠癌细胞SW480和HT29中分别转染pCDNA3.0和pCDNA3.0-HLJ1,应用荧光定量PCR和Western blot法检测HLJ1的表达,分别应用流式细胞仪和细胞侵袭实验检测其对细胞周期和侵袭能力的影响.结果 pCDNA3.0-HLJ1重组质粒构建成功,并在结直肠癌细胞中成功表达.转染pCDNA3.0-HLJ1质粒入结直肠癌细胞后,肿瘤细胞G1/G0期比例明显增加(P<0.05),侵袭能力明显减弱(P<0.05).结论 pCDNA3.0-HLJ1质粒为进一步研究HLJ1在结直肠癌中的作用提供实验基础.HLJ1将结直肠癌细胞阻滞在G1期并抑制其侵袭能力.
临床与实验病理学杂志相关文献
  • 阴道无色素梭形细胞型恶性黑色素瘤1例临床病理分析

    目的 探讨阴道无色素梭形细胞型恶性黑色素瘤的病理形态学特点、免疫表型、诊断及鉴别诊断.方法 回顾性分析1例阴道无色素梭形细胞型恶性黑色素瘤的临床资料、病理组织学及免疫表型特征,并复习相关文献.结果 镜下见肿瘤细胞呈弥漫片状分布,大小较一致,未见色素,可见席纹状结构,核呈梭形及短梭形,核仁较明显,可见病理性核分裂,胞质红染,细胞边界不清,肿瘤边缘可见淋巴细胞岛.免疫表型:肿瘤细胞CK、desmin和actin均阴性,S-100、Melan-A和HMB-45均阳性.结论 诊断阴道无色素梭形细胞型恶性黑色素瘤需结合形态学及免疫表型特征,其中免疫组化标记HMB-45阳性是确诊的重要依据.

    作者:曹军;邱建学;李春飞;陈玉 刊期: 2016年第02期

  • KLF5和Survivin蛋白异常表达与胃癌预后的关系

    目的 通过分析KLF5和Survivin蛋白在胃癌组织中的表达,探讨KLF5和Survivin在胃癌发生、发展中的相互关系及二者对胃癌预后的影响.方法 采用免疫组化SP法检测79例胃癌组织和40例正常胃组织中KLF5和Survivin的表达,并根据检测结果进行相关性分析、Kaplan-Meier法进行生存分析、通过Cox比例风险模型分析KLF5和Survivin的表达与患者预后的关系.结果 79例胃癌组织中KLF5和Survivin的阳性率分别为46.84%和56.96%,二者表达均与肿瘤分化程度、临床分期、浸润程度及有无淋巴结转移显著相关(P<0.05).经Spearman等级相关分析显示,KLF5和Survivin在胃癌组织中的表达呈正相关(rs =0.444,P<0.05).Kaplan-Meier法生存分析显示,KLF5和Survivin阳性组的中位生存期(28个月和29个月)明显低于阴性组(48.5个月和50.6个月)(P <0.000 1).Cox回归分析表明,肿瘤浸润深度、临床分期、淋巴结转移以及KLF5和Survivin异常表达是影响胃癌患者预后的危险因素.结论 KLF5和Survivin高表达与胃癌分化程度、浸润和转移有关,并且二者间可能存在相互调节和协同效应,是胃癌不良预后的危险因素,可作为胃癌诊断及预后评价的客观指标.

    作者:张小玲;田志逢;王萍;王现国 刊期: 2016年第02期

  • 金胺O荧光染色在结核病病理诊断中的应用价值

    近年来结核病的发病率呈上升趋势,临床上结核病的诊断主要依靠病理组织学结果及抗酸染色法(Ziehl-Neelsen染色法)加以确诊.抗酸染色法是一种特异性高且长期用于结核病病原学诊断的经典方法,但其镜检时间较长,敏感性低,无法满足目前临床诊断的需求.为了提供结核抗酸杆菌感染的证据,福建医科大学附属漳州市医院病理科采用金胺O荧光染色法应用于病理组织切片,并以抗酸染色以及血清学结核抗体金标法为对照,结果证实了金胺O荧光染色法可用于辅助抗酸杆菌感染的病理诊断,并具有一定的临床应用价值.

