姜振宇；宋晓燕；林海；姚程
目的:克隆单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)基因,并在大肠杆菌中表达,通过免疫家兔,获得HSV-TK多克隆抗体,为进一步研究HSV-TK的功能奠定基础.方法:从纯化的单纯疱疹病毒(HSV)中提取病毒基因组,用PCR特异性扩增HSV-TK全长基因,克隆人表达载体pRSET B中进行表达,以纯化的表达产物免疫家兔制备多克隆抗血清,进行Western blotting鉴定.结果:用IPTG诱导后,表达出相对分子质量(Mr)约43 000的融合蛋白,免疫家兔制备的兔血清,第2～5周每周采血1次,Western blotting检测均获得特异性蛋白带;后一次样品3个稀释度(1:1 000、1:3 000、1:5 000)的Western blotting分析仍可以检出蛋白质带.结论:成功获得了特异性强和滴度高的HSV-TK多克隆抗体.
作者：张煜；于湘辉；查晓；王安荣；孔维 刊期： 2008年第06期
关于阿普唑仑中毒的西药救治方法已有很多报道,但单独应用复方麝香注射液救治阿普唑仑中毒性昏迷成功的病例尚未见报道,现将此病例报道如下.1 临床资料患者,男性,35岁.患有甲状腺功能亢进1年,曾接受正规治疗,近期病情稳定.患者2 h前因生气口服阿普唑仑(具体用量不详)后呕吐1次,继而昏迷,被家人急送本院.在急诊室诊断为急性药物中毒,给予清水洗胃后收入内科.查体：血压120/90 mmHg,脉搏60次?min-1,体温36.0℃,呼吸浅,慢意识丧失,浅昏迷,双侧瞳孔缩小,对光反射减弱,病理反射未引出.
作者：何红丽；朱冬元 刊期： 2008年第06期
本实验选用苦参、黄柏、龙胆草及百部4味中药,运用正交实验筛选中药组方,为后续研究提供理论依据.1 材料与方法 白色念珠菌由霉菌性阴道炎患者白带标本中临床分离.培养基为沙氏葡萄糖琼脂及液体培养基.药物为苦参、黄柏、龙胆草及百部.选用三水平四因素L9(34)正交表进行正交设计.四因素三水平分别为苦参A、黄柏B(3、6、10)、百部C(5、10、15)、龙胆草D(3、4.5、6).
作者：王莘；王彬彬；陈薇；王维 刊期： 2008年第06期
目的:研究去氢表雄酮(DHEA)及其代谢物去氢表雄酮硫酸酯(DHEAs)对HepG2和HT-29细胞增殖的抑制作用及其机制.方法:HepG2和HT-29细胞分别分为对照组、不同浓度(1、10、50、100及200 μmol·L-1)DHEA组和DHEAs组,孵育8、24、48及72 h后,分别采用噻唑蓝(MTT)比色法和BrdU测定法检测DHEA对肿瘤细胞的生长抑制率,同时测定3-羟基-3-甲基戊二酸单酰A还原酶(HMGR)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)及乳酸脱氢酶(LDH)活性.结果:①MTT法结果显示,与对照组比较,不同浓度DHEA组HepG2和HT-29细胞增殖抑制率均显著增加(P<0.05).作用24 h时,100 μmol·L-1 DHEA组细胞增殖抑制率降低显著(P<0.05),而DHEAs组差异无显著性(P>0.05).②BrdU法结果显示,当DHEA浓度在50、100和200 μmol·L-1时细胞的生长均显著受到抑制,尤其以HepG2细胞的生长抑制率高(P<0.05).③DHEA对HepG2细胞HMGR活性抑制率为62%,对HT-29细胞HMGR活性抑制率为51%,而DHEAs则无明显作用.④100 μmol·L-1 DHEA抑制G6PD的效力为85%,而DHEAs的抑制效力仅为6%.⑤DHEA和DHEAs对细胞LDH的活性影响组间比较差异无显著性(P>0.05).结论:DHEA对HepG2和HT-29两种肿瘤细胞系均具有较强的抗增殖作用,能明显降低细胞的G6PD或HMGR活性,DHEAs则无明显作用.
