周珺；贾正平；邱建国；张泉龙；保芸；张汝学
目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)-epigallocatechin-3-gallate,EGCG]对三阴乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和凋亡的影响及其可能作用机制.方法 通过CCK-8实验观察不同浓度EGCG(10、20、40、80、160 mg·L-1)对MDA-MB-231细胞增殖的影响;Hoechst33258染色法观察EGCG对MDA-MB-231细胞凋亡的影响;JC-1法测定细胞线粒体膜电位;caspase-3活性检测试剂盒检测caspase-3活性的变化;Western blot法检测葡萄糖调节蛋白78( glucose regulatd protein 78,GRP78)和caspase-3蛋白表达变化.结果 EGCG能明显抑制MDA-MB-231 细胞增殖,且随EGCG浓度的增加和作用时间的延长而增强,EGCG作用MDA-MB-231 细胞12、24、48 h的IC50分别为69.1、40.4、29.4 mg·L-1.EGCG作用MDA-MB-231细胞24 h后,细胞出现体积变小、染色质聚集、细胞核边缘化等典型的凋亡形态学改变,且随EGCG浓度的增加,MDA-MB-231 细胞凋亡率逐渐增加,线粒体膜电位明显降低,caspase-3活性明显增强,Western blot结果显示EGCG可抑制GRP78蛋白表达,增强活性caspase-3蛋白表达.结论 EGCG能够促进MDA-MB-231凋亡,其机制可能与内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)引起的caspase-3激活有关.
作者：魏芳；刘浩；张配；蒋国君；马琳艳；陈超 刊期： 2013年第05期
目的 研究维甲酸诱导SH-SY5Y细胞分化后对阿片受体表达的影响.方法 1×10-5 mol·L-1维甲酸诱导SH-SY5Y细胞分化6天,[3H-diprenorphine]放射性配体受体结合试验确定阿片受体表达量.结果 维甲酸诱导分化6天后,与对照细胞比较,SH-SY5Y细胞突起增多增长类似轴突,且细胞间形成明显神经纤维网络,细胞生长明显减慢,阿片受体表达提高1.6倍以上.结论 维甲酸明显诱导SH-SY5Y细胞向神经元分化,且分化后细胞阿片受体表达明显上调.
作者：边佳明；吴宁；李锦 刊期： 2013年第05期
目的 研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对PC12大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞缺糖/缺氧损伤的保护作用及其可能的作用机制.方法 建立PC12细胞缺糖/缺氧 (oxygen and glucose deprivation,OGD) 损伤模型,1-640 nmol·L-1 TSA处理细胞,噻唑蓝(MTT)检测对PC12细胞活性的影响,Propidium iodide (PI)和Hoechst 33258染色检测细胞凋亡与坏死,荧光显微镜和流式细胞仪检测各组细胞内活性氧(ROS)的含量.结果 与模型组相比,80 nmol·L-1 TSA可明显提高ODG PC12的细胞存活率,降低细胞内的ROS含量(P＜0.05).结论 TSA对OGD损伤的PC12细胞具有保护作用,其机制可能是通过增加细胞内能量代谢中各种酶的乙酰化水平来应对缺血损伤.
作者：越茂松；黄琼；王进京；季秋虹；季煜华 刊期： 2013年第05期
目的 研究海地瓜硫酸软骨素(Acaudina Molpadioides chondroitin sulfate,AM-CHS)对3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响,并探讨其作用机制.方法 采用传统的鸡尾酒诱导剂诱导分化3T3-L1前脂肪细胞,以MTT法检测AM-CHS对3T3-L1前脂肪细胞及不同分化阶段3T3-L1细胞增殖活性的影响;分别采用油红O染色和甘油三酯(triglycerides,TG)含量测定法评价其对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响.采用RT-PCR法检测脂肪细胞中过氧化物酶体增殖体激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptors gamma,PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白α (CCAAT/enhancer binding protein alpha,C/EBPα)、固醇调节元件结合蛋白-1c (sterol regulatory element binding protein-1c,SREBP-1c)等分化相关基因的mRNA表达水平.结果 AM-CHS能明显抑制3T3-L1前脂肪细胞和成熟脂肪细胞的增殖,抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化过程,以对分化早期的抑制作用强.RT-PCR结果表明,AM-CHS能明显降低脂肪细胞PPARγ、C/EBPα和SREBP-1c mRNA的表达.结论 海地瓜AM-CHS能明显抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖和分化,其作用机制与下调分化相关基因PPARγ、C/EBPα和SREBP-1c的表达有关.
