何敏；徐济良；吴锋
胰腺炎至今尚缺乏有效的治疗药物.近年来发现胞内Ca2+超负荷能导致胰腺炎的发生.该文综述了胰腺炎早期胰腺腺泡细胞内Ca2+转运的变化和胆盐、乙醇、高脂对其影响,以及咖啡因抑制异常Ca2+信号的作用,并据此提出研究防治药物的新靶点.
作者：王振纲；薛全福 刊期： 2007年第03期
目的 通过观察阿托伐他汀对LPS诱导的人血管内皮细胞IκBα表达的影响来探明其抑制核因子κB活性的机制.方法 将培养的人血管内皮细胞株ECV304,分为对照组、LPS组、阿托伐他汀低、中、高3个浓度组.阿托伐他汀3组加入不同阿托伐他汀孵育后与LPS组均加入LPS刺激30 min.用免疫荧光法观察核因子κB活化情况,用逆转录-聚合酶链反应观察IκBα mRNA的表达情况,用蛋白印迹法观察IκBα及p-IκBα蛋白含量的变化.结果 阿托伐他汀3组能够抑制p65由胞质转移至核内、能够剂量依赖性的降低pIκBα蛋白表达、减少IκBα的降解;阿托伐他汀高浓度组IκBαmRNA的表达增加.结论 阿托伐他汀可以通过影响IκBα的表达和降解来抑制核因子κB活性.
作者：赵钢；刘闺男；李志明 刊期： 2007年第03期
目的 研究Akt和ERK的激活在 N-去甲基克拉霉素诱导HeLa细胞凋亡中作用.方法 MTT法测定 N-去甲基克拉霉素对HeLa细胞的细胞毒作用;荧光染色观察细胞形态学变化;用琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段化;用Western blot法分析药物对蛋白质表达的影响.结果 N-去甲基克拉霉素明显诱导HeLa细胞凋亡,其作用呈明显的时间依赖性.Akt抑制剂和ERK抑制剂(PD98059)能促进 N -去甲基克拉霉素诱导HeLa细胞凋亡,形态学观察可见凋亡小体的形成,琼脂糖凝胶电泳可见凋亡典型的DNA条带.Western blot结果显示, N-去甲基克拉霉素作用HeLa细胞24 h后,Akt和磷酸化Akt蛋白表达减少,同时ERK和磷酸化ERK蛋白表达也减少.结论 N-去甲基克拉霉素通过激活Akt和ERK对其诱导HeLa细胞凋亡起拮抗作用.
作者：乔爱敏；池岛乔；张为革；吴英良 刊期： 2007年第03期
目的 利用BioStarR40s cDNA芯片,检测经全新结构类型化合物埃他卡林3 mg·kg-1灌胃2wk处理后的大鼠心脏、脑、肝脏组织基因表达的变化，初步判断埃他卡林的基因作用谱;同时探讨埃他卡林给药2 wk后,其心脏血流动力学的变化、心肌形态学和超微结构的变化,为阐述埃他卡林的体内生物学作用特征和评价其长期用药安全性提供实验依据.方法 ①给予埃他卡林(3mg·kg-1)2 wk后取大鼠心脏、脑、肝脏组织,抽提总RNA,反转录合成cDNA 探针;将荧光标记的cDNA探针与BioStarR-40S芯片杂交,对荧光信号扫描分析.结合RT-PCR方法对芯片结果进行验证.②Wistar ♂大鼠随机分为5组:正常对照组、埃他卡林1、3、9 mg·kg-1组以及9 mg·kg-1撤药组.采用直接插管法,观察麻醉大鼠的血压、心率、收缩参数以及舒张参数的变化;采用HE染色和电镜技术观察不同组对心肌的形态学和超微结构的变化.结果 ①埃他卡林对心、脑和肝脏基因表达的调节作用具有选择性.采用 4 096个具有重要功能的基因序列的芯片,埃他卡林3 mg·kg-1灌胃2 wk,大鼠心脏236个基因的表达发生变化,其中100个基因表达上调,136个基因表达下调;肝脏6个基因表达上调;脑组织的基因表达未发生变化;埃他卡林调节心脏组织的基因表达包括与肌肉收缩相关的肌球蛋白、肌动蛋白和微管蛋白等;与信号转导相关的G蛋白、腺苷酸环化酶和钙调结合蛋白等;②埃他卡林1、3、9 mg·kg-1灌胃2 wk,在体心脏功能未发现有药理学意义的变化,也未发现心肌组织及其超微结构有病理学意义的变化.结论 该实验体系下埃他卡林对重要器官、心、脑和肝脏基因表达的调节作用具有选择性;反复给予埃他卡林未发现其对心脏的不良反应.
