李琴；郭云良；李震；徐新颖
目的 建立高脂血症实验动物模型新型方法.方法 30只小鼠随机分为空白对照组、阳性对照组及模型组.空白对照组喂饲标准饲料,阳性对照组喂饲高脂饲料;模型组饲以标准饲料和牛奶,30 d后检测血清和肝脏胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及肝脏指数(LI),光镜观察肝脏病理变化.结果 与空白组相比,模型组LI及血液和血清中TC、TG、LDL-C明显升高,而HDL-C明显降低.光镜下模型组肝脏均出现弥漫性肝细胞脂肪变性和炎症病灶.结论 小鼠喂饲30 d标准饲料和牛奶,可建立理想的高脂血症模型.
作者：吴争荣；马志刚；董永喜；黄金程；贺殿 刊期： 2010年第03期
目的 研究钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)信号通路在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导心肌细胞肥大中的作用.方法 Lowry法测心肌细胞蛋白含量;计算机图像分析系统测心肌细胞体积;[~3H]-亮氨酸参入法测心肌细胞蛋白合成;Till阳离子测定系统观察胞内[Ca~(2+)]_i瞬变;Western blot法测定CaMKⅡδ_B的表达.结果 ① TNF-α(100 μg·L~(-1))明显诱导心肌细胞蛋白含量、蛋白合成及体积的增加,CaMKⅡ特异性抑制剂KN93(0.2 μmol·L~(-1))明显抑制TNF-α诱导的心肌肥大,但对正常心肌细胞生长无影响.② TNF-α引起心肌细胞内钙离子浓度([Ca~(2+)]_i)瞬间变化幅度增高,KN93明显降低TNF-α诱导的上述改变.③ TNF-α明显增强心肌细胞内CaMKⅡδ_B的表达.结论 TNF-α可能通过引起心肌细胞[Ca~(2+)]_i升高,促进CaMKⅡδ_B表达诱导心肌细胞肥大的.
作者：王桂君；姚玉胜；王洪新 刊期： 2010年第03期
目的 观察银杏酮酯GBE50对模拟缺血游离豚鼠心室肌细胞L型钙电流和游离钙浓度的影响,探讨GBE50抗心肌缺血的作用机制.方法 应用单酶酶解法分离游离单个豚鼠心室肌细胞,采用膜片钳全细胞记录心室肌细胞L型钙电流,通过激光共聚焦显微镜扫描测定细胞内游离钙浓度的动态变化.结果 缺血抑制豚鼠心室肌细胞的 I_(Ca-L) (n =9, P <0.01),使豚鼠心室肌细胞内游离钙增加(n =10, P <0.01),而50 mg·L~(-1) GBE50减轻缺血对 I_(Ca-L) 的抑制效应(n=6,P >0.05),减少缺血后心室肌细胞内游离钙浓度的增加(n =10, P >0.05).结论 GBE50可减轻心肌缺血区域与非缺血区域电生理的异质性,维持缺血后豚鼠心肌细胞电生理的稳定性,并减轻缺血后心肌细胞内钙超载介导的心肌损伤.
作者：刘爱华；张志雄 刊期： 2010年第03期
目的 探讨辣椒素受体(vanilloid receptor subtype 1,VR1)在慢性疼痛发生机制中的作用,构建携带VR1 siRNA的慢病毒载体并检测其对大鼠DRG神经元VR1基因的干扰作用.方法 设计靶向大鼠VR1基因的发夹状siRNA,合成两对互补的寡核苷酸序列,退火后克隆到酶切的pRNAT-U6.2/Lenti siRNA载体,通过PCR和DNA测序鉴定重组质粒.空载体及重组质粒分别与慢病毒包装质粒共转染293T细胞生成慢病毒载体.通过蛛网膜下腔将慢病毒载体注射到大鼠体内,采用RT-PCR方法检测L4-L6 DRG神经元内VR1的沉默效果.结果 测序鉴定证实目的 寡核苷酸片段被克隆到pRNAT-U6.2/Lenti载体中;经蛛网膜下腔注射后,pRNAT-U6.2/Lenti-siVR1可下调正常大鼠L4-L6 DRG神经元内VR1 mRNA的表达.结论 成功构建了靶向VR1基因的 siRNA载体,可有效抑制VR1 mRNA的表达,为深入研究和治疗慢性痛提供了有力的工具.
