臧茹琨;宋轶鹏;胡立宽;姜玉华
自上世纪80年代免疫组化(IHC)技术在我国逐步开展以来,近20年有了快速发展,现已成为病理科工作的重要组成部分.IHC在部分疑难病例诊断和鉴别诊断中起到决定性作用,癌基因、肿瘤增殖指数、肿瘤耐药基因、个性化治疗靶向基因的检测对肿瘤的预后判断、治疗方法及药物的选择上具有重要指导作用.一些大型医院已采用全自动IHC染色仪,但绝大多数中小医院仍是人工操作.本文就人工IHC的技巧及要注意的问题作一探讨.
作者:李德本;王涛;姜骏 刊期: 2011年第11期
免疫组化在病理诊断中广泛而深入的推广和应用,使之在辅助诊断、鉴别诊断方面进入了一个传统病理学极少涉及的领域,使病理诊断提高到了新的水平.近几年发展的PV法又称为两步法使得免疫组化染色技术更加简单快速,背景更加清晰.本院病理科细胞涂片均采用中性福尔马林液固定,本文对细胞学检查疑似阳性的涂片,将HE切片褪色处理后行免疫组化染色的体会介绍如下.
作者:方杰;盛晓光;吴嘉端 刊期: 2011年第11期
目的 研究食管鳞癌及食管黏膜组织中的细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)及其活化形式蛋白(P-ERK)的表达情况,并与食管癌临床病理特征进行相关性分析,探讨ERK及其活化形式蛋白在食管鳞癌发生发展中的作用.方法 采用Western blotting法检测食管癌组织与黏膜组织中ERK及P-ERK蛋白的表达情况,并分别从食管鳞癌患者年龄、性别、病理分化程度、临床分期及淋巴结有无转移等方面进行相关性研究.同时,采用免疫组化SP法从食管鳞癌病理分化程度、临床分期及淋巴结有无转移方面进一步检测ERK及P-ERK与食管鳞癌的相关性.结果 由Western blotting法结果可以看出,ERK及P-ERK在食管癌组织中表达明显增强,而在食管黏膜组织中则呈低表达,差异均有统计学意义(P<0.01).ERK在患者的年龄、性别和分化程度各组间的表达差异无显著性(P>0.05),而在临床分期、淋巴结转移各组间差异有显著性(P<0.05),且T3-4期患者ERK及P-ERK蛋白的表达强度明显高于T1-2期患者;食管鳞癌淋巴结发生转移患者ERK及P-ERK蛋白的表达强度明显高于无淋巴结转移患者.免疫组化结果与Western blotting结果一致.结论 ERK及P-ERK蛋白在食管鳞癌组织发生、发展中起关键作用,对研究食管癌与ERK转导途径相关的抗肿瘤药物有重要的参考价值.
作者:赵萌;刘月平;刘世正;王小玲 刊期: 2011年第11期
目的 探讨广西地区人群XPF基因RS744154多态性与胃腺癌发病风险及其临床病理特征的关系.方法 应用TaqMan-PCR方法对99例胃腺癌患者及284例正常人群的XPF基因RS744154多态性进行检测,并分析各基因型与胃腺癌患者临床病理特征的关系.结果 (1)XPF基因3种基因型(即XPF-GG、-GC和-CC型)在胃腺癌组与对照组中的分布差异具有统计学意义,以XPF-GG基因型为参照,其中携带XPF-CC者胃腺癌的发病风险增加(CC对应比值比OR为2.60);(2)分层分析显示,带风险基因型(即XPF-GC/CC)的男性、汉族或高龄者发病风险分别是不带风险基因型者的2.25倍、1.95和3.00倍(P<0.05);(3)XPF-GG、GC/CC基因型在肿瘤直径≤5 cm和>5 cm患者中出现频率分别为43.75%、71.64%和56.25%、28.36%,两者差异有统计学意义(χ2=7.198,P=0.007,OR=3.69);(4)XPF基因多态性与胃腺癌患者肿瘤发生部位、浸润深度、病理分级、Laurén分类、淋巴结转移和TNM分期均无相关性;(5)HP感染发生率在不同基因型胃腺癌患者中差异无统计学意义.结论 XPF基因RS744154多态性与广西人群胃腺癌发病风险相关,在男性、汉族及高龄者更为明显.癌旁胃黏膜HP感染与XPF基因RS744154多态性之间无显著相关性,同时其多态性也与影响胃腺癌预后的临床病理特征无相关性.
