任振宇；于小倩；彭双清
目的 在中医药理论指导下建立SD大鼠阳虚便秘动物模型并对其进行评价.方法 应用山西白醋加活性炭冰水法制作阳虚便秘动物模型.观察模型动物的一般生物学特征变化,进行模型动物的排便和在体结肠肌电等实验,检测模型动物的胃肠激素、肠神经递质等客观指标.结果 造模后,模型动物的一般生物学特征表现为:腹胀、披毛蓬松、倦怠蜷缩、体重减轻、大便色黑、干燥;与空白对照组比较,模型动物的首粒排便时间明显延迟,6 h内排便粒数明显减少,结肠收缩频率明显降低、结肠收缩幅度减弱,胃肠激素、肠神经递质分泌紊乱;经通便灵药物治疗后,上述症状和指标明显改善.造模后动物恢复6 d,与空白对照组比较,其首粒排便时间和6 h内排便粒数仍有差异.结论 应用山西白醋加活性炭冰水能复制出稳定的SD大鼠阳虚便秘模型.
作者：彭成；王岚；赵小梅 刊期： 2007年第03期
目的 筛选鉴定血管内皮细胞新型嘌呤受体功能性抗体,为进一步研究新型嘌呤受体提供标志物.方法 大鼠血管内皮细胞蛋白质免疫BALB/c小鼠,采用噬菌体抗体库技术构建小鼠抗大鼠血管内皮细胞的单链噬菌体抗体库.利用新型嘌呤受体在主动脉内皮细胞表达而在血管平滑肌细胞不表达的特点,先用主动脉内皮细胞进行阳性筛选,再用血管平滑肌细胞进行阴性筛选,从噬菌体抗体库中富集主动脉内皮细胞特异抗体.对筛选到的抗体经可溶性表达后,采用离体血管环功能试验,筛选新型嘌呤受体特异单链抗体.采用免疫组化实验对筛选到的抗体进行鉴定.结果 经过4次免疫后,小鼠血清抗内皮细胞蛋白的IgG效价为1:16 000,通过噬菌体表面呈现,得到小鼠抗大鼠内皮细胞免疫噬菌体抗体库容量为8×106.4轮主动脉内皮细胞阳性筛选及大鼠血管平滑肌细胞阴性筛选富集到约 2 500株主动脉内皮细胞特异抗体,可溶性表达后,在离体血管环上,经过4轮的逐级淘筛得到一株影响腺苷诱发NO依赖性血管收缩反应的功能性抗体ScFv-B,其抑制率为83.4%±21.6%.免疫组化鉴定此抗体与内皮细胞特异结合,功能性鉴定此抗体对腺苷诱发的肠肌收缩反应无影响,初步认为此抗体是新型嘌呤受体特异性功能抗体.结论 本研究通过噬菌体抗体库的构建及抗体筛选和鉴定,得到了新型嘌呤受体特异性功能抗体ScFv-B,为进一步采用表达文库筛选的方法克隆新型嘌呤受体基因提供了良好的工具.
作者：山丽梅；赵艳玲；张萍；金城；蔡光明；肖小河 刊期： 2007年第03期
肿瘤坏死因子a(TNE-a)作为一种效应和调节的细胞因子,在炎症反应、免疫调节等方面重要作用[1].类风湿性关节炎(RA)的发病机制迄今仍不十分清楚,但TNF-a在RA中起很关键的作用,RA患者关节中的巨噬细胞和淋巴细胞产生大量的TNF-a[2].重组人肿瘤坏死因子受体融合蛋白(rhTNFR:Fc)是1个二聚体的融合蛋白,包含人75ku肿瘤坏死因子受体(TNFR)(p75)的细胞膜外配基结合部分与人1gG1的Fc片段.
作者：康建功；刘树刚；李凯；王睿 刊期： 2007年第03期
兴奋性氨基酸受体的过度活化会导致神经元的兴奋性死亡,该过程与细胞内钙离子([Ca2+]i)稳态失调密切相关.谷氨酸兴奋毒性参与许多急慢性神经病变的发病及病程进展,提示Ca2+信号传导阻滞剂的应用可能在疾病的早期阶段就阻断病变进程,达到有效治疗.
