学术投稿

核黄素联合紫外光灭活血小板悬液中的病毒及抑制细胞因子的实验研究

钟涛;沈继龙;许伟;张循善;卞茂红;杨鹏

关键词:核黄素, 紫外光, 病毒灭活, 人类巨细胞病毒, 细胞因子, 植物凝集素
摘要:目的研究核黄素联合紫外光进行血小板病毒灭活的安全性、有效性及对血小板保存中白细胞释放细胞因子的抑制作用;观察灭活后血小板体外各参数的变化。方法实验组:将人巨细胞病毒标准株( HCMV AD169)注入核黄素溶液,混匀后加入到单采血小板中,以一定辐照剂量的紫外光照射,检测照射前后病毒滴度和照射后不同时间细胞因子的变化,并观察体外血小板部分参数的变化。对照组:为相同来源新鲜单采血小板,同步检测其细胞因子的含量和血小板体外各参数。以植物凝集素( PHA)同步刺激两组血小板,用ELISA法检测细胞因子的含量。结果实验组经150μmol/L的核黄素结合辐照剂量为1500 mJ/cm2的紫外光(250<λ<350 nm)照射10 min 可有效灭活血小板中病毒;对照组细胞因子含量随着保存时间的延长而显著增加;实验组第3天和第5天的细胞因子含量相对于保存前(0 d)差异无统计学意义;而在同一保存时间对照组中细胞因子含量高于实验组(P<0.05);实验组和对照组血小板悬液经过PHA同步刺激后:接受PHA刺激的对照组与未接受PHA刺激的对照组相比,细胞因子含量显著增加( P <0.05);而接受PHA刺激的实验组与未接受PHA刺激的实验组相比,细胞因子含量无显著变化。结论核黄素结合紫外光照射可以有效灭活血小板中病毒,抑制血小板保存中白细胞释放细胞因子的能力,而单采血小板体外诸参数和阴性对照比较无明显差异。
安徽医科大学学报杂志相关文献
  • 超声造影及彩色多普勒参数对门静脉高压食管静脉曲张的诊断价值

    目的探讨超声造影及彩色多普勒参数在门静脉高压食管静脉曲张的诊断价值。方法根据胃镜检查结果,将29例无食管静脉曲张的正常人设为对照组,60例食管静脉曲张的患者均分为中重度组及轻度组,3组分别接受彩色多普勒及超声造影检查,采集肝内血流循环动态数据,获得时间-强度曲线( TIC曲线),得到以下定量参数:肝静脉减震指数( DI )、门静脉流速( PVV )、造影剂肝动脉到达时间( HAAT)、门静脉到达时间( PVAT )及肝静脉到达时间( HVAT),进而计算造影剂肝动脉门静脉间隔时间( PV-HA,即造影剂到达门静脉时间减去到达肝动脉时间)及肝静脉门静脉间隔时间( PV-HV,即造影剂到达门静脉时间减去到达肝静脉时间)。结果 PV-HV、PV-HA、PVV、DI在3组之间差异有统计学意义( F =72.63、14.97、6.71、13.74, P <0.01)。中重度组与对照组比较,PV-HV、PV-HA、PVV、DI差异有统计学意义(P<0.01),与轻度组比较,PV-HV、PV-HA、DI差异有统计学意义( P<0.01),而PVV差异无统计学意义。轻度组与对照组比较,PV-HA差异有统计学意义( P<0.05),PV-HV、DI及PVV差异无统计学意义。结论利用超声造影及彩色多普勒诊断门静脉高压食管静脉曲张具有重要价值,有望成为其无创诊断的新方法。

    作者:崔亚云;王玲;张超学 刊期: 2014年第01期

  • BDNF rs12273539基因多态性与2型糖尿病认知障碍的关联存在性别差异

    目的探讨脑源性神经营养因子( BDNF) rs12273539基因多态性和2型糖尿病认知障碍( T2DM-CI)之间的关联。方法选择 T2DM-CI 患者92例,无认知障碍的 T2DM (T2DM-NCI)患者191例,聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性( PCR-RFLP )法检测 BDNF rs12273539基因多态性,SPSS 15.0及在线遗传软件SHEsis进行统计分析。结果在总体样本和男性样本中,BDNF rs12273539 TT基因型在认知障碍病例组分布相对过多,可能是T2DM-CI的易感基因型,在女性样本中BDNF-rs12273539等位基因和基因型分布在T2DM-CI组和T2DM-NCI组的差异无统计学意义。结论 BDNF-rs12273539可能是T2DM-CI的易感基因;BDNF-rs12273539基因多态性与T2DM-CI的关联存在性别差异。