作者：张宏伟；方东；任鹏飞；察雪湘；聂雅莉；胡香杰；赵国强 刊期： 2010年第03期
目的 探讨地尔硫卓对刀豆凝集素(Con A)诱导单个核细胞细胞因子表达的影响.方法 ficoll密度梯度离心法分离大鼠脾脏单个核细胞,分对照组、Con A组和地尔硫卓-Con A处理组.ELISA测定上清中细胞因子浓度.结果 单个核细胞在Con A的刺激下,其上清液中IL-10、TNF-α、IL-6急剧增高,IL-1β低水平表达,TGF-β_1未见明显表达.地尔硫卓干预后,IL-10、TNF-α、IL-6的浓度明显减低.结论 地尔硫卓能抑制Con A所诱导的单个核细胞IL-10、TNF-α、IL-6的表达.
作者：刘英；程翔；廖玉华 刊期： 2010年第03期
Polo-Like激酶1(PLK1)是高度保守的丝/苏氨酸激酶,在多种人类肿瘤细胞中高表达.其在有丝分裂进程中的重要作用已经被阐明.新的研究发现, PLK1有诱导DNA合成、DNA完整性的检修以及防止细胞凋亡方面的作用.PLK1还能通过磷酸化p53而抑制其转活性,进而抑制p53发挥检验点蛋白和诱导细胞凋亡的功能.另外,PLK1与肿瘤的发生发展密切相关,还可以通过抑制MAVS调节干扰素IFN的诱导生成,破坏先天性免疫.多种PLK1的抑制剂都表现出了高效低毒的特性, PLK1有望成为恶性肿瘤治疗和免疫治疗的良好靶点.
作者：董宪喆；张鹏；毕明刚 刊期： 2010年第03期
肥大细胞膜表面表达IgE高亲和力受体,经活化后可产生和释放多种参与变态反应的炎性介质,从而引起多种变态反应症状~([1]) .姜黄素(curcumin)是从姜黄中提取的酚性色素,为姜黄的主要有效成分,具有抗炎、抗肿瘤、抗氧化等作用~([2]) .研究证实姜黄素能够抑制肥大细胞组胺的生成~([3]) ,但抑制肥大细胞活化的具体作用机制尚未完全阐明.本实验以腹腔肥大细胞为主要研究对象,探讨姜黄素对肥大细胞的影响,并探讨其相关作用机制.
作者：延光海；崔允浩；李光昭；沈光海；金东洙；宋顺宗 刊期： 2010年第03期
目的 探讨在肝损伤早期酒精和HBV协同作用的分子机制.方法 20只HBV转基因小鼠和20只普通小鼠随机分为4组:转基因小鼠酒精组(alcohol-fed Tg mice)和普通小鼠酒精组(alcohol-fed Wt mice),以白酒灌胃;转基因小鼠对照组(control Tg mice)和普通小鼠对照组(control Wt mice),以生理盐水灌胃.连续处理10 wk后检测各组小鼠血清ALT、AST水平,肝组织转化生长因子-β_1(TGF-β_1)、Smad3、Smad7、结缔组织生长因子 (CTGF) mRNA表达水平及TGF-β_1、CTGF、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达水平.结果 酒精可升高转基因小鼠血清ALT、AST水平,诱发其肝脏病理损伤,但纤维化不明显;肝组织TGF-β_1、Smad3、Smad7、CTGF mRNA及TGF-β_1、CTGF、α-SMA蛋白表达增加.结论 酒精和HBV对肝损伤协同作用的机制可能与TGF-β_1、Smad3、CTGF、α-SMA表达增加以及TGF-β_1/Smads通路信号分子表达比例失调有关.
作者：黄娟娟；李兵；曹力波；欧阳林旗；刘世坤 刊期： 2010年第03期
目的 研究12名健康志愿者按400 mg单剂量和多剂量静脉滴注注射用法罗培南钠后的药代动力学.方法 多剂量给药方案为每天2次,连续5次.采用高效液相色谱法测定法罗培南钠的血药浓度及尿药浓度.血药浓度-时间数据用3p87软件处理,按两室模型拟合并求算药代动力学参数.尿药排泄数据采用尿药速率法.结果 单剂量给药后的药代动力学参数分别为: C_(max) 为(45.20±8.73) mg·L~(-1);T_(1/2α)为(0.401±0.096) h; T _(1/2β)为(1.419±0.267) h;AUC_(0-12) (以梯形法计算)分别为(59.216±11.886) mg·h·L~(-1);尿累积排泄率为(30.48±12.77)%, T_((1)/(2)) 为(0.993±0.088) h, K_e为(0.227±0.097)h~(-1).多剂量给药达稳态后的药代动力参数分别为:C~(ss)_(min)为(0.03±0.02)mg·L~(-1);C~(ss)_(max)为(44.60±9.08) mg·L~(-1);C_(av) 为(4.939±1.048) mg·L~(-1); T_(1/2α)为(0.340±0.105) h;T_(1/2β)为(1.257±0.173) h;AUC~(ss)_(0-τ)为(59.268±12.571) mg·h·L~(-1) ;尿累积排泄率为(40.55±17.53)% , T_(1/2)为(1.085±0.069) h, K_e为(0.296±0.136) h~(-1).结论 该药在人体内的分布和消除速度不随连续给药而变化.按400 mg ,每天2次的给药方案,在体内可达到有效血药浓度,且安全性好,适合临床推广应用.