作者：姜艳芳；赵平伟；谭岩；方艳秋；松崎静司 刊期： 2008年第06期
目的:研究taurolidine通过增强Bax和Bad蛋白表达,降低Bcl-2蛋白表达,提高小鼠黑色素瘤B16-F10细胞的辐射敏感性的作用及机制.方法:流式细胞仪检测0、10、25、50,100和150μmol·L-1taurolidine诱导B16-F10细胞凋亡的百分比;细胞克隆实验检测放射增敏性;Western blotting分析检测蛋白的表达.结果:50μmol·L-1taurolidine作用于B16-F10细胞48 h,可诱导5%的细胞凋亡,随作用时间的延长及taurolidine浓度的增加,细胞凋亡的百分率增加(P<0.05),呈显著的时效和量效关系;细胞克隆存活实验显示,当25μol·L-1 taurolidine与2 Gy X射线照射联合作用B16-F10细胞时,与单纯给药组和单纯照射组比较,给药联合放疗组的细胞存活率显著降低(P<0.05),并随着药物浓度及照射剂量的增加细胞存活率进一步下降,随着taurolidine的浓度逐渐提高,小鼠黑色素瘤细胞放射增敏比(SER Do和SER Dq)增高,50μmol·L-1 taurolidine组与10μmol·L-1组比较差异有显著性(P<0.05);同时促凋亡蛋白Bax和Bad的表达增强,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达下降.结论:taurolidine联合X射线照射通过调节Bcl-2家族蛋白协同诱导小鼠黑色素瘤细胞凋亡,从而提高了放射敏感性.
作者：孙宝胜；刘士新；王铁君；黄国民；龚守良；刘林林 刊期： 2008年第06期
目的:评估应激和尼古丁两者共同作用对大鼠实验性牙周炎进展的影响,为临床牙周炎患者治疗提供理论指导.方法:40只Wistar雄性大鼠,采用尼龙丝线结扎左上颌第二磨牙颈部,建立实验性牙周炎模型,随机分为性应激组(S组)、尼古丁组(Ni组)、尼古丁+应激组(Ni+S组)和对照组(C组),第2、4、6、8和10天分批处死后大鼠,进行组织学观察和测量.结果:与对照组比较,各实验组牙槽骨吸收破坏明显,其中Ni+S组牙槽骨破坏程度为显著.牙槽骨吸收率在第6、8和10天各实验组明显高于C组(P<0.01),第6和10天Ni组和Ni+S组高于S组(P<0.01),第10天Ni+S高于Ni组(P<0.05);Ni组在第6、8和10天明显高于C组(P<0.01),第6天明显高于S组(P<0.01).结论:应激可以明显增强尼古丁对牙周组织的破坏作用,两者在牙周组织破坏过程中具有协同作用.
作者：李博；林崇韬；张颖丽；周春华 刊期： 2008年第06期
目的:研究卵巢癌组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)的表达,探讨PI3K在卵巢癌发生及发展中的作用.方法:应用RT-PCR检测10例卵巢癌组织、10例卵巢良性肿瘤组织及10例正常卵巢组织中PI3K mRNA表达.应用免疫组化方法检测PI3K蛋白在60例卵巢癌、24例卵巢良性肿瘤及24例正常卵巢组织中的表达.结果:PI3K mRNA在卵巢癌组织中表达量高于正常卵巢及卵巢良性肿瘤(P<0.01),在卵巢良性肿瘤组织中表达量与正常卵巢组织表达量比较差异无显著性(P>0.05).PI3K蛋白表达主要定位于细胞质和(或)胞核.PI3K蛋白在卵巢癌组的阳性表达率明显高于正常卵巢组和卵巢良性肿瘤组(P<0.01);PI3K蛋白的表达强度与病理分级及临床分期有关,卵巢癌分化越差PI3K蛋白表达越强(P<0.05),临床分期越晚,其PI3K蛋白阳性表达率也越高(P<0.05).结论:PI3K mRNA和蛋白在卵巢癌组织表达明显增强,PI3K基因在卵巢癌发生及发展中起促进作用.
作者：张晓霞；费军伟；于晓伟；倪劲松；王芯蕊；李荷莲 刊期： 2008年第06期
为探讨脂肪肝与胆囊结石发病的关系,本文作者对近3年来本院体检及就诊的40岁以上376例患者彩色多普勒超声检查结果进行对比分析,发现脂肪肝患者胆囊结石发病率明显高于无脂肪肝者,现报道如下.
