张玲非；刘敏彦；潘会敏；师哲；王鑫国；牛丽颖
神经组织染色是研究神经退行性疾病所必需的一项关键的实验技术.但是,由于染色步骤的复杂和外界因素的干扰,时常导致染色结果的不稳定.该文就目前国内外建立的神经组织染色方法,包括尼氏染色、神经元染色、神经胶质细胞染色、髓鞘染色、突触染色和神经纤维染色的原理、优缺点及其应用作一概述,以便指导研究者选用合适的染色方法.
作者：顾兵；金建波；李华南；王烁宇 刊期： 2011年第10期
目的 探讨Janu激酶/信号转导子和转录激活子(Janus kinase/signal transducer and activator of transcriptio,JAK2/STAT3)通路对吸入七氟烷后处理的在体大鼠缺血/再灌注心肌的保护作用和影响.方法 75只成年健康♂ SD大鼠,体质量250～300 g,随机分为5组(n=15):假手术组(S)、缺血/再灌注组(CON)、AG-490组(AG)、七氟烷后处理组(Sev-p)、七氟烷后处理+AG490组(AG+Sev-p).采用结扎左冠状动脉前降支30 min、再灌注120 min的方法制备心肌缺血/再灌注模型.假手术组左冠状动脉前降支穿线并不阻断冠状动脉,AG-490组在再灌前10 min静注JAK2抑制剂AG-490(3mg·kg-1),七氟烷后处理组在再灌注前2 min开始吸入2 8%七氟烷,持续5 min,七氟烷后处理+AG490组于再灌前10 min静注JAK-STAT通道阻断剂AG-490(3 mg·kg-1),再行七氟烷后处理.各组均以5 ml·kg-1·h-1的速率静脉输注生理盐水维持至术毕.记录心率(HR)、平均动脉压(MAP),计算心率和收缩压乘积(RPP).各组随机取10只于再灌120 min后处死大鼠,TTC法测定心肌梗死面积(IS/AAR).各组另5只大鼠,于再灌注开始后的10 min处死,取出左心室心肌组织,提取总蛋白,用Western blot法分析心肌JAK2和磷酸化JAK2及心肌STAT3和磷酸化STAT3的蛋白表达变化.结果 与其它组比较,Sev-p组和Sev-p+AG490组在后处理5 min时,MAP、HR和RPP均明显下降(P<0.05),但经历10 min洗脱期后,各指标变化趋向一致,组间比较差异无统计学意义.与CON组和AG+Sev-p组比较,Sev-p组的梗死面积明显减少,差异有统计学意义(P<0.05).AG-490组与CON组比较心梗面积差异无显著性(P>0.05).Western blot检测发现,Sev-p组再灌注后10 min JAK2、STAT3的磷酸化水平明显升高,与其它组相比差异有统计学意义,AG+Sev-p组与Sev-p组相比,其JAK2、STAT3的磷酸化水平较低,差异有统计学意义.结论 七氟烷后处理对缺血/再灌注损伤的大鼠心肌有较好的保护作用,该作用与 JAK2-STAT3通路的激活有关.
作者：颜丽晖；江晓菁 刊期： 2011年第10期
目的 观察角质细胞生长因子(keratinocyte growth factor-2,KGF-2)对角膜基质细胞的增殖作用及ERK1/2信号在角膜基质细胞增殖中的调控作用,探讨KGF-2 对角膜基质细胞增殖的可能机制.方法 体外培养角膜基质细胞,MTT法检测细胞增殖,Western blot 检测磷酸化ERK1/2 表达水平.结果 KGF-2 在1～100 mg·L-1对角膜基质细胞有明显的促进增殖作用且呈现剂量-效应关系;100 mg·L-1 KGF-2 处理角膜基质细胞,5、15、30 min后ERK1/2磷酸化表达水平明显升高,60、90、120、180 min后ERK1/2 磷酸化表达水平逐渐减弱;20 μmol·L-1 ERK1/2抑制剂PD98059 可抑制KGF-2对角膜基质细胞的促增殖作用.结论 KGF-2 激活ERK1/2信号通路,提高细胞增殖率,可被抑制剂PD98059 阻断; ERK1/2信号通路调控角膜基质细胞的增殖,在角膜基质细胞损伤中发挥作用.
