黄健；吴立军；田代真一；小野寺敏；池岛乔
目的探讨扇贝多肽对单次长波紫外线辐射HaCaT角质形成细胞氧化损伤的保护作用机制.方法从栉孔扇贝中提取扇贝多肽(PCF, Mr=879).UVA辐射强度为5 J·cm-2.酶生化法测定胞质SOD,GSH-px活性,ROS、MDA水平;透射电镜观察细胞超微结构的改变;原位杂交技术检测细胞内p21mRNA的变化.结果在5 J·cm-2 UVA辐射下,在给定浓度范围内PCF能剂量依赖性降低胞质ROS、MDA水平;提高SOD,GSH-px活力;电镜下可见PCF可保护细胞超微结构;p21 mRNA原位杂交发现PCF可明显抑制其表达.结论扇贝多肽对单次UVA诱导的人HaCaT细胞氧化损伤有保护作用.其机制与清除氧自由基、提高抗氧化酶活性、抑制p21 mRNA表达及细胞凋亡有关.
作者：窦梅；初晓；张杰；陈雪红；王跃军；邵伯芹；王春波 刊期： 2006年第04期
目的观察雌激素对NMDA诱导离体海马神经元凋亡的作用,探讨雌激素的神经保护作用机制.方法用形态学鉴定和细胞死亡率的测定以及Western blot方法分析雌激素对NMDA诱导神经元凋亡的作用.结果培养的神经细胞经形态学鉴定绝大多数是神经元,占总细胞数目的81.3%, 凋亡细胞百分数为15.1%, NMDA(300 μmol·L-1+甘氨酸5 μmol·L-1)能明显诱导神经元凋亡,凋亡发生数为31.6%(与对照组相比P<0.05),雌激素(300 μmol·L-1)能明显拮抗NMDA的凋亡毒性作用,凋亡发生数为18.2% (与对照组相比P>0.05).MTT实验测定细胞生存率:NMDA组为70.2%(与对照组相比P<0.05),NMDA+雌激素组为89.7%(与对照组相比P>0.05).蛋白印迹也显示, caspase-3的活性能被雌激素所抑制.结论雌激素具有神经保护作用,作用机制可能通过抑制凋亡相关酶的活性来实现.实验结果为开发雌激素的临床应用和寻找神经保护作用药物提供实验参考依据.
作者：常全忠；张淑玲 刊期： 2006年第04期
目的观察山茱萸环烯醚萜总苷(ICO)对糖化终产物(AGEs)培养肾小球系膜细胞(GMC)形态学、细胞周期及氧化应激的影响.方法用含AGEs的培养液配制ICO、氨基胍,同时设对照.GMC培养48 h后,加混合荧光染液进行染色,并立即进行荧光显微观察.另用流式细胞仪分析GMC的周期.试剂盒测定细胞上清液MDA含量与SOD和GSH-Px活性,流式细胞仪检测细胞内ROS含量.结果形态学显示,正常GMC形态结构正常.而GMC在AGEs的刺激下,细胞数量明显增多,细胞结构不甚清晰,细胞S期延长,G0/G1缩短,细胞内SOD、GSH-Px下调,ROS、MDA上调.在系统中加入ICO后细胞异常增殖明显减少,细胞形态趋于正常,使S期细胞减少,SOD、GSH-Px活力提高,ROS、MDA含量降低.结论 ICO能对抗AGEs对GMC的损伤作用.其可能是通过抑制氧化应激来保护GMC免受AGEs的损害,从而达到防治糖尿病肾病的目的.
作者：许惠琴；刘洪；沈健；时艳 刊期： 2006年第04期
目的研究β-胡萝卜素(BC)对阿霉素(ADM)所致大鼠心肌组织的锰超氧化物歧化酶(Mn SOD)mRNA、铜-锌超氧化物歧化酶(Cu-Zn SOD)mRNA、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)mRNA表达改变的影响,探讨BC拮抗ADM导致心肌组织的Mn SOD、Cu-Zn SOD、GPx活性降低的机制.方法大鼠腹腔注射(ip)ADM(10.0 mg·kg-1,1次);ADM处理的大鼠灌胃(ig)不同剂量的BC(每天1次,3次;ipADM前ig BC,每天1次,11次行预处理)进行干预.分别用硫代巴比妥酸法、硝酸还原酶法、黄嘌呤氧化酶法、二硫代二硝基苯甲酸法、血红蛋白氧化法测定心肌组织的丙二醛(MDA)含量、一氧化氮(NO)含量、Mn SOD及Cu-Zn SOD活性、GPx活性、一氧化氮合酶活性;RT-PCR方法检测心肌组织的Mn SOD mRNA、Cu-Zn SOD mRNA、GPx mRNA、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达.结果 BC(20.0, 40.0,80.0 mg·kg-1)拮抗ADM所致心肌组织的MDA含量及NO含量增加、iNOS mRNA表达水平增加及其酶活性增加(P<0.01);拮抗ADM所致心肌组织的Mn SOD mRNA、Cu-Zn SOD mRNA、GPx mRNA表达水平降低及其酶活性降低(P<0.01).结论 BC拮抗ADM导致心肌组织的Mn SOD mRNA、Cu-Zn SOD mRNA、GPx mRNA表达降低而拮抗ADM导致Mn SOD 、Cu-Zn SOD、GPx 活性降低.其机制可能与BC抑制ADM诱导心肌组织的iNOS mRNA表达而降低iNOS活性使心肌组织产生NO减少,从而减少NO抑制Mn SOD mRNA、Cu-Zn SOD mRNA、GPx mRNA表达有关.
