罗杰;高峰;赵晓亮;孙治君
目的 建立重组复杂蛋白快速表达体系.方法 利用定点整合技术建立定点整合宿主细胞库,分别以X-Fc融合蛋白和人凝血因子Ⅷ(FⅧ)为研究对象进行定点整合转染和表达分析.结果 通过定点整合转染建立了高表达的宿主细胞库;X-Fc融合蛋白和人FⅧ均在宿主细胞中获得了高表达,X-Fc融合蛋白的表达量为220 mg/L,人FⅧ在有血清培养条件下的酶活性为2 IU/ml,且细胞株表达稳定,易于扩大培养.结论 已成功建立了基于CHO细胞定点整合的重组复杂蛋白快速表达体系,该体系在克隆效率和时间上具有很大优势,可实现蛋白的有效快速表达.
作者:何太平;杨波;谭晓晶;唐菁燕;雷韬;宋春雷;聂艳桃;徐珑 刊期: 2011年第11期
目的 优化皮上划痕人用炭疽活疫苗的运输条件及活菌数测定方法.方法 用平皿培养菌落计数法对厂家先后2次送检(第1次为常温下运输3d,第2次为低温下运输6h)的皮上划痕人用炭疽活疫苗进行活菌数测定;对第2次送检的7批疫苗分别使用吸量管和移液器取样进行活菌数测定;取第2次送检的1批疫苗,分别使用吸量管和移液器取样进行5次活菌数测定,比较两种工具测定的精密度.结果 第1次送检的7批疫苗活菌数均不符合规定,第2次送检的疫苗活菌数显著高于第1次送检样品(P<0.01),均符合规定;使用吸量管和移液器取样对活菌数测定结果影响不大,差异无统计学意义(P>0.05);使用移液器取样测定活菌数的变异系数(11.3%)明显低于使用吸量管取样测定活菌数的变异系数(23.0%).结论 炭疽活疫苗在送检过程中必须低温运输;使用移液器取样测定活菌数精密度高且操作方便,有利于制品的质量控制.
作者:魏东;李恪梅;王秉翔;王国治 刊期: 2011年第11期
目的 通过检测EV71中和抗体效价(EV71-NT),对四川地区供浆员中EV71-NT的分布进行分析.方法 应用基于细胞病变抑制的EV71-NT检测方法,检测四川地区349份健康人血浆的EV71-NT,同时用肠道病毒(EV)71型抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)检测其EV71抗体,并分析二者的相关性;检测四川地区21 817份健康人血浆中EV71-NT的分布.结果 该EV71-NT检测方法具有较好的重复性,测定高效价和低效价EV71中和抗体标准品的变异系数分别为30.9%和33.6%;该方法与ELISA法的相关性较差(r=0.024);四川地区21 817份健康人血浆中含高效价EV71中和抗体的比例在7.1%~18.4%之间,EV71高效价血浆占10.3%.结论 在四川地区供浆员血浆中含有一定比例的高效价EV71中和抗体,可以直接从自然感染人群中筛选EV71抗体血浆进行EV71特异性免疫球蛋白的研制.
作者:秦婷婷;杨春;李小姣;刘瑞熙;武志强;张航;刘波;刘兰军 刊期: 2011年第11期
目的 探讨普洱茶水提物对巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)的影响.方法 以佛波酯处理THP-1细胞48 h,分化得到巨噬细胞,以其为炎症细胞模型,用不同浓度的普洱茶水提物(125、250 μg/ml)与终浓度为100 EU/ml的脂多糖的混合物作用于巨噬细胞,ELISA法检测细胞培养液中TNF-α的含量.结果 普洱茶水提物能有效抑制巨噬细胞炎症因子TNF-α的分泌,且浓度为250 μg/ml的普洱茶水提物对TNF-α分泌的抑制作用强于浓度为125 μg/ml的普洱茶水提物,呈剂量依赖性.结论 普洱茶水提物对巨噬细胞炎症因子TNF-α的分泌具有抑制作用.这种效果与已知的绿茶抗炎的主要成分EGCG无关.
作者:李春磊;王宣军;宋爽;李冬青;师思;郝淑美;盛军 刊期: 2011年第11期
目的 探讨DN-ALK2对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、迁移和侵袭能力的影响.方法 RT-PCR法检测MDA-MB-231细胞中ALK2基因mRNA的转录;分别以腺病毒DN-ALK2和RFP感染MDA-MB-231细胞,并设空白对照组,通过MTT法、平板集落形成试验、细胞划痕试验及Transwell侵袭试验检测细胞的增殖、集落形成、迁移及侵袭能力.结果 MDA-MB-231细胞中内源性表达ALK2.腺病毒DN-ALK2和RFP感染MDA-MB-231细胞36 h后,荧光表达量一致,约为70%.MDA-MB-231/DN-ALK2细胞中高表达DN-ALK2.与MDA-MB-231/RFP组相比,MDA-MB-231/DN-ALK2组细胞的增殖活力、集落形成率及划痕愈合率均显著降低(P<0.05),穿膜细胞数也明显减少(P<0.05);而MDA-MB-231/RFP组与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 DN-ALK2可以在体外抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖、迁移与侵袭.
