刘晓影；陈丽梅；张宝刚；冯卫国；王守训；杜长青；刘顺梅；赵春玲
氯胺酮是临床常用静脉麻醉药,特别是广泛用于小儿短小手术的麻醉和术前基础麻醉.已知氯胺酮进入体内之后,大部分经肝脏细胞色素P450代谢,形成去甲氯胺酮.有必要进一步研究氯胺酮的代谢机制和影响其代谢的遗传机制.
作者：赵芸慧；王晓龙；田阿勇；马虹；王俊科 刊期： 2013年第11期
miRNAs是一种内源性的非编码小分子RNA,长约18～25个核苷酸.能够通过碱基互补配对原则特异性地与一个或多个靶基因的mRNA结合,导致mRNA降解或者抑制其翻译过程,从而在转录后水平沉默靶基因,起到调控作用.Bai等发现外周神经系统存在很多miRNAs,外周炎性刺激可引起其中一些miRNAs的表达变化,推测在疼痛的发生机制中miRNAs可能发挥了重要的作用.因此,对miRNAs在疼痛中的调控作用进行研究,对镇痛药物研发及应用具有重要的意义.
作者：李桂霞；李春莉；吴春福 刊期： 2013年第11期
PICK1蛋白(protein interacting with C alpha kinase 1)是一种同时具有PDZ和BAR区域的支架蛋白,在哺乳动物体内与多种蛋白质相互作用,并被证明在多种生理过程中发挥重要的调节作用,同时参与了多种疾病病理过程.因此,PICK1蛋白可能成为极具前景的疾病治疗靶点.该文通过对近年来国内外发表的相关文献进行整理与分析,综述了PICK1蛋白的生理功能与其作为药物靶点的研究新进展,旨在为PICK1蛋白的深入研究提供理论支持.
作者：段贤春；汪永忠；高家荣；冯艺戎；李翔；吴健；刘晓闯；魏良兵；何云娇；朱红；李瑛；夏伦祝 刊期： 2013年第11期
目的 探讨三七皂苷R1(notoginsenoside R1)对慢性低氧(chronic hypoxia,CH)和野百合碱(monocrotaline,MCT)致肺高压(pulmonary hypertension,PH) 大鼠模型肺动脉(pulmonary arteries,PAs)收缩效应的作用及其机制.方法 清洁级♂ SD大鼠随机分为3组.正常对照组;CH组:大鼠饲养于氧分压为10.0%±0.5% 的密封有机玻璃箱内;MCT组:大鼠按60 mg·kg-1 (BW) 一次性腹腔注射20 mg·L-1 的MCT.观察三七皂苷R1对两种肺高压模型大鼠PAs收缩效应的作用.结果 可成功制备CH和MCT致肺高压大鼠;三七皂苷R1(0.1～100 μmol·L-1)对10 nmol·L-1内皮素-1(endothelin-1,ET-1)诱发正常大鼠PAs收缩效应呈剂量依赖性舒张,EC50为(5.25±0.14) μmol·L-1;3 nmol·L-1 Gd3+阻断ET-1诱发两种肺高压模型大鼠PAs收缩效应后,再加入三七皂苷R1无进一步抑制作用;6 μmol·L-1三七皂苷R1对环匹阿尼酸(cyclopiazonic acid,CPA)诱发两种肺高压模型大鼠PAs收缩效应均有明显的抑制作用.结论 三七皂苷R1可能通过阻断钙池操纵性钙内流介导的PAs收缩产生治疗肺高压作用.