作者：沈金芳；孙黎；苏克剑；刘瑾 刊期： 2010年第03期
目的 观察吡格列酮对谷氨酸所致培养皮质神经元损伤的保护作用及作用机制.方法 大鼠乳鼠大脑皮质神经元,培养7 d后用于实验.实验分为对照组、谷氨酸组、谷氨酸+吡格列酮组、谷氨酸+SP600125组、SP600125组.用MTT法测定细胞活力;Hoechst33258核染色观察细胞凋亡的形态学改变;免疫荧光染色法检测磷酸化活化转录因子2(phospho-ATF2)的表达;Western blot检测磷酸化JNK1和JNK1总量的蛋白表达水平.结果 谷氨酸(100 μmol·L~(-1))作用24 h可使体外培养的皮质神经元细胞活力明显下降,细胞凋亡百分比明显增加,磷酸化JNK1蛋白水平(谷氨酸作用2 h后检测)和磷酸化ATF2表达明显增加.吡格列酮明显对抗谷氨酸引起的皮质神经元损伤,同时明显抑制谷氨酸引起的磷酸化JNK1及磷酸化ATF2表达增多.JNK抑制剂SP600125明显对抗谷氨酸引起的神经元损伤及phospho-ATF2表达增多.结论 吡格列酮对谷氨酸引起的培养皮质神经元损伤具有明显的保护作用,吡格列酮的保护作用与抑制JNK信号转导通路有关.
作者：王蕊；金英；闫恩志；隋海娟；刘婉珠；齐志敏 刊期： 2010年第03期
阿尔采末病(Alzheimer's disease,AD)是一种以进行性认知障碍和记忆能力损害为主的中枢神经系统退行性疾病.随着人口老龄化的加剧, AD给患者及其家庭和社会带来了巨大的压力,对人类生活质量的影响乃至生存的威胁日趋明显[1,2].对于AD这类多因素疾病,目前的治疗药物主要包括胆碱能药物、非胆碱能药物、脑细胞代谢增强剂、雌激素、抗氧化剂等.但该类药物存在问题较多,诸如作用持续时间短、毒副作用大、难于透过血脑屏障、来源困难、实际应用受限等.因此,研发理想的治疗AD的新药成为目前关注的热点.近年来,多数研究者都把目光转向天然产物,对中药、植物药逐步开展了筛选、评价及研发工作,希望从中找到治疗AD的候选药物.黄芩素作为传统中药黄芩的提取物,其表现出的抗氧化、抗炎性、抗凋亡以及改善学习记忆能力的卓越功效,使其有望成为治疗AD的潜在理想药物.
作者：张瑶；冯天骄；张占军；王永炎 刊期： 2010年第03期
目的 观察人参皂苷Rg1对光老化p53信号转导途径中相关基因损伤及蛋白表达水平的影响.方法 采用8-MOP/UVA(8-methoxypsoralen and subsequent ultraviolet A irradiation)联合处理人皮肤成纤维细胞建立光老化模型,用流式细胞周期分析、SA-β-半乳糖苷酶(senescence associated β-galactosidase)化学染色,免疫荧光及Western blot等方法检测人参皂苷Rg1对培养真皮成纤维细胞多项细胞衰老指标及p53信号途径中蛋白表达的影响.结果 人参皂苷Rg1可明显抑制细胞和组织老化的指标表达(包括SA-β-Gal 表达减少及细胞周期G1阻滞率降低);减少基因氧化应激损伤产物8-oxo-dG及老化相关蛋白p53,p21~(WAF-1) 及p16~(INK-4a) 的表达.结论 人参皂苷Rg1可能通过缓解基因的氧化应激损伤,抑制相关信号转导,从而缓解细胞光老化进程.