作者:孙笑笑;王科;冯红蕾;罗进勇;王虹;张彦 刊期: 2011年第11期
目的 观察无明胶冻干水痘减毒活疫苗接种后的安全性和免疫原性.方法 采用随机、双盲、对照的方法,将1 398名1~12岁儿童分为试验组和对照组,分别接种无明胶和含明胶冻干水痘减毒活疫苗,观察接种后的安全性;并对其中733名接种者采用膜抗原荧光抗体(Fluorescent antibody to membrane antigen,FAMA)法检测水痘抗体水平,观察疫苗的免疫原性.结果 试验组与对照组接种后全身反应的总发生率分别为11.49%和14.96%,组间比较差异无统计学意义(P>0.05).全身反应以发热为主,试验组中度发热反应(37.6~39.0℃)的发生率(0.57%)显著低于对照组(1.71%)(P<0.05);试验组(3.02%)与对照组(2.99%)局部反应的发生率差异无统计学意义(P>0.05),主要表现为疼痛、红肿和瘙痒.试验组和对照组接种前的抗体几何平均滴度(GMT)分别为1∶5.83和1∶6.04;接种后的GMT分别为1∶89.15和1∶94.44,抗体阳转率分别为98.91%和98.37%,组间比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 无明胶冻干水痘减毒活疫苗的免疫原性等同于含明胶冻干水痘减毒活疫苗,且能明显降低中度发热反应的发生率.
作者:白云骅;杨立清;郭丽姝;陶航;艾星;李丽;屈燕;吴疆;时念民;郑艳微;沈艳杰;陈莹 刊期: 2011年第11期
目的 建立马抗破伤风毒素免疫球蛋白F(ab′)2新的制备工艺.方法 制备并纯化破伤风类毒素(Tetanus toxoid,TT)及重组破伤风毒素c片段(Recombinant tetanus toxin C fragment,rTT-C),将TT/rTT-C(2∶1)免疫马匹,待血清抗体效价达3 500 IU/ml时,采血,分离血清,灭活,去除外源蛋白,胃蛋白酶消化制备F(ab′)2,经DEAE柱层析纯化,并对其进行中和抗体效力、安全性和稳定性检测.结果 纯化的TT和rTT-C的浓度分别为70 000 Lf/L和4~5 mg/L,纯度分别达95%以上和96%以上;纯化的TAT-F( ab′)2收率为1.4%,纯度达91%以上,中和抗体效价>15 000 IU/ml;其安全性及稳定性均符合《中国药典》三部(2005版)要求,有效期暂定为18个月.结论 建立了马抗破伤风毒素免疫球蛋白F(ab′)2新的制备工艺,制备的制品达到甚至超过了国外的质量标准,为马抗血清同类制品的升级换代提供了技术支持.
作者:刘永祥;赵忠鹏;罗德炎;陈中伟;杨涛;王希良;高俊杰 刊期: 2011年第11期
目的 观察甲型H1N1流感患者病毒核酸阴转时限.方法 选择2009年9月16~27日我院收治的甲型H1N1流感确诊病例38例,经同一名医生进行咽拭子采集,采用RT-PCR方法检测甲型通用、甲1通用、季节性流感、甲型H1N1亚型4个病毒亚型,以甲型通用、甲1通用、甲型H1N1亚型均阴转作为判定病毒核酸阴转的标准.结果 38例甲型H1N1流感患者病毒核酸阴转的时限短1d,长14d,平均4.5d;病毒核酸阴转时间主要集中在第3、4、5天,第5天与第4天相比,甲型通用、甲1通用和甲型H1N1的阴转比例均明显增加(P<0.05);发病36 h内接受抗病毒治疗者,病毒核酸阴转平均时间为4.1d;37~72 h接受抗病毒治疗者,病毒核酸阴转平均时间为5.2d;有3例甲型通用、甲1通用、甲型H1N1亚型病毒核酸未同时阴转.结论 甲型H1N1流感抗病毒治疗1周,大部分患者病毒核酸阴转,不具有传染性;尽早(36 h内)接受抗病毒治疗,可以缩短病毒核酸阴转时间;甲型通用、甲1通用、甲型H1N1亚型具有较好的一致性,对三者未同时阴转的情况,应注意是否同时合并其他甲型流感病毒亚型感染.