作者：王玉；潘志远；汪海 刊期： 2007年第03期
目的 探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对大鼠肺间质巨噬细胞(PIMs)cAMP-PKA信号通路的激活作用.方法 分离纯化大鼠PIMs,采用放射免疫分析法测定细胞内cAMP含量,放射激酶法测定PKA活性,受体拮抗剂的IC50值由对数-几率单位法求得.结果 正常对照组大鼠静息状态下PIMs cAMP含量和PKA活性分别为(2.04±0.13) nmol·g-1和(118.3±11.2)nmol·min-1·g-1.低浓度CCK-8[(10-12 ～10-10)mol·L-1]对细胞内cAMP含量和PKA活性没有影响(与正常对照组比较: P＞0.05);高浓度CCK-8[(10-9～10-5)mol·L-1]可明显提高细胞内cAMP含量和PKA活性(与正常对照组比较: P＜0.05).10 mg·L-1脂多糖(LPS)刺激大鼠PIMs,可明提高细胞内cAMP含量和PKA活性,分别为(5.15±0.12)nmol·g-1和(188.6±13.5)nmol·min-1·g-1.不同浓度的CCK-8与LPS共同孵育PIMs,细胞内cAMP含量和PKA活性的变化趋势与CCK-8作用于静息状态下大鼠PIMs的变化趋势完全相同.CCK受体拮抗剂丙谷胺、CR-1409、CR-2945可呈剂量依赖性地抑制CCK导致的cAMP含量的升高,它们的IC 50值分别为(0.5×10-6、4.1×10-6、7.2×10-4) mol·L-1.丙谷胺、CR-1409、CR-2945也可明显减弱CCK-8所导致的PKA活性的升高;其中,丙谷胺的抑制作用强,CR-1409次之,CR-2945的抑制作用小.结论 CCK-8可剂量依赖性地激活静息状态和LPS诱导的大鼠PIMs cAMP-PKA信号转导途径,这可能是CCK抗炎作用的分子机制之一.CCK激活cAMP-PKA通路是通过CCK受体来实现的,且CCK-AR的作用比CCK-BR的作用更为明显.
作者：高维娟；许顺江；丛斌；李淑瑾；马春玲 刊期： 2007年第03期
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus MRSA)是医院感染和社区获得性感染的重要病原菌[1-2],对多种抗菌药物产生不同程度的耐药,所造成的感染发病率逐年上升.目前万古霉素和替考拉宁仍然是治疗MRSA的有效药物.本研究对从临床各类感染标本中分离的30株MRSA进行了万古霉素、替考拉宁分别与左氧氟沙星联合应用的体外抑菌试验,为临床有效的治疗MRSA感染提供理论依据.
作者：楮永红；白玉兰；李云卓 刊期： 2007年第03期
丙戊酸盐(valproate,VPA)是临床治疗双相精神障碍的主要药物,能有效控制患者的躁狂和抑郁症状.近年来研究发现,VPA能拮抗多种损伤因素诱导的神经细胞凋亡,并且与神经细胞发生、增殖、分化和神经营养有关.该文对VPA的神经保护作用及其机制的研究进展作一综述.