作者：龙腾腾；王静凤；常耀光；贺敏；武凤娟；王玉明；薛长湖 刊期： 2013年第05期
目的 初步探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)抗甲型流感病毒的活性及其作用机制.方法 采用H5N1假病毒检测体系,观察EGCG对A/Thailand/Kan353/2004 H5N1毒株假病毒的抑制作用;采用神经氨酸酶抑制实验进一步分析其作用机制;采用H1N1 FM_1病毒检测体系,根据药物与病毒、细胞的不同作用,通过两种给药方式,评估EGCG对甲型流感病毒FM_1的抑制作用.结果 EGCG能特异性的抑制H5N1假病毒的进入,IC50为145.10 μmol·L-1;EGCG对神经氨酸酶具有抑制作用,IC50为417.20 μmol·L-1,EGCG对预防和治疗给药方式均有一定的抑制作用,其IC50分别为6.88 μmol·L-1和14.83 μmol·L-1,治疗指数分别为58.02和26.92.结论 EGCG在体外具有明显的抗甲型流感病毒作用,其作用机制包括抑制病毒的进入和神经氨酸酶活性.
作者：李湘潋；刘叔文；杨洁 刊期： 2013年第05期
目的 探究大麻素受体在肝星状细胞(HSCs)活化中的作用及姜黄素的干预效应,为阐明肝纤维化发生发展机理及姜黄素抗肝纤维化机制提供依据.方法 MTT法检测CBR1激动剂NADA与拮抗剂AM251,CBR2激动剂JWH015与拮抗剂AM630对HSCs增殖的影响;Western blot实验检测AM251对HSCs中ERK、JNK、p38蛋白表达及磷酸化水平的影响;Western bolt与细胞免疫荧光检测了姜黄素对HSCs中两种类型大麻素受体CBR1与CBR2蛋白表达的影响;Western bolt检测在姜黄素对CBR1激动剂与拮抗剂的刺激下HSCs产生的细胞外基质(ECM)成分α1(I) collagen和Fibronectin的影响.结果 激动CBR1可促进HSCs的增殖,相反拮抗CBR1后则可以抑制HSCs的增殖(P<0.05);而激动CBR2也可抑制HSCs的增殖(P<0.05),但抑制CBR2对HSCs的增殖没有明显的影响(P>0.05).CBR1拮抗剂AM251能够明显抑制ERK与JNK的磷酸化,并呈剂量依赖性的关系(P<0.05,P<0.01),但对p38蛋白表达的影响较小(P>0.05).姜黄素可抑制HSCs中CBR1的表达(P<0.05),对 CBR2蛋白表达的影响则差异没有统计学意义(P>0.05).姜黄素可呈剂量依赖性的抑制CBR1激动剂导致的ECM成分表达的上升,并可协同 CBR1拮抗剂抑制HSCs表达ECM成分的作用(P<0.05,P<0.01).结论 大麻素受体在HSCs的增殖活化过程中具有重要作用,姜黄素可能通过干预大麻素受体信号通路这一途径达到治疗肝纤维化的目的.