作者：丁怡敏；马志辉；门洪君 刊期： 2008年第06期
目的:观察眯唑安定对大鼠海马脑片突触长时程增强(LTP)效应的影响,并探讨其影响记忆的机制.方法:126只雄性SD大鼠,断头后取出海马组织,制备400μm海马脑片.取42张脑片,随机分为6组(n=7):对照组及咪唑安定0.1、0.5、1.0,2.0和5.0μmol?L-1组.各组脑片分别灌流人工脑脊液(ACSF)及咪唑安定0.1、0.5、1.0、2.0和5.0μmol·L-1.采用细胞外微电极记录技术,记录海马脑片CA1区细胞外群体峰电位(PS)的变化.另取84张脑片,随机分为12组(n=7):LTP组,眯唑安定LTP 0.1、0.5、1.0、2.0和5.0μmol·L-1组,印防己毒素组,荷包牡丹碱组,CGP35348组,印防己毒素+咪唑安定组,荷包牡丹碱+眯唑安定组,CGP35348+咪唑安定组.各组脑片分别灌流ACSF及其他各组相对应药物.海马脑片记录PS30 min后,施以100Hz的高频强直刺激(HFS),诱发LTP,观察各组脑片HFS后PS幅值的变化.结果:与对照组比较,咪唑安定1.0、2.0和5.0μmol·L-1组给药后PS幅值明显降低(P<0.05或P<0.01).LTP组HFS后PS幅值增高,较刺激前增加了52%±12%(P<0.01).与LTF组比较,咪唑安定LTP 0.1μmol·L-1组HFS后其Ps幅值无明显改变(P>0.05),眯唑安定LTP 0.5、1.0、2.0及5.0 μmol·L-1组HFS后其PS幅值均明显降低(P<0.01).印防己毒素+咪唑安定组、荷包牡丹碱+咪唑安定组HFS后PS幅值与HFS前和咪唑安定LTP 2.0μmol·L-1组比较均明显增加(P<0.01),与LTP组比较差异无显著性(P>0.05).CGP35348+眯唑安定组HFS后PS幅值与HFS前和咪唑安定LTP 2.0 μmol·L-1组比较均无明显改变(P>0.05),与LTP组比较明显降低(P<0.01).结论:咪唑安定能够抑制海马LTP的形成而影响记忆功能,其作用机制与活化海马γ-氨基丁酸(GABA)A受体有关.
作者：冯春生；王艳姝；仇金鹏；岳云；麻海春 刊期： 2008年第06期
股骨颈骨折是老年人的常见损伤,以前主要以非手术治疗为主,因卧床时间长致并发症发生率高,死亡率高.随着治疗方法的改进及更新,目前主要采用人工股骨头置换手术治疗,疗效满意.现对本院有详细随访资料的36例老年人股骨颈骨折病例进行总结,报道如下.
作者：林士钊；魏霖；陈世明；邹志新 刊期： 2008年第06期
目的:探索在毕赤酵母中表达人β-淀粉样蛋白1-42(hAβ1-42)的可行性.方法:以含有hAβ1-42基因的质粒为模板,采用PCR方法扩增所需DNA片段,与毕赤酵母表达载体pPICZa连接,构建重组质粒pPICZa-hAβ1-42并进行DNA测序分析.将其电击转化毕赤酵母菌株X-33,经SDS-PAGE和Western blotting分析表达产物.结果:经测序证实,获得的hAβ1-42序列与基因合成的完全一致.SDS-PAGE显示,在约4 000处有一蛋白带,Western blotting证明表达产物与抗hAβ1-42抗体有特异性免疫反应.结论;本研究在毕赤酵母中成功地重组表达hAβ1-42.
作者：申茉函；王全才；牟旭鹏；陈洪波；牛超；颜炜群 刊期： 2008年第06期
目的:研究蒺藜皂苷(GSTT)对成年豚鼠心室肌细胞动作电位和钾通道的影响,初步探讨其抗心律失常的作用及机制.方法:分离豚鼠心肌细胞,建立缺氧模型,分为正常对照组、模型组及GSTT10和30 mg·L-1组,采用全细胞膜片钳记录各组成年豚鼠单个心肌细胞的电位变化及测定钾通道电流.结果:与模型组比较,GSTT 30 mg·L-1组缺氧细胞动作电位平台期即动作电位复极时程(50%和90%)延长(P<0.01).将保持电位控制在-40 mV,测试电位从-100 mV到+100 mV,阶跃命令为+10 mV,时程300 ms.正常对照组豚鼠心室肌细胞钾通道处于关闭状态,GSTT 10和30 mg·L-1剂量组在+80 mV时其峰值电流分别为(1.19±0.20)和(1.15±0.10)nA,与模型组[(1.50±0.20)nA]比较差异有显著性(P<0.05和P<0.01).结论:GSTT可阻碍缺氧导致的钾电流增加,即减少缺氧引起的钾离子外流,改善胞内钾离子丢失状态,显著延长缺氧细胞动作电位复极时程,延长有效不应期,从而改善缺氧及钾丢失导致的心肌细胞电生理异常,减少心律失常的发生,保护心肌细胞.
