康建功；刘树刚；李凯；王睿
目的 探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对大鼠肺间质巨噬细胞(PIMs)cAMP-PKA信号通路的激活作用.方法 分离纯化大鼠PIMs,采用放射免疫分析法测定细胞内cAMP含量,放射激酶法测定PKA活性,受体拮抗剂的IC50值由对数-几率单位法求得.结果 正常对照组大鼠静息状态下PIMs cAMP含量和PKA活性分别为(2.04±0.13) nmol·g-1和(118.3±11.2)nmol·min-1·g-1.低浓度CCK-8[(10-12 ～10-10)mol·L-1]对细胞内cAMP含量和PKA活性没有影响(与正常对照组比较: P＞0.05);高浓度CCK-8[(10-9～10-5)mol·L-1]可明显提高细胞内cAMP含量和PKA活性(与正常对照组比较: P＜0.05).10 mg·L-1脂多糖(LPS)刺激大鼠PIMs,可明提高细胞内cAMP含量和PKA活性,分别为(5.15±0.12)nmol·g-1和(188.6±13.5)nmol·min-1·g-1.不同浓度的CCK-8与LPS共同孵育PIMs,细胞内cAMP含量和PKA活性的变化趋势与CCK-8作用于静息状态下大鼠PIMs的变化趋势完全相同.CCK受体拮抗剂丙谷胺、CR-1409、CR-2945可呈剂量依赖性地抑制CCK导致的cAMP含量的升高,它们的IC 50值分别为(0.5×10-6、4.1×10-6、7.2×10-4) mol·L-1.丙谷胺、CR-1409、CR-2945也可明显减弱CCK-8所导致的PKA活性的升高;其中,丙谷胺的抑制作用强,CR-1409次之,CR-2945的抑制作用小.结论 CCK-8可剂量依赖性地激活静息状态和LPS诱导的大鼠PIMs cAMP-PKA信号转导途径,这可能是CCK抗炎作用的分子机制之一.CCK激活cAMP-PKA通路是通过CCK受体来实现的,且CCK-AR的作用比CCK-BR的作用更为明显.
作者：高维娟；许顺江；丛斌；李淑瑾；马春玲 刊期： 2007年第03期
目的 在大肠杆菌中表达犬钩虫线虫抗凝血蛋白NAP7 (AcaNAP7) 成熟蛋白,并鉴定表达产物的抗凝活性.方法 根据AcaNAP7的核苷酸序列设计引物,从克隆质粒pUCm-T/AcaNAP7中扩增编码 AcaNAP7成熟蛋白的基因;扩增产物经双酶切定向克隆到原核表达载体PET-32a中;构建的重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达;表达产物经镍琼脂糖凝胶FF纯化后,用凝血酶原时间(PT)和活化的部分凝血活酶时间(aPTT)检测体外抗凝血活性.结果 克隆了编码 AcaNAP7成熟蛋白的基因并构建了重组表达质粒pET-32a/AcaNAP7;在大肠杆菌BL21(DE3) 中高效地表达了融合有硫氧还蛋白(Trx)的目的蛋白,产物主要以可溶形式存在;镍琼脂糖凝胶亲和纯化获得了纯度高达92%的目的蛋白;纯化产物能明显延长PT及aPTT,其延长PT比延长aPTT更有效.结论 在大肠杆菌中成功表达了AcaNAP7融合蛋白,表达产物具有抗凝活性.该实验为进一步研究AcaNAP7的功能及应用奠定了基础.