作者：胡莹；焦海霞；王瑞幸；郭立成；穆云萍；林默君 刊期： 2013年第11期
目的 探讨吴茱萸次碱(rutaecarpine,Rut)抗溶血性磷脂酰胆碱(LPC)损伤的内皮保护效应及对缝隙连接细胞间通讯功能(GJIC)的调节作用.方法 在培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC),预先加入不同浓度的Rut(1.0、0.3、0.1 μmol·L-1),处理10 min后加入LPC(10 mg·L-1)共同孵育24 h.应用辣椒素受体(TRPV1)竞争性拮抗剂CAPZ(10 μmol·L-1)研究TRPV1是否介导Rut的保护效应.荧光定量PCR检测缝隙连接蛋白Cx37、Cx40的mRNA水平,Western blot检测Cx37和Cx40的蛋白水平,划痕负载试验测定GJIC功能.检测内皮细胞活力(MTT法)、活性氧(ROS)水平和细胞培养液中NO水平及单核细胞黏附,以评价内皮细胞损伤程度.结果 LPC明显下调HUVEC中Cx37和Cx40的mRNA和蛋白水平,抑制缝隙连接染料迁移.而Rut可明显恢复Cx37、Cx40的表达,改善GJIC功能,并减轻LPC诱导血管内皮损伤,表现为增加细胞活力和NO水平,抑制ROS生成和单核细胞黏附.预先给予CAPZ可取消这些效应.结论 Rut可抑制LPC诱导的内皮细胞损伤,恢复Cx37和Cx40的表达而改善GJIC,其机制与激活TRPV1有关.
作者：刘勇；余艳荣；彭维杰；况海斌；徐宏；宋培源；罗丹 刊期： 2013年第11期
目的 研究萘哌地尔(naftopidil)对α1受体亚型的选择性作用.方法 大鼠胸主动脉、脾、输精管分别富含了α1D、α1B、α1A 3种亚型受体,分别制备这3种离体组织,在存在和不存在萘哌地尔时,按浓度累积法加入去甲肾上腺素(noradrenaline,NA),至组织达到大收缩效应,得到相应的量效曲线,通过Schild法计算拮抗参数pA2值.结果 萘哌地尔对主动脉、脾、输精管的拮抗参数pA2值分别为7.93(±0.13)、6.75(±0.01)、7.48(±0.30),其对α1D-AR的选择性是对α1B-AR的15.1倍,是对α1A-AR的2.8倍.结论 萘哌地尔为一种高选择性的α1A/1D亚型拮抗剂.
作者：易艳珍；黄珺珺；黄美华；黄敏怡；朱柳；袁牧 刊期： 2013年第11期
目的 了解α干扰素(IFN-α)单独处理和拉米夫定联合IFN-α序贯处理对人肝胚瘤细胞株HepG2.2.15表达干扰素诱导跨膜蛋白(IFITM1、IFITM2、IFITM3)的影响,探讨拉米夫定与IFN-α序贯处理抗病毒机制.方法 以0～1 000 kU·L-1 IFN-α连续处理的HepG2.2.15细胞为α干扰素单独处理组,以20 μmol·L-1拉米夫定联合0～1 000 kU·L-1 IFN-α处理的HepG2.2.15细胞为序贯处理组;分别用免疫印迹法和Southern blot法检测不同组别细胞内干扰素诱导跨膜蛋白IFITM1、IFITM2、IFITM3的表达和细胞内HBV复制水平,再将表达抗病毒蛋白IFITM1的真核表达质粒pEGFP-IFITM1转染入HepG2.2.15细胞,以ELISA和荧光定量PCR法分别分析细胞外HBV抗原分泌和HBV-DNA水平.结果 免疫印迹分析提示IFN-α单独处理和拉米夫定联合IFN-α序贯处理均能诱导HepG2.2.15细胞表达干扰素诱导跨膜蛋白IFITM1、IFITM2、IFITM3,并且拉米夫定联合IFN-α序贯处理能够明显增强干扰素诱导跨膜蛋白IFITM1的表达;Southern blot法分析表明IFN-α单独处理HepG2.2.15细胞不能有效抑制细胞内HBV复制,而拉米夫定联合IFN-α序贯处理能够完全抑制细胞内HBV复制.进一步研究发现,拉米夫定联合IFN-α序贯处理诱导的干扰素诱导跨膜蛋白IFITM1具有一定抗HBV活性.结论 在体外细胞模型中,IFN-α能够诱导HepG2.2.15细胞表达干扰素诱导跨膜蛋白IFITM1、IFITM2、IFITM3;拉米夫定联合IFN-α序贯处理能够增强HepG2.2.15细胞表达干扰素诱导跨膜蛋白IFITM1,这可能是拉米夫定联合IFN-α序贯治疗慢性乙型肝炎重要机制之一.