    作者:周东浩;张建丽;刘红艳;陈淑红;刘桂娟;单晓阳;周爱金;彭焱;房辉;张向阳 刊期: 2014年第01期

  • pEGFP-C2-NLRC5重组质粒的构建及其表达

    目的构建含NLRC5蛋白功能区的cDNA序列的真核表达载体 pEGFP-C2-NLRC5,并检测其在肾成纤维细胞(COS-7)中的表达。方法采用RT-PCR法从人肝星状细胞(LX-2)中获得 NLRC5蛋白功能区的 cDNA 序列片段,用EcoR玉和BamH 玉双切酶将片段和载体pEGFP-C2双酶切后,酶切产物加入T4连接酶16益连接过夜,构建真核表达载体pEGFP-C2-NLRC5。将构建成功的pEGFP-C2-NLRC5重组质粒经PCR,限制性内切酶酶切和测序鉴定后用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将其转染至COS-7细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达, Western blot法鉴定融合蛋白表达。结果阳性克隆经双酶切法鉴定可见NLRC5基因片段。转染重组质粒后可观察到绿色荧光蛋白的表达,而且主要分布在细胞质中,Western blot法也可检测到在74 ku处有一明显条带,其大小符合EGFP-NLRC5表达的蛋白( NLRC5蛋白大小约为47 ku,EGFP蛋白大小约为27 ku),表明融合蛋白可在哺乳动物细胞中成功表达。结论成功构建pEG-FP-C2-NLRC5质粒, NLRC5蛋白可在 COS-7细胞中成功表达。

    作者:徐涛;彭云云;李琳;黄成;张磊;金涌;吕雄文;李俊 刊期: 2014年第01期

  • 右美托咪定对胃癌根治术中瑞芬太尼复合丙泊酚全麻药量及麻醉效果的影响

    目的观察胃癌根治术中右美托咪定辅助全身麻醉对患者围术期血流动力学、麻醉药用量以及术后镇静镇痛的影响。方法择期全麻行胃癌根治术患者40例,随机均分为右美托咪定(D)组和对照(C)组,D组麻醉诱导前15 min静脉泵注右美托咪定0.6μg/kg,维持为0.4μg/(kg·h),直至术毕前40 min,C组则给予等量的生理盐水。观察注药前(T1)、麻醉诱导前(T2)、气管插管前即刻(T3)、插管后1 min( T4)、切皮时( T5)、探查时( T6)、拔管后即刻( T7)的脑双频指数( BIS)、平均动脉压( MAP)、心率( HR),记录丙泊酚和瑞芬太尼的用量,术后4 h内的镇静评分Ramsay和视觉模拟评分VAS情况。结果 T2时D组BIS值明显低于T1和C组(P<0.01);与C组比较,T2、T4~T7时D组MAP 明显降低,HR明显减慢(P<0.05,P<0.01); D组丙泊酚和瑞芬太尼的用量明显低于C组(P<0.05);D组术后1 h和4 h的Ramsay评分明显高于C组、VAS评分明显低C组( P<0.05)。结论右美托咪定辅助全身麻醉可产生明显的镇静,镇痛效应,减少麻醉药的用量,降低了患者术后的不适感。

    作者:王红仙;张野;李云;王斌 刊期: 2014年第01期

  • 美洲大蠊及其不同提取物对急性免疫性肝损伤保护作用的比较

    目的探讨美洲大蠊及其不同提取物对刀豆蛋白A ( ConA)致小鼠急性免疫性肝损伤时肝脏功能的保护作用。方法将小鼠随机分为正常对照组、模型组、虫粉混悬(100、200 mg/kg)组、醇提取(100、200 mg/kg)组、水提取(100 mg、200 mg/kg)组、醇水双体取(100、200 mg/kg)组、联苯双酯200 mg/kg组。给予小鼠美洲大蠊原虫粉及其不同提取物灌胃10 d后,采用尾静脉注射ConA 20 mg/kg制备急性免疫性肝损伤模型,8 h后称取小鼠体重,眼球取血测定血清中丙氨酸氨基转移酶( ALT)、门冬氨酸氨基转移酶( AST)活性;处死小鼠取出肝脏和脾脏称重,计算肝脾指数;制备肝脏匀浆测定超氧化物歧化酶( SOD )、丙二醛( MDA )、谷胱甘肽( GSH)活性和HE染色下肝脏病理组织学变化。结果与模型组比较,给药组均有降低ConA致小鼠急性免疫性肝损伤肝脾指数(P<0.01,P<0.05);降低血清中ALT、AST活性(P<0.01,P <0.05)和肝脏组织中 MDA 的活性(P <0.01,P<0.05);升高肝脏组织中的SOD、GSH的活性(P<0.01,P<0.05);减轻小鼠肝脏病理损伤。结论美洲大蠊及其提取物对ConA引起的小鼠急性免疫性肝损伤具有一定保护作用。美洲大蠊及其提取物存在药效差别,虫粉混悬组及水提取组作用优于其醇提取组和醇水双提取组。