作者：张自力；张涉；郭瑶；王妤清；倪雯霞；张衍；孔德松；郑仕中 刊期： 2013年第05期
目的 研究走马胎皂苷成分AG4对不同肿瘤细胞株增殖的影响,检测其对MCF-7细胞凋亡、细胞周期、Caspase-3 和Caspase-9的活性、以及SOD活性和GSH、MDA含量的影响.方法 终浓度为0.51~8.13 μmol·L-1的AG4作用于肿瘤细胞株24~72 h后,采用MTT比色法检测AG4对9种肿瘤细胞株增殖的影响;筛选出对AG4敏感的细胞株,Hoechst染色观察细胞形态学变化;采用流式细胞术检测细胞凋亡和周期变化;采用相应试剂盒分别进行SOD活性和GSH、MDA含量的测定;采用Caspase-3和Caspase-9活性检测试剂盒对Caspase-3和Caspase-9活性进行检测.结果 AG4作用于A549、BeL-7402、BGC-823、C6、EJ、HeLa、HepG2、MCF-7、LS180细胞24 h、48 h和72 h的IC50为3.67~11.1 μmol·L-1,其中MCF-7细胞株对AG4较为敏感,24 h、48 h和72 h的IC50值分别为(3.67±0.61)、(3.76±0.66)和(4.03±0.47) μmol·L-1.高、中两剂量的AG4作用MCF-7细胞24 h后,细胞凋亡形态明显,发生早期凋亡;细胞阻滞在S期;SOD活性和GSH含量降低,MDA含量明显升高;Caspase-3和Caspase-9的活性均明显高于正常对照组.结论 AG4对MCF-7细胞的增殖抑制作用为明显.AG4干预MCF-7细胞内的氧化还原系统、阻滞周期并通过激活线粒体凋亡信号转导通路来诱导细胞凋亡.
作者：郑小丽；董宪喆；穆丽华；廖红波；余冰颖；刘屏 刊期： 2013年第05期
糖皮质激素(glucocorticoids,GC)作为降糖激素的反调激素,它对于维持葡萄糖稳态发挥着巨大的作用[1-2],研究表明[2],GC活性升高与胰岛素抵抗密切相关,GC与其受体结合后,发挥着促进肝糖异生、葡萄糖转运系统异常等多方面作用.本文采用高脂饲料加小剂量STZ联合诱导的大鼠糖尿病模型模拟人类临床2型糖尿病,研究HPA轴的功能变化及HPA轴调节剂,即糖皮质激素受体 (glucocorticoids receptor, GR) 拮抗剂-米非司酮对HPA轴的调节作用,研究其对糖尿病大鼠血糖血脂代谢的影响.
作者：周珺；贾正平；邱建国；张泉龙；保芸；张汝学 刊期： 2013年第05期
目的 探讨人参皂苷Rh2对实验性SD大鼠子宫内膜异位症模型的抑制作用及其机制.方法 外科手术法建立SD大鼠子宫内膜异位症模型,在第2次开腹后按模型异位内膜大小随机分成5组,分别是模型对照组(0.5%羧甲基纤维素钠,0.5% CMC-Na),孕三烯酮组(1.5 mg·kg-1)和Rh2低、中、高剂量组(5、10、40 mg·kg-1);连续灌胃给药21 d后,在末次给药24 h内麻醉解剖大鼠、采血及保存异位内膜组织.HE染色观察异位内膜病理组织学改变;Elisa测定血清中雌激素(Estrogen,E2)、孕激素(Progesterone,P)和抗子宫内膜抗体(Endometrial antibody,EMAb)水平;Western blot检测异位内膜组织中Bcl-2、Bax、Caspase-9、Caspase-3蛋白的表达情况.结果 Rh2(40 mg·kg-1)异位内膜组织明显萎缩,腺体数目明显减少,腺腔萎缩,腔内积液体积减少;Rh2(5、10、40 mg·kg-1)降低E2、P和EMAb的水平;Rh2(5、10、40 mg·kg-1)异位内膜组织中Bax/Bcl-2、Caspase-9和Caspase-3蛋白表达明显升高.结论 Rh2(40 mg·kg-1)可明显抑制实验性SD大鼠异位内膜生长,其作用机制可能与降低E2、P和EMAb水平、上调Bax/Bcl-2蛋白表达、激活细胞凋亡的内源性途径启动因子Caspase-9蛋白、激活执行因子Caspase-3蛋白表达有关.
