张瑶；冯天骄；张占军；王永炎
目的 探讨心肌钙反常模型诱导心肌细胞因子的表达及地尔硫卓的干预作用.方法 采用Langendorff装置对离体大鼠心脏进行钙反常灌流(无钙灌流液5 min,立即换正常钙灌流液灌流30 min),建立心肌细胞钙超载模型.设立钙超载组、正常对照组、无钙对照组、钙超载给药组(地尔硫卓)和无钙给药组.电镜和光镜观察心肌病理和超微结构的变化.原子分光光度计检测心肌钙离子浓度,RT-PCR法测心肌细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、TGF-β1和IL-10的表达.结果 钙超载组光镜下未见明显炎症细胞浸润,电镜结果显示心肌细胞膜、细胞核和线粒体明显破坏.与正常对照组比较,TNF-α、IL-1β和IL-6明显增高,而TGF-β1和IL-10无明显变化.钙超载给药组(地尔硫卓)显示心肌损伤明显改善,TNF-α、IL-1β和IL-6明显下降.正常对照组、无钙对照组和无钙给药组心肌光镜和电镜下无明显差异,心肌Ca 2+ 浓度差异无统计学意义,细胞因子的表达差异也无统计学意义.结论 心肌钙反常模型诱导心肌表达TNF-α、IL-1β和IL-6,对TGF-β1和IL-10无明显影响,地尔硫卓能抑制心肌细胞钙超载诱导的TNF-α、 IL-1β和IL-6表达.
作者：刘英；程翔；廖玉华 刊期： 2010年第03期
目的 建立高脂血症实验动物模型新型方法.方法 30只小鼠随机分为空白对照组、阳性对照组及模型组.空白对照组喂饲标准饲料,阳性对照组喂饲高脂饲料;模型组饲以标准饲料和牛奶,30 d后检测血清和肝脏胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及肝脏指数(LI),光镜观察肝脏病理变化.结果 与空白组相比,模型组LI及血液和血清中TC、TG、LDL-C明显升高,而HDL-C明显降低.光镜下模型组肝脏均出现弥漫性肝细胞脂肪变性和炎症病灶.结论 小鼠喂饲30 d标准饲料和牛奶,可建立理想的高脂血症模型.
作者：吴争荣；马志刚；董永喜；黄金程；贺殿 刊期： 2010年第03期
目的 探讨地尔硫卓对刀豆凝集素(Con A)诱导单个核细胞细胞因子表达的影响.方法 ficoll密度梯度离心法分离大鼠脾脏单个核细胞,分对照组、Con A组和地尔硫卓-Con A处理组.ELISA测定上清中细胞因子浓度.结果 单个核细胞在Con A的刺激下,其上清液中IL-10、TNF-α、IL-6急剧增高,IL-1β低水平表达,TGF-β_1未见明显表达.地尔硫卓干预后,IL-10、TNF-α、IL-6的浓度明显减低.结论 地尔硫卓能抑制Con A所诱导的单个核细胞IL-10、TNF-α、IL-6的表达.
作者：刘英；程翔；廖玉华 刊期： 2010年第03期
目的 从噬菌体抗体库中筛选抗CCR7单链融合抗体,并对其生物学特性进行初步检测.方法 PCR检测大肠杆菌中ScFv基因插入率;琼脂糖凝胶电泳鉴定Sfi I和Not I双酶切质粒的结果;分别以乳腺癌细胞及CCR7多肽片段为靶抗原对抗体库进行4轮和3轮筛选富集.将阳性克隆转化E.coli HB2151进行可溶表达.抗体亲和层析纯化后,经Western blot鉴定,通过ELISA法检测可溶性ScFv抗体的免疫活性.免疫细胞化学和放射免疫显像鉴定scFv抗体与乳腺癌细胞结合的特异性.结果 ScFv基因插入率为90%(18/20),双酶切鉴定检测到目的 条带.经4轮细胞筛选,3轮抗原筛选抗CCR7抗原的噬菌体抗体得到了明显富集,在E.coli HB2151中实现可溶表达.Western blot结果显示获得抗体相对分子质量为34 ku左右.免疫细胞化学检测与放射免疫显像均证实单链抗体与表达CCR7的乳腺癌细胞MDA-MB-435s特异性结合.结论 成功从噬菌体抗体库中筛选获得具有较高特异性的抗CCR7单链抗体.抗体在体内体外均与肿瘤细胞表达特异抗原结合.