    作者:张鹏;王佳佳;方海明;程启闰;章礼久 刊期: 2014年第01期

  • MSCs及其上清液预防大鼠佐剂性关节炎的实验研究

    目的探讨骨髓间充质干细胞( MSCs)及其上清液对大鼠佐剂性关节炎( AA)的预防作用。方法培养扩增SD大鼠骨髓MSCs,收集MSCs及其上清液。将健康雄性SD大鼠右后足跖皮内一次性注射弗氏完全佐剂0.1 ml/只造模。造模后行MSCs及其上清液干预。造模前1 d、造模后7、14、21、28 d测量大鼠体重和后足爪体积,同时观察大鼠生存状况。干预后第28天,行四肢关节X线片及病理检查。结果 MSCs干预组和上清液干预组大鼠,原发性炎症和继发病变均不明显,关节X线片和病理检查均未见明显异常,与模型组大鼠相比,体重和足爪体积差异有统计学意义(P <0.05)。结论 MSCs及其上清液可有效干预弗氏完全佐剂诱导的大鼠AA的进展。

    作者:许键炜;何志旭;申长清;赵芳芳 刊期: 2014年第01期

  • 经结膜无缝合23 G玻璃体切除术灌注系统在玻璃体切除术后白内障手术中的应用

    回顾性分析30例(30只眼)均系玻璃体切除术后白内障的患者,经结膜无缝合23G玻璃体切除术(23GTSV)灌注系统的支持下行小切口非超声乳化白内障摘除术和白内障超声乳化术,观察视力预后、术中及术后并发症。1例患者在行超声乳化时,术中发现后囊膜破裂改行小切口手术。3例患者术后低眼压,其中1例发现是脉络膜脱离所致,另外2例考虑有切口的渗漏,经处理后恢复正常。4例硬核和3例合并糖尿病视网膜病变的患者术后出现角膜水肿和前房闪辉。所有患者没有出现巩膜塌陷、晶体核沉入玻璃体腔、脉络膜上腔出血等严重的并发症。28例患者术后视力得到改善。

    作者:汪永;李寿玲;赵冰莹 刊期: 2014年第01期

  • 实时三平面定量组织速度成像及实时三平面应变率成像技术评价尿毒症患者左室舒张功能

    目的应用实时三平面(RT-3PE)定量组织速度成像( QTVI)及实时三平面应变率( SRI)成像技术定量分析尿毒症患者左室舒张功能。方法收集30例尿毒症患者和33例健康志愿者的心尖四腔观 RT-3PE 图像。应用 RT-3PE QTVI和RT-3PE SRI技术分别测量左心室各室壁基底段和中间段心肌舒张早期和舒张晚期峰值速度( Ve、Va )及峰值应变率( SRe、SRa),计算Ve/Va和SRe/SRa,然后进行比较分析。结果与正常对照组相比,尿毒症组的Ve、SRe明显降低( P<0.05), Ve/Va、SRe/SRa显著降低( P<0.05), Va升高(P<0.05),而SRa变化差异无显著性。结论 RT-3PE QTVI技术和RT-3PE SRI技术通过舒张期峰值速度、峰值应变率等指标能更加准确地评价尿毒症患者左室舒张功能。