作者：盛磊；郝树芳；周洁芸；杨英；周娴颖；郭湘洁；李钊；谢淑武；朱焰 刊期： 2013年第05期
目的 观察黄连素干预后四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠肾组织、高糖培养的系膜细胞中S1P2受体表达变化情况,以及对高糖条件下S1P2受体介导的纤维连接蛋白(FN)生成和MAPK信号通路的影响.方法 腹腔注射四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠肾损伤模型.随机分成正常、糖尿病、黄连素低剂量和高剂量组.12周实验结束时比较各组小鼠血糖、肾脏肥大指数(肾重/体重)、尿素氮、血肌酐、24 h尿蛋白等肾功能相关指标的变化.应用Real-time PCR和Western blot方法分别检测肾组织中S1P2受体mRNA和蛋白水平的表达变化.Western blot检测黄连素干预后高糖培养的系膜细胞中S1P2受体、FN表达及MAPK磷酸化改变.结果 黄连素有效抑制糖尿病小鼠血糖升高,明显降低血尿素氮、血肌酐、24 h 尿蛋白等肾功能相关指标,下调肾脏S1P2受体mRNA和蛋白表达.体外研究中黄连素降低高糖培养的系膜细胞S1P2受体蛋白和FN蛋白表达,还不同程度抑制MAPK (ERK1/2、p38MAPK和JNK) 磷酸化水平.结论 减少S1P2受体表达,抑制S1P2-MAPK(主要是ERK1/2和p38MAPK) 通路介导的FN表达增加是黄连素抗糖尿病肾纤维化可能的作用机制之一.
作者：刘慰华；刘世明；林双峰；黄河清 刊期： 2013年第05期
目的 构建Kir2.1/ Kir2.3通道嵌合体,为进一步研究Kir2.1和Kir2.3通道的调控机制打下基础.方法 利用重叠延伸PCR方法构建不同的Kir2.1/ Kir2.3嵌合体质粒:N1P3C3,N3P1C1,N3P3C1,N1P1C3,NIP3C1,N3P1C3.将不同的嵌合体质粒分别用NheI线性化后,转录为cRNA表达于非洲爪蟾卵母细胞,用双电极电压钳记录电流.结果 不同的Kir2.1/ Kir2.3嵌合体质粒构建成功,在非洲爪蟾卵母细胞上可以记录到电流表达.结论 成功构建Kir2.1/ Kir2.3嵌合体并完成了嵌合体通道的异源性表达和电压钳记录.
作者：赵志英；朱宏谦；张璇；刘丽；张国红 刊期： 2013年第05期
目的 探讨枸杞多糖对N-甲基-D天门冬氨酸(NMDA)诱导大鼠视网膜损伤的保护作用及其机制.方法 采用玻璃体内注射NMDA建立大鼠视网膜损伤模型.枸杞多糖(100、200和400 mg·kg-1)于NMDA注射前7天灌胃给药,共14 d.取大鼠眼组织进行病理学观察,同时采用Western blot法测定相关蛋白的表达.结果 枸杞多糖(100、200和400 mg·kg-1)明显抑制NMDA所致视网膜神经节细胞的减少和内丛状层的变薄.枸杞多糖(100、200和400 mg·kg-1)抑制NMDA诱导视网膜NMDAR2A蛋白表达的升高;提高eNOS蛋白表达降低的同时,抑制iNOS蛋白表达的升高.结论 枸杞多糖对NMDA诱导损伤的大鼠视网膜具有保护作用,其机制与调控视网膜中NMDAR2A表达,以及平衡eNOS/iNOS水平有关.
作者：白双；于鑫；杜瑛培；郑萍；郑婕；闫琳；戴贵东 刊期： 2013年第05期
Hedgehog-Pat/Smo-Gli信号转导通路是一条高度保守的信号转导通路,从果蝇到脊椎动物的胚胎发育、组织分化等特定的过程中,该通路调控着细胞的分化与增殖,发挥着中轴器官的形态发生作用.该通路在肿瘤特别是在上皮类肿瘤发生中同样发挥着重要的作用.近来发现该通路与肿瘤的侵袭转移关系密切.该文就该通路及其在肿瘤侵袭转移中的研究进展作一综述.