作者:崔文玉;闫世明;赵云虹;杨光绪;张智勇;于关成 刊期: 2011年第11期
目的 建立一种新的造血干细胞获取方法,为临床应用提供实验依据.方法 将明胶海绵移植到小鼠后肢的大腿内侧肌间隙,12d后分离明胶海绵中的迁移细胞.采用流式细胞术和免疫荧光法检测迁移细胞和骨髓细胞中CD34+、Sca-1+和CD34+Sca-1+细胞的表达,利用体外造血克隆分析迁移细胞和骨髓细胞中造血克隆的密度.结果 迁移细胞的数量在移植12d时达大;迁移细胞中CD34+、Sca-1+和CD34Sca-1+细胞的比例明显高于骨髓细胞(P<0.05),造血克隆比例也明显高于骨髓(P<0.01).结论 利用生物材料明胶海绵成功建立了一种高效的造血干细胞获取方法,可实现自体细胞治疗.
作者:武晓云;王世立 刊期: 2011年第11期
目的 探讨外源性Notch2胞内段基因过表达对慢性粒细胞白血病(Chronic myeloid leukemia,CML)细胞株K562增殖的影响及其机制.方法 将携带Notch2胞内段(ICN2)基因的质粒转染K562细胞,MTT法检测细胞的增殖;流式细胞仪检测细胞的细胞周期分布;RT-PCR检测Notch2基因全长mRNA的转录,Western blot检测Notch2蛋白的表达;RT-PCR检测Notch通路下游靶基因Hes1、Hey1及细胞增殖、凋亡相关基因numb、Bcl-2、NF-κB和TGF-β1的mRNA转录水平.结果 与未转染组相比,转染组K562细胞数量减少,增殖显著受抑(P<0.01);转染48 h后的K562细胞G1期细胞比例显著增多(P<0.01),S期细胞比例显著减少(P<0.01);Notch2基因mRNA及下游靶基因Hes1和Hey1 mRNA转录水平均明显增强(P<0.01),Notch2蛋白表达量增加(P<0.01);numb基因mRNA转录水平无变化;Bcl-2表达下调,NF-κB和TGF-β1表达上调.结论 Notch2胞内段基因过表达可抑制K562细胞增殖,其机制可能是通过上调TGF-β1和NF-κB基因表达及下调Bcl-2基因表达,将细胞阻滞于G1期来实现的.
作者:杨春秀;陈建斌;张树君;李芳菲;杨泽松 刊期: 2011年第11期
目的 研究聚-DL-乳酸-聚乙二醇共聚物(DL-polylactide-co-polyethylene glycol,PELA)包裹哈维弧菌(Vibrio harveyi,Vh)重组外膜蛋白OmpK制备的微球疫苗的部分特性及其对鲫鱼(Carassius auratus gibelio)的口服免疫效果.方法 用可生物降解的合成高分子材料PELA,通过乳化溶剂挥发法包裹OmpK,制备微球疫苗,Bradford法测定蛋白浓度,计算蛋白包裹率;通过扫描电镜观察微球粒径大小及其在4℃保存不同时间的形貌.取鲫鱼随机分为3组:微球疫苗组、OmpK蛋白组和空白对照组,前两组采用疫苗或蛋白拌饲投喂方式口服免疫,投喂3d,间隔7d,再投喂3d加强免疫;对照组投喂不含疫苗的饲料.加强免疫4周和8周后,经腹腔注射20LD50的Vh EcGS020802株攻击,记录各组鱼死亡数,计算相对免疫保护率.结果 制备的PELA-OmpK微球疫苗中OmpK蛋白的包裹率达78%.微球粒径小于12μm,且90%微球的粒径小于5μm.4℃保存10d微球表面光滑、圆整;保存30 d PELA微球降解,粒径较大的微球表面出现空洞;保存60 d可见大量碎片,微球表面毛糙松散,出现多个空洞.微球疫苗加强免疫鲫鱼4周和8周后,对活菌攻击的相对免疫保护率分别为70%和48%,而口服OmpK蛋白组和空白对照组鱼全部死亡.结论 用PELA包裹裸疫苗制备成微球疫苗,对抗原具有一定的保护作用,PELA用作鱼类口服疫苗的投递载体是可行的.