    作者:姚文;郑慧;帅秀芳;靳松;姚翀;王迪;李晓金 刊期: 2014年第01期

  • 还原型谷胱甘肽联合腺苷蛋氨酸治疗化疗药物性肝损害的临床疗效

    回顾性分析还原型谷胱甘肽( GSH)联合腺苷蛋氨酸治疗化疗药物引起肝损害的临床疗效。83例化疗患者随机分为联合组(n=43)和对照组(n=40),在预防性保肝药物应用基础上,对照组予GSH 180 mg静滴1次/d,联合组在对照组基础上加用腺苷蛋氨酸1.0g静滴1次/d。两组疗程12 d。联合组较对照组疗效更佳,联合组总有效率95.35%,明显高于对照组80.00%(P<0.05)。联合腺苷蛋氨酸治疗化疗药物性肝损害临床疗效肯定,优于单用。

    作者:时兆燕;汪伟民;邓松华 刊期: 2014年第01期

  • 肝淀粉样变性的显微和超微结构观察

    应用HE染色、刚果红染色、高锰酸钾氧化刚果红染色、透射式电子显微镜观察病肝组织的显微及超微结构变化。结果显示,光镜下淀粉样物质可逐渐沉积于窦周间隙、肝细胞间、汇管区,这些受累的区域无细胞或细胞过少;电镜下观察肝细胞间沉着大量淀粉样物质,肝细胞萎缩甚至崩解,细胞器消失,出现裸核。

    作者:吴敏霞;陈虹;周琳瑛;钟秀容 刊期: 2014年第01期

  • 核黄素联合紫外光灭活血小板悬液中的病毒及抑制细胞因子的实验研究

    目的研究核黄素联合紫外光进行血小板病毒灭活的安全性、有效性及对血小板保存中白细胞释放细胞因子的抑制作用;观察灭活后血小板体外各参数的变化。方法实验组:将人巨细胞病毒标准株( HCMV AD169)注入核黄素溶液,混匀后加入到单采血小板中,以一定辐照剂量的紫外光照射,检测照射前后病毒滴度和照射后不同时间细胞因子的变化,并观察体外血小板部分参数的变化。对照组:为相同来源新鲜单采血小板,同步检测其细胞因子的含量和血小板体外各参数。以植物凝集素( PHA)同步刺激两组血小板,用ELISA法检测细胞因子的含量。结果实验组经150μmol/L的核黄素结合辐照剂量为1500 mJ/cm2的紫外光(250<λ<350 nm)照射10 min 可有效灭活血小板中病毒;对照组细胞因子含量随着保存时间的延长而显著增加;实验组第3天和第5天的细胞因子含量相对于保存前(0 d)差异无统计学意义;而在同一保存时间对照组中细胞因子含量高于实验组(P<0.05);实验组和对照组血小板悬液经过PHA同步刺激后:接受PHA刺激的对照组与未接受PHA刺激的对照组相比,细胞因子含量显著增加( P <0.05);而接受PHA刺激的实验组与未接受PHA刺激的实验组相比,细胞因子含量无显著变化。结论核黄素结合紫外光照射可以有效灭活血小板中病毒,抑制血小板保存中白细胞释放细胞因子的能力,而单采血小板体外诸参数和阴性对照比较无明显差异。

    作者:钟涛;沈继龙;许伟;张循善;卞茂红;杨鹏 刊期: 2014年第01期

  • 江苏省2011~2012年新报告HIV/AIDS新发感染状况分析

    目的了解江苏省新报告艾滋病病毒感染者( HIV)及艾滋病患者( AIDS)的新发感染状况,计算新发感染比例。方法对江苏省新报告的 HIV/AIDS 2145例,应用 BED HIV-1 IgG捕获酶免疫( BED-CEIA)法检出其中的新发感染者,按不同的感染途径和样本来源计算各感染途径和样本来源的HIV/AIDS 中新发感染的比例。结果新报告 HIV/AIDS中同性传播的新发感染比例为26.97%(260/964),异性传播为16.77%(162/966),注射毒品为19.85%(27/136);新报告HIV/AIDS中来源于自愿咨询检测、专题调查及无偿献血人员检测的新发感染比例分别为30.98%(149/481)、28.57%(60/210)及36.63%(37/101),来源于术前检测、性病门诊、其他就诊者检测及其他羁押人员体检的新发感染比例分别为16.06%(44/274)、19.42%(27/139)、15.12%(75/496)及17.42%(23/132)。结论江苏省新报告HIV/AIDS中男男同性传播的新发感染比例高,状况不容乐观;应加强主动发现的手段以尽早发现HIV/AIDS,减少二代传播。