作者：彭礼飞；杨陈；王会兰；吴亚敏；邓莉；吴铁；胡晶晶 刊期： 2007年第03期
目的 在中医药理论指导下建立SD大鼠阳虚便秘动物模型并对其进行评价.方法 应用山西白醋加活性炭冰水法制作阳虚便秘动物模型.观察模型动物的一般生物学特征变化,进行模型动物的排便和在体结肠肌电等实验,检测模型动物的胃肠激素、肠神经递质等客观指标.结果 造模后,模型动物的一般生物学特征表现为:腹胀、披毛蓬松、倦怠蜷缩、体重减轻、大便色黑、干燥;与空白对照组比较,模型动物的首粒排便时间明显延迟,6 h内排便粒数明显减少,结肠收缩频率明显降低、结肠收缩幅度减弱,胃肠激素、肠神经递质分泌紊乱;经通便灵药物治疗后,上述症状和指标明显改善.造模后动物恢复6 d,与空白对照组比较,其首粒排便时间和6 h内排便粒数仍有差异.结论 应用山西白醋加活性炭冰水能复制出稳定的SD大鼠阳虚便秘模型.
作者：彭成；王岚；赵小梅 刊期： 2007年第03期
动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)活化免疫系统产生的免疫应答,既可能导致持久性的动脉炎症反应而促进AS,也可能抑制动脉炎症反应和AS.通过免疫调节,选择性抑制促AS的免疫应答或促进抗AS的免疫应答,可能对AS产生防治作用.
作者：谢立新；方芳；李辉；方云祥 刊期： 2007年第03期
目的 观察中药山茱萸水提液对线粒体呼吸链复合体IV(即细胞色素C氧化酶)抑制剂叠氮钠(NaN3)致神经细胞骨架系统损伤的拮抗作用,探讨山茱萸在防治阿尔采末病中的机制.方法 山茱萸水提液(0.125～8 g生药·L-1)分别与SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞及原代培养新生大鼠海马神经元共孵育24～48 h,加入64 mmol·L-1叠氮钠作用4～6 h,MTT、LDH法测定细胞存活率,激光共聚焦显微镜观察细胞微管结构及微管相关蛋白表达的变化.结果 1～4 g·L-1山茱萸能明显拮抗叠氮钠致神经细胞存活率下降;使损伤的微管结构基本恢复正常,微管相关蛋白表达增加,尤以突起内为明显.结论 中药山茱萸能明显拮抗线粒体缺陷致神经细胞损伤,其机制与保护细胞骨架系统有关,对于防治阿尔采末病等神经退行性疾病有一定应用前景.
作者：张兰；李林；安文林；薛冰 刊期： 2007年第03期
目的 探讨23-羟基白桦酸对人结肠癌细胞株LoVo细胞增殖和凋亡的影响.方法 采用MTT法检测23-羟基白桦酸对LoVo细胞的增殖抑制作用.Hoechst染色、流式细胞仪检测细胞凋亡及线粒体膜电位的变化.结果 23-羟基白桦酸能抑制LoVo细胞的增殖,其作用呈明显的时间和剂量依赖性.Hoechst33258染色显示细胞凋亡特征.23-羟基白桦酸25、50、100及200 μmol·L-1作用LoVo细胞48 h后,其凋亡率分别为11.32%±0.92%、19.23%±0.78%、24.51%±5.88%及42.22%±2.32%,显示一定的剂量依赖性关系.与空白组相比,23-羟基白桦酸可明显降低LoVo细胞线粒体膜电位( P＜0.01).结论 23-羟基白桦酸可抑制LoVo细胞的增殖,其机制与降低线粒体膜电位继而诱导LoVo细胞凋亡有关.
作者：程燕；叶文才；石俊敏；姚新生；栗原博 刊期： 2007年第03期
目的 观察甲硫哒嗪损伤大鼠学习记忆是否伴随脑内β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein, Aβ)水平的升高,探讨甲硫哒嗪引起认知功能受损的机制.方法 20只大鼠随机分为对照组和甲硫哒嗪组,连续2 wk分别腹腔注射生理盐水和治疗剂量的甲硫哒嗪(10 mg·kg-1).用Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力,用放射免疫分析法测脑组织Aβ含量,用免疫组织化学染色检测β-淀粉样前体蛋白(β-amyloid precursor protein, APP)表达,用RT-PCR方法测定脑中3种APP、α及β-分泌酶mRNA表达.结果 甲硫哒嗪组大鼠学习记忆能力下降,脑组织Aβ含量升高( P＜0.05),是对照组的1.3倍;脑皮质和海马区APP蛋白表达增高( P＜0.05);除APP 695、α-分泌酶mRNA表达变化无统计学意义外,脑组织APP 751和APP 770 mRNA表达升高( P＜0.05),相对表达量之和是对照组的2.5倍;β-分泌酶mRNA表达升高( P＜0.05),是对照组的2.6倍.结论 脑内Aβ水平的增加,可能是甲硫哒嗪引起认知功能损害的原因之一.