作者：李红；张爽；石卓；杨世杰 刊期： 2008年第06期
目的:建立分离、纯化大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的方法,探讨损伤肝组织匀浆对MSCs的诱导分化作用.方法:采用密度梯度离心、贴壁培养法分离培养大鼠MSCs,以含10%损伤肝组织匀浆、10%FBS的L-DMEM培养基诱导培养,并在不同时间点采用免疫组织化学方法(SP)检测甲胎蛋白(AFP)和白蛋白(Alb)的表达.结果:MSCs在含10%损伤肝组织匀浆的10%FBS L-DMEM培养基中培养,呈类上皮样细胞.诱导组在培养7 d时,大部分细胞呈AFP阳性表达(75.2%),与对照组比较差异有显著性(P<0.05);诱导培养14、21和28 d AFP表达阳性率分别为35.2%、12.3%和2.0 0A,组间比较差异有显著性(P<0.05);诱导组在培养7 d仅少数细胞Alb呈阳性表达(14.6%),诱导培养14、21和28 d Alb表达阳性率分别为67.6 oA、88.9%和95.6%,诱导组与对照组比较及不同时间点比较差异均有显著性(P<0.05).结论:此方法可获得纯度较高MSCS,损伤肝组织匀浆可诱导MSCs表达AFP和Alb.
作者：赵文静；方艳秋；齐亚灵；刘婷；牛凤兰；谭岩 刊期： 2008年第06期
目的:探讨中国北方汉族人群13q32区域亲核素β3(KPNB3)基因多态性与精神分裂症各种临床表型的关系.方法:收集752例中国北方汉族人群精神分裂症患者和909例健康对照全血样品,提取基因组DNA,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法,检测KPNB3基因rs626716单核苷酸多态性位点基因型.应用拟合优度x2检验分析基因型分布频率是否符合Hardy-Weinberg平衡定律,应用x2检验和数量性状分析分别进行等位基因、基因型以及各种临床表型的关联性分析.结果:精神分裂症病例组和健康对照组rs626716位点基因型分布频率均符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05).等位基因关联分析表明,病例组和对照组等位基因C和T的频率分布差异无显著性(P>0.05);基因型关联分析表明,病例组和对照组C/C、C/T和T/T 3种基因型的频率分布差异无显著性(P>0.05);等位基因频率与精神分裂症各种临床表型的关联性分析结果表明,rs626716与精神分裂症各种临床表型不相关(P>0.05).结论:KPNB3基因rs626716位点可能与中国北方汉族人群精神分裂症发病及其临床表型无关,但是不能排除该基因其他SNPs位点与精神分裂症有关联.
作者：武宁；王珍琦；蔡敏；李勇峰；侯佳妹；张萱 刊期： 2008年第06期
1 资料与方法符合冠心病诊断参考标准、具有典型的心绞痛发作及心电图改变的患者120例,随机分为3组：①刺五加注射液治疗组45例(男性30例,女性15例,年龄55～69岁),刺五加注射液(黑龙江省乌苏里江制药厂)60 mL加入5%葡萄糖注射液250 mL,每日1次静点,2周为1个疗程.
作者：李向辉；刘洋 刊期： 2008年第06期
目的:探讨20(S)-人参皂苷Rg3(SPG-Rg3)诱导人大细胞肺癌细胞NCI-H460凋亡及其机制.方法:MTT法测定NCI-H460细胞的增殖,依据其半数抑制浓度(IC50)将SPG-Rg3实验组分为25、50及100 mg·L-1组,并设空白对照组.采用AO/EB荧光双染、免疫细胞化学染色、Rhodamine 123摄取法及Fluo-3/AM染色分别观察NCI-H460细胞的凋亡、Bcl-2及Bax蛋白的表达量、线粒体跨膜电位及细胞内游离钙离子浓度.结果:SPG-Rg3能抑制NCI-H460的生长,抑制率与浓度呈正相关(r=0.764,P<0.05),其IC50值为47.97 mg?L-1;SPG-Rg3组NCI-H460细胞呈现明显凋亡改变;SPG-Rg3 100 mg?L-1组细胞内Bcl-2蛋白的表达量明显低于空白对照组(P<0.01)f SPG-Rg3各浓度组细胞Bax蛋白的表达量均明显高于对照组(P<0.001),并随浓度的增大而增加(P<0.01);各浓度组细胞内Bax/Bcl-2比值均高于对照组,细胞内线粒体跨膜电位则均低于对照组(P<0.01),并随药物作用浓度的增加而减少,组间比较差异有显著性(P<0.01);各组细胞内游离钙离子浓度明显高于对照组(P<0.01).结论:SPG-Rg3能够明显抑制细胞的增殖,诱导细胞凋亡.其作用机制可能是SPG-Rg3促进细胞内Bax蛋白的表达并增加Bax/Bcl-2比值,降低线粒体跨膜电位,提高细胞内游离钙离子浓度,终经线粒体通路诱导细胞凋亡.