作者：李凌云；秦正红；梁中琴 刊期： 2007年第03期
目的 探讨迷迭香酸对过氧化氢(H2O2)诱导血管平滑肌细胞凋亡的保护作用及其机制.方法 流式细胞术检测细胞凋亡率;吖啶橙(acridine orange ,AO)染色观察细胞形态学变化;MTT法检测细胞活性;Western blot检测细胞中Bcl-2、Bax、Fas和FasL蛋白的表达.结果 经500 μmol·L-1 H2O2处理24 h后,细胞凋亡率为34.9%±2.55%,出现核固缩、核碎裂等典型的凋亡形态学改变,所以随后实验选择500 μmol·L-1 H2O2为诱导血管平滑肌细胞凋亡的佳浓度.①500 μmol·L-1的H2O2 处理血管平滑肌细胞24 h能引起细胞活性明显降低;细胞凋亡率明显增加,达35.7%±1.33%;细胞中Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达升高,Bcl-2/Bax蛋白比值减少,Fas和FasL蛋白表达升高.②用迷迭香酸(10、20、40 μmol·L-1)预处理细胞30 min,可以增加细胞活性;降低细胞凋亡率,呈浓度依赖性;细胞中Bcl-2/Bax蛋白比值升高,Fas和FasL蛋白表达降低.结论 迷迭香酸能拮抗H2O2诱导血管平滑肌细胞凋亡;其作用机制可能与升高细胞中Bcl-2/Bax蛋白比值,减少Fas、FasL蛋白表达有关.
作者：郭峰；朱炳阳；迟秀玲；黄红林 刊期： 2007年第03期
目的 观察HDAC抑制剂曲古霉素A(TSA)和针对DNA的抗癌药物联用对膀胱癌T24细胞的杀伤作用.方法 用MTT法测定TSA单用及分别与ADM、MMC和DDP联用对T24细胞的抑制率,用金氏公式法判断联合用药的效果.结果 TSA分别与ADM、MMC、DDP联合用药对T24细胞的抑制率均随着浓度的增加而明显增加,TSA与MMC联用的协同作用明显,而TSA与ADM和DDP在中低剂量下联用亦表现为协同作用.结论 HDAC抑制剂TSA可明显增强针对DNA的抗癌药物对膀胱癌细胞的杀伤作用,有希望应用于晚期膀胱癌的化疗方案中.
作者：曲巍；王立明；朱有华；许涛；付莉莉 刊期： 2007年第03期
目的 探讨脱氟烷(desflurane)的脑保护作用及其与神经元缺血/再灌注损伤后血红素氧合酶-1(HO-1)表达的信号转导通路的关系.方法 将96孔和6孔培养板上培养7 d的海马神经元随机分为7组:正常培养组(C组)、缺血/再灌注组(I/R组)、缺血/ 再灌注+6% desflurane组(D6组)、缺血/再灌注+12% desflurane组(D12组)、缺血/再灌注+12% desflurane+tin-protoporphyrin (HO-1抑制剂)组(T组) 、缺血/ 再灌注+12% desflurane+U-0126(ERK抑制剂)组(U组)、缺血/再灌注+12%desflurane+rapamycin(RS6K抑制剂)组(R组).C组神经元按正常培养方法培养.I/R组神经元进行缺糖缺氧后复糖复氧处理.D6组和D12组在神经元缺糖缺氧的同时接受6%或12% desflurane麻醉.T组、U组和R组在神经元进行缺糖同时分别加入tin-protoporphyrin 、U-0126或Rapamycin使其终浓度均为10 μmol·L-1后同D12组处理.96孔培养板的神经元进行细胞存活力的检测.6孔培养板的神经元进行神经元纯度鉴定、神经元凋亡、HO-1-mRNA表达、磷酸化ERK1/2和P90RSK蛋白表达的检测.结果 缺血/再灌注后神经元存活率降低,凋亡率增加,HO-1-mRNA的表达增加,PERK1/2和PP90RSK蛋白表达增加( vs C组, P＜0.01).D6组PERK1/2和PP90RSK蛋白表达增加,HO-1-mRNA表达增加,神经元存活率增加、神经元凋亡率降低( vs I/R组, P＜0.01).D12组PERK1/2和PP90RSK蛋白表达增加,HO-1-mRNA表达增加,神经元存活率增加、神经元凋亡率降低( vs I/R组或D6组, P＜0.01或 P＜0.05).T组PERK1/2和PP90RSK蛋白表达变化不明显( vs D12组, P＞0.05),HO-1-mRNA表达降低,神经元存活率降低、神经元凋亡率增加( vs D12组, P＜0.01).U组PERK1/2和PP90RSK表达降低,HO-1-mRNA表达降低,神经元存活率降低、神经元凋亡率增加( vs D12组, P＜0.05或 P＜0.01).R组PERK1/2蛋白表达变化不明显( vs D12组, P＞0.05),PP90RSK表达降低,HO-1-mRNA表达降低,神经元存活率降低,神经元凋亡率增加( vs D12组, P＜0.05或 P＜0.01).结论 Desflurane通过ERK1/2/P90RSK信号转导通路激活HO-1,在海马神经元缺血/再灌注时抑制了神经元凋亡,保护了神经元.