    作者:陈顺平;陈伟德;吴文乔;洪少君;纪思灵;苏海燕 刊期: 2016年第02期

  • 激素抵抗型微小病变病发展为局灶节段性肾小球硬化症6例临床病理分析

    目的 分析由激素抵抗型微小病变病(steroid-resistant minimal change disease,SR-MCD)发展为局灶节段性肾小球硬化症(focal segmental glomerulosclerosis,FSGS)的临床病理特点,并探讨二者之间的相关性及演变过程中的形态学特点.方法 分别利用HE染色、特殊染色、免疫组化染色及电镜检查分析6例患者的临床病理学资料,并复习相关文献.结果 6例患者均表现为肾病综合征,具有激素抵抗的临床特点,初次活检镜下均表现为足细胞弥漫性肿胀,局灶可见增生(≥3个连续排列或叠层),且初次肾活检均可见C4d节段不均匀系膜区较强表达,6例均由SR-MCD发展为FSGS.结论 当发现MCD足细胞病变显著或有较强C4d表达时应提示临床医师该患者有向FSGS发展的可能.

    作者:王慧;姚梅宏;王明月;曾德华;李敏;曾玲;郑智勇 刊期: 2016年第02期

  • 伴肉瘤分化的甲状旁腺癌1例临床病理学分析

    目的 探讨伴肉瘤分化的甲状旁腺癌的临床病理特点、病理诊断及预后.方法 对1例伴肉瘤分化的甲状旁腺癌进行HE和免疫组化染色,并复习相关文献.结果 患者女性,62岁,肿块位于左侧颈部,大小3.5 cm×3.5 cm ×2.5cm.肿瘤由巢状透明的细胞组成,间隔带为伴肉瘤分化的异型梭形细胞.免疫表型:透明细胞显示CgA阳性,间隔带梭形细胞vimentin阳性,Ki-67增殖指数为80%.结论 伴肉瘤分化的甲状旁腺癌是甲状旁腺原发肿瘤的罕见类型,明确诊断需结合组织病理学形态及免疫表型,伴肉瘤分化是甲状旁腺癌预后差的因素之一.

    作者:官忠燕;丰宇芳;侯英勇 刊期: 2016年第02期

  • HLJ1高表达对结直肠癌细胞周期和侵袭能力的影响

    目的 构建并鉴定pCDNA3.0-HLJ1真核表达质粒,检测HLJ1基因表达上调对结直肠癌细胞周期和侵袭能力的影响.方法 利用反转录PCR法钓取HLJ1基因片段并与pCDNA3.0载体连接,酶切及测序鉴定pCDNA3.0-HLJ1重组质粒.在结直肠癌细胞SW480和HT29中分别转染pCDNA3.0和pCDNA3.0-HLJ1,应用荧光定量PCR和Western blot法检测HLJ1的表达,分别应用流式细胞仪和细胞侵袭实验检测其对细胞周期和侵袭能力的影响.结果 pCDNA3.0-HLJ1重组质粒构建成功,并在结直肠癌细胞中成功表达.转染pCDNA3.0-HLJ1质粒入结直肠癌细胞后,肿瘤细胞G1/G0期比例明显增加(P<0.05),侵袭能力明显减弱(P<0.05).结论 pCDNA3.0-HLJ1质粒为进一步研究HLJ1在结直肠癌中的作用提供实验基础.HLJ1将结直肠癌细胞阻滞在G1期并抑制其侵袭能力.