作者：樊春波；李少林；彭志平；罗弋；曹辉；王洁 刊期： 2010年第03期
目的 观察人参皂苷Rg1对光老化p53信号转导途径中相关基因损伤及蛋白表达水平的影响.方法 采用8-MOP/UVA(8-methoxypsoralen and subsequent ultraviolet A irradiation)联合处理人皮肤成纤维细胞建立光老化模型,用流式细胞周期分析、SA-β-半乳糖苷酶(senescence associated β-galactosidase)化学染色,免疫荧光及Western blot等方法检测人参皂苷Rg1对培养真皮成纤维细胞多项细胞衰老指标及p53信号途径中蛋白表达的影响.结果 人参皂苷Rg1可明显抑制细胞和组织老化的指标表达(包括SA-β-Gal 表达减少及细胞周期G1阻滞率降低);减少基因氧化应激损伤产物8-oxo-dG及老化相关蛋白p53,p21~(WAF-1) 及p16~(INK-4a) 的表达.结论 人参皂苷Rg1可能通过缓解基因的氧化应激损伤,抑制相关信号转导,从而缓解细胞光老化进程.
作者：高瑛瑛；刘文丽；周炳荣；李威；骆丹 刊期： 2010年第03期
烟酸是广谱调脂药,能明显降低血浆甘油三酯及升高高密度脂蛋白-胆固醇.缓释型烟酸与他汀类药物联合能达到全面调脂、减少心血管剩留风险的目标,并可能优于他汀与其它类调脂药合用.两者联合为临床工作者提供了一种安全、有效、经济的调脂方案.
作者：吴陈璐；赵水平；张丹华 刊期： 2010年第03期
特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一种病因未明的肺间质性疾病,以肺泡上皮损伤、纤维细胞增殖、肌成纤维细胞形成、细胞外基质沉积为主要病理特征.CXCR4是纤维细胞主要的趋化因子受体,CXCL12是CXCR4的唯一配体.大量研究表明,在缺氧、HIF-1α、PI3K-Akt-mTOR路径的调节下,CXCL12/CXCR4生物轴(CXCL12/CXCR4 biological axis)能促进纤维细胞增殖、肌成纤维细胞形成、细胞外基质沉积,加速肺纤维化发病进程.该文将就CXCL12/CXCR4生物轴在特发性肺纤维化发病过程中的作用进行综述.
作者：崔红霞；冯一中；顾振纶；蒋小岗；郭次仪 刊期： 2010年第03期
目的 探讨非诺贝特对大鼠全脑缺血/再灌注损伤(I/R)的保护作用及机制.方法 采用双侧颈总动脉夹闭合并低血压方法建立全脑缺血/再灌注大鼠模型.药物非诺贝特(fenofibrate,FF;33、100、300 mg·kg~(-1))在缺血前30 min灌胃给药,PPARα受体拮抗剂MK886(6 mg·kg~(-1))在给予非诺贝特300 mg·kg~(-1) 前腹腔注射.Morris 水迷宫测定大鼠空间学习能力变化,病理切片HE染色观察海马神经元形态结构变化,免疫组化染色检测海马组织核转录因子 NF-κB p65蛋白的表达,生化酶学方法观察超氧歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量变化,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞因子IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α含量变化.结果 非诺贝特能明显缩短全脑缺血/再灌注大鼠的寻台潜伏期,减轻全脑缺血/再灌注大鼠海马神经元损伤,降低海马神经元NF-κB p65蛋白表达,明显阻遏缺血/再灌注大鼠海马IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA含量的升高和IL-10含量及SOD活性的降低;预先给予MK886能取消非诺贝特的作用.结论 非诺贝特对缺血/再灌注脑损伤有明显保护作用,其机制与激活PPARα,抑制NF-κB活性,抑制CNS炎症反应和氧化应激有关.
作者：张艳丽；杨俊卿 刊期： 2010年第03期
目的 探讨甲基苯丙胺(methamphetamine,MA)所导致的大鼠神经毒性及纹状体硝化作用的改变.方法 建立MA给药模型,对照组给予等量生理盐水;观察两组大鼠的行为学改变,体温变化,纹状体中NO含量,NOS活性和蛋白质硝化水平的变化情况.结果 MA组大鼠刻板行为评分和体温均高于对照组(P ＜0.01);与对照组相比,MA组大鼠纹状体NO含量及NOS活性增加(P ＜0.01);纹状体蛋白硝化水平明显增加(P ＜0.01),差异有显著性.结论 MA可导致大鼠行为学改变和体温变化,大鼠脑组织NO含量、NOS活性及蛋白硝化水平的增高可能是MA中枢神经系统损伤的重要机制.