作者：高瑛瑛；刘文丽；周炳荣；李威；骆丹 刊期： 2010年第03期
目的 研究海兔素(Aplysin)对人胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响.方法 MTT法测定海兔素对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响;倒置显微镜观察细胞生长状态的变化;HE染色检测细胞凋亡情况;RT-PCR法检测SGC-7901细胞中COX-2 mRNA的表达.结果 经60、120、240、480 mg·L~(-1) 海兔素作用24、48 h后,SGC-7901细胞的生长增殖均明显受到抑制,呈量效依赖性.延长作用时间,抑制作用差异无显著性(P ＞0.05);120、240 mg·L~(-1) 海兔素作用24 h后,细胞生长状态明显下降;经120、240 mg·L~(-1) 海兔素处理18 h后,细胞凋亡率分别为(15.0±2.12)%和(18.4±2.30)%,与对照组(1.4±0.55)%比较差异均有显著性(P <0.05); 60、120、240 mg·L~(-1) 海兔素处理24 h后,SGC-7901细胞COX2 mRNA水平有下调趋势,但差异无显著性(P ＞0.05).结论 海兔素对人胃癌SGC-7901细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用.
作者：刘颖；梁惠；苏爱；贺娟；于红 刊期： 2010年第03期
低浓度的毒物往往存在对生物体毒物兴奋效应(hormesis),这种非线性剂量效应关系是近年来评价药物毒性的一种新方法~([1]) .低水平的亚硝酸盐暴露对细胞生物学效应实验研究文献报道较少,为了研究亚硝酸盐对肝源性细胞生长的毒物兴奋效应,课题组利用人肝癌SMMC-7721细胞,研究了亚硝酸盐从低浓度到高浓度时细胞增殖、凋亡、低浓度预适应细胞保护作用等毒物兴奋效应关键指标的变化.
作者：孙玉生；史齐；李延红；石贞玉；厉永强；刘彬；皇甫超申 刊期： 2010年第03期
特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一种病因未明的肺间质性疾病,以肺泡上皮损伤、纤维细胞增殖、肌成纤维细胞形成、细胞外基质沉积为主要病理特征.CXCR4是纤维细胞主要的趋化因子受体,CXCL12是CXCR4的唯一配体.大量研究表明,在缺氧、HIF-1α、PI3K-Akt-mTOR路径的调节下,CXCL12/CXCR4生物轴(CXCL12/CXCR4 biological axis)能促进纤维细胞增殖、肌成纤维细胞形成、细胞外基质沉积,加速肺纤维化发病进程.该文将就CXCL12/CXCR4生物轴在特发性肺纤维化发病过程中的作用进行综述.
作者：崔红霞；冯一中；顾振纶；蒋小岗；郭次仪 刊期： 2010年第03期
目的 分析odds ratio在医学动物实验中的应用现状.方法 以医学动物实验中常用动物模型及优势比或odds ratio为检索式进行搜索,分别对比分析中外数据库中7种动物模型实验中应用odds ratio的状况.同时,给出范例,说明OR值的计算方法及不同结果的实际意义.结果 动物模型实验中使用OR值作为统计指标的寥寥无几.结论 OR值的重要性在国内没有得到足够的关注.
作者：迟琼；邹泽红；傅意玲；陶爱林 刊期： 2010年第03期
目的 从噬菌体抗体库中筛选抗CCR7单链融合抗体,并对其生物学特性进行初步检测.方法 PCR检测大肠杆菌中ScFv基因插入率;琼脂糖凝胶电泳鉴定Sfi I和Not I双酶切质粒的结果;分别以乳腺癌细胞及CCR7多肽片段为靶抗原对抗体库进行4轮和3轮筛选富集.将阳性克隆转化E.coli HB2151进行可溶表达.抗体亲和层析纯化后,经Western blot鉴定,通过ELISA法检测可溶性ScFv抗体的免疫活性.免疫细胞化学和放射免疫显像鉴定scFv抗体与乳腺癌细胞结合的特异性.结果 ScFv基因插入率为90%(18/20),双酶切鉴定检测到目的 条带.经4轮细胞筛选,3轮抗原筛选抗CCR7抗原的噬菌体抗体得到了明显富集,在E.coli HB2151中实现可溶表达.Western blot结果显示获得抗体相对分子质量为34 ku左右.免疫细胞化学检测与放射免疫显像均证实单链抗体与表达CCR7的乳腺癌细胞MDA-MB-435s特异性结合.结论 成功从噬菌体抗体库中筛选获得具有较高特异性的抗CCR7单链抗体.抗体在体内体外均与肿瘤细胞表达特异抗原结合.