    作者:王舰梅;张熙曦;周铁军;倪江涛;刘勇 刊期: 2016年第02期

  • 组织石蜡切片常见问题应对

    石蜡切片制备可分为组织取材固定[1,2]、脱水[3]、包埋、切片、染色等,其中任何环节出现问题,均会影响终染色结果.一张好的石蜡切片非常重要,但是要切出一张厚薄均匀、平整无痕、光滑无碎裂的切片也并非易事,切片的好坏与组织固定、脱水、包埋等均有关系,其中切片是出现问题多,也是难解决的重要环节之一.作者结合具体实践查找组织切片过程中常见问题,初步分析探讨问题的解决方法,以期为初学者提供帮助,节约不必要的资源浪费和时间浪费;并与有经验者共同磋商进步,提高常见组织病理石蜡切片质量.

    作者:李慧;付海燕;马丽丽;杨珞;于飞飞;王玉燕 刊期: 2016年第02期

  • 无醛固定液与甲醛固定液对DNA保存效果比较

    随着分子生物学技术的不断发展及疾病相关基因研究的不断深入,分子病理学检测已经成为病理诊断的重要辅助手段,广泛运用于临床实践.特别是近几年随着靶向治疗的发展需要对肿瘤基因分型,分子生物学技术中要求使用甲醛固定、石蜡包埋的组织块作为检测的主要对象.但甲醛固定组织会导致基因组DNA断裂.甲醛与蛋白质的广泛交联阻碍核酸的定量分析并局限了DNA片段的PCR扩增产物的长度[1].而且随着时间的推移,这种交联会越来越严重,影响高质量DNA和(或)RNA的提取效率[2].研究显示,经10%中性福尔马林固定的组织超过6个月后不可用于DNA突变检测[3].因此,其在分子学方法的适用性上受到限制[4].本实验通过配制3种无醛固定液对组织进行固定,通过基因组DNA的提取,对总DNA浓度、纯度、完整性的检测以及对GAPDH基因的PCR扩增,并以10%中性福尔马林作为对照来比较不同固定液对DNA保存方面的影响,试图建立新的高质量的组织固定液.

    作者:吴平;张声 刊期: 2016年第02期

  • 中国结直肠癌、肺癌和胃癌患者KRAS基因突变情况分析

    目的 探讨中国结直肠癌、肺癌和胃癌中KRAS基因的突变特征及其与临床病理特征的关系,并比较基因突变在三种癌症间的异同.方法 采用直接测序法检测860例结直肠癌、101例肺癌和96例胃癌组织中KRAS基因第2号外显子的突变.结果 KRAS基因突变率在肺癌、胃癌、结直肠癌中的差异均有显著性(5.9% vs4.2% vs 35.1%,P<0.05).三种肿瘤中,KRAS基因突变均以第12密码子为主.KRAS突变与患者年龄、性别无明显相关性.肺腺癌患者KRAS基因突变高于非腺癌包括鳞癌等(10.2% vs0,P<0.05).肠腺癌和黏液腺癌中KRAS基因突变率显著高于其它类型结直肠癌(35.7% vs 37.6% vs 8%,P<0.05).结论 结直肠癌患者的KRAS基因突变率显著高于肺癌和胃癌.因此,KRAS基因突变检测可能对结直肠癌患者的个体化靶向治疗具有更为重要的指导意义.

    作者:谢玲;陈劼;孙怡;郑燕影;申龙树 刊期: 2016年第02期

  • 胃血管球瘤1例

    患者女性,34岁.因间断性黑便10余天人院.患者既往体健,2014年7月26日在当地医院行胃镜检查示胃窦肿物,活检病理结果示胃窦慢性炎症伴腺体增生.7月28日赴上级医院行超声检查,超声内镜检查示胃窦黏膜下肿瘤.8月5日本院胃镜示与胃体交界处大弯侧见一较大的黏膜下球形隆起(图1).遂行手术切除术.术后电话随访16个月,患者一般情况良好.

    作者:宋芳;龚圣勇 刊期: 2016年第02期

  • 新生儿神经母细胞瘤皮肤转移1例

    患儿男婴,1个月5天.因家属无意间发现其右大腿包块人院.腹部B超发现肾上腺区占位性病变,直径3 cm;肝实质内散在低回声结节;右大腿实质性肿块,2.5 cm ×0.8cm大小.血生化检查:AFP 1 000 ng/ml,HCG 0.8μg/L,NSE 35.851 ng/ml.