作者：高丽昌；李婷婷；李富勇；唐禄；李海燕；王晓杰；李校堃 刊期： 2011年第10期
目的 研究唑来膦酸对多发性骨髓瘤(MM)患者成骨细胞(OB)增殖及其细胞核因子κ-B受体活化因子配体(RANKL)和护骨素(OPG)表达的影响.方法 取MM患者骨髓液密度梯度离心法分离单个核细胞,原代培养,贴壁传代后加入含维生素C、地塞米松、β-甘油磷酸钠的条件培养基,诱导成OB,采用不同浓度唑来膦酸处理培养的OB,分别作用24、48和72 h后,通过①细胞计数试剂盒(CCK-8)检测OB增殖;② RT-PCR检测OB RANKL和OPG mRNA表达;和③酶联免疫吸附实验(ELISA)检测相应细胞培养上清液中sRANKL和OPG浓度来考察唑来膦酸的作用.结果 ① OB用唑来膦酸处理后,OB的CCK-8实验吸光值呈不同程度升高.②唑来膦酸作用24 h和48 h后,OB RANKL mRNA表达变化不明显.作用72 h,低浓度(10-9 mol·L-1)唑来膦酸显示能降低RANKL mRNA表达(P<0.05).OB培养上清的sRANKL浓度也呈现类似的变化.③唑来膦酸作用24 h后,OB OPG mRNA表达变化不明显.作用48 h,呈不同程度增加,以10-8 mol·L-1浓度明显(P<0.05).作用72 h,呈不同程度增加,以10-7 mol·L-1浓度明显(P<0.05).结论 唑来膦酸有促进OB增殖的作用;唑来膦酸可能下调OB RANKL表达,并且上调OPG表达.
作者：肖萍萍；陈君敏；叶德富 刊期： 2011年第10期
目的 探讨山奈酚对人小细胞肺癌H446细胞的抑制作用,并研究其作用机制.方法 采用MTT法、DAPI染色、流式细胞术等方法检测山奈酚对H446细胞增殖及凋亡的影响;使用Western blot检测山奈酚处理后H446细胞中p53、bax和bcl-2的表达变化.结果 山奈酚抑制人小细胞肺癌H446细胞增殖,促进H446细胞阻滞于S期及G2/M期,诱导该细胞株凋亡,上调p53、bax的表达水平,降低bcl-2的表达水平.结论 山奈酚对H446细胞有明显的抑制作用,该抑制作用与山奈酚诱导的细胞周期阻滞和细胞凋亡有关.
作者：仇炜；赵娟；吕雨虹；赵俊霞；王彦玲；雷宇华 刊期： 2011年第10期
目的 研究蜂毒素 (Melittin,Mel)对人肝癌细胞株 BEL-7402 增殖及 VEGF、bFGF 表达的影响.方法 应用 MTT 法检测Mel 对人肝癌 BEL-7402 细胞增殖的影响;采用 ELISA 法和免疫细胞化学法检测 VEGF 和 bFGF 的表达.实时荧光定量 PCR 检测 VEGF mRNA 和 bFGF mRNA 的变化.结果 Mel可明显抑制BEL-7402细胞的增殖活性,且具有浓度和时间依赖性.经Mel作用 24、48和72 h后的IC50分别为6.80、5.47和4.87 mg·L-1.Mel(2.0、4.0、8.0 mg·L-1)作用24 h后,能明显降低BEL-7402 细胞上清液中 VEGF 及 bFGF 的含量(P<0.05 或 P<0.01),并可下调 VEGF 和 bFGF 的蛋白表达 (P<0.01).荧光定量 PCR 检测显示,Mel能降低BEL-7402 细胞 VEGF mRNA 和 bFGF mRNA 的转录水平 (P<0.01).结论 Mel具有抑制人肝癌细胞株BEL-7402 增殖的作用,并可下调促血管生成因子 VEGF 和 bFGF 的表达,有可能阻碍肿瘤血管生成.