作者：石如玲；姜玲玲 刊期： 2007年第03期
目的 利用BioStarR40s cDNA芯片,检测经全新结构类型化合物埃他卡林3 mg·kg-1灌胃2wk处理后的大鼠心脏、脑、肝脏组织基因表达的变化，初步判断埃他卡林的基因作用谱;同时探讨埃他卡林给药2 wk后,其心脏血流动力学的变化、心肌形态学和超微结构的变化,为阐述埃他卡林的体内生物学作用特征和评价其长期用药安全性提供实验依据.方法 ①给予埃他卡林(3mg·kg-1)2 wk后取大鼠心脏、脑、肝脏组织,抽提总RNA,反转录合成cDNA 探针;将荧光标记的cDNA探针与BioStarR-40S芯片杂交,对荧光信号扫描分析.结合RT-PCR方法对芯片结果进行验证.②Wistar ♂大鼠随机分为5组:正常对照组、埃他卡林1、3、9 mg·kg-1组以及9 mg·kg-1撤药组.采用直接插管法,观察麻醉大鼠的血压、心率、收缩参数以及舒张参数的变化;采用HE染色和电镜技术观察不同组对心肌的形态学和超微结构的变化.结果 ①埃他卡林对心、脑和肝脏基因表达的调节作用具有选择性.采用 4 096个具有重要功能的基因序列的芯片,埃他卡林3 mg·kg-1灌胃2 wk,大鼠心脏236个基因的表达发生变化,其中100个基因表达上调,136个基因表达下调;肝脏6个基因表达上调;脑组织的基因表达未发生变化;埃他卡林调节心脏组织的基因表达包括与肌肉收缩相关的肌球蛋白、肌动蛋白和微管蛋白等;与信号转导相关的G蛋白、腺苷酸环化酶和钙调结合蛋白等;②埃他卡林1、3、9 mg·kg-1灌胃2 wk,在体心脏功能未发现有药理学意义的变化,也未发现心肌组织及其超微结构有病理学意义的变化.结论 该实验体系下埃他卡林对重要器官、心、脑和肝脏基因表达的调节作用具有选择性;反复给予埃他卡林未发现其对心脏的不良反应.
作者：王玉；潘志远；汪海 刊期： 2007年第03期
目的 筛选鉴定血管内皮细胞新型嘌呤受体功能性抗体,为进一步研究新型嘌呤受体提供标志物.方法 大鼠血管内皮细胞蛋白质免疫BALB/c小鼠,采用噬菌体抗体库技术构建小鼠抗大鼠血管内皮细胞的单链噬菌体抗体库.利用新型嘌呤受体在主动脉内皮细胞表达而在血管平滑肌细胞不表达的特点,先用主动脉内皮细胞进行阳性筛选,再用血管平滑肌细胞进行阴性筛选,从噬菌体抗体库中富集主动脉内皮细胞特异抗体.对筛选到的抗体经可溶性表达后,采用离体血管环功能试验,筛选新型嘌呤受体特异单链抗体.采用免疫组化实验对筛选到的抗体进行鉴定.结果 经过4次免疫后,小鼠血清抗内皮细胞蛋白的IgG效价为1:16 000,通过噬菌体表面呈现,得到小鼠抗大鼠内皮细胞免疫噬菌体抗体库容量为8×106.4轮主动脉内皮细胞阳性筛选及大鼠血管平滑肌细胞阴性筛选富集到约 2 500株主动脉内皮细胞特异抗体,可溶性表达后,在离体血管环上,经过4轮的逐级淘筛得到一株影响腺苷诱发NO依赖性血管收缩反应的功能性抗体ScFv-B,其抑制率为83.4%±21.6%.免疫组化鉴定此抗体与内皮细胞特异结合,功能性鉴定此抗体对腺苷诱发的肠肌收缩反应无影响,初步认为此抗体是新型嘌呤受体特异性功能抗体.结论 本研究通过噬菌体抗体库的构建及抗体筛选和鉴定,得到了新型嘌呤受体特异性功能抗体ScFv-B,为进一步采用表达文库筛选的方法克隆新型嘌呤受体基因提供了良好的工具.