    作者:徐红艳;曾华;吴艳;黄慧;张守华;曾松涛;杨文萍 刊期: 2016年第02期

  • STAT蛋白在抑瘤素M诱导的肾小管上皮细胞损伤中的作用

    目的 探讨STAT蛋白在抑瘤素M(oncostatin M,OSM)诱导的肾小管上皮细胞表型转化及分泌功能中的作用.方法 体外培养人肾近曲小管上皮细胞,分为对照组(C组)、OSM(20 ng/ml)组(OSM组)、OSM+雷帕霉素(100 ng/ml)组(OSM+R组)和OSM+氟达拉滨(100 ng/ml)组(OSM+F组).培养72 h后收集细胞及上清液,透射电镜观察细胞超微结构改变;免疫细胞化学和Western blot法检测CK18、d-SMA蛋白表达;采用Western blot法检测信号转导及转录激活因子(STAT1、STAT3、p-STAT1、p-STAT3)的表达;酶联免疫吸附实验测定细胞上清液中Ⅰ型胶原(collagen Ⅰ,Col Ⅰ)和纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的分泌.结果 与对照组相比,细胞经OSM刺激后CK18的表达下调,而α-SMA的表达上调并分泌过多的细胞外基质蛋白Col Ⅰ和FN;此外,OSM还可磷酸化激活STAT1和STAT3.OSM的上述作用可被雷帕霉素和氟达拉滨所阻断.结论 OSM具有促纤维化特性,而STAT1和STAT3信号活化在OSM介导的纤维化进程中发挥同等重要的作用.

    作者:李建英;杜云霞;张玮;张瑞华;封晓娟;刘思媛;刘青娟 刊期: 2016年第02期

  • 诊断免疫组织化学阴性对照的标准化:来自国际特设专家委员会的建议

    免疫组织化学(简称免疫组化)是应用于临床病理诊断和鉴别诊断的重要技术手段.免疫组化操作步骤繁多,不同的标本处理方法、不同的抗原修复条件以及不同的检测系统等均可影响染色结果,而设置对照(包括阳性和阴性对照)是检验操作步骤是否正确、染色结果是否可靠的关键.阳性对照主要用于证实目的抗原是否存在以及评估抗原表达水平,阴性对照主要用于评估免疫组化检测结果的特异性(即排除假阳性结果).对照标准化是免疫组化质量控制及其结果判读的主要影响因素,但目前尚未建立统一的标准,在日常病理工作中如何选择应用免疫组化对照是其关键.近,国际特设专家委员会对诊断免疫组化阴性对照标准化问题进行了探讨,并且对诊断免疫组化阴性对照的分类及标准定义、阴性对照结果判读及选择应用等方面提出了专家推荐意见[1].本文就该方面内容作一简介.

    作者:刘勇;杨海玉 刊期: 2016年第02期

  • 肾杂合性嗜酸细胞/嫌色细胞肿瘤合并肾乳头状癌1例并文献复习

    目的 探讨肾杂合性嗜酸细胞/嫌色细胞肿瘤(hybrid oncocytic/chromophobe tumors,HOCT)的临床病理学特点及免疫表型.方法 对l例肾HOCT合并肾乳头状癌(papillary renal cell carcinoma,PRCC)病变进行临床病理分析及免疫组化染色,并复习相关文献.结果 眼观:右肾中段见2个肿物.镜检:肿物大者由嗜酸细胞瘤和嫌色细胞癌(chromophobe renal cell carcinoma,CRCC)组成,两种成分混杂或镶嵌排列;免疫表型:CK7局灶弥漫强阳性或强弱不等,EMA、E-cad和P504S阳性,vimentin阴性,Ki-67增殖指数<3%.肿物小者瘤细胞呈乳头状排列,局部浸润性生长,纤维血管轴心内见砂粒体.免疫表型:CK7、P504S、EMA、CD10、vimentin和E-cad均阳性,CDll7阴性,Ki-67增殖指数<5%.结论 肾HOCT诊断主要依据病理组织学和免疫表型.