作者：杨凯；管世鹤；王爱华；潘颖；吴园园；孙蓓蓓 刊期： 2013年第11期
灯盏细辛是菊科飞蓬属植物短葶飞蓬[Erigeron breviscapus (Vant.)hand-Mazz.]的干燥全草,具有活血化瘀、通经活络等功效,为贵州少数民族常用药物.灯盏乙素是其主要活性成分,而灯盏乙素苷元为灯盏乙素的主要活性代谢产物[1-2].因此,有必要研究灯盏乙素苷元在大鼠肝微粒体中的代谢规律.CYP3A4是人体含量丰富的P450酶,大约占人肝P450总含量的30%,参与50%以上药物的代谢[3-4],有关灯盏乙素苷元对大鼠CYP3A的抑制作用未见相关报道.实验建立了UPLC-MS/MS法,研究灯盏乙素苷元在大鼠肝微粒体中的代谢规律.通过研究睾酮的相对代谢量来反映其是否对CYP3A有抑制作用,为指导临床合理用药及预测可能产生的药物相互作用提供理论依据.
作者：黄勇；陆苑；郑林；何峰；李勇军；兰燕宇 刊期： 2013年第11期
目的 观察北太平洋鱿鱼墨多糖对化疗小鼠肠道黏膜损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制.方法 连续给小鼠灌胃鱿鱼墨多糖28 d,d 26、27连续两天腹腔注射环磷酰胺建立化疗小鼠模型,d 29脱颈椎处死.取空肠组织进行石蜡切片,HE染色,统计绒毛高度、隐窝深度及绒毛高度与隐窝深度比值(V/C).取肠组织匀浆进行蛋白质电泳,考马斯亮蓝染色观察特异性表达的蛋白质.取特异性表达蛋白质进行质谱分析,鉴定蛋白质种类.取肠匀浆上清检测丙二醛(MDA) 和超氧化物歧化酶(SOD) 活性变化.结果 (1)鱿鱼墨多糖中、高剂量组小肠绒毛高度明显高于环磷酰胺模型组(P<0.01);鱿鱼墨多糖各剂量组小肠隐窝深度均明显低于环磷酰胺模型组(P<0.01);鱿鱼墨多糖各剂量组V/C比值均明显高于环磷酰胺模型组(P<0.01).(2)质谱结果显示,特异性表达的蛋白条带之一为谷胱甘肽巯基转移酶ω-1.(3)模型组SOD 活性降低,MDA 含量增高,而鱿鱼墨多糖可以提高SOD活性,降低MDA 含量.结论 鱿鱼墨多糖具有保护小鼠肠道黏膜的作用,预防环磷酰胺所致的消化道不良反应.上述作用与鱿鱼墨多糖能够提高小鼠肠道黏膜的抗氧化能力有关.
作者：曹露；左涛；李学敏；于卿；曹斌斌；王静凤；王玉明；薛长湖；唐庆娟 刊期： 2013年第11期
目的 观察鞘内注射肾上腺髓质素(adrenomedullin,AM)受体拮抗剂AM22-52对吗啡耐受大鼠血浆及脊髓(L4-6)背角兴奋性氨基酸含量的影响,以探讨AM促成吗啡耐受形成的细胞学机制.方法 ♂SD大鼠,随机分为生理盐水组、吗啡组和吗啡+AM22-52组.以大鼠甩尾潜伏时评价疼痛行为,应用高效液相柱前衍生法测定血浆和脊髓背角氨基酸含量.结果 连续7 d鞘内注射吗啡后,吗啡组大鼠甩尾反射潜伏时与生理盐水组比较,差异没有统计学意义,与吗啡组比较,吗啡+AM22-52组大鼠甩尾反射潜伏时明显增加(P＜0.05～0.01);吗啡组大鼠血浆中Glu、Asp含量[Glu:(193.12±21.25) μmol· L-1,Asp:(37.40±7.13) μmol· L-1]明显高于生理盐水组(P＜0.05-0.01),与吗啡组比较,吗啡+AM22-52组大鼠血浆中Glu含量(164.56±23.42) μmol·L-1有所降低,差异没有统计学意义,但Asp含量(18.02±2.87) μmol· L-1 明显降低(P＜0.05);吗啡组大鼠脊髓背角Glu (2.70±0.06) mol·g-1和Asp (2.48±0.12) mol·g-1的含量与生理盐水组比较明显升高(P＜0.05),AM22-52联合注射后脊髓背角Glu、Asp含量分别为 (2.33±0.16)mol·g-1和(1.94±0.11) mol·g-1,均明显低于吗啡耐受组 (P＜0.05).结论 鞘内注射AM受体拮抗剂AM22-52能抑制兴奋性氨基酸的释放,提示AM通过促进兴奋性氨基酸的释放,导致吗啡耐受.