作者：山丽梅；赵艳玲；张萍；金城；蔡光明；肖小河 刊期： 2007年第03期
作者： 刊期： 2007年第03期
目的 探讨内源性硫化氢(hydrogen sulfide, H2S)对大鼠高肺血流性肺血管结构重建及血管活性肽的影响.方法 ♂ SD大鼠32只随机分为分流组、分流+PPG(炔丙基甘氨酸,内源性H2S合成酶的抑制剂)组、对照组和对照+PPG组,每组8只.经腹主动脉-下腔静脉穿刺建立动物模型.分流4 wk后,应用敏感硫电极法测定大鼠肺组织硫化氢(H2S)含量;应用放免试剂盒测定血浆中内皮素(ET-1)、心钠素(ANP)、降钙素基因相关肽(CGRP)及肾上腺髓质素(ADM)的含量;观察肺小血管的显微结构变化;结果 分流4 wk后,大鼠肺组织H2S水平升高,肺血管结构重建,血浆ET-1、ANP、CGRP及ADM升高.PPG干预后,肺组织H2S水平降低,肺血管结构重建加重,血浆ET-1、ANP、CGRP升高,而ADM降低.结论 内源性H2S对高肺血流性肺血管结构重建具有重要的保护作用,并对多种血管活性肽具有调节作用.
作者：李晓惠；杜军保；唐朝枢 刊期： 2007年第03期
肿瘤坏死因子a(TNE-a)作为一种效应和调节的细胞因子,在炎症反应、免疫调节等方面重要作用[1].类风湿性关节炎(RA)的发病机制迄今仍不十分清楚,但TNF-a在RA中起很关键的作用,RA患者关节中的巨噬细胞和淋巴细胞产生大量的TNF-a[2].重组人肿瘤坏死因子受体融合蛋白(rhTNFR:Fc)是1个二聚体的融合蛋白,包含人75ku肿瘤坏死因子受体(TNFR)(p75)的细胞膜外配基结合部分与人1gG1的Fc片段.
作者：康建功；刘树刚；李凯；王睿 刊期： 2007年第03期
目的 探讨2型糖尿病大鼠氧化应激与主动脉内皮细胞损伤的关系,观察缬沙坦对两者的影响.方法 SD大鼠,用长期高能量饮食加小剂量注射链脲佐菌素(STZ)的方法复制模型.注射STZ 12 wk末,将大鼠分为3组:正常组、糖尿病组、缬沙坦治疗组(24 mg·kg-1·d-1,灌胃给药8 wk).在注射STZ 12和20 wk末,检测大鼠的内皮依赖性血管舒张反应及主动脉内皮形态,血清超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量,以及主动脉一氧化氮合酶(NOS)基因表达情况.结果 ①12 wk末,糖尿病大鼠主动脉对低浓度乙酰胆碱(Ach)舒张反应减弱,局部内皮隆起,血清SOD、GSH-Px活性增强,MDA和NO含量增加,主动脉iNOSmRNA表达明显上调,eNOSmRNA表达无明显改变.②20 wk末,糖尿病大鼠主动脉对各浓度Ach的反应性均减弱,主动脉内皮变性、坏死,血清SOD、GSH-Px活性减弱,MDA含量进一步增加,NO含量下降,主动脉iNOSmRNA表达仍升高,eNOSmRNA表达降低,缬沙坦治疗后能减轻主动脉病变,改善血清SOD、GSH-Px、MDA、NO及主动脉NOSmRNA表达的异常.结论 糖尿病大鼠的氧化应激和NO系统的紊乱参与了主动脉病变过程,增强机体抗氧化能力及调节NO生成可能是缬沙坦发挥主动脉保护作用机制之一.