作者：邵建林；王玲玲；王俊科；朱俊超；叶青山；马宏仲 刊期： 2007年第03期
目的 探讨内源性硫化氢(hydrogen sulfide, H2S)对大鼠高肺血流性肺血管结构重建及血管活性肽的影响.方法 ♂ SD大鼠32只随机分为分流组、分流+PPG(炔丙基甘氨酸,内源性H2S合成酶的抑制剂)组、对照组和对照+PPG组,每组8只.经腹主动脉-下腔静脉穿刺建立动物模型.分流4 wk后,应用敏感硫电极法测定大鼠肺组织硫化氢(H2S)含量;应用放免试剂盒测定血浆中内皮素(ET-1)、心钠素(ANP)、降钙素基因相关肽(CGRP)及肾上腺髓质素(ADM)的含量;观察肺小血管的显微结构变化;结果 分流4 wk后,大鼠肺组织H2S水平升高,肺血管结构重建,血浆ET-1、ANP、CGRP及ADM升高.PPG干预后,肺组织H2S水平降低,肺血管结构重建加重,血浆ET-1、ANP、CGRP升高,而ADM降低.结论 内源性H2S对高肺血流性肺血管结构重建具有重要的保护作用,并对多种血管活性肽具有调节作用.
作者：李晓惠；杜军保；唐朝枢 刊期： 2007年第03期
兴奋性氨基酸受体的过度活化会导致神经元的兴奋性死亡,该过程与细胞内钙离子([Ca2+]i)稳态失调密切相关.谷氨酸兴奋毒性参与许多急慢性神经病变的发病及病程进展,提示Ca2+信号传导阻滞剂的应用可能在疾病的早期阶段就阻断病变进程,达到有效治疗.
作者：任振宇；于小倩；彭双清 刊期： 2007年第03期
动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)活化免疫系统产生的免疫应答,既可能导致持久性的动脉炎症反应而促进AS,也可能抑制动脉炎症反应和AS.通过免疫调节,选择性抑制促AS的免疫应答或促进抗AS的免疫应答,可能对AS产生防治作用.
作者：谢立新；方芳；李辉；方云祥 刊期： 2007年第03期
目的 在大肠杆菌中表达犬钩虫线虫抗凝血蛋白NAP7 (AcaNAP7) 成熟蛋白,并鉴定表达产物的抗凝活性.方法 根据AcaNAP7的核苷酸序列设计引物,从克隆质粒pUCm-T/AcaNAP7中扩增编码 AcaNAP7成熟蛋白的基因;扩增产物经双酶切定向克隆到原核表达载体PET-32a中;构建的重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达;表达产物经镍琼脂糖凝胶FF纯化后,用凝血酶原时间(PT)和活化的部分凝血活酶时间(aPTT)检测体外抗凝血活性.结果 克隆了编码 AcaNAP7成熟蛋白的基因并构建了重组表达质粒pET-32a/AcaNAP7;在大肠杆菌BL21(DE3) 中高效地表达了融合有硫氧还蛋白(Trx)的目的蛋白,产物主要以可溶形式存在;镍琼脂糖凝胶亲和纯化获得了纯度高达92%的目的蛋白;纯化产物能明显延长PT及aPTT,其延长PT比延长aPTT更有效.结论 在大肠杆菌中成功表达了AcaNAP7融合蛋白,表达产物具有抗凝活性.该实验为进一步研究AcaNAP7的功能及应用奠定了基础.