作者:王名法;王超;马韵;邓卓霖;黄永秩;王华;梁秀就;廖文莉;龙喜带 刊期: 2011年第11期
随着比较基因组杂交(comparative genomic hybridization,CGH)技术在研究肿瘤相关染色体异常方面的应用,已发现在食管癌中存在大量染色体基因组拷贝数变化,其中一些拷贝数变化与食管癌的转移、预后及病理分期等相关.利用高分辨率、高通量微阵列比较基因组杂交芯片(array based comparative genomic hybridization,array-CGH)进一步对基因拷贝数变化及候选基因进行鉴定、分析,为食管癌发生、发展以及早期诊断、预测预后等提供有价值的理论依据.本文就食管癌比较基因组杂交研究现况进行综述.
作者:常爱敏;刘春霞;陈云昭;李锋 刊期: 2011年第11期
神经母细胞瘤是小儿常见的颅外实体瘤,其内有淋巴管生成的研究在小儿神经母细胞瘤的文献中少有报道[1,2].由于淋巴管内皮细胞特异性抗体D2-40的广泛应用,使区分血管与淋巴管成为可能.本文应用D2-40与CD56双重免疫组化染色法,探讨小儿神经母细胞瘤中淋巴管生成的意义.
作者:曾荣新;夏健清;曹毅;李丽萍;牛会林 刊期: 2011年第11期
笔者就2010年第4版消化系统肿瘤WHO新分类中上皮性肿瘤、神经内分泌肿瘤、间叶肿瘤和胃肠道上皮性肿瘤分类特点分别在本刊今年第4、7期作了解读[1,2].与前一版分类相比[3,4],第4版在肝脏、胆道和胰腺肿瘤方面也发生较大变化:不但增加了一些新肿瘤类型或组织学亚型,还在许多上皮性肿瘤的分子病理学和遗传学研究等方面取得一定进展,现介绍如下.
作者:周晓军;樊祥山 刊期: 2011年第11期
目的 探讨颈部胸腺样分化癌(carcinoma showing thymus-like differentiation,CASTLE)的临床病理类型、肿瘤组织来源和鉴别诊断.方法 对2例CASTLE进行光镜观察和免疫组化标记,并复习相关文献.结果 2例CASTLE均为女性,中位年龄26.5岁.以颈前包块,声音嘶哑就诊.肿瘤位于颈部软组织和甲状腺内,包膜完整,囊实性.镜检:例1肿物为腮裂样囊肿结构,囊壁见胸腺样组织和甲状腺微小乳头状癌组织.例2肿物在甲状腺内呈岛状、巢状分布,岛间有纤维分隔,瘤细胞梭形、合体样,可见胸腺小体样结构,并向鳞状上皮分化,形似鳞状细胞癌.间质伴淋巴细胞浸润,形似甲状腺髓样癌.结论 CASTLE是一类具有良、恶性胸腺上皮样肿瘤结构的甲状腺恶性肿瘤.良性胸腺上皮样特征可表现为胸腺样囊肿,并可向甲状腺微小乳头状癌分化;恶性胸腺上皮样特征多类似甲状腺鳞癌或甲状腺髓样癌,易误诊.结合肿瘤部位、病理学特征及免疫组化CD5、CD117、CK19检测有助鉴别.
作者:雷伟华;谭敏华;胡志雄;邹绮嫦;郭锦辉;陈威;成卓梅;邓超桦 刊期: 2011年第11期
目的 探讨凋亡相关蛋白Caspase-3及其上游的Caspase-8、Caspase-9在肿瘤血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)中的作用.方法 建立C57BL小鼠B16恶性黑色素移植瘤模型,并随机分为Caspase-3抑制剂组、Caspase-8和Caspase-9抑制剂联合用药组、对照组,待成瘤后每日分别注射Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9抑制剂,记录肿瘤体积并绘制肿瘤生长曲线.通过免疫组化-PAS双染法检测并计数各组肿瘤组织VM的形成数目;通过明胶酶谱法检测肿瘤组织中MMP-2和MMP-9的活性.结果 与对照组相比,Caspase-3抑制剂组和Caspase-8、Caspase-9抑制剂联合用药组肿瘤体积的生长速度较缓慢,差异有统计学意义(P<0.05),Caspase-3抑制剂组和Caspase-8、Caspase-9抑制剂联合用药组肿瘤组织中VM的数量小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),对照组MMP-2、MMP-9的活性强于Caspase-3抑制剂组,差异有统计学意义(P<0.05),对照组MMP-9的活性强于Caspase-8、Caspase-9抑制剂联合用药组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 Caspase家族在恶性黑色素瘤VM的形成过程中起重要作用.