    作者:胡海洋;刘晓燕;还锡萍;周莹;张之;徐晓琴;徐金水;邱涛;傅更锋;羊海涛 刊期: 2014年第01期

  • 维生素D与Graves 病的研究进展

    人体维生素D( Vit D)主要来自紫外线照射皮肤后合成和膳食获取,1,25(OH)2D是Vit D主要的活性形式, Vit D具有调节钙磷代谢的作用,与自身免疫性疾病有密切关系。 Graves病( GD)是一种器官特异性自身免疫性疾病。 Vit D与GD患者甲状腺刺激抗体( TSAb)及甲状腺功能相关,其可能机制包括 Vit D 受体( VDR )基因多态性、1α-羟化酶(CYP27B1)基因多态性及Vit D抑制CXCL10分泌等。 Vit D不足与GD患者骨量减少相关。

    作者:王玉婵(综述);邢学农(审校) 刊期: 2014年第01期

  • 4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯的在体肠吸收研究

    目的探讨新型全反式维甲酸( ATRA)衍生物4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯( ATPR )的在体肠吸收特性。方法建立大鼠在体单向肠灌流模型并采用高效液相色谱( HPLC)法测定灌流液中的ATPR、ATRA的浓度,分别计算100、250、500、1000 mg/L ATPR在空肠及ATPR、ATRA在不同肠段的吸收速率常数( Ka )和有效渗透系数( Pef )。结果随着ATPR浓度的增加,其Ka、Pef值分别为(6.77依1.84)×10-3、(14.85依3.46)×10-3、(12.48依3.15)×10-3、(3.03依0.73)×10-3/s 和(0.61依0.17)×10-3、(1.41依0.25)×10-3、(1.23依0.30)×10-3、(0.29依0.07)×10-3 cm/s,均先增加后减小,存在高浓度饱和现象。灌流液在各肠段(十二指肠、空肠、回肠和结肠)的Ka 和Pef差异均无显著性(P>0.05),且与ATRA在4个肠段的Ka 和Pef比较差异无显著性(P>0.05)。结论 ATPR在大鼠肠道内的吸收机制可能为主动转运或易化扩散,且在全肠段内无特定吸收窗。

    作者:詹侠;陈飞虎;汤继辉;徐亚运 刊期: 2014年第01期

  • 投稿须知

    1《安徽医科大学学报》是公开发行的综合性医学学术期刊。1955年创刊,月刊。为《中文核心期刊要目总览》2004、2008、2011年版收录的综合性医药卫生类核心期刊,中国科技核心期刊(中国科技论文统计源期刊),2009、2010、2011年RCCSE核心期刊排行榜A类期刊,被国内外多种数据库收录。本刊以原始研究论文为主,反映我校在科研、医疗等方面的研究成果和进展;辟有专家笔谈、基础医学研究、预防医学研究、药学研究、临床医学研究、技术与方法、综述、讲座等。作者以本校及附属医院、临床学院的科研和医务人员为主,外单位稿件必须是省级以上基金项目论文。

    作者: 刊期: 2014年第01期

  • 31例介入合并甲氨蝶呤治疗子宫瘢痕妊娠的分析

    回顾性分析31例安徽省妇幼保健院收治的子宫下段剖宫产术后切口瘢痕妊娠患者的临床资料。其中22例明确诊断给予介入手术;1例切口妊娠处破裂急诊入院行介入治疗;另8例由于诊断错误在入院前均经过药流或清宫等处理而有活动性阴道流血入院。结果显示31例患者接受介入及其他治疗后,均未行子宫切除术并且人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)均有明显下降。其中24例行介入后清宫术;3例介入后手术行子宫瘢痕切除术;4例介入后药物保守治疗。表明介入治疗为治疗子宫瘢痕妊娠包括急诊瘢痕妊娠合并大出血的有效措施,它降低了子宫切除率。

    作者:马艳;孙玉琴;刘羽 刊期: 2014年第01期

  • 不同体位穿刺腰硬联合麻醉在肥胖产妇剖宫产手术中的比较

    目的观察不同体位穿刺腰硬联合麻醉( CSEA)在肥胖产妇剖宫产手术中对产妇麻醉效果、麻醉操作和血流动力学的影响。方法选择剖宫产手术肥胖产妇80例[体重指数( BMI )≥30], ASA 分级玉或域级,随机均分为两组, A组:侧卧位腰硬联合麻醉,腰麻液为0.5%盐酸罗哌卡因2.4 ml。 B组:坐位腰硬联合麻醉,腰麻液同A组。记录两组一次穿刺成功率、麻醉平面、麻醉效果、血流动力学变化及不良反应发生情况(包括术中仰卧位低血压综合征,脊麻后头痛以及术后脊神经刺激)。结果 B组麻醉效果与A组相比差异无统计学意义,但一次穿刺成功率高于A组(P<0.05),血流动力学变化差异有统计学意义( P<0.05)。仰卧位低血压综合征的发生率低于A组( P<0.05)。结论两种体位腰硬联合麻醉在肥胖产妇剖宫产手术麻醉中具有相同的麻醉效果,但坐位腰硬联合麻醉比侧卧位更易于穿刺操作,血流动力学更稳定。