作者：曾雪爱；洪炎国 刊期： 2013年第11期
目的 探讨无创肢体缺血预适应对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用及机制.方法 56只健康♂ Wistar大鼠随机分为缺血/再灌注(I/R)组、肢体缺血预适应(LIP)组、I/R+5-羟基癸酸钠(5-hydroxydecanoate,5-HD)组和LIP+5-HD组.LIP组和LIP+5-HD组左后肢每天经历3次5 min缺血/5 min再灌注,连续3 d.d 4,全部大鼠冠状动脉左前降支经历30 min缺血/120 min再灌注,I/R+5-HD组和LIP+5-HD组于缺血前及I/R期间给予mitoKATP阻断剂5-HD.测定心肌梗死面积、心肌细胞凋亡指数、凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间和纤维蛋白原含量,观察心肌形态学改变.结果 与I/R组相比,LIP能缩小心肌梗死面积(约38.24%,P<0.05),减少心肌细胞凋亡(约23.33%,P<0.01),改善心肌形态学改变.LIP对基础状态下的凝血功能无影响,但能降低I/R后血浆纤维蛋白原增加程度(约12.5%,P<0.05).上述LIP作用被5-HD取消.结论 LIP对大鼠心肌I/R损伤具有保护作用,机制可能涉及mitoKATP的开放.
作者：侯微；袁恒杰；温克；吴艳娜；娄建石 刊期： 2013年第11期
目的 研究黄芪的主要有效成分黄芪甲苷分别与三七的有效成分人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1配伍对小鼠脑缺血/再灌注后氧化应激和核转录因子E2 相关因子2(nuclear factor-erythroid 2 related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶(heme oxygenase,HO)-1途径的影响.方法 C57BL/6小鼠随机分组,连续给药3 d,末次给药1 h后,结扎双侧颈总动脉造成脑缺血20 min,再灌注24 h.测定脑组织丙二醛(malonyldialdehyde,MDA)、一氧化氮(nitric oxide,NO)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH),HO-1mRNA表达,脑组织胞核、胞质Nrf2和全细胞HO-1蛋白表达.结果 ①脑缺血/再灌注后,脑组织MDA、NO含量明显升高,SOD活性和GSH含量明显降低.黄芪甲苷可降低脑组织MDA、NO含量,人参皂苷Rg1能降低脑组织NO含量.黄芪甲苷+人参皂苷Rg1、黄芪甲苷+人参皂苷Rb1和黄芪甲苷+三七皂苷R1均能明显降低脑组织MDA和NO含量,且黄芪甲苷与人参皂苷Rb1、三七皂苷R1配伍的效应大于人参皂苷Rb1单用和三七皂苷R1单用.②脑缺血/再灌注后,脑组织胞核和胞质中Nrf2蛋白含量及核转位率升高,同时HO-1mRNA和蛋白表达增强.各给药组能不同程度地降低胞质Nrf2蛋白含量,升高胞核Nrf2含量,使Nrf2核转位率升高,且黄芪甲苷+人参皂苷Rg1、黄芪甲苷+人参皂苷Rb1、黄芪甲苷+三七皂苷R1的作用强于各有效成分单用.黄芪甲苷、人参皂苷Rg1、黄芪甲苷+人参皂苷Rg1、黄芪甲苷+人参皂苷Rb1、黄芪甲苷+三七皂苷R1可使脑组织HO-1mRNA和蛋白表达明显增加,黄芪甲苷+人参皂苷Rg1、黄芪甲苷+人参皂苷Rb1、黄芪甲苷+三七皂苷R1脑组织HO-1mRNA和蛋白的增加明显高于各有效成分单用.且黄芪甲苷+人参皂苷Rg1升高胞核Nrf2蛋白、提高Nrf2核转位率的作用强于黄芪甲苷+人参皂苷Rb1,增加HO-1基因和蛋白表达的作用强于黄芪甲苷+人参皂苷Rb1和黄芪甲苷+三七皂苷R1.结论 黄芪甲苷分别与三七的3种有效成分配伍可增强其抗脑缺血/再灌注后氧化应激损伤的作用,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1信号途径,促进Nrf2合成和核转位,从而促进下游抗氧化基因HO-1等的表达有关,黄芪甲苷与人参皂苷Rg1配伍的效应更为明显.