    作者:袁宏伟;韦玄;贾永峰;云芬;宝鲁日;张军;乌新林;施琳 刊期: 2016年第02期

  • 脂肪酸合成酶调节机制的研究进展

    近年来,随着对恶性肿瘤的深入研究,在人类许多恶性肿瘤细胞中发现脂肪酸合成增加,而过去人们认为脂肪酸的生物合成是正常的能量合成形式.该合成过程中的关键酶:脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASN)使肿瘤细胞的内源性脂肪酸的生物合成发生了明显变化,后者可对肿瘤细胞的生存产生重要的作用,提供了肿瘤细胞生存所需的能量及结构物质,而且与肿瘤细胞的生长、侵袭及患者预后密切相关.这些发现让人们对FASN产生新的认识,使得该酶的研究成为肿瘤研究的热点,其可能对肿瘤的治疗提供新思路.该文现就其目前的研究状况作一综述.

    作者:曹钟;岑红兵;郑昌旭;夏丹萍;万勇汉;敖启林 刊期: 2016年第02期

  • 舌血管球瘤1例

    患儿女,2岁,4个月前发现左侧舌缘肿物,约花生米大小,无疼痛、破溃出血.10多天前在当地医院就诊,肿物穿刺抽出血性液体,考虑血管瘤.7天后因肿物明显增大来我院就诊.入院后检查见舌背部黏膜表面肿块,2.0 cm×l.5cm×1.0 cm大小,红色,质地中等,边界清,无触痛.

    作者:罗纯;叶长华;陈桂妃;刘友斌;王名法;彭万来;王莉 刊期: 2016年第02期

  • 梭形细胞/多形性脂肪瘤7例临床病理分析

    目的 探讨梭形细胞/多形性脂肪瘤(spindle cell/pleomorphic,SCL/PL)的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断.方法 回顾性分析7例SCL/PL的临床及病理学特征,并复习相关文献,并将其与脂肪瘤样型孤立性纤维性肿瘤、硬化型脂肪肉瘤、梭形细胞脂肪肉瘤进行对比分析.结果 7例患者年龄41 ~ 77岁,平均54岁,均为男性.肿瘤部位:手部2例,颈部3例,肩部2例.病史1~8年.梭形细胞脂肪瘤镜下由温和的梭形细胞、束状排列的胶原纤维及数量不等的脂肪细胞组成.多形性脂肪瘤可见特征性的大的、多形性、花环状细胞.免疫表型:梭形细胞及多形性细胞CD34阳性,脂肪细胞S-100阳性.术后随访5 ~59个月,未见复发及转移.结论 SCL/PL为较少见的良性肿瘤,应与一些良性、局部侵袭性及低度恶性的软组织肿瘤及肿瘤样病变相鉴别.

    作者:宫丽华;田萌萌;佟桂珍;丁宜;黄啸原 刊期: 2016年第02期

  • Wnt信号通路成员蛋白NKD1、β-catenin和Cyclin D1在结直肠腺癌中的表达及意义

    目的 观察NKD1、β-catenin和Cyclin D1蛋白在结直肠正常黏膜、腺瘤和腺癌组织中的表达,探讨NKD1、β-catenin和Cyclin D1在结直肠正常黏膜-腺瘤-腺癌这一癌变过程中的表达变化及临床意义.方法 应用免疫组化SP法检测38例结直肠正常黏膜、70例腺瘤、128例腺癌组织中NKD1、β-catenin和Cyclin D1蛋白的表达.结果 NKD1在结直肠正常黏膜、腺瘤、腺癌组织中的阳性率依次降低(P<0.05),其在轻度异型增生腺瘤组织中的阳性率高于重度异型增生腺瘤组织(P<0.05);β-catenin异位表达率与Cyclin D1阳性率在结直肠正常黏膜、腺瘤、腺癌组织中均依次升高(P<0.01),且Cyclin D1在重度异型增生腺瘤组织中的阳性率高于中度及轻度异型增生腺瘤(P<0.05).NKD1、β-catenin、Cyclin D1在结直肠腺癌组织中的表达均与癌分化程度、Duke分期、淋巴结转移有关(P<0.05).在结直肠腺癌组织中NKD1的阳性率和β-catenin异位表达率呈负相关(rs=-0.645,P<0.01).在结直肠腺癌组织中β-catenin异位表达率和Cyclin D1阳性率呈正相关(rs=0.618,P<0.01).结论 NKD1、β-catenin、Cyclin D1三者可能参与结直肠肿瘤的发生、发展,有望成为评价结直肠腺癌恶性程度及预后的指标.