作者：路景涛；何伟；宋莎莎；魏伟 刊期： 2013年第05期
乙酰肝素酶(heparanase,Hpa)是哺乳动物细胞中唯一能切割细胞外基质(extra cellular matrix,ECM)中硫酸乙酰肝素(heparin sulfate,HS)侧链的内切性糖苷酶,在肿瘤发生发展的各个阶段尤其是肿瘤转移中起到重要的作用.有关Hpa的研究近年来一直受到广泛关注,该文综述了Hpa在肿瘤组织中的表达及调控,旨在为以Hpa为靶点的肿瘤治疗提供依据.
作者：李阳；刘浩；蒋志文 刊期： 2013年第05期
目的 观察urantide对大鼠缺血/再灌注心肌组织氧化应激损伤的作用和心肌细胞凋亡的影响及其与PI3K/Akt及PKC信号通路的关系.方法 可逆性冠脉左前降支结扎造成心肌缺血/再灌注模型,给予大鼠心脏缺血30 min再灌注90 min.80只大鼠随机分为假手术组、缺血/再灌注(I/R)组、urantide低、中、高剂量组(3,10,30 μg·kg-1)、维拉帕米对照组(1.6 mg·kg-1)、urantide+CHE组(30 μg·kg-1+1 mg·kg-1)、urantide+LY294002组(30 μg·kg-1+0.3 mg·kg-1).Urantide低、中、高剂量组中urantide于缺血前5 min舌下静脉1 min内一次性推注,urantide+CHE组与urantide+LY294002组中,在穿线稳定后舌下静脉分别快速推注CHE与LY294002,5 min 后舌下静脉快速推注urantide 30 μg·kg-1,稳定10 min后再行缺血/再灌注操作.实验结束后测定大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)活力和丙二醛(MDA)含量以及一氧化氮(NO)含量.TUNEL法检测凋亡细胞指数(AI),免疫组化法检测心肌组织Bcl-2、Bax的蛋白表达.结果与I/R组相比,urantide 30 μg·kg-1能明显升高SOD活性(P<0.01),明显减少血清中MDA的含量(P<0.05),明显提高NOS活力(P<0.01),使NO含量增加(P<0.01);Bax蛋白表达和心肌细胞凋亡指数降低(P<0.01),Bcl-2蛋白表达增加(P<0.05);urantide+CHE组与urantide+LY294002组与urantide 30 μg·kg-1组相比,SOD活力和NO含量下降,MDA含量上升,心肌组织中Bax蛋白表达和心肌细胞凋亡指数上升,而Bcl-2蛋白表达下降,与I/R组比较差异无统计学意义(P>0.01).结论 Urantide能够通过激活PKC和PI3K/Akt信号转导通路,减少心肌组织氧自由基的含量,进一步调控Bcl-2和Bax蛋白的表达,抑制心肌缺血/再灌注大鼠心肌细胞的凋亡,从而对大鼠心肌缺血/再灌注具有一定保护作用.
作者：张骏艳；姚华；李晟；孙璇君；陈志武 刊期： 2013年第05期
Mg2+是细胞内第二位含量丰富的二价阳离子,与生物体的生理病理变化密切相关,但对其平衡调节的机制还不十分清楚.该文就细胞膜通道TRPM6、TRPM7,转运体Na+/Mg2+交换、Ca2+/Mg2+交换及细胞内ATP、蛋白、线粒体、内质网、细胞核与胞内游离镁离子稳态调节研究进展进行综述以为读者提供一个了解镁离子调节的机会.