作者：宋长城；吕祥；程彬彬；李柏；凌昌全 刊期： 2011年第10期
用药安全性评价是药物临床前研究和临床评价的重要内容,维吾尔医药针对一些特色制剂及有毒性药材的使用和控制,以及临床前安全评价的研究较为滞后,这影响了维吾尔医药的发展.本研究选择临床常用、具有代表性的特色维吾尔药毒性药材曼陀罗子及其代表制剂镇痛艾比西帕丸为研究对象,通过毒理学研究,探讨其毒性表现和毒性靶器官.
作者：热比姑丽·伊斯拉木；尤力都孜·买买提；阿布都吉力力·阿布都艾尼；艾西木江·热甫卡提；闫明；凯赛尔·阿不都克热木 刊期： 2011年第10期
目的 观察二烯丙基三硫化物(diallyl trisulfide,DATS)对离体肾内动脉张力的影响及其机制.方法 SD大鼠体质量250～300 g,脱臼处死后,显微操作下取出肾内动脉,制备成1.8～2.0 mm长的血管条,每根血管条固定于微血管测定仪的浴槽内,记录张力变化.分别给予血管收缩剂苯肾上腺素(Phe)、血栓素A2受体激动剂(U46619)、5-羟色胺(5-HT)和KCl刺激血管产生持续性收缩,采用累积给药法加入DATS,观察不同浓度的DATS对肾内动脉张力的影响.观察DATS舒张效应的同时用等体积的药物溶剂二甲基亚砜(DMSO)作为对照.结果 DATS能呈浓度依赖性诱导舒张1 μmol·L-1 Phe、0.1 μmol·L-1 U46619和2 μmol·L-1 5-HT预收缩内皮完整的肾内动脉环,pD2分别为(6.06±0.17),(6.14±0.26)和(5.37±0.16),其大舒张率(Emax)分别为(91.24±2.71)%,(93.44±2.14)%和(92.51±1.15)%;但是,对60 mmol·L-1 KCl预收缩的肾内动脉环无明显舒张作用;分别用eNOS抑制剂L-NAME和sGC抑制剂ODQ预处理内皮完整的肾内动脉环不影响DATS舒张效应;去除肾内动脉血管内皮也不影响DATS对其舒张作用.结论 DATS有浓度依赖性舒张大鼠肾内动脉作用,无明显内皮依赖性.
作者：邝素娟；邓春玉；张光燕；饶芳；李晓红；单志新；林秋雄；杨敏；余细勇 刊期： 2011年第10期
目的 观察黄芪甲苷对慢性哮喘小鼠模型气道重塑的影响.方法 48只BALB/c小鼠按随机原则分成正常对照组、哮喘组、黄芪甲苷组、布地奈德组,每组12只.卵蛋白致敏,气道激发8周.黄芪甲苷组和布地奈德组分别给予黄芪甲苷溶液(50 mg·kg-1)灌胃,布地奈德混悬液(8 ml)雾化,每日1次,共8周.末次激发24 h后,每组取6只小鼠评价呼气阻力,支气管肺泡灌洗液(BALF)观察炎症细胞计数,HE染色和Masson染色观察气道炎症和上皮下纤维化情况,ELISA检测BALF中血管内皮生长因子(VEGF)水平,免疫组织化学检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和VEGF蛋白表达.结果 黄芪甲苷能够明显抑制慢性哮喘小鼠模型的气道炎症、气道高反应性和气道重塑.黄芪甲苷治疗后哮喘小鼠BALF中VEGF含量明显降低,哮喘小鼠肺组织高表达的α-SMA和VEGF蛋白水平也明显降低.结论 黄芪甲苷能够抑制慢性哮喘小鼠模型的气道重塑,其机制可能通过抑制VEGF表达而实现.