作者：彭礼飞；杨陈；王会兰；吴亚敏；邓莉；吴铁；胡晶晶 刊期： 2007年第03期
目的 构建可以高效表达人过氧化物酶体增殖物激活受体(αhPPARα)的真核细胞表达载体,为筛选作用于PPARα受体的药物提供分子平台.方法 将HepG2细胞总RNA经逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)克隆hPPARα全长基因,用 BamH Ⅰ、Sal Ⅰ双酶切后,与相同双酶切的pIRES2-EGFP载体连接,构建phPPARα-IRES2-EGFP重组质粒,用酶切及基因测序鉴定重组质粒中hPPARα基因的完整性和可靠性;重组质粒转染293细胞,荧光显微镜观察EGFP报告基因表达强度,并对转染细胞的hPPARα表达进行荧光定量PCR及免疫细胞化学检测.结果 经酶切和测序证实重组质粒构建正确,并在转染的293细胞中获得hPPARα的高效表达.结论 成功构建重组质粒phPPARα-IRES2-EGFP,为基于hPPARα受体靶点的药物筛选平台的建立提供了高效表达hPPARα的重组载体.
作者：章涛；杨贵忠；袁野；李苌清；万敬员；蒋建新；周岐新 刊期： 2007年第03期
目的 在中医药理论指导下建立SD大鼠阳虚便秘动物模型并对其进行评价.方法 应用山西白醋加活性炭冰水法制作阳虚便秘动物模型.观察模型动物的一般生物学特征变化,进行模型动物的排便和在体结肠肌电等实验,检测模型动物的胃肠激素、肠神经递质等客观指标.结果 造模后,模型动物的一般生物学特征表现为:腹胀、披毛蓬松、倦怠蜷缩、体重减轻、大便色黑、干燥;与空白对照组比较,模型动物的首粒排便时间明显延迟,6 h内排便粒数明显减少,结肠收缩频率明显降低、结肠收缩幅度减弱,胃肠激素、肠神经递质分泌紊乱;经通便灵药物治疗后,上述症状和指标明显改善.造模后动物恢复6 d,与空白对照组比较,其首粒排便时间和6 h内排便粒数仍有差异.结论 应用山西白醋加活性炭冰水能复制出稳定的SD大鼠阳虚便秘模型.
作者：彭成；王岚；赵小梅 刊期： 2007年第03期
目的 观察长期高脂喂养对糖尿病(DM)大鼠骨骼肌解偶联蛋白3(UCP3)基因表达的影响以及非诺贝特治疗后其表达的变化.方法 Wistar大鼠随机分为正常饮食对照组(NC)、DM正常饮食组(DN),DM高脂饮食组(DH)和DM高脂饮食非诺贝特治疗组(DHF).10 wk后留取空腹血浆测定血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)和胰岛素,同时测定骨骼肌细胞内TG和FFA,RT-PCR法测定骨骼肌UCP3 mRNA表达.结果 与NC组和DN组相比,DH组大鼠血浆和肌肉内FFA和TG均明显升高,骨骼肌UCP3基因表达明显增加( P＜0.01),胰岛素抵抗指数(HOMA2-IR)明显升高( P＜0.01).给予非诺贝特后可以明显改善上述异常( P＜0.01),同时观察到骨骼肌内UCP3基因表达较DH组明显增加( P＜0.01).结论 高脂喂养可增加糖尿病大鼠血浆脂质水平,引起肌肉组织内脂质沉积,导致胰岛素抵抗(IR).非诺贝特有降低血浆脂肪酸水平和肌肉内脂质沉积,改善胰岛素敏感性的作用,其作用可能与增强UCP3基因表达有关.