作者：王双双；杨敏慧；何琼；谭晓辉；王慧君 刊期： 2010年第03期
目的 评估蛋白激酶A(PKA)抑制剂H-89对大鼠心室肌细胞膜主要离子通道和转运体的影响.方法 应用全细胞膜片钳技术观察H-89对胶原酶分解的成年SD大鼠心室肌细胞膜离子电流L-型钙电流(I_(Ca-L))、电压门控钠电流(I_(Na))、内向整流钾电流(I_(K1))、瞬时外向钾电流(I_(to))和钠钙交换体电流(I_(Na/Ca))的影响.结果 1～10 μmol·L~(-1) H-89可浓度依赖性抑制I_(Ca-L)、I_(Na)、I_(to)(P<0.05);对I_(K1)有更强的抑制作用,在较低浓度(5μmol·L~(-1))时即可完全抑制I_(K1)(P<0.05),与0.5 mmol·L~(-1)氯化钡的作用类似.但在1～10 μmol·L~(-1)浓度范围内H-89对I_(Na/Ca)无明显作用(P>0.05).结论 H-89对心肌细胞膜电流的影响可能是其对通道的直接作用或间接通过抑制PKA所致.
作者：刘清华；刘福；张杨；吴博威 刊期： 2010年第03期
目的 观察大花罗布麻叶中槲皮素-3-O-槐糖苷和黄酮富集物对MPTP型帕金森症(Parkinson's disease,PD)小鼠模型的多巴胺能(dopaminergic,DA)神经保护作用.方法 以C57/bl6小鼠为研究对象,采用MPTP腹腔注射30 mg·kg~(-1) 连续5 d制备PD模型,口服灌胃给予槲皮素-3-O-槐糖苷25 mg·kg~(-1) 和大花罗布麻叶黄酮富集物250 mg·kg~(-1) ,造模前7 d开始给药.给药结束后进行自主活动和爬杆实验测试动物行为变化,荧光法测定纹状体中多巴胺含量,石蜡切片观察黑质神经细胞病理变化,分析大花罗布麻对多巴胺能神经的保护作用.结果 槲皮素-3-O-槐糖苷25 mg·kg~(-1) 预先给药1 wk,能提升MPTP型PD小鼠的运动能力,提高纹状体中多巴胺含量,减轻黑质神经的损伤,增加酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)阳性细胞表达数量.结论 槲皮素-3-O-槐糖苷能减轻MPTP对PD小鼠的DA神经损伤.
作者：马成；马龙；RAUSCH Wolf-dieter 刊期： 2010年第03期
目的 探讨辣椒素受体(vanilloid receptor subtype 1,VR1)在慢性疼痛发生机制中的作用,构建携带VR1 siRNA的慢病毒载体并检测其对大鼠DRG神经元VR1基因的干扰作用.方法 设计靶向大鼠VR1基因的发夹状siRNA,合成两对互补的寡核苷酸序列,退火后克隆到酶切的pRNAT-U6.2/Lenti siRNA载体,通过PCR和DNA测序鉴定重组质粒.空载体及重组质粒分别与慢病毒包装质粒共转染293T细胞生成慢病毒载体.通过蛛网膜下腔将慢病毒载体注射到大鼠体内,采用RT-PCR方法检测L4-L6 DRG神经元内VR1的沉默效果.结果 测序鉴定证实目的 寡核苷酸片段被克隆到pRNAT-U6.2/Lenti载体中;经蛛网膜下腔注射后,pRNAT-U6.2/Lenti-siVR1可下调正常大鼠L4-L6 DRG神经元内VR1 mRNA的表达.结论 成功构建了靶向VR1基因的 siRNA载体,可有效抑制VR1 mRNA的表达,为深入研究和治疗慢性痛提供了有力的工具.