    作者:苗玉;周玮玮;张欣;郭效忠;邢荣格 刊期: 2016年第02期

  • 胰岛素样生长因子-1对共培养的神经细胞和施万细胞超微结构的影响

    目的 分析胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)对体外培养的神经细胞和施万细胞超微结构的影响.方法 建立VSC4.1大鼠神经细胞与RSC96大鼠施万细胞共培养模型:将VSC4.1神经细胞与RSC96施万细胞共同培养,通过改善培养条件,使之共同生长.经相差显微镜观察,确定共培养的两种细胞可发生相互作用.透射电镜观察单独培养的神经细胞、施万细胞及共培养时细胞超微结构的变化.观察IGF-1的影响:实验分为共培养对照组和IGF-t组(20 ng/ml).培养5天后,收集细胞进行扫描电镜和透射电镜观察.结果 透射电镜观察单独培养的神经细胞及施万细胞均可见不同的分化状态,其超微结构各异.透射电镜结果:与对照组相比,IGF-1组中细胞表面绒毛状或指状突起明显增多且联系紧密.扫描电镜结果:对照组与IGF-1组中均可见RSC96细胞包绕轴突形成髓鞘(可称之为成髓的施万细胞).对照组中所有的细胞表面均比较平滑,绒毛样突起不明显.IGF-1组的细胞表面不再光滑,神经细胞和未成髓的施万细胞表面呈明显的绒毛样突起,而包裹轴突的成髓施万细胞表面主要呈片层状突起.结论 IGF-1可引起VSC4.1神经细胞和RSC96施万细胞超微结构及表面形态的改变.这或许是引起其功能改变的外在表现形式.

    作者:牛群丽;钟延丰;王盛兰;郑丹枫;刘爽 刊期: 2016年第02期

  • 淋巴结纤维母细胞性网状细胞肿瘤2例临床病理分析

    目的 分析纤维母细胞性网状细胞肿瘤(fibroblastic reticular cell tumour,FRCT)的临床病理学特征.方法 回顾性分析2例淋巴结FRCT的临床病理资料,并复习相关文献.结果 2例患者均行肿大淋巴结活检术.镜检:淋巴结结构破坏,大量梭形细胞增生,呈结节状或膨胀性生长.梭形细胞呈席纹状排列,瘤细胞之间常穿插纤细的胶原纤维,并可见大量炎性细胞浸润.梭形细胞较肥胖,细胞边界不清,空泡状核,核膜薄且有褶皱,核仁明显,核分裂可见.免疫表型:例1瘤细胞actin、SMA和CD68均阳性,S-100弱阳性,CD30、PAX-5、ALK、desmin、CK(AE1/AE3)、CD21、CD35、CD23和CD1a均阴性,EBER原位杂交检测阴性;例2瘤细胞CK(AE1/AE3)、desmin、CD68和SMA均阳性,CD21、CD35、CD23和CD1a均阴性,EBER原位杂交检测阳性.结论 FRCT是一种罕见的肿瘤,多发生于淋巴结,可分为CK阳性和CK阴性两类,其诊断主要依赖于病理学形态和免疫表型,例2EBER原位杂交检测阳性,提示FRCT的发生可能与EBV感染有关.

    作者:汪亮亮;刘勇;范思斯;徐晓;李婷 刊期: 2016年第02期

临床与实验病理学杂志

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主办:安徽医科大学;中华医学会安徽分会