作者:赵建民;孙保存;刘艳荣;赵秀兰;宗文康;古强;董学易;赵楠 刊期: 2011年第11期
患者女性,46岁.因左膝疼痛不适伴肿胀3个月就诊.患者既往无外伤史.MRI示肿块位于外上髁股四头肌与股骨之间的髌上囊内(图1).临床诊断:左膝滑膜炎,髌上囊肿块.
作者:周隽;蒋智铭;张惠箴 刊期: 2011年第11期
目的 探讨胃腺癌中多药耐药基因蛋白P-gp(P-glycoprotein,P-gp)、ToPoⅡ(topoisomerase ToPoⅡ)、GSTπ(glutathione-S-transferase,GSTπ)、MGMT(O6-methylguanine-DNA-methyltransferase,MGMT)和TS(thymidylate synthase,TS)的表达情况及临床意义.方法 采用免疫组化SP法对74例原发性胃腺癌组织与10例癌旁正常胃黏膜组织中P-gp、ToPoⅡ、GSTπ、MGMT和TS的表达进行检测,并结合其临床病理资料进行综合分析.结果 74例胃腺癌中P-gp、ToPoⅡ、GSTπ、MGMT和TS的阳性率分别为37.8%、63.5%、63.5%、78.4%和10.8%;5种蛋白在10例正常胃黏膜组织中的阳性率分别为20.0%、0、30.0%、40.0%和0.ToPoⅡ、GSTπ和MGMT在胃腺癌组的阳性率明显高于正常组(ToPoⅡ:P<0.01,GSTπ:P<0.05,MGMT:P<0.05).P-gp的表达与临床分期和脉管内有无癌栓相关(P<0.05,P<0.01);GSTπ的表达与侵犯深度相关(P<0.01);TS的表达与淋巴结有无转移相关(P<0.01).结论 ToPoⅡ、GSTπ和MGMT在胃腺癌中过表达与胃腺癌多药耐药相关,P-gp、GSTπ和TS与胃腺癌的侵袭性和预后有一定关系.P-gp、ToPoⅡ、GSTπ、MGMT和TS的联合检测对化疗药的筛选有重要的指导意义.
作者:李艳;章明放;郭雪西;李彦敏;蔡文娟;王政禄 刊期: 2011年第11期
目的 探讨化生性胸腺瘤(metaplastic thymoma)的临床与病理学特点.方法 对1例少见的化生性胸腺瘤进行光镜下组织学检查,同时进行免疫组化标记CK(AE1/AE3)、vimentin、CD99、TdT、CD99、CD3、CD5、CD20、CD34、CD43、CD57、calretinin、VEGF及Ki-67,并复习相关文献.结果 患者女性,45岁,左侧纵隔有一包膜完整的肿块,组织学特征具有明显双相性分化的肿瘤,由互相盘绕的上皮岛和束状梭形细胞组成,并可见出血囊性变的区域.免疫组化染色上皮细胞区域:CK(AE1/AE3)强阳性,vimentin阴性;梭形细胞区域:vimentin弥漫阳性,CK(AE1/AE3)及EMA阴性,Ki-67增殖指数1%;间质淋巴细胞:CD3、CD5、CD20、CD43均阳性,TdT和CD99均阴性.结论 化生性胸腺瘤是一种少见的交界性或低度恶性的肿瘤,根据组织学特征及免疫组化检测可做出明确诊断.