作者：张宏伟；方东；任鹏飞；察雪湘；聂雅莉；胡香杰；赵国强 刊期： 2010年第03期
Polo-Like激酶1(PLK1)是高度保守的丝/苏氨酸激酶,在多种人类肿瘤细胞中高表达.其在有丝分裂进程中的重要作用已经被阐明.新的研究发现, PLK1有诱导DNA合成、DNA完整性的检修以及防止细胞凋亡方面的作用.PLK1还能通过磷酸化p53而抑制其转活性,进而抑制p53发挥检验点蛋白和诱导细胞凋亡的功能.另外,PLK1与肿瘤的发生发展密切相关,还可以通过抑制MAVS调节干扰素IFN的诱导生成,破坏先天性免疫.多种PLK1的抑制剂都表现出了高效低毒的特性, PLK1有望成为恶性肿瘤治疗和免疫治疗的良好靶点.
作者：董宪喆；张鹏；毕明刚 刊期： 2010年第03期
目的 探讨胡黄连苷Ⅱ(picrodideⅡ)对大鼠脑缺血/再灌注损伤脑组织半胱天冬酶-3(Caspase-3)和多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶(PARP)表达的影响.方法 线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞/再灌注模型;经尾静脉注射胡黄连苷Ⅱ(10 mg·kg~(-1))和丹参素钠(10 mg·kg~(-1))干预治疗,Bederson法评价动物神经行为功能,氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察脑梗死体积,苏木精伊红(HE)染色观察脑组织结构,原位末端标记(TUNEL)法检测神经细胞凋亡,免疫组化和酶联免疫法检测Caspase-3和PARP表达.结果 脑缺血2 h/再灌注22 h后,大鼠出现神经行为功能障碍,缺血侧半球出现梗死病灶,脑组织Caspase-3和PARP表达增强,细胞凋亡数较假手术组明显增多(P<0.05).胡黄连苷组和丹参素钠组大鼠Bederson's评分和脑梗死体积,Caspase-3和PARP表达以及细胞凋亡数量较阴性对照组均降低(P <0.05).但胡黄连苷组与丹参素钠组比较,各项指标均差异无显著性(P >0.05).结论 胡黄连苷Ⅱ可能通过下调Caspase-3和PARP表达,抑制脑缺血/再灌注损伤诱导的细胞凋亡,从而改善动物的神经行为功能.
作者：李琴；郭云良；李震；徐新颖 刊期： 2010年第03期
阿尔采末病(Alzheimer's disease,AD)是一种以进行性认知障碍和记忆能力损害为主的中枢神经系统退行性疾病.随着人口老龄化的加剧, AD给患者及其家庭和社会带来了巨大的压力,对人类生活质量的影响乃至生存的威胁日趋明显[1,2].对于AD这类多因素疾病,目前的治疗药物主要包括胆碱能药物、非胆碱能药物、脑细胞代谢增强剂、雌激素、抗氧化剂等.但该类药物存在问题较多,诸如作用持续时间短、毒副作用大、难于透过血脑屏障、来源困难、实际应用受限等.因此,研发理想的治疗AD的新药成为目前关注的热点.近年来,多数研究者都把目光转向天然产物,对中药、植物药逐步开展了筛选、评价及研发工作,希望从中找到治疗AD的候选药物.黄芩素作为传统中药黄芩的提取物,其表现出的抗氧化、抗炎性、抗凋亡以及改善学习记忆能力的卓越功效,使其有望成为治疗AD的潜在理想药物.
作者：张瑶；冯天骄；张占军；王永炎 刊期： 2010年第03期
目的 观察银杏酮酯GBE50对模拟缺血游离豚鼠心室肌细胞L型钙电流和游离钙浓度的影响,探讨GBE50抗心肌缺血的作用机制.方法 应用单酶酶解法分离游离单个豚鼠心室肌细胞,采用膜片钳全细胞记录心室肌细胞L型钙电流,通过激光共聚焦显微镜扫描测定细胞内游离钙浓度的动态变化.结果 缺血抑制豚鼠心室肌细胞的 I_(Ca-L) (n =9, P <0.01),使豚鼠心室肌细胞内游离钙增加(n =10, P <0.01),而50 mg·L~(-1) GBE50减轻缺血对 I_(Ca-L) 的抑制效应(n=6,P >0.05),减少缺血后心室肌细胞内游离钙浓度的增加(n =10, P >0.05).结论 GBE50可减轻心肌缺血区域与非缺血区域电生理的异质性,维持缺血后豚鼠心肌细胞电生理的稳定性,并减轻缺血后心肌细胞内钙超载介导的心肌损伤.