作者：任振宇；于小倩；彭双清 刊期： 2007年第03期
目的 构建可以高效表达人过氧化物酶体增殖物激活受体(αhPPARα)的真核细胞表达载体,为筛选作用于PPARα受体的药物提供分子平台.方法 将HepG2细胞总RNA经逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)克隆hPPARα全长基因,用 BamH Ⅰ、Sal Ⅰ双酶切后,与相同双酶切的pIRES2-EGFP载体连接,构建phPPARα-IRES2-EGFP重组质粒,用酶切及基因测序鉴定重组质粒中hPPARα基因的完整性和可靠性;重组质粒转染293细胞,荧光显微镜观察EGFP报告基因表达强度,并对转染细胞的hPPARα表达进行荧光定量PCR及免疫细胞化学检测.结果 经酶切和测序证实重组质粒构建正确,并在转染的293细胞中获得hPPARα的高效表达.结论 成功构建重组质粒phPPARα-IRES2-EGFP,为基于hPPARα受体靶点的药物筛选平台的建立提供了高效表达hPPARα的重组载体.
作者：章涛；杨贵忠；袁野；李苌清；万敬员；蒋建新；周岐新 刊期： 2007年第03期
目的 研究海洛因对大鼠肾脏功能及代谢的影响.方法 50只成年♀性Wistar大鼠平均分为5组,对照组腹腔注射生理盐水12 d,两给药组分别腹腔注射海洛因3 d和9 d,两停药组腹腔注射海洛因9 d后分别停药3 d和9 d.自动生化分析仪分析血浆尿酸(UA)、尿素氮(UN)、肌酐(CRE)及肾脏组织谷氨酸脱氢酶(GDH)含量,比色法检测肾脏组织腺苷脱氨酶(ADA)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、谷氨酰胺合成酶(GS)及谷氨酸(Glu)含量.结果 与对照组相比,两海洛因给药组血浆中CRE及UN均无明显升高,两停药组CRE升高( P＜0.05),UN在停药9 d后明显升高( P＜0.01);两给药组大鼠血浆UA比对照组明显升高,两停药组大鼠血浆UA与对照组无差异;各实验组大鼠肾脏ADA含量均低于对照组;与对照组比,肾脏GS含量从给药3 d开始升高( P＜0.01),停药9 d后恢复到对照组水平;肾脏GDH给药9 d后明显低于对照组( P＜0.01),停药9 d后高于对照组( P＜0.05);实验中XOD、Glu含量无变化.结论 长期应用海洛因影响肾脏组织的代谢并损害肾脏功能.
作者：付海英；迟秀梅；张纪周；李奇；马宁；洪敏 刊期： 2007年第03期
目的 观察HDAC抑制剂曲古霉素A(TSA)和针对DNA的抗癌药物联用对膀胱癌T24细胞的杀伤作用.方法 用MTT法测定TSA单用及分别与ADM、MMC和DDP联用对T24细胞的抑制率,用金氏公式法判断联合用药的效果.结果 TSA分别与ADM、MMC、DDP联合用药对T24细胞的抑制率均随着浓度的增加而明显增加,TSA与MMC联用的协同作用明显,而TSA与ADM和DDP在中低剂量下联用亦表现为协同作用.结论 HDAC抑制剂TSA可明显增强针对DNA的抗癌药物对膀胱癌细胞的杀伤作用,有希望应用于晚期膀胱癌的化疗方案中.
作者：曲巍；王立明；朱有华；许涛；付莉莉 刊期： 2007年第03期
目的 通过观察阿托伐他汀对LPS诱导的人血管内皮细胞IκBα表达的影响来探明其抑制核因子κB活性的机制.方法 将培养的人血管内皮细胞株ECV304,分为对照组、LPS组、阿托伐他汀低、中、高3个浓度组.阿托伐他汀3组加入不同阿托伐他汀孵育后与LPS组均加入LPS刺激30 min.用免疫荧光法观察核因子κB活化情况,用逆转录-聚合酶链反应观察IκBα mRNA的表达情况,用蛋白印迹法观察IκBα及p-IκBα蛋白含量的变化.结果 阿托伐他汀3组能够抑制p65由胞质转移至核内、能够剂量依赖性的降低pIκBα蛋白表达、减少IκBα的降解;阿托伐他汀高浓度组IκBαmRNA的表达增加.结论 阿托伐他汀可以通过影响IκBα的表达和降解来抑制核因子κB活性.