作者：何敏；徐济良；吴锋 刊期： 2007年第03期
目的 研究酪氨酸蛋白激酶抑制剂金雀异黄素(genistein)对大鼠呼吸机所致肺损伤(VILI)的保护作用.方法 30只健康SD大鼠随机均分成A、B、C 3组, A组为正常潮气量机械通气组:潮气量(VT)=8 ml·kg-1;B组为大潮气量机械通气组:潮气量(VT)=40 ml·kg-1;C组为大潮气量通气加Genistein处理组:潮气量(VT)=40 ml·kg-1,C组大鼠实验前30 min腹腔注射Genistein溶液(50 mg·kg-1).A、B、C 3组机械通气频率(P)均为每分钟80次,通气时间均为2 h.实验完毕收集肺组织和肺灌洗液标本.光镜观察肺病理改变,TUNEL法检测肺组织细胞凋亡情况,同时测定肺灌洗液中总蛋白、肺湿/干比、白细胞计数、肿瘤坏死因子(TNF-α)等指标以及肺组织中中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)的水平.结果 和A组相比,B组肺病理改变明显,肺细胞凋亡数量增加,肺湿/干比、总蛋白、白细胞计数、MPO、TNF-α等指标均增高( P＜0.01);和B组比较,C组肺病理改变明显减轻,肺细胞凋亡数量减少,肺湿/干比、总蛋白、白细胞计数、MPO、TNF-α等指标均降低( P＜0.05).结论 酪氨酸蛋白激酶抑制剂genistein对大鼠呼吸机所致的肺损伤具有较好的保护作用.
作者：冯丹；姚尚龙；武庆平；王立奎 刊期： 2007年第03期
药物代谢存在着性别差异,性别差异如何影响药物代谢?机制如何?目前国内外均没有完整系统的结论.性别差异主要在于性激素的不同,雌二醇是雌激素的主要活性成份, 阐明雌二醇对肝细胞药物代谢相关基因的影响,可以解释性别差异导致药物代谢差别的原因,从而能提高妇女及肝病患者的用药安全性.该文重点阐述了雌激素对药物代谢酶的影响以及与核受体的联系.
作者：张松波；周宏灏 刊期： 2007年第03期
目的 观察κ阿片受体选择性激动剂(U50,488H)对大鼠心脏缺血/再灌注(ischemia and reperfusion,I/R)室性心律失常的影响并探讨其可能的可能机制.方法 观察U50,488H对大鼠I/R整体动物模型血浆肌酸磷酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)水平的影响;分离正常大鼠心脏,采用Langendorff离体心脏灌流方法,预先给予U50,488H(5 mmol·L-1)和NE(100 μmol·L-1),测定其对血流动力学指标和对心律失常的影响;常规酶解法分离成年大鼠心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术观察U50,488H对钠电流的作用.结果 ①U50+I/R组血浆中CK和LDH的含量较I/R组明显降低( P＜0.01).②与I/R组相比,给予U50,488H后,心率明显下降( P＜0.05).③对照组偶发早搏,I/R组心律失常发生频率明显增加,与I/R组相比较,I/R+NE组心律失常评分明显增高( P＜0.01);如果提前给予U50,488H,发现不仅可以明显降低I/R组缺血和再灌注期间室速和室颤的发生率( P＜0.01)及降低I/R组心律失常的评分,而且明显降低I/R+NE组心律失常的评分( P＜0.01).④U50,488H (100 μmol·L -1)可以明显降低心室肌细胞的钠电流( P＜0.01).结论 κ阿片受体激动剂U50,488H对I/R时的心律失常有拮抗作用,其作用可能是通过抑制心肌细胞的钠电流而实现的.