作者：杜强；张倩；沈立；蔡健康；黄茂；殷凯生 刊期： 2011年第10期
目的 探讨化合物BSSD-1对斑马鱼新生血管的影响以及对大肠癌HT29裸鼠肿瘤的抑制作用.方法 采用24hpf (hours post fertilization)健康TG(VEGFR2:GFP)系血管荧光转基因斑马鱼作为实验动物模型,加入不同剂量BSSD-1与胚胎共同孵育24 h,在荧光显微镜下观察背部节间血管(intersegmental vessels,ISV)生成情况,并计数评价抑制程度;进而建立人大肠癌HT29细胞裸小鼠模型,观察BSSD-1不同剂量作用下对裸鼠肿瘤的抑制作用,根据瘤体积及瘤重,计算相对肿瘤增殖率和肿瘤生长抑制率.结果 化合物BSSD-1在0.25～25.0 mg·L-1范围抑制斑马鱼背部节间血管生成具有剂量相关性,12.5 mg·L-1抑制率可达98.8%;裸鼠肿瘤抑制试验中,大、中、小剂量组肿瘤生长抑制率试验结果分别为31.1%、40.0%和40.0%,统计学处理3组差异均有显著性.结论 BSSD-1可以抑制荷瘤裸鼠移植瘤的生长,该作用与抑制肿瘤新生血管生成有关.
作者：韩利文；王思锋；王加宁；何秋霞；陈贯虹；袁延强；陈锡强；刘可春 刊期： 2011年第10期
目的 研究辣椒素受体对大鼠骶髓后联合核(SDCN)神经元突触传递的影响.方法 在脊髓骶段横切薄片上,利用全细胞膜片钳法记录骶髓后联合核神经元谷氨酸能兴奋性突触后电流(EPSCs)和γ-氨基丁酸(GABA)能抑制性突触后电流(IPSCs),比较激动辣椒素受体后上述突触电流的变化;观察激动辣椒素受体对SDCN神经元动作电位发放的影响.结果 辣椒素受体被其特异性激动剂辣椒素(1 μmol·L-1)激动后,自发EPSCs (sEPSCs)的频率和振幅均有明显增加(P<0.05,n=17).在河豚毒素(0.5 μmol·L-1)存在的条件下,辣椒素明显增加微小EPSCs(mEPSCs)的频率(P<0.01,n=13),但对mEPSCs的振幅无影响(P>0.05,n=13),提示辣椒素的作用在突触前.辣椒素也明显增加动作电位发放 (P<0.05,n=19).上述作用均可被辣椒素受体特异性拮抗剂capsazepine (10 μmol·L-1)阻断.辣椒素也增加GABA 能的自发IPSCs(sIPSCs)的频率 (P<0.05,n=20),但对其不依赖动作电位的微小IPSCs (mIPSCs)的频率或振幅均无作用(P>0.05,n=9).结论 在SDCN,辣椒素受体主要表达于兴奋性突触终末;激动辣椒素受体影响兴奋性和抑制性突触活动,并可能参与痛觉信息在脊髓水平的传递和调制.
作者：马红雨；任曲；魏利召；罗丹；安映红；杨鲲 刊期： 2011年第10期
目的 观察细胞因子信号传导抑制蛋白1(SOCS-1)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导肾小管上皮细胞(HKC)凋亡的影响.方法 体外培养人肾小管上皮细胞(HKC),应用脂质体2000分别转染pCR3.1/SOCS-1表达质粒和pCR3.1空质粒载体,G418筛选阳性克隆.给予TNF-α(20 μg·L-1)进行刺激.采用Western blot检测SOCS-1、Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3、Caspase-3、Janus酪氨酸激酶2(JAK2)、信号转导和转录活化因子1(STAT1)、磷酸化JAK2(p-JAK2)和磷酸化STAT1(p-STAT1)的表达;流式细胞术和原位缺口末端标记法(TUNEL)观察HKC细胞凋亡情况.结果 与对照组相比,TNF-α组肾小管上皮细胞凋亡明显增加,凋亡相关Cleaved caspase-3蛋白表达明显上调,Bax/Bcl-2蛋白比率升高; SOCS-1过表达能够抑制TNF-α刺激引起的HKC细胞的凋亡,下调JAK2和STAT1的磷酸化水平及Cleaved caspase-3蛋白的表达,降低Bax/Bcl-2蛋白比率.结论 SOCS-1过表达抑制TNF-α诱导的肾小管上皮细胞凋亡可能是通过抑制JAK/STAT信号通路活化实现的.