作者：阳冠明；孙胜涛；李树全；林伟雄；刘微；叶司原；利基林；林善修 刊期： 2006年第04期
目的探讨芸香苷(Rutoside,Ru)静脉输注给药对实验性急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)腺泡细胞凋亡的影响及作用机制.方法 3%牛磺胆酸钠(sodium taurocholate,STC)逆行胆胰管注射诱导大鼠AP模型,取胰腺做病理学检查.应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase biotin-dUTP nick end labeling,TUNEL)方法检测胰腺组织中的腺泡细胞凋亡.用免疫组化法检测Fas、FasL蛋白的表达.结果 Ru 15、30、60 mg·kg-1·h-1 3个静脉输注剂量组可改善胰腺的病理组织学变化,且凋亡指数(apoptosis index,AI)高于模型组[6 h Ru大、中、小剂量治疗组分别为(23.33%±3.49%)、(21.56%±3.81%)、(16.24%±2.83%),6 h模型组(8.54%±1.28%),P<0.01];Fas蛋白阳性表达细胞的灰度值低于模型组[6 h Ru大、中剂量治疗组分别为(189.17±5.79)、(203.83±10.94),6 h模型组(226.86±10.37),P<0.01];FasL在各组腺泡细胞中均有不同程度的表达,但各治疗组的阳性表达细胞的灰度值高于模型组[6 h Ru大、中、小剂量治疗组分别为(220.63±7.41)、(218.72±4.48)、(207.22±22.67),6 h模型组(181.70±9.01),P<0.05,P<0.01],各组的AI在各时间点均与Fas阳性表达细胞的灰度值呈正相关,与FasL阳性表达细胞的灰度值和胰腺严重程度呈负相关(P<0.05,P<0.01).结论 Ru对实验性AP的保护作用可能与促腺泡细胞凋亡有关,Fas/FasL系统可能参与此过程而诱导细胞凋亡.
作者：汪琳；武征；赵维中；高锟 刊期： 2006年第04期
二烯丙基二硫(diallyl disulfide, DADS)具有抑制肿瘤细胞增殖,调控细胞周期依赖素激酶、信号转导,诱导肿瘤细胞分化、凋亡及影响癌基因与抑癌基因表达的作用.小剂量DADS(1.25 mg·L-1)可以抑制JAK1/STAT3信号通路,将HL-60细胞阻滞在G0/G1期,诱导HL-60细胞向粒系分化,其作用与全反式维甲酸(ATRA)相当[1～3].本实验将探讨小剂量DADS与ATRA联合应用对HL-60细胞的生长抑制及诱导分化效应.
作者：程爱兰；武明花；黄卫国；何洁；周建国；苏琦 刊期： 2006年第04期
目的比较冬凌草甲素 (oridonin) 和TNFα诱导小鼠成纤维L929细胞凋亡的分子机制.方法 MTT法、Hoechst 33258荧光染色、DNA片断化分析和Western blot分析法.结果 Oridonin和TNFα均能诱导L929细胞发生凋亡,其半数有效抑制浓度IC50分别为(24.8±1.2) μmol·L-1 和(20.9±1.9) μg·L-1.Oridonin和TNFα均能引起L929细胞凋亡形态学变化,TNFα处理过的细胞在琼脂糖凝胶电泳上可见典型的凋亡DNA梯状条带,但是oridonin处理的细胞却不能,称之为非典型凋亡;caspase-3,-8抑制剂和caspase家族抑制剂能明显得促进25 μmol·L-1 oridonin和20 μg·L-1 TNFα诱导的L929细胞凋亡,caspase-9抑制剂只能促进oridonin诱导的L929细胞凋亡;ERK的抑制剂PD98059能明显的抑制oridonin和TNFα诱导的L929细胞凋亡,但是p38的抑制剂SB203580只能抑制TNFα诱导的L929细胞凋亡;在L929细胞中oridonin能促进内源性pro-TNFα的表达和其上游蛋白IκB的磷酸化.结论 Oridonin通过激活转录因子NF-κB而促进内源性pro-TNFα的表达,并且部分通过细胞因子TNFα信号转到途径诱导L929细胞凋亡.