作者：李娟；郭海涛；毕辉；仝黎；魏保真；肖安；王跃民；裴建明 刊期： 2007年第03期
丙戊酸盐(valproate,VPA)是临床治疗双相精神障碍的主要药物,能有效控制患者的躁狂和抑郁症状.近年来研究发现,VPA能拮抗多种损伤因素诱导的神经细胞凋亡,并且与神经细胞发生、增殖、分化和神经营养有关.该文对VPA的神经保护作用及其机制的研究进展作一综述.
作者：李凌云；秦正红；梁中琴 刊期： 2007年第03期
胰腺炎至今尚缺乏有效的治疗药物.近年来发现胞内Ca2+超负荷能导致胰腺炎的发生.该文综述了胰腺炎早期胰腺腺泡细胞内Ca2+转运的变化和胆盐、乙醇、高脂对其影响,以及咖啡因抑制异常Ca2+信号的作用,并据此提出研究防治药物的新靶点.
作者：王振纲；薛全福 刊期： 2007年第03期
目的 探讨JNK通路在缺血预处理诱导海马神经元保护中的作用.方法 ♂蒙古沙土鼠,随机分为假手术组(SH)、缺血/再灌注组(I/R)、缺血预处理组(IP)、Anisomycin组(AN)、Curcumin组(CU)、Anisomycin复合IP组(AP)、Curcumin复合IP组(CP)及溶剂对照组(VE),每组据再灌注15 min、2、4、6 h、1、3、5及7 d又分8个亚组.预定时间点行TUNEL海马CA1区凋亡细胞检测、免疫组化SP法检测p-JNK及Jun蛋白在海马CA1区的表达变化.结果 IP、CU及CP可减少海马CA1区凋亡锥体细胞数( vs I/R, P＜0.01),减弱CA1区再灌注各点p-JNK及Jun蛋白的表达水平( vs IR, P＜0.01),该效应CP组＞IP组＞CU组.AN增加CA1区凋亡锥体细胞数( vs IR, P＜0.01),增强CA1区再灌后1 d内各点p-JNK及再灌后1～7 d各点Jun蛋白表达水平( vs IR, P＜0.01).AP部分抵消IP保护效应.结论 JNK通路激活参与沙土鼠海马CA1区缺血性神经元凋亡,缺血预处理可通过抑制CA1区JNK磷酸化、减少Jun蛋白表达而保护海马细胞和功能.抑制JNK通路激活可发挥缺血预处理相似的保护作用.
作者：李军；曹红；连庆泉；王耀岐；曾因明 刊期： 2007年第03期
目的 通过观察阿托伐他汀对LPS诱导的人血管内皮细胞IκBα表达的影响来探明其抑制核因子κB活性的机制.方法 将培养的人血管内皮细胞株ECV304,分为对照组、LPS组、阿托伐他汀低、中、高3个浓度组.阿托伐他汀3组加入不同阿托伐他汀孵育后与LPS组均加入LPS刺激30 min.用免疫荧光法观察核因子κB活化情况,用逆转录-聚合酶链反应观察IκBα mRNA的表达情况,用蛋白印迹法观察IκBα及p-IκBα蛋白含量的变化.结果 阿托伐他汀3组能够抑制p65由胞质转移至核内、能够剂量依赖性的降低pIκBα蛋白表达、减少IκBα的降解;阿托伐他汀高浓度组IκBαmRNA的表达增加.结论 阿托伐他汀可以通过影响IκBα的表达和降解来抑制核因子κB活性.
作者：赵钢；刘闺男；李志明 刊期： 2007年第03期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