作者：刘爱华；张志雄 刊期： 2010年第03期
低浓度的毒物往往存在对生物体毒物兴奋效应(hormesis),这种非线性剂量效应关系是近年来评价药物毒性的一种新方法~([1]) .低水平的亚硝酸盐暴露对细胞生物学效应实验研究文献报道较少,为了研究亚硝酸盐对肝源性细胞生长的毒物兴奋效应,课题组利用人肝癌SMMC-7721细胞,研究了亚硝酸盐从低浓度到高浓度时细胞增殖、凋亡、低浓度预适应细胞保护作用等毒物兴奋效应关键指标的变化.
作者：孙玉生；史齐；李延红；石贞玉；厉永强；刘彬；皇甫超申 刊期： 2010年第03期
目的 研究豹皮樟总黄酮(total flavonoids of Litsea coreana Leve,TFLC)对胶原性关节炎大鼠(collagen-induced arthritis,CIA)腹腔巨噬细胞(peritoneal macrophage,PMΦ)产生细胞因子及其免疫功能的影响.方法 Ⅱ型胶原蛋白(collagen Ⅱ,CII)和氟氏完全佐剂(CFA)诱导大鼠胶原性关节炎(CIA)模型,采用体重、足爪肿胀及病理组织学变化等指标评价TFLC对CIA大鼠的治疗作用;无菌取PMΦ,体外用药(TFLC 0.05、0.5、5 mg·L~(-1)),采用小鼠胸腺细胞增殖法检测CIA大鼠PMΦ分泌白细胞介素1(interleukin-1,IL-1)的水平,小鼠脾淋巴细胞增殖法检测CIA大鼠脾细胞分泌白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)的水平,放射免疫测定法和反转录RT-PCR法分别检测CIA大鼠PMΦ中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的分泌和表达,中性红法测定CIA大鼠PMΦ的吞噬功能.结果 TFLC(50、100、200 mg·kg~(-1))能抑制关节肿胀,增加CIA大鼠体重,改善膝关节病理损伤.TFLC(0.05、0.5、5 mg·L~(-1))可降低 CIA大鼠PMΦ过强的吞噬功能,下调脾细胞IL-2的分泌水平和腹腔巨噬细胞IL-1的分泌水平,同时抑制PMΦ TNF-α的分泌水平以及TNF-α mRNA的表达.结论 TFLC对CIA大鼠关节炎具有明显抑制作用,其抗炎和免疫抑制作用与其降低CIA大鼠PMΦ过强的吞噬功能,抑制细胞因子的分泌和表达有关.
作者：周倩；李俊；王婷玉；王小华 刊期： 2010年第03期
目的 观察吡格列酮对谷氨酸所致培养皮质神经元损伤的保护作用及作用机制.方法 大鼠乳鼠大脑皮质神经元,培养7 d后用于实验.实验分为对照组、谷氨酸组、谷氨酸+吡格列酮组、谷氨酸+SP600125组、SP600125组.用MTT法测定细胞活力;Hoechst33258核染色观察细胞凋亡的形态学改变;免疫荧光染色法检测磷酸化活化转录因子2(phospho-ATF2)的表达;Western blot检测磷酸化JNK1和JNK1总量的蛋白表达水平.结果 谷氨酸(100 μmol·L~(-1))作用24 h可使体外培养的皮质神经元细胞活力明显下降,细胞凋亡百分比明显增加,磷酸化JNK1蛋白水平(谷氨酸作用2 h后检测)和磷酸化ATF2表达明显增加.吡格列酮明显对抗谷氨酸引起的皮质神经元损伤,同时明显抑制谷氨酸引起的磷酸化JNK1及磷酸化ATF2表达增多.JNK抑制剂SP600125明显对抗谷氨酸引起的神经元损伤及phospho-ATF2表达增多.结论 吡格列酮对谷氨酸引起的培养皮质神经元损伤具有明显的保护作用,吡格列酮的保护作用与抑制JNK信号转导通路有关.
作者：王蕊；金英；闫恩志；隋海娟；刘婉珠；齐志敏 刊期： 2010年第03期
肝星状细胞(hepatic stellate cell, HSC)是肝纤维化形成的主要效应细胞,TGFβ_1是目前已知重要的致肝纤维化细胞因子之一~([1]).因此,降低TGFβ_1表达,抑制HSC增殖,诱导其凋亡是治疗肝纤维化的重要策略~([2,3]).国内外研究资料显示乌索酸具有护肝作用~([4～7]),本研究拟观察乌索酸对人HSC凋亡及TGFβ_1 mRNA表达的影响,以探索其在抗肝纤维化方面的作用.
作者：王博龙 刊期： 2010年第03期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