作者：黄健；吴立军；田代真一；小野寺敏；池岛乔 刊期： 2006年第04期
蛋白质芯片技术日趋成熟,研究重点已由对整个蛋白质组的观察,转变为对具有重要功能的蛋白质的研究.低密度蛋白质芯片技术的建立为这一研究转变提供了有力工具,具有交叉影响小,信号强度高,结果准确性好的特点.文章综述了低密度蛋白质芯片在疾病诊断和监控,药物发现和检测,分子相互作用和信号通路等医药研究中的应用.
作者：周勇；耿美玉；杜冠华 刊期： 2006年第04期
目的克隆胶质细胞M1、M3、M5受体亚型基因序列,比较胶质细胞和神经细胞M1、M3、M5受体亚型基因序列、蛋白质序列的差异.方法根据神经细胞M1、M3、M5受体基因序列全长设计特异性探针,采用RT-PCR方法扩增胶质细胞M1、M3、M5受体亚型基因序列,并对其进行克隆测序.结果测序得到胶质细胞M1、M3、M5受体亚型基因序列,与神经细胞比较,M1受体差异碱基4个,发生氨基酸改变的有1个;M3受体差异碱基有8个,发生氨基酸改变的位点有4个;M5受体差异碱基1个,发生氨基酸改变的有1个.结论胶质细胞与神经细胞M1、M3、M5受体亚型在基因和蛋白序列上具有明显差异.
作者：张晓娟；汪海 刊期： 2006年第04期
目的应用高胰岛素体外诱导培养建立的胰岛素抵抗HepG2细胞模型探讨蜕皮甾酮对其胰岛素敏感性和糖代谢的影响.方法采用3H-D-葡萄糖的参入试验评价细胞的胰岛素敏感性,在诱导胰岛素抵抗HepG2细胞模型的过程中或模型建立后,培养液中加入蜕皮甾酮及吡格列酮共同孵育,观察蜕皮甾酮及吡格列酮对HepG2细胞葡萄糖参入率,同时观察蜕皮甾酮对胰岛素抵抗细胞模型葡萄糖消耗量的影响.结果含有蜕皮甾酮(浓度为1×10-6～10-4mol·L-1)的胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖参入率与葡萄糖消耗量明显高于不含蜕皮甾酮的胰岛素抵抗HepG2细胞(对照细胞,P<0.01).蜕皮甾酮与吡格列酮对胰岛素抵抗模型细胞的葡萄糖参入率与葡萄糖消耗量差异无显著性(P>0.05).结论蜕皮甾酮在胰岛素抵抗细胞模型中能提高胰岛素介导的葡萄糖摄取和利用能力,即增加胰岛素的敏感性;并能明显改善糖代谢.
作者：陈秋；夏永鹏；邱宗荫 刊期： 2006年第04期
目的探讨蛋白激酶C(PKC)、蛋白激酶A(PKA)信号转导途经及血管内皮完整性在15-羟基二十碳四烯酸(15-HETE)收缩肺动脉中的作用. 方法采用组织浴槽血管环法与PKC、PKA抑制剂以及除去血管内皮细胞相结合的方法.结果用6.8 mmol·L-1 hypericin阻断PKC途径可使15-HETE收缩缺氧大鼠肺动脉量效曲线右移(P<0.01);用0.112 mmol·L-1 KT5720阻断PKA途径使15-HETE收缩缺氧大鼠肺动脉量效曲线右移不明显;除去血管内皮细胞可降低对照组和缺氧组肺动脉血管环对15-HETE的反应性. 结论 15-HETE收缩肺动脉的作用和PKC信号转导系统以及血管内皮细胞的完整性有关.