作者：杜春阳；史永红；崔立文；任韫卓；王月华；赵松；段惠军 刊期： 2011年第10期
趋化因子是一组能够趋化细胞定向移动的小分子细胞因子,参与白细胞迁移的调控,在炎症中诱导性表达,与炎症过程密切相关,初的研究主要局限于免疫系统.近几年来研究发现,趋化因子不仅参与糖尿病的炎症过程,而且在糖尿病并发症的发生发展中发挥重要的调节作用.该文主要针对趋化因子5及其受体CCR5在糖尿病并发症中的作用及相关机制的研究予以综述,以便深入理解趋化因子与糖尿病的关系,为进一步的研究提供帮助.
作者：李桂林；梁尚栋 刊期： 2011年第10期
目的 研究脊髓蛋白酪氨酸磷酸酶(protein tyrosine phosphatases,PTPs)在炎性疼痛中的作用及其机制.方法 昆明种♂小鼠,左后足底皮下注射完全弗氏佐剂 (CFA),建立炎性疼痛动物模型;24 h后,鞘内给予PTPs抑制剂正钒酸钠(sodium orthovanadate,Na3VO4),观察对缩足阈值的影响;免疫印迹法检测正钒酸钠对损伤侧脊髓背角NMDA受体NR2B亚基第1472位酪氨酸(NR2B-Y1472)磷酸化水平的影响.结果 鞘内注射正钒酸钠50、100和200 ng,虽然不影响正常动物的痛阈,但却能够剂量依赖性地缓解CFA诱发的机械性痛觉超敏,给药后30 min,炎性疼痛小鼠的缩足阈值从(0.24±0.07)g分别升高至(0.17±0.06) g (P>0.05,n=4)、(1.07±0.51) g(P<0.05,n=4)和(1.38±0.47) g(P<0.05,n=4);同时,CFA诱发的脊髓NR2B-Y1472的磷酸化也被正钒酸钠100 ng所完全阻断.结论 PTPs抑制剂正钒酸钠,通过降低脊髓NR2B的酪氨酸磷酸化,逆转炎性疼痛动物的NMDA受体功能亢进,产生明显的镇痛作用.
作者：李帅；杨娴；索占伟；时蕾；刘燕妮；曹静；许英明；胡晓东 刊期： 2011年第10期
目的 探讨二苯乙烯苷(TSG)对过氧化氢(H2O2)诱导人脐静脉内皮细胞凋亡及对核因子κB(NF-κB)、NF-κB抑制因子(IκB)基因表达的影响.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞,实验分为对照组、H2O2组、TSG组,采用Hoechst 33258染色观察细胞凋亡形态,MTT法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR检测NF-κB与IκB mRNA表达,Western blot检测NF-κB p65、IκB蛋白表达.结果 与对照组比较,H2O2组凋亡细胞数增多,细胞凋亡率增加,细胞增殖降低;NF-κB mRNA和蛋白表达增加,IκB mRNA和蛋白表达降低,差异均有显著性(P<0.01).经TSG预处理后,细胞的增殖率较H2O2组增加,细胞凋亡率减少;NF-κB mRNA和蛋白表达减少,IκB mRNA和蛋白表达增加(P<0.01).结论 二苯乙烯苷能抑制H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡,其作用机制可能与调节NF-κB/ IκB表达有关.
作者：龙石银；张彩平；高细强；乔新惠；黄良珠；佟丽；陈武哲；田英 刊期： 2011年第10期
目的 观察血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂氯沙坦对内毒素诱导的脓毒症大鼠的干预效果.方法 SD大鼠30只随机分成生理盐水对照组(Control组,n=10)、脓毒症组(LPS组,LPS 12 mg·kg-1,iv,n=10)和氯沙坦组(LOS组,氯沙坦50 mg·kg-1 ip,30 min后LPS 12 mg·kg-1 iv,n=10).LPS注射6 h后抽血检测一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)及IL-1β、TNF-α血浆浓度,随即处死大鼠,分离胸主动脉,测定各组胸主动脉核因子κB抑制蛋白( inhibitor of NF-κB,IκB) mRNA和蛋白的表达.结果 LPS组NO、MDA、IL-1β及TNF-α血浆浓度较对照组明显升高(P<0.01),经LOS干预后上述指标明显降低(P<0.01);大鼠胸主动脉IκB mRNA和蛋白在LPS组中的表达较对照组均明显降低(P<0.01),而LOS组中IκB 的mRNA和蛋白表达较LPS组明显回升(P<0.01).结论 血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂氯沙坦对内毒素诱导的脓毒症大鼠有抗炎作用.