作者：赵钢；刘闺男；李志明 刊期： 2007年第03期
目的 观察中药山茱萸水提液对线粒体呼吸链复合体IV(即细胞色素C氧化酶)抑制剂叠氮钠(NaN3)致神经细胞骨架系统损伤的拮抗作用,探讨山茱萸在防治阿尔采末病中的机制.方法 山茱萸水提液(0.125～8 g生药·L-1)分别与SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞及原代培养新生大鼠海马神经元共孵育24～48 h,加入64 mmol·L-1叠氮钠作用4～6 h,MTT、LDH法测定细胞存活率,激光共聚焦显微镜观察细胞微管结构及微管相关蛋白表达的变化.结果 1～4 g·L-1山茱萸能明显拮抗叠氮钠致神经细胞存活率下降;使损伤的微管结构基本恢复正常,微管相关蛋白表达增加,尤以突起内为明显.结论 中药山茱萸能明显拮抗线粒体缺陷致神经细胞损伤,其机制与保护细胞骨架系统有关,对于防治阿尔采末病等神经退行性疾病有一定应用前景.
作者：张兰；李林；安文林；薛冰 刊期： 2007年第03期
目的 探讨迷迭香酸对过氧化氢(H2O2)诱导血管平滑肌细胞凋亡的保护作用及其机制.方法 流式细胞术检测细胞凋亡率;吖啶橙(acridine orange ,AO)染色观察细胞形态学变化;MTT法检测细胞活性;Western blot检测细胞中Bcl-2、Bax、Fas和FasL蛋白的表达.结果 经500 μmol·L-1 H2O2处理24 h后,细胞凋亡率为34.9%±2.55%,出现核固缩、核碎裂等典型的凋亡形态学改变,所以随后实验选择500 μmol·L-1 H2O2为诱导血管平滑肌细胞凋亡的佳浓度.①500 μmol·L-1的H2O2 处理血管平滑肌细胞24 h能引起细胞活性明显降低;细胞凋亡率明显增加,达35.7%±1.33%;细胞中Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达升高,Bcl-2/Bax蛋白比值减少,Fas和FasL蛋白表达升高.②用迷迭香酸(10、20、40 μmol·L-1)预处理细胞30 min,可以增加细胞活性;降低细胞凋亡率,呈浓度依赖性;细胞中Bcl-2/Bax蛋白比值升高,Fas和FasL蛋白表达降低.结论 迷迭香酸能拮抗H2O2诱导血管平滑肌细胞凋亡;其作用机制可能与升高细胞中Bcl-2/Bax蛋白比值,减少Fas、FasL蛋白表达有关.
作者：郭峰；朱炳阳；迟秀玲；黄红林 刊期： 2007年第03期
目的 构建耐药性突变HIV-1蛋白酶(protease PR)敏感切割位点序列体外噬菌体筛选模型,研究HIV-1蛋白酶耐药性突变与敏感切割序列的关系.方法 用含随机核苷酸序列的引物PCR方法对HIV-1gag基因上的CAP2片段的PR切割位点处的氨基酸序列进行随机化,再将重组CAP2片段和NC片段拼接克隆于噬菌体展示载体LD3-pCANTAB5S上,建立HIV-1蛋白酶靶蛋白切割位点随机化的噬菌体展示文库.结果 该噬菌体展示文库库容量为2.6×106,滴度为4.1×1015TU·L-1 ,CAP2片段插入率为47.8%;序列分析显示切割位点中随机化的核苷酸与氨基酸均呈随机性分布.结论 成功地构建HIV-1蛋白酶的敏感切割序列噬菌体筛选文库,为筛选到突变PR敏感切割序列噬菌体及研究耐药HIV-1蛋白酶抑制剂与突变PR的关系打下基础.
作者：卢海妹；周波；潘卫；贾建安；王锦红；温宗梅；何俊；陈露；邓松华 刊期： 2007年第03期
目的 研究edelfosine(ET-18-OCH3,依地福新)抑制schizosaccharomyces pombe(S.pombe,粟酒裂殖酵母)细胞分裂的作用机制.方法 应用胞质分裂抑制试验,平行生长抑制试验,观察edelfosine对S.pombe细胞分裂和生长的抑制作用;应用酵母基因再转染试验,探索其作用机制.结果 edelfosine在低剂量浓度时,抑制S.pombe细胞分裂;高剂量时抑制其生长.平行生长抑制试验显示,删除了mid2、spm1和pmp1基因的细胞株(mid2△、spm1△和pmp1△),对高剂量edelfosine有抵抗作用;再转染了相应的基因后,细胞重新恢复了对edelfosine的敏感性.Spm1、Mid2 和Pmp1相互作用的试验研究显示,Mid2介导磷酸化Spm1的生成,而Pmp1抑制磷酸化Spm1的生成.结论 edelfosine可能通过影响Spm1、Mid2 和Pmp1蛋白磷酸化而产生胞质抑制和生长抑制作用.