作者：唐晓波；李倩；毕海荣；周建秋；吕昌莲；朱大岭 刊期： 2006年第04期
目的研究地黄寡糖(ROS)在2型糖尿病(T2DM)动物模型和正常大鼠高血糖模型上对血糖的影响及机制.方法采用长期高脂肪饲料饲养加小剂量链脲佐菌素(STZ, 30 mg·kg-1, ip)诱导♀大鼠2型糖尿病动物模型;采用葡萄糖(2.5 g·kg-1, ip)和肾上腺素(300 μg·kg-1, ip)诱导正常♂大鼠高血糖模型.动物分为正常对照组、2型糖尿病模型组或高血糖模型组、ROS给药组及阳性对照二甲双胍组,以上各组均为灌胃给药.结果与2型糖尿病模型组比较,ROS高、低剂量组均可降低糖尿病大鼠的血糖值,以高剂量组为明显;ROS对血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量有降低趋势,对高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量有升高趋势;ROS可使肝脏葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)活性降低,使肝糖原和胰岛素含量呈增加趋势;对正常大鼠肾上腺素性高血糖模型,ROS给药6 d后,血糖峰值比高血糖模型组低.结论 ROS灌胃给药对2型糖尿病大鼠的血糖有降低作用,其机制与降低肝葡萄糖-6-磷酸酶的活性有关,也可能与增加大鼠肝糖原合成和促进胰岛素分泌有关.ROS亦有降低大鼠肾上腺素性高血糖的作用.
作者：曾艳；贾正平；张汝学；李茂星；王娟；胡静 刊期： 2006年第04期
目的建立转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导肺切片纤维化模型,为肺纤维化病理机制和治疗药物的研究提供实验基础.方法 0.4 %的琼脂糖充盈肺组织,切片,于肺切片培养的1、3、5、7、9 d以LDH漏出值和MTT比色法观察肺切片存活情况.以羟脯氨酸(HYP)为指标从时效和量效两个方面确定TGF-β1诱导肺切片纤维化的亚适时间点和亚适剂量.肺组织进行HE和Masson染色以确定肺纤维化是否形成.结果在本实验条件下,培养的肺切片可存活9 d.通过HYP和组织学检查确定TGF-β1诱导肺切片纤维化的亚适时间点和亚适剂量分别为7 d和2.5 μg·L-1.另外,氢化可的松对TGF-β1诱导肺切片纤维化无明显影响.结论 TGF-β1(2.5 μg·L-1,×7 d)可诱导肺切片纤维化,氢化可的松对此无明显影响.
作者：朱剑萍；姚宏伟；陈季强 刊期： 2006年第04期
目的探讨不同浓度的瘦素对5-氟尿嘧啶(5-FU)损伤结肠癌细胞的影响. 方法同时用5-FU及不同浓度的瘦素进行体外干预结肠癌HT-29细胞株.MTT法检测5-FU 50%细胞生长抑制率(IC50)的变化.流式细胞仪、原位末端转移酶标记法(TUNEL)进行周期及凋亡分析.以RT-PCR方法检测caspase-9,caspase-3 mRNA的表达.结果瘦素抑制5-FU对HT-29的杀伤作用.抑制5-FU诱导的细胞周期阻滞及细胞凋亡.RT-PCR表明加入瘦素后caspase-9,caspase-3 mRNA的表达均下降,且呈剂量依赖性. 结论瘦素通过下调caspase-9,caspase-3 的表达促进结肠癌细胞产生凋亡抵抗,抑制5-FU的损伤作用.
作者：王晓玲；沈志祥；沈磊；于皆平；罗和生；滕小军；郭洁 刊期： 2006年第04期
过氧化物酶体增殖剂激活受体(peroxisome proliferation-activated receptors, PPARs)是由配体激活的核转录因子,属于核激素受体(nuclear hormone receptors)超家族.PPARs的激活可能对某些细胞的生长、分化甚至凋亡有重要影响.近年来的研究表明,PPARs具有神经保护作用,可减轻神经退行性疾病所致的脑组织损害,PPARs激动药可能用于阿尔采末病、帕金森病、缺血性脑中风及多发性硬化等神经退行性疾病的治疗.本文对PPARs在中枢神经系统的分布及功能、PPARs介导的信号途径及PPARs对阿尔采末病、帕金森病、缺血性脑中风及多发性硬化等神经退行性疾病的作用做一综述.