作者:夏钰弘;杨树东;杨国仪;洪建刚 刊期: 2011年第11期
目的 研究肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)在食管鳞癌中的表达及其与肿瘤血管形成之间的关系.方法 应用免疫组化PV两步法检测64例食管鳞癌组织及20例癌旁正常组织中HGF及CD34的表达情况,并计数微血管密度(microvessel density,MVD).结果 HGF在食管鳞癌中的表达(76.6%)高于癌旁正常组织(15.0%,P<0.05),且与肿瘤直径、分化程度及淋巴结转移有关;食管鳞癌组织的MVD值(38.87±17.55)/mm2明显高于癌旁正常组织的MVD值(15.10±3.76)/mm2(P<0.05),肿瘤直径>5 cm,有淋巴结转移及侵袭较深的肿瘤MVD值高(P<0.05);食管鳞癌中HGF阳性组MVD值为(42.25±16.50)/mm2,高于HGF阴性组MVD值(27.89±16.83)/mm2(P=0.005),且MVD值与HGF的表达之间具有相关性.结论 HGF的高表达与食管鳞癌的恶性生物学行为及肿瘤血管生成关系密切,HGF可作为食管鳞癌生物治疗的潜在靶点.
作者:臧茹琨;宋轶鹏;胡立宽;姜玉华 刊期: 2011年第11期
目的 探讨荧光原位杂交(FISH)技术检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因扩增的临床应用价值.方法 采用FISH技术检测57例人NSCLC石蜡组织标本中EGFR基因扩增水平.对于EGFR基因扩增阳性的患者采用酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors,TKIs)药物进行治疗,其余患者采用传统化疗进行治疗.结果 57例NSCLC患者中有18例EGFR基因扩增阳性(31.58%),其中12例为高多体性扩增(66.67%),5例为成簇扩增(27.78%),以肺腺癌为主(72.22%).TKIs靶向药物治疗有效率(RR)、中位生存时间(MST)和1年生存率分别为61.11%、13.5个月和55.56%,对照组分别为35.89%、7.6个月和33.33%,差异均有显著性(P<0.05),前者的疾病控制率(DCR)高于后者,但差异无统计学意义(P>0.05).结论 使用FISH技术检测NSCLC患者EGFR基因扩增水平可以为临床采用TKIs药物治疗提供参考依据.
作者:王晓敏;李军;袁勇;王一羽 刊期: 2011年第11期
目的 探讨具有血管周上皮样细胞分化的肿瘤(perivascular epithelioid cell tumor,PEComa)临床病理特征及免疫表型.方法 对15例PEComa行EnVision两步法免疫组化及特殊染色,并分析其临床表现、病理学特征和免疫组化特点.结果 15例PEComa中13例为女性,且术后无复发.肿瘤可发生在身体任何部位,以肝脏和肾脏多见,有包膜,多为实性,可有出血.特征性组织学改变是肿瘤细胞围绕血管生长.PAS染色显示该肿瘤细胞中有糖原物质沉积,弹力纤维染色显示该肿瘤中的血管壁缺乏弹力层.免疫组化显示所有PEComa病例均明显表达HMB-45、Melan-A、SMA,Ki-67阳性率不高.结论 PEComa是一组具有恶性潜能的肿瘤,多发于女性,来源于血管周上皮样细胞.大部分肿瘤呈良性过程,生物学分级极低,预后良好;极少部分病例可发生转移,预后不佳.免疫组化检测对其组织来源、生物学行为具有提示意义,并可辅助诊断.
作者:徐晓艳 刊期: 2011年第11期
目的 研究骨巨细胞瘤中Skp2(S期激酶相关蛋白2)、p27(周期素依赖性蛋白激酶抑制因子)及E2F-1(细胞周期相关性转录因子家族成员)的表达并探讨其与放射学分期、肿瘤复发等关系.方法 运用免疫组化SP法检测44例骨巨细胞瘤中Skp2、p27及E2F-1的表达情况.结果 Skp2、p27及E2F-1的阳性率分别为65.91%、38.64%和63.64%,在影像学分期1型、2型、3型中的阳性率分别为50%、64.29%、100%(P<0.05),60%、28.57%、10%(P<0.05),50%、71.43%、80%(P>0.05).Skp2、p27及E2F-1在复发组与未复发组的阳性率分别为91.67%、56.25% (P<0.05),8.33%、50%(P<0.05),75.00%、59.38%(P>0.05).Skp2、骨皮质破坏或软组织浸润、手术方式以及p27对复发均有明显影响,其中前两者是骨巨细胞瘤复发的危险因素,后两者(截骨的手术方式、p27)则是骨巨细胞瘤复发的保护因素.Skp2与p27的表达呈负相关(P<0.05).结论 在骨巨细胞瘤中,Skp2与p27的表达均与骨巨细胞瘤的复发有关,二者在骨巨细胞瘤细胞的增殖过程中可能起重要作用.联合检测Skp2与p27可能作为骨巨细胞瘤侵袭状态、复发倾向的判断以及手术治疗方式选择的参考指标.