作者：樊春波；李少林；彭志平；罗弋；曹辉；王洁 刊期： 2010年第03期
目的 建立一种基于累积周边活动时间/周边时间的比值(accumulate peripheral active time percent,APATP)的行为学评价模型.方法 利用视频跟踪系统检测戊巴比妥钠和地西泮诱导小鼠自发活动并提取相应数据,并计算得到APATP.采用DAS软件对数据进行处理,得到小鼠活动趋稳半衰期(T_(1/2α))、对数曲线下面积(lgAUC0-60)和对数尾点回归值(lgPmin)进行统计学分析.结果 各组小鼠的APATP随时间的延长而逐步下降,均符合方程P=Ae~(-αt)+Be~(-βt).与正常组比较,PB 5 mg·kg~(-1)组T_(1/2α)、lgAUC0-60和lgPmin略有下降,而PB 10 mg·kg~(-1)组(均为 P <0.01)和PB 15 mg·kg~(-1) 组(P <0.01, P <0.01和 P >0.05)均能不同程度的抑制3参数;与PB 10 mg·kg~(-1) 组比较,PB 15 mg·kg~(-1)组3参数有所回升(P>0.05,P<0.05和P <0.05).本模型参数lgAUC0-60 和lgPmin与总路程具有较好的一致性(r~2=1.0000和r~2=0.9995,均为P<0.01).应用地西泮进一步证实了模型的可行性,具有类似的特点;与正常组比较,地西泮2、4 mg·kg~(-1)组3参数均下降(均为P<0.01),认为两组的镇静效应与正常等同;与PB 10 mg·kg~(-1)比较,地西泮2、4 mg·kg~(-1) 组的3参数差异均无显著性,认为两组地西泮镇静作用与之等同.结论 ICR小鼠累积周边活动时间占比模型可用于评价小鼠自发活动及药物干预效果.
作者：虞希冲；杨伟；吴波拉 刊期： 2010年第03期
目的 研究豹皮樟总黄酮(total flavonoids of Litsea coreana Leve,TFLC)对胶原性关节炎大鼠(collagen-induced arthritis,CIA)腹腔巨噬细胞(peritoneal macrophage,PMΦ)产生细胞因子及其免疫功能的影响.方法 Ⅱ型胶原蛋白(collagen Ⅱ,CII)和氟氏完全佐剂(CFA)诱导大鼠胶原性关节炎(CIA)模型,采用体重、足爪肿胀及病理组织学变化等指标评价TFLC对CIA大鼠的治疗作用;无菌取PMΦ,体外用药(TFLC 0.05、0.5、5 mg·L~(-1)),采用小鼠胸腺细胞增殖法检测CIA大鼠PMΦ分泌白细胞介素1(interleukin-1,IL-1)的水平,小鼠脾淋巴细胞增殖法检测CIA大鼠脾细胞分泌白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)的水平,放射免疫测定法和反转录RT-PCR法分别检测CIA大鼠PMΦ中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的分泌和表达,中性红法测定CIA大鼠PMΦ的吞噬功能.结果 TFLC(50、100、200 mg·kg~(-1))能抑制关节肿胀,增加CIA大鼠体重,改善膝关节病理损伤.TFLC(0.05、0.5、5 mg·L~(-1))可降低 CIA大鼠PMΦ过强的吞噬功能,下调脾细胞IL-2的分泌水平和腹腔巨噬细胞IL-1的分泌水平,同时抑制PMΦ TNF-α的分泌水平以及TNF-α mRNA的表达.结论 TFLC对CIA大鼠关节炎具有明显抑制作用,其抗炎和免疫抑制作用与其降低CIA大鼠PMΦ过强的吞噬功能,抑制细胞因子的分泌和表达有关.
作者：周倩；李俊；王婷玉；王小华 刊期： 2010年第03期
目的 初步探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)通过何种途径发挥抗急性髓性白血病作用.方法 以人急性髓性白血病细胞Kasumi-1为研究对象,不同浓度Res作用不同时间,甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期分布的变化,计算细胞凋亡率,进而分别从基因和蛋白水平检测Bcl-2、Bax表达,应用免疫印迹及荧光素酶报告基因分析等方法检测Res干预前后信号转导子和转录激活子(signal transducers and activators of transcription,STAT)3的变化.利用白血病小鼠模型以Western blot与免疫组化等方法在整体水平研究Res对动物存活状态及STAT3活性表达的影响.结果 Res明显抑制白血病细胞Kasumi-1生长增殖、阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡、下调Bcl-2/Bax比值以及STAT3的活性水平;此外,Res还能剂量依赖的促进荷瘤小鼠存活、减弱小鼠p-STAT3表达.结论 提取自传统中药材的Res是一种高效低毒的新型抗肿瘤药物,通过多种机制发挥抗白血病效应,特别是对STAT3信号途径的调控可能是其重要的作用靶点.
作者：王伟；李覃；陈虹；郭小芹；牛秀珑 刊期： 2010年第03期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