作者：张慧灵；顾振纶；秦正红 刊期： 2006年第04期
目的为阐明大鼠哮喘模型肺组织cAMP-PDE活性升高的相关原因和意义,研究了咯利普兰(rolipram, Rol)对大鼠哮喘模型的肺功能、肺组织中磷酸二酯酶( PDE )活性和IL-4含量的影响.方法采用卵白蛋白致敏后重复抗原攻击制备哮喘模型,测定肺功能,肺组织cAMP-PDE活性、PDE4的活性和IL-4含量,分类计数外周血和支气管肺泡灌洗液(BALF)中的白细胞.结果哮喘大鼠肺组织cAMP-PDE及PDE4活性与正常对照组相比均升高(P<0.05),致敏后重复抗原攻击的哮喘大鼠肺组织cAMP-PDE活性中PDE4活性比例较高,约占70%.Rol剂量依赖性增加哮喘大鼠肺顺应性,降低肺阻力,抑制增加的哮喘大鼠肺组织cAMP-PDE和PDE4活性,降低肺组织IL-4含量.以Rol (1 mg·kg-1, po)作用明显.哮喘大鼠的肺组织cAMP-PDE和PDE4活性与IL-4存在相关性(P<0.05).此外,Rol还能明显抑制哮喘大鼠BALF中和外周血炎症细胞数目,明显抑制BALF中多形核细胞及血中EOS的比例(P<0.05).结论致敏后重复抗原攻击的哮喘大鼠肺功能明显恶化,肺组织IL-4含量、cAMP-PDE活性明显升高,其中cAMP-PDE活性中以PDE4为主,且cAMP-PDE活性、PDE4活性与肺组织中IL-4密切相关.Rol能有效抑制哮喘大鼠肺组织cAMP-PDE及PDE4活性的升高,降低IL-4含量,改善肺功能.
作者：陈艳；李子刚；汤慧芳；陈季强 刊期： 2006年第04期
目的观察多抗甲素(polyactin A, PA)对脐血树突状细胞(dendritic cell,DC)体外扩增、成熟的影响.方法分别用加有PA、GM-CSF+TNF-α+IL-4(GTI)及GTI+PA(GTIP)的RPMI-1640培养液体外诱导培养脐血单核细胞,培养d 7,Elivision免疫组化方法检测各组细胞CD1a、CD83、HLA-DR、CD34抗原表达情况,透射电镜观察细胞形态.结果 PA组、GTI 组及GTIP组均有一定数量的典型DC,电镜观察该细胞表面有大量粗细不等的树枝状突起;PA组CD1a+、CD83+细胞比例分别达19.63%±3.61%、14.52%±5.79%,高于对照组(即单纯培养液组);GTIP组CD1a+细胞比例升高明显,高于GTI组.结论 PA不仅能促进脐血DC体外扩增、成熟,还能协同GM-CSF、TNF-α、IL-4促进DC生成,PA是一种实用的DC活化剂.
作者：宫惠琳；徐长福；莫立平；张健；韩水平；李恒力 刊期： 2006年第04期
双孔钾通道是一类有多个亚型、可在基线水平上调节细胞膜兴奋性的通道超家族.其中一类TREK高表达于人的中枢神经系统,并受到一些物理和化学因素的调节.近,有关基因敲除动物的实验研究表明,TREK-1可能参与了一些麻醉剂的全麻过程.
作者：孙丽娜；王晓良 刊期： 2006年第04期
目的观察了庆大霉素在体外对肾小管上皮细胞内HSP70表达的影响.方法将庆大霉素(100 mg·L-1)作用于人肾小管上皮细胞系(HK-2),用MTT法检测庆大霉素对HK-2细胞增殖活力的影响,应用免疫细胞化学和Western blot法观察了HSP70蛋白表达的改变,采用RT-PCR法检测HSP70 mRNA表达的变化.结果庆大霉素在作用HK-2细胞24、48、72 h后,MTT吸光度值为0.166±0.02、0.181±0.009、0.237±0.016,均低于对照组0.187±0.011、0.32±0.016、0.515±0.035 (P<0.01); HSP70蛋白阳性表达率(%)分别为69±17、86±21、89±25,均高于对照组6±3、4±3、7±2(P<0.01);还可增加HSP70蛋白和mRNA表达(P<0.01).结论庆大霉素在降低人肾小管上皮细胞系细胞增殖活力的同时,增加HSP70的表达.
作者：王志鹏；梅其炳；刘琳娜；冉玉华；张蓉 刊期： 2006年第04期
对氧磷酶(paraoxonase,简称PON1)是体内分解有机磷酸酯类(organophosphate,以下简称OP)的酶.它在肝脏合成并与高密度脂蛋白(HDL)结合,具有抗氧化和过氧化物酶样作用[1].文献报道,长期与OP接触可导致体内PON1活性降低和心血管系统疾病的发生[1,2].我们推测机体长期暴露于低量OP农药,可消耗体内的PON1,继而导致动脉粥样硬化(AS)发生.本文报道兔长期口服低剂量敌百虫对血管内皮功能及对高脂饮食致AS作用的影响.
作者：胡敏；刘立英；熊小明；钟才高；陈双秀；吴晋湘 刊期： 2006年第04期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