作者：魏翠凤；陈璐璐；王保平；吴迁；王咏波 刊期： 2007年第03期
药物代谢存在着性别差异,性别差异如何影响药物代谢?机制如何?目前国内外均没有完整系统的结论.性别差异主要在于性激素的不同,雌二醇是雌激素的主要活性成份, 阐明雌二醇对肝细胞药物代谢相关基因的影响,可以解释性别差异导致药物代谢差别的原因,从而能提高妇女及肝病患者的用药安全性.该文重点阐述了雌激素对药物代谢酶的影响以及与核受体的联系.
作者：张松波；周宏灏 刊期： 2007年第03期
目的 研究酪氨酸蛋白激酶抑制剂金雀异黄素(genistein)对大鼠呼吸机所致肺损伤(VILI)的保护作用.方法 30只健康SD大鼠随机均分成A、B、C 3组, A组为正常潮气量机械通气组:潮气量(VT)=8 ml·kg-1;B组为大潮气量机械通气组:潮气量(VT)=40 ml·kg-1;C组为大潮气量通气加Genistein处理组:潮气量(VT)=40 ml·kg-1,C组大鼠实验前30 min腹腔注射Genistein溶液(50 mg·kg-1).A、B、C 3组机械通气频率(P)均为每分钟80次,通气时间均为2 h.实验完毕收集肺组织和肺灌洗液标本.光镜观察肺病理改变,TUNEL法检测肺组织细胞凋亡情况,同时测定肺灌洗液中总蛋白、肺湿/干比、白细胞计数、肿瘤坏死因子(TNF-α)等指标以及肺组织中中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)的水平.结果 和A组相比,B组肺病理改变明显,肺细胞凋亡数量增加,肺湿/干比、总蛋白、白细胞计数、MPO、TNF-α等指标均增高( P＜0.01);和B组比较,C组肺病理改变明显减轻,肺细胞凋亡数量减少,肺湿/干比、总蛋白、白细胞计数、MPO、TNF-α等指标均降低( P＜0.05).结论 酪氨酸蛋白激酶抑制剂genistein对大鼠呼吸机所致的肺损伤具有较好的保护作用.
作者：冯丹；姚尚龙；武庆平；王立奎 刊期： 2007年第03期
目的 探讨外周苯二氮(艹卓)受体(peripheral benzodiazepine receptor,PBR)在调控心肌线粒体通透性转换(mitochondrial permeability transition,MPT)中的作用.方法 分离SD大鼠心肌线粒体,电镜观察其形态证实线粒体结构完整性.将线粒体分别和不同浓度(50,100,200 μmol·L-1)的PBR拮抗剂PK11195孵育,部分线粒体和100 mmol·L-1 PK11195孵育之前5 min加入5 μmol·L-1 MPT抑制剂环孢菌素A(CsA组).不给任何处理的线粒体为阴性对照(Con组),单纯给150 μmol·L-1 Ca2+作阳性对照(Ca2+组).分光光度法测520 nm处吸光度的改变反映MPT变化,电镜观察线粒体超微结构改变,Western blot检测线粒体细胞色素C(Cyto C)释放.结果 PK11195剂量依赖性诱发MPT,不同浓度组间比较差异有显著性( P＜0.05, P＜0.01);PK11195导致线粒体出现空泡变性、线粒体肿胀、线粒体脊膜破裂,Cyto C释放明显增多( vs Con组, P＜0.01);CsA能阻断PK11195的上述作用,CsA组线粒体超微结构基本完好,线粒体CytoC释放较少( vs 100μmol·L-1组, P＜0.05).结论 PBR参与调控大鼠心肌MPT,其拮抗剂PK11195可剂量依赖性诱导心肌MPT,导致线粒体超微结构损伤和线粒体Cyto C释放.
作者：李敬远；王俊科；曾因明 刊期： 2007年第03期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