作者：王静；洪炳哲 刊期： 2013年第05期
目的 探讨泊洛沙姆188(Poloxamer 188,P188)对体外神经元损伤引起的细胞死亡及线粒体损害可能发挥的作用机制.方法 采用小鼠的原代神经元培养并建立体外神经元离心损伤模型(VCID),在损伤后10 min加入P188,观察神经元的形态变化,MTT法与LDH法检测P188对体外神经元损伤引起细胞死亡的影响.分离线粒体亚成分,采用免疫印记法检测损伤后6 h与24 h线粒体内与胞质中CytC的表达情况,并检测P188对体外神经元损伤后caspase-3表达的影响.结果 显微镜观察到:与正常组相比,损伤组在外伤后24 h出现了一些结构与形态上的改变.P188处理过的神经元在损伤后24 h,在形态特征上发生明显的恢复,与对照组的形态特征类似.MTT法与乳酸脱氢酶(LDH)法结果显示:P188能明显减轻损伤引起的神经元死亡与乳酸脱氢酶漏出率.Western blot结果显示:在损伤后6 h与24 h,P188处理后均能明显抑制损伤后线粒体成分中CytC蛋白水平的下调(P<0.05),及胞质成分中CytC蛋白水平的上调(P<0.05),提示P188能明显抑制外伤引起CytC蛋白的释放.同时,P188也能抑制外伤引起的激活型caspase-3 (p20)的上调 (P<0.05).结论 P188对体外神经元损伤引起的细胞死亡及线粒体损害具有明显的神经保护作用,这种保护作用可能与抑制线粒体膜完整性破坏和抑制凋亡的线粒体途径有关.
作者：李倩倩；罗承良；张越；杨艳艳；陶陆阳；赵子琴 刊期： 2013年第05期
目的 探讨Kruppel样因子(KLF4)对食管癌细胞生长、侵袭及迁移等生物学行为的影响,揭示其与食管癌发生发展的关系.方法 检测人食管癌细胞株KYSE140、KYSE150、EC109及EC9706及食管永生化细胞NE3中KLF4的表达,通过siRNA的方法将KLF4高表达的KYSE140细胞敲降KLF4基因,通过 MTT 试验、软琼脂集落形成实验、Transwell 小室侵袭实验检测该细胞生物学行为的变化.结果 与转染control siRNA的细胞相比,转染KLF4-siRNA1、KLF4-siRNA2的KYSE140细胞生长速度上升,细胞穿过Transwell微孔膜的细胞数量增加,并且形成的集落明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 KLF4在人食管癌细胞的增殖、侵袭和迁移过程中起着负性调节的作用,可能成为早期诊断和判断食管癌预后的分子标志物以及临床治疗的分子靶点.
作者：黄邵洪；胡昆鹏；叶升；严淑红 刊期： 2013年第05期
内质网是蛋白质合成、加工和转运的主要场所.内质网应激是指缺血缺氧、葡萄糖或营养物质缺乏、药物、毒素等因素破坏内质网的稳态,出现错误折叠与未折叠蛋白在腔内聚集以及Ca2+平衡紊乱的状态.内质网早期或未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)能提高细胞在有害因素下的生存能力.但剧烈或者持久的ERS,能诱发凋亡机制.研究表明,脑缺血/再灌注后发生ERS,导致神经细胞凋亡和坏死,是引起再灌注损伤的重要原因.本文对近年来ERS在细胞凋亡调控中的重要作用及脑缺血/再灌注损伤与ERS的关系进行综述,这对脑卒中的理论及临床研究具有重要意义,也给治疗脑卒中的药物发现提供新思路.
作者：武彩霞；刘睿；杜冠华 刊期： 2013年第05期
目的 该文采用血清代谢组学探讨正常大鼠皮下注射L-左旋甲状腺素钠诱导甲亢模型的作用机制和六味地黄丸干预甲亢模型的作用研究.方法 选用SD大鼠按35 μg·(100 g)-1皮下注射L-左旋甲状腺素钠造模1周后,给予 4.7 g·kg-1 的六味地黄丸干预3周,同时以正常大鼠作为对照,采用UPLC-QTOF-MS 技术对不同组别大鼠的血清进行了分析.结果 甲亢大鼠的体内草酰乙酸、磷酸二羟基丙酮、乙基葡糖苷酸、甘油三酯、溶血磷脂、胆固醇等明显上调;而六味地黄丸干预后,这些物质的水平出现明显下调.结论 推测甲亢大鼠机体内的三羧酸循环发生障碍,糖、脂质、氨基酸代谢均出现紊乱,给予六味地黄丸后紊乱得到一定的改善.同时,这种方法为全面建立一种基于代谢组学的手段来诊断甲亢的病因和评价六味地黄丸治疗作用,提供一定的参考.
作者：王彬；沈岚；从文娟；朱云云；王强；冯怡 刊期： 2013年第05期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