作者：黄小平；邓常清；邱咏园；王蓓；唐映红；曾嵘 刊期： 2013年第11期
目的 研究辽东楤木叶总皂苷(ETS)对HT-29细胞生长的抑制作用及作用机制.方法 采用MTT法检测ETS对HT-29细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测ETS对HT-29细胞周期和凋亡的影响;Western blot法检测ETS对HT-29细胞PLK1蛋白表达的影响.结果 ETS对结肠癌HT-29细胞增殖有明显抑制作用,IC50值为39.62 mg·L-1.在10～40 mg·L-1剂量作用下,可剂量依赖性诱导HT-29细胞凋亡.ETS主要将细胞周期阻滞在G0/G1期,从而可剂量依赖性抑制肿瘤细胞增殖.ETS可明显抑制HT-29细胞PLK1蛋白的表达.结论 ETS体外可明显抑制HT-29细胞的生长,其抗肿瘤作用与细胞周期阻滞、细胞凋亡及抑制PLK1蛋白表达有关.
作者：尹丽颖；李凤金；边晓燕；牛雯颖；敖鹏；肖洪彬 刊期： 2013年第11期
目的 研究新型褪黑素(melatonin,MLT)受体激动剂Neu-P11对睡眠限制大鼠胰岛素敏感性的影响.方法 采用转笼法对SD大鼠进行8 d的睡眠限制,期间每天分别给予腹腔注射Neu-P11 (20 mg·kg-1)、MLT (5 mg·kg-1)、生理盐水.监测各组大鼠体重和耗食量,实验末测定空腹血糖、胰岛素、TG、TC、HDL-C水平,进行口服葡萄糖耐量实验(OGTT).结果 睡眠限制后大鼠空腹血糖、血清胰岛素和TG、TC水平明显高于正常对照组,HDL-C水平及葡萄糖耐量降低;而与睡眠限制组比较,Neu-P11或MLT处理组血糖、血清胰岛素、TG、TC水平及HOMA-IR降低、葡萄糖耐量升高.结论 Neu-P11能调节睡眠限制大鼠的糖脂代谢,改善睡眠限制引起的胰岛素抵抗.
作者：佘美华；蒋文艳；杨升华；胡小波；Moshe Laudon；尹卫东 刊期： 2013年第11期
目的 探究Foxo1在糖尿病大鼠肾脏的表达和脂质代谢的关系.方法 构建1型糖尿病大鼠模型,喂养2个月后处死,取肾脏组织,免疫组织化学和Western blot检测Foxo1、Akt和SREBP-1在肾脏的表达;油红O染色及组织脂质定量检测肾组织中脂质含量.结果 糖尿病大鼠出现明显的多饮、多食、多尿症状,体重较正常组明显下降,血糖、血甘油三酯及血尿素氮升高.免疫组织化学检测显示,磷酸化Foxo1和Foxo1表达定位于肾小管上皮细胞.Western blot检测可见与正常组大鼠相比,磷酸化Foxo1在糖尿病大鼠表达升高;而总Foxo1在两组间表达未见差异.相似地,磷酸化Akt和SREBP-1在糖尿病组大鼠表达也均明显升高.油红O染色表明脂滴沉积于糖尿病大鼠肾小管上皮细胞,定量甘油三酯测定显示糖尿病组肾脏脂质含量高于正常对照大鼠.结论 磷酸化Foxo1在糖尿病大鼠肾小管上皮细胞表达升高,可能和SREBP-1上调及细胞内脂质沉积相关.