作者：张辉；喻莉萍；方芳；方云祥 刊期： 2007年第03期
失巢凋亡是一种特殊形式的细胞程序性死亡,不仅参与了机体组织自身平衡的调节,而且还参与了许多病理过程的发生,如动脉粥样硬化(atherosclerosis, As)、急性冠脉综合征、心力衰竭、动脉瘤和肿瘤等.该文综述了失巢凋亡在As斑块不稳定性和破裂中的作用及机制.
作者：刘娜；刘俊田 刊期： 2007年第03期
目的 探讨脱氟烷(desflurane)的脑保护作用及其与神经元缺血/再灌注损伤后血红素氧合酶-1(HO-1)表达的信号转导通路的关系.方法 将96孔和6孔培养板上培养7 d的海马神经元随机分为7组:正常培养组(C组)、缺血/再灌注组(I/R组)、缺血/ 再灌注+6% desflurane组(D6组)、缺血/再灌注+12% desflurane组(D12组)、缺血/再灌注+12% desflurane+tin-protoporphyrin (HO-1抑制剂)组(T组) 、缺血/ 再灌注+12% desflurane+U-0126(ERK抑制剂)组(U组)、缺血/再灌注+12%desflurane+rapamycin(RS6K抑制剂)组(R组).C组神经元按正常培养方法培养.I/R组神经元进行缺糖缺氧后复糖复氧处理.D6组和D12组在神经元缺糖缺氧的同时接受6%或12% desflurane麻醉.T组、U组和R组在神经元进行缺糖同时分别加入tin-protoporphyrin 、U-0126或Rapamycin使其终浓度均为10 μmol·L-1后同D12组处理.96孔培养板的神经元进行细胞存活力的检测.6孔培养板的神经元进行神经元纯度鉴定、神经元凋亡、HO-1-mRNA表达、磷酸化ERK1/2和P90RSK蛋白表达的检测.结果 缺血/再灌注后神经元存活率降低,凋亡率增加,HO-1-mRNA的表达增加,PERK1/2和PP90RSK蛋白表达增加( vs C组, P＜0.01).D6组PERK1/2和PP90RSK蛋白表达增加,HO-1-mRNA表达增加,神经元存活率增加、神经元凋亡率降低( vs I/R组, P＜0.01).D12组PERK1/2和PP90RSK蛋白表达增加,HO-1-mRNA表达增加,神经元存活率增加、神经元凋亡率降低( vs I/R组或D6组, P＜0.01或 P＜0.05).T组PERK1/2和PP90RSK蛋白表达变化不明显( vs D12组, P＞0.05),HO-1-mRNA表达降低,神经元存活率降低、神经元凋亡率增加( vs D12组, P＜0.01).U组PERK1/2和PP90RSK表达降低,HO-1-mRNA表达降低,神经元存活率降低、神经元凋亡率增加( vs D12组, P＜0.05或 P＜0.01).R组PERK1/2蛋白表达变化不明显( vs D12组, P＞0.05),PP90RSK表达降低,HO-1-mRNA表达降低,神经元存活率降低,神经元凋亡率增加( vs D12组, P＜0.05或 P＜0.01).结论 Desflurane通过ERK1/2/P90RSK信号转导通路激活HO-1,在海马神经元缺血/再灌注时抑制了神经元凋亡,保护了神经元.
作者：邵建林；王玲玲；王俊科；朱俊超；叶青山；马宏仲 刊期： 2007年第03期
动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)活化免疫系统产生的免疫应答,既可能导致持久性的动脉炎症反应而促进AS,也可能抑制动脉炎症反应和AS.通过免疫调节,选择性抑制促AS的免疫应答或促进抗AS的免疫应答,可能对AS产生防治作用.