    作者:张庆梅;夏晓琼;查显忠 刊期: 2014年第01期

  • 新生SD大鼠心肌细胞的原代培养及荧光鉴定

    采用单纯胰蛋白酶消化法分离,差速贴壁法纯化新生大鼠心肌细胞。光学显微镜观察心肌细胞基本形态特征,台盼蓝染色检测成活率,肌钙蛋白玉、α-横纹肌肌动蛋白抗体鉴定心肌细胞。结果显示培养24 h后心肌细胞大部分已贴壁,并出现自发搏动现象,48 h后逐渐伸出伪足相互接触交织成网,72 h后逐渐形成细胞簇并出现同步搏动;台盼蓝染色法检测细胞成活率达90%以上;肌钙蛋白玉及α-横纹肌肌动蛋白免疫荧光染色法鉴定心肌细胞纯度达98%以上。

    作者:姬婷婷;徐岩;张建华;赵勇 刊期: 2014年第01期

  • 钠通道亚型Nav1.3在大鼠实验性牙髓炎组织中的表达

    目的探讨钠通道亚型Nav1.3的表达与炎性疼痛之间的关系。方法大肠杆菌内毒素( LPS)诱导大鼠牙髓炎后,在伤后1、3、5d处死。取正常大鼠及牙髓炎大鼠牙髓组织,采用免疫组织化学法检测Nav1.3在牙髓炎牙髓组织的表达;Western blot法检测Nav1.3的蛋白表达情况。结果与正常大鼠牙髓组织相比,诱导牙髓炎后的大鼠牙髓的成牙本质细胞层中Nav1.3表达显著增强,免疫组化结果显示:正常组、实验1、3、5d组的平均光密度分别为:0.2631依0.0609、0.3628依0.0610、0.5249依0.1815、0.6354依0.2160,实验组与对照组相比,差异有统计学意义( P<0.05)。 West-ern blot检测结果显示:正常组、实验1、3、5 d组的Nav1.3蛋白表达量分别为:0.320依0.041、0.551依0.038、0.983依0.027、1.142依0.019,实验组与对照组相比,差异有统计学意义( P <0.05)。结论牙髓炎所致的炎性疼痛可导致Nav1.3蛋白表达显著上调,这可能是炎性疼痛发生时神经元细胞膜上钠通道功能异常的分子学基础之一。

    作者:朱凌;胡媛平;许乐;阳宏林;蒋勇 刊期: 2014年第01期

  • 应用免疫磁珠分离法纯化弓形虫速殖子的研究

    目的用免疫磁珠分离法分选弓形虫速殖子,以去除宿主细胞成分,并尽可能对虫体的生物学特性无不良影响,为弓形虫的基础与临床研究提供技术基础。方法采用弓形虫Wh3株( China 1基因型)速殖子感染小鼠,提取腹腔液,常规方法制备速殖子可溶性抗原,免疫家兔,获得兔抗弓形虫多克隆IgG抗体。用抗体包被的免疫磁珠对小鼠腹腔液内弓形虫速殖子进行纯化,比较其纯度、回收率、虫体活力、毒力与感染性。结果用免疫磁珠分离技术纯化弓形虫速殖子后,其纯度提高到98.2%,细胞清除率为96%,虫体回收率为73.5%;用内盐法( MTS )细胞增殖与毒性检测试剂盒检测分离后的速殖子活性为95.6%。定量分组感染小鼠后死亡时间无显著性差异。结论免疫磁珠分离的速殖子纯度、细胞清除率和虫体回收率较高,能有效去除宿主细胞,且对速殖子的活性和毒力无影响。该法操作简便快速,无需昂贵的仪器设备,具有较大的实用价值。

    作者:楼研;沈继龙;程维晟;刘芳;陈鹤;罗庆礼;王林 刊期: 2014年第01期

安徽医科大学学报杂志

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