作者：郝军；朱琳；李凡；刘巍；刘淑霞；刘青娟；赵松；李宏博；段惠军 刊期： 2013年第11期
目的 建立吗啡诱导的斑马鱼条件性位置偏爱模型,探讨诱导斑马鱼形成位置偏爱的佳条件.方法 根据条件性位置偏爱(CPP)原理和斑马鱼的生物学特性,对斑马鱼的天然偏爱进行测定后,腹腔注射不同浓度的吗啡,并与非偏爱箱(伴药箱)进行搭配;随之,斑马鱼注射等体积生理盐水,与偏爱箱进行搭配.经过连续3次的训练,观察吗啡诱导的斑马鱼CPP效应.结果 斑马鱼注射40～50 μg·g-1吗啡并进行连续3次CPP训练,能诱导其在伴药箱中的活动时间增加,与训练前相比,差异有显著性(P<0.01),与生理盐水组相比,差异也具有显著性(P<0.01).结论 斑马鱼进行腹腔注射给药40～50 μg·g-1吗啡,并进行连续3次训练,能形成明显的CPP.
作者：彭菊；刘伟；罗超华；陈小辉；张文清；莫志贤 刊期： 2013年第11期
目的 观察磷酸二酯酶4(phosphodiesterase 4,PDE4)4种亚型(A、B、C和D)的siRNA对内毒素刺激前后小胶质细胞内cAMP的影响.方法 24孔板接种原代培养的小胶质细胞,收集细胞测定PDE4 4种亚型的蛋白含量.随机将细胞分为空白对照组、LPS组、单纯载体组、错配siRNA 组、PDE4A-siRNA组、PDE4B-siRNA组、PDE4C-siRNA组和PDE4D-siRNA组,空白对照组与LPS组细胞不进行转染;其余5组分别转染LipofectaminTM RNAiMAX、错配siRNA、PDE4A siRNA、PDE4B siRNA、PDE4C siRNA和PDE4D siRNA,48 h后收集各组细胞测定4种亚型mRNA及细胞内cAMP的表达水平;除空白对照组外,其余7组细胞在转染48 h后分别给予100 μg·L-1 LPS,刺激30 min后收集各组细胞测定细胞内cAMP的浓度.结果 PDE4 4种亚型蛋白均在小胶质细胞内表达;转染48 h后,PDE4A-siRNA、PDE4B-siRNA、PDE4C-siRNA和PDE4D-siRNA可分别明显抑制相应PDE4亚型mRNA 的表达(P<0.05),各组细胞内cAMP的含量无明显改变(P＞0.05);LPS 刺激后各组细胞内cAMP的含量均比空白对照组明显增高(P<0.05),与LPS组相比,仅PDE4B-siRNA组细胞内的cAMP含量明显升高(P<0.05).结论 PDE4B-siRNA可有效抑制PDE4B mRNA的表达并能明显升高LPS刺激后细胞内的cAMP含量.
作者：和晓韵；和底妍；张利东；刘健；刘清珍；李伟彦；嵇晴 刊期： 2013年第11期
目的 研究染料木素对人宫颈癌细胞株(HeLa)增殖的影响,并初步探讨其可能的作用机制.方法 用无酚红DMEM高糖培养基(含10%活性炭处理过的胎牛血清)培养HeLa细胞,使用不同浓度染料木素(0.001～10 μmol·L-1)作用,采用MTT法检测细胞增殖变化,流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡的变化,Western blot检测雌激素受体ERα蛋白表达的变化.结果 实验浓度区间的染料木素作用于HeLa细胞48、72 h后,均能促进HeLa细胞的增殖.在该浓度区间下,染料木素能够促进HeLa细胞由G1期进入S期,增加HeLa细胞S期细胞比例,减少G1期细胞比例;同时,细胞凋亡降低,ERα蛋白表达量提高.结论 染料木素在0.001～10 μmol·L-1浓度范围内能够刺激HeLa细胞增殖,这一增殖效果可能是通过上调ERα表达量、调节细胞周期及凋亡相关信号通路产生的.