作者：王光兰；崔俊生；王心蕊；石博；高静；倪劲松 刊期： 2008年第06期
目的:用人型结核杆菌H37Rv诱导BALB/c系小鼠建立肺结核动物实验模型.方法:利用自动雾化吸人感染装置(IES)对BALB/c系小鼠进行不同时间(0.5～4.0 h)、不同雾化液量(2.5、5.0及10.0 mL)及不同浓度(104～108cfu)的Hs37Rv雾化,观察动物的临床表现及肺内肉芽肿病理改变,并对感染动物的肺组织匀浆进行结核杆菌培养,计数菌落数,探讨适实验条件.结果:使用5 mL雾化液(细菌+生理盐水)雾化90 min后,雾化液无残留,可见感染动物明显体毛湿润.雾化吸入结核菌数为104、106和108 cfu时,感染动物的肺组织匀浆在小川培养基培养4周后的菌落数分别为1.10±0.83、77.00±11.87和1 020.00±345.83 cfu.其中106以上时,动物在3周后开始出现死亡.结论:成功地使用IES制备了小鼠肺结核模型,雾化感染实验的适条件为5 mL雾化液(细菌+生理盐水)雾化90 min.雾化吸人结核菌数佳为106 cfu.
作者：华树成；李丹；杨明 刊期： 2008年第06期
1 临床资料患者,男性,46岁.无明显诱因出现双眼痛、视力突然下降,伴头痛、头昏及耳鸣9 d入院.入院后查体：心肺检查未见异常.眼科情况：右眼视力0.05(不能矫正),眼压17 mmHg,角膜后灰白色KP(+),前房深度正常,房水闪辉(+),虹膜纹理清,瞳孔圆形居中,直径约4 mm,对光反射迟钝,玻璃体点状混浊;眼底视盘界不清,色淡红,后极部视网膜水肿,2：00-4：00位周边部视网膜青灰色隆起,其上血管迂曲,高处+3D视清,血管走行大致正常,黄斑中心凹反射消失.
作者：李林；吕华毅 刊期： 2008年第06期
目的:将人低氧诱导因子1-α(HIF1-α)转染人骨髓内皮祖细胞(EPCs),为探讨转染HIF1-α基因的EPCs对梗塞心肌血管修复及血管再生能力提供依据.方法:密度梯度法分离人骨髓中单个核细胞,以1×106?mL-1细胞浓度接种于用纤维连接蛋白包被的培养皿中,培养14 d后采用RT-PCR法检测内皮细胞特异性成分ecNOS、flk-1的表达;采用acLDL-Dil和FITC-UEA-1对细胞染色;采用LipofectamineTM 2000介导PCDNA3.0-HIF1-α质粒转染EPCs,RT-PCR检测HIF1-α的转录;ELISA检测细胞上清中VEGF表达;免疫印迹法检测HIF1-α蛋白表达.结果:培养第5天起,部分圆形单核细胞转化为梭形贴壁EPCs,7 d左右出现由数十个细胞形成的细胞集落,10 d后形成明显克隆.RT-PCR检测ecNOS在548 bp处出现条带,flk-1在819 bp处出现条带;acLDL-Dil和FITC-UEA-1双染色阳性;RT-PCR在383 bp处出现特异性条带;ELISA转染HIF1-α的EPCs上清中VEGF含量为(20.53±2.33)μg·L-1,未转染HIF1-α的EPCs上清中VEGF含量为(3.96±1.67)μg·L-1,两组比较差异有显著性(P<0.05).免疫印迹法(Western blotting)检测在相对分子质量120 000处出现条带.结论:PCDNA3.0-HIF1-α质粒成功转染EPCs.
作者：姜振宇；宋晓燕；林海；姚程 刊期： 2008年第06期
为了解大学生神经衰弱的病因,对2001-2006年本院在校学生神经衰弱病因进行调查分析,现报道如下.1 临床资料2001-2006年,采取填表与门诊结合的方法对北华大学18个系的学生进行问卷调查,发放问卷10 000份,收回7 325份,门诊接诊1 818人次,共计对9 143名在校不同年级的大学生进行调查,并根据<实用内科学>中规定的神经衰弱的诊断原则及诊断标准确诊,排除精神分裂症、抑郁症和各种慢性病所导致的神经综合征.
作者：郭莉娟；祝雁；郝曙光 刊期： 2008年第06期
吉林大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：吉林大学