作者：谢立新；方芳；李辉；方云祥 刊期： 2007年第03期
目的 探讨23-羟基白桦酸对人结肠癌细胞株LoVo细胞增殖和凋亡的影响.方法 采用MTT法检测23-羟基白桦酸对LoVo细胞的增殖抑制作用.Hoechst染色、流式细胞仪检测细胞凋亡及线粒体膜电位的变化.结果 23-羟基白桦酸能抑制LoVo细胞的增殖,其作用呈明显的时间和剂量依赖性.Hoechst33258染色显示细胞凋亡特征.23-羟基白桦酸25、50、100及200 μmol·L-1作用LoVo细胞48 h后,其凋亡率分别为11.32%±0.92%、19.23%±0.78%、24.51%±5.88%及42.22%±2.32%,显示一定的剂量依赖性关系.与空白组相比,23-羟基白桦酸可明显降低LoVo细胞线粒体膜电位( P＜0.01).结论 23-羟基白桦酸可抑制LoVo细胞的增殖,其机制与降低线粒体膜电位继而诱导LoVo细胞凋亡有关.
作者：程燕；叶文才；石俊敏；姚新生；栗原博 刊期： 2007年第03期
目的 探讨内源性硫化氢(hydrogen sulfide, H2S)对大鼠高肺血流性肺血管结构重建及血管活性肽的影响.方法 ♂ SD大鼠32只随机分为分流组、分流+PPG(炔丙基甘氨酸,内源性H2S合成酶的抑制剂)组、对照组和对照+PPG组,每组8只.经腹主动脉-下腔静脉穿刺建立动物模型.分流4 wk后,应用敏感硫电极法测定大鼠肺组织硫化氢(H2S)含量;应用放免试剂盒测定血浆中内皮素(ET-1)、心钠素(ANP)、降钙素基因相关肽(CGRP)及肾上腺髓质素(ADM)的含量;观察肺小血管的显微结构变化;结果 分流4 wk后,大鼠肺组织H2S水平升高,肺血管结构重建,血浆ET-1、ANP、CGRP及ADM升高.PPG干预后,肺组织H2S水平降低,肺血管结构重建加重,血浆ET-1、ANP、CGRP升高,而ADM降低.结论 内源性H2S对高肺血流性肺血管结构重建具有重要的保护作用,并对多种血管活性肽具有调节作用.
作者：李晓惠；杜军保；唐朝枢 刊期： 2007年第03期
目的 探讨2型糖尿病大鼠氧化应激与主动脉内皮细胞损伤的关系,观察缬沙坦对两者的影响.方法 SD大鼠,用长期高能量饮食加小剂量注射链脲佐菌素(STZ)的方法复制模型.注射STZ 12 wk末,将大鼠分为3组:正常组、糖尿病组、缬沙坦治疗组(24 mg·kg-1·d-1,灌胃给药8 wk).在注射STZ 12和20 wk末,检测大鼠的内皮依赖性血管舒张反应及主动脉内皮形态,血清超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量,以及主动脉一氧化氮合酶(NOS)基因表达情况.结果 ①12 wk末,糖尿病大鼠主动脉对低浓度乙酰胆碱(Ach)舒张反应减弱,局部内皮隆起,血清SOD、GSH-Px活性增强,MDA和NO含量增加,主动脉iNOSmRNA表达明显上调,eNOSmRNA表达无明显改变.②20 wk末,糖尿病大鼠主动脉对各浓度Ach的反应性均减弱,主动脉内皮变性、坏死,血清SOD、GSH-Px活性减弱,MDA含量进一步增加,NO含量下降,主动脉iNOSmRNA表达仍升高,eNOSmRNA表达降低,缬沙坦治疗后能减轻主动脉病变,改善血清SOD、GSH-Px、MDA、NO及主动脉NOSmRNA表达的异常.结论 糖尿病大鼠的氧化应激和NO系统的紊乱参与了主动脉病变过程,增强机体抗氧化能力及调节NO生成可能是缬沙坦发挥主动脉保护作用机制之一.
作者：何敏；徐济良；吴锋 刊期： 2007年第03期
药物代谢存在着性别差异,性别差异如何影响药物代谢?机制如何?目前国内外均没有完整系统的结论.性别差异主要在于性激素的不同,雌二醇是雌激素的主要活性成份, 阐明雌二醇对肝细胞药物代谢相关基因的影响,可以解释性别差异导致药物代谢差别的原因,从而能提高妇女及肝病患者的用药安全性.该文重点阐述了雌激素对药物代谢酶的影响以及与核受体的联系.
作者：张松波；周宏灏 刊期： 2007年第03期
作者： 刊期： 2007年第03期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