作者：郑秋玲；聂少平；李文娟；胡晓娟；谢明勇 刊期： 2013年第11期
目的 针对药源性肝脏线粒体毒性问题,利用人肝癌HepG2细胞分别建立以葡萄糖和半乳糖作为生长能源的线粒体毒性评价模型,并初步应用于核苷类似物药物线粒体毒性的评价.方法 采用半乳糖替换葡萄糖作为HepG2细胞生长的能量来源,通过对半乳糖浓度及作用时间的优化,建立线粒体毒性评价模型,并用线粒体抑制剂进行验证,进而评价核苷类似物的线粒体毒性.结果 (1)线粒体抑制剂作用24 h结果显示:葡萄糖模型中,鱼藤酮、寡霉素、CCCP浓度分别在1、10、1 μmol·L-1即可见明显的线粒体毒性,而在半乳糖模型中3者均在1 nmol·L-1时已表现出明显的线粒体毒性,抑制率分别为81.8%(P<0.01)、46.4%(P<0.01)、20.0%(P<0.05);相比之下,作用48 h,3者在半乳糖细胞模型中的线粒体功能抑制率比葡萄糖模型中更显著.(2)核苷类似物在葡萄糖模型中未见明显的线粒体毒性.而在半乳糖模型中,药物作用24 h,10 μmol·L-1更昔洛韦、喷昔洛韦、阿昔洛韦即表现出明显的线粒体毒性,抑制率分别达7.5%(P<0.05)、6.9%(P<0.05)、8.2%(P<0.05),100 μmol·L-1的抑制率更高;药物作用48 h,上述药物的线粒体功能抑制率更高.结论 以半乳糖替代葡萄糖作为细胞生长碳源时,可避免细胞Crabtree effect效应,使得线粒体毒性物质作用细胞后线粒体损伤更易显现,尤其对于线粒体低毒的化合物而言,利用半乳糖作为细胞生长碳源使其线粒体毒性更易评价.
作者：胡倩倩；谭初兵；张洁；潘晓菲；王士伟；时丽丽；徐为人 刊期： 2013年第11期
目的 研究纳米氧化锌(ZnO NPs)对SH-SY5Y人神经细胞的毒性作用及其可能的分子机制.方法 MTT法检测ZnO NPs对SH-SY5Y细胞存活率的影响;TUNEL法检测ZnO NPs对SH-SY5Y细胞的形态学影响;流式细胞术观察ZnO NPs对SH-SY5Y细胞周期的影响及凋亡诱导作用;Real-time PCR检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Survivin的mRNA水平变化;Western blot测定Bcl-2、Bax、Survivin及Cyto-C的蛋白表达并进行光密度定量.结果 ZnO NPs显示出对SH-SY5Y的细胞毒性,呈现浓度依赖性;15 mg·L-1 ZnO NPs作用后,TUNEL检测呈阳性反应;与未处理组相比,SH-SY5Y细胞中细胞周期阻滞于G1期并产生凋亡(P<0.05);抗凋亡基因Bcl-2、Survivin的mRNA水平和蛋白水平下调(P<0.05),促凋亡蛋白Bax的mRNA水平和蛋白水平上调,同时细胞Cyto-C的蛋白表达上调(P<0.05).结论 ZnO NP下调SH-SY5Y的细胞存活率,诱导细胞周期阻滞和凋亡产生,显示出对神经细胞的毒性损伤作用,其机制与激活线粒体凋亡通路及抑制Survivin的转录和表达有关.
作者：万彬彬；何浩；江维；赵宇侠；金京娥；金惠 刊期： 2013年第11期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