作者:李翀;李海;冯一中 刊期: 2011年第11期
转录因子E3(translocation facor E3,TFE3)位于X染色体短臂11.22,属于MiT转录因子家族成员.TFE3有许多重要的生物学功能,如参与细胞的生长与维护、DNA依赖型的转录调控、蛋白质翻译时tRNA氨基化等.目前国内外关于TFE3的研究较少,主要集中在Xp11.2易位的相关肾细胞癌、腺泡状软组织肉瘤及血管周上皮细胞肿瘤等.进一步研究TFE3在肿瘤中的作用与分子机制具有重要意义.
作者:王晓卿;王雷;宋林红 刊期: 2011年第11期
目的 探讨p16与CD56标记在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)和良性乳头状增生(benign papillary hyperplasia,BPH)中的表达特点与诊断价值.方法 采用免疫组化EnVision两步法检测46例PTC及22例BPH中p16与CD56蛋白的表达.结果 乳头状癌中p16阳性率以(+~)为主,分布呈癌巢中央区阳性率低、浸润性边缘阳性率高的特点,癌周组织(-).CD56在80%的癌组织中表达缺失,其余病例呈(+~),癌周组织(+).p16、CD56对PTC和BPH的诊断敏感度为98%、80%;特异度为82%、64%;准确度为93%、75%.两者平行联合检测,敏感度达100%,特异性降为55%,如串联联合,特异性升高为91%,敏感度率为78%.结论 p16蛋白是鉴别PTC与BPH的良好标记物,CD56对这两种病变的诊断价值有限,p16、CD56蛋白联合检测并不优越于p16单独标记.
作者:左敏;欧慧婷;李剑;徐洲稳;李红 刊期: 2011年第11期
目的 探讨大脑胶质瘤病(gliomatosis cerebri,GC)的临床、病理学特点,诊断及鉴别诊断.方法 采用免疫组化对2例GC进行检测,并观察其临床、病理形态学、影像学特征.结果 例1男性,43岁,镜下未见正常皮髓质结构,星形细胞增生,密度略高,局部星形细胞三五成群,细胞核有轻度异型性,组织学仅可考虑低级别星形细胞瘤;例2女性,55岁,镜下见星形胶质细胞肿瘤性增生,细胞密度明显增高,细胞核呈圆形短梭形,有一定异型性,增生的细胞部分为星形细胞,其中可见少量胖细胞型星形细胞;部分为少突胶质细胞.结合影像学,2例均诊断为GC,WHOⅢ级.结论 GC是一种少见的胶质细胞肿瘤性弥漫性增生、预后较差的肿瘤.组织病理学可表现为低或高级别星形胶质细胞肿瘤,肿瘤性微血管增生及坏死少见,核分裂少见;MRI显示肿瘤累及大脑半球3个以上脑叶,多呈弥漫性生长.确诊依靠影像学与组织学密切结合,以避免漏诊、误诊.
作者:王瑾;刘志钦;杨光之;王鲁平 刊期: 2011年第11期
匀耘染色是病理形态学诊断常用的方法.一张优质的匀耘染色切片是正确诊断的前提,其细胞核和细胞质的对比染色必须是清晰的.而在日常外检制片过程中由于一些人为因素的影响,匀耘切片偶尔会出现细胞核发灰的现象,即组织结构模糊不清,细胞核淡染,甚至核内见不到染色质等.这种匀耘切片使病理诊断困难或误诊.引起这种现象的原因有很多种[员原猿],如:术后新鲜组织未能及时固定致组织有一定程度的自溶;固定液种类和浓度的选择有误;取材的组织块太厚或脱水时间不足引起脱水不彻底;浸蜡时间过短、过久或浸蜡温度过高(特别是在包埋时,如果标本量太大,不能及时包埋极易引起组织块浸蜡时间过久)等.笔者对固定不良、浸蜡过久等引起的匀耘核灰染切片进行多种实验,找出一种纠正匀耘核灰染的方法.
作者:汪晓军;高凌云 刊期: 2011年第11期