作者：廖丽君；郭建荣；贾东林；喻君；沈华春 刊期： 2011年第10期
该文对丙泊酚 (propofol) 前体药磷丙泊酚 (fospropofol,FP) 的特点及研究新进展进行综述.临床药代动力学研究表明:FP进入脑组织能迅速实现人体血药浓度平衡,没有药效滞后现象,半衰期、药时曲线下面积(AUC)明显延长或增加,中等程度镇静作用持续时间明显延长.FP的临床药效学研究指出,在大脑中,FP分解产生的丙泊酚和经典丙酚药物作用类似;持续静脉注射FP可引起剂量依赖性;可减少FP的使用剂量;可避免经典异丙酚作用持续时间短、溶解度差,注射部位疼痛、高血脂等不良反应.它的作用机制与对 突触后膜的γ-氨基丁酸受体的作用、对瞬时受体电位TRP V1 和TRP A1活化作用、对α-氨基羟甲基恶左丙酸(AMPA)受体等作用有关.FP是一种新型、较高效和长效、副作用较少并可使病人清醒冷静状态下接受内窥镜或小手术的检查与治疗的中等程度镇静剂.
作者：刘志男；林原；唐泽耀 刊期： 2011年第10期
目的 研究地鳖虫纤溶活性蛋白(fibrinolytic proteins of Eupolyphaga sinensis,EFP)对肿瘤细胞凋亡的诱导作用及其机制.方法 采用纤溶平板法检测了EFP纤溶活性;采用流式细胞术检测了EFP高、中、低浓度对小鼠S180和H22实体瘤组织细胞凋亡的诱导作用;采用免疫组织化学法检测了Caspase-3的表达;采用TRAP-PCR银染法检测了腹水瘤组织端粒酶活性.结果 EFP对S180和H22实体瘤有一定的抑瘤作用,对H22和S180腹水瘤细胞端粒酶活性有一定降低作用,可提高Caspase-3表达水平,诱导细胞凋亡.结论 EFP具有诱导S180和H22肿瘤细胞凋亡作用.
作者：韩雅莉；曹付春；余磊；叶韵；张卫丽；黄明星；刘浩；黎子蔚 刊期： 2011年第10期
α、β和γ 3种分泌酶是淀粉样前体蛋白(APP)加工及代谢的关键酶,选择性地激活α分泌酶或抑制β和γ分泌酶,将有助于减少β-淀粉样蛋白(Aβ)的产生,并可能成为治疗AD的有效靶点.该文主要对APP 3种分泌酶活性表达的影响因素及其靶向干预研究的进展做一综述.
作者：李守业；朱妍；焦悦；李昌煜 刊期： 2011年第10期
目的 评价香椿果多酚类化合物XCG-7对补体致内皮细胞活化和损伤的保护作用.方法 采用能特异性激活补体替代途径的眼镜蛇毒因子激活血清补体,将激活的血清作用于血管内皮细胞,诱导其活化和损伤.通过测定内皮细胞P-selectin、E-selectin 和IL-8的表达以及乳酸脱氢酶释放和Caspase-3/7活化的变化,评价XCG-7对补体刺激内皮细胞活化和损伤的抑制作用.结果 XCG-7能明显抑制补体刺激内皮细胞P-selectin、E-selectin和IL-8的表达上调,减少补体损伤内皮细胞导致乳酸脱氢酶的释放和Caspase-3/7的活化.结论 香椿果多酚化合物 XCG-7对补体导致内皮细胞活化和损伤具有明显的保护作用.
作者：赵琼；孙黔云；杨庆雄 刊期： 2011年第10期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