作者:任燕;张小江;常藕琴;陶家发;赖迎迢;石存斌;吴淑勤 刊期: 2011年第11期
目的 克隆并原核表达分枝杆菌噬菌体D29裂解酶gp10基因,观察重组蛋白对脓肿分枝杆菌的抑菌作用.方法 以噬菌体D29基因组DNA为模板,PCR扩增gp10基因片段,克隆至pET-32a(+)载体上,构建重组原核表达质粒pET-32a-gp10,转化E.Coli BL21(DE3),IPTG诱导表达.表达的重组蛋白经SDS-PAGE分析,亲和层析纯化后,采用杯碟法检测其抑菌活性.结果 PCR扩增获得长1 454 bp的gp10基因片段,重组表达质粒pET-32a-gp10经PCR、双酶切及测序证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为54 800,表达量占菌体总蛋白的97.4%,破菌上清及破菌沉淀中均可见目的蛋白的表达,纯化后纯度可达90%,浓度为0.5mg/ml;重组蛋白对脓肿分枝杆菌有抑菌作用.结论 已成功表达重组分枝杆菌噬菌体D29裂解酶gp10,其对脓肿分枝杆菌具有抑菌作用,为抗脓肿分枝杆菌及其他非结核分枝杆菌感染新药物的研制提供了依据.
作者:熊玉霞;杨致邦;于拽拽;戴维;蒋任举;蒋英 刊期: 2011年第11期
目的 提取、纯化牛心肌肌钙蛋白T( Cardiac troponin T,cTnT),并制备其单克隆抗体.方法 采用组织匀浆、蛋白层析技术提取、纯化牛cTnT,紫外分光光度法检测其浓度;SDS-PAGE检测其纯度;间接ELISA法检测其反应特性.将纯化的牛cTnT免疫小鼠,进行细胞融合,间接ELSIA法筛选阳性杂交瘤细胞株,采用小鼠体内法制备腹水.结果 纯化的两批牛cTnT浓度分别为0.246和0.336 mg/ml;相对分子质量约为37 000,纯度分别为86.02%和93.77%;纯化的cTnT蛋白可与鼠抗牛cT-nT单克隆抗体结合.共获得5株分泌抗牛cTnT单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其中,阳性杂交瘤细胞株3B10腹水抗体效价达1∶10240.结论 已成功提取、纯化了牛cTnT,并建立了稳定分泌抗牛cTnT单抗的杂交瘤细胞株,为cTnT检测试剂盒的国产化奠定了基础.
作者:付海英;崔衢;吴静;李勇;施雨露;王艳玲;李一 刊期: 2011年第11期
目的 应用生物信息学方法分析Ⅰ型新德里金属β内酰胺酶(New Delhi metallo-β-1actamase 1,NDM1)的基本性质,并与常见的β内酰胺类抗生素进行分子对接,在理论上研究NDM1对β内酰胺类抗生素和抑制剂的水解活性.方法 应用EMBOSS 6.3.1.1软件包的程序分析NDM1的基本性质,并分别利用SWISS-MODEL同源建模和PHYRE 2.0折叠识别法构建NDM1的空间结构,再运用Arguslab 4.0软件的dock模块进行β内酰胺类抗生素与NDM1分子对接.结果 NDM1共270个氨基酸残基,理论等电点为6.3,包含1个跨膜区,α螺旋占27%,β折叠占34.5%;与抗生素对接能量由低到高依次为氨苄西林、头孢拉啶、阿莫西林、头孢唑林、甲氧西林、美罗培南、亚胺培南、氨曲南、克拉维酸.结论 NDM1对氨苄西林催化效率高,对氨曲南催化效率低,克拉维酸对NDM1无抑制作用.
作者:曾建涛;李泉 刊期: 2011年第11期
目的 观察卡介菌多糖核酸对过敏性鼻炎合并哮喘的临床治疗效果.方法 将98例2001年初~2009年初在吉林市中心医院耳鼻喉科就诊的过敏性鼻炎合并哮喘患者随机分为治疗1组、治疗2组及对照组,3组均给予相同的过敏哮喘基础治疗,治疗1组再经肌肉注射卡介菌多糖核酸(BCG polysaccharide and nucleic acid,BCG-PSN)注射液,疗程3个月;治疗2组再经肌肉注射BCG-PSN,疗程6个月;对照组只进行基础治疗,不给予BCG-PSN.观察疗程结束后1年内3组患者过敏性鼻炎及哮喘的发作情况,根据哮喘的发作次数及程度判断疗效.结果 疗程结束后0~6个月内,治疗1组和治疗2组的过敏性鼻炎及哮喘的临床症状明显好转,显效率和总有效率均明显高于对照组(P<0.05或P< 0.01);疗程结束后7~ 12个月,治疗2组的显效率和总有效率均明显高于对照组(P均<0.05).BCG-PSN治疗中未见明显不良反应.结论 BCG-PSN治疗过敏性鼻炎合并哮喘疗效确切,安全可靠,远期疗效与疗程有关.
作者:王敏;何巍;王伟善;周欣 刊期: 2011年第11期
目的 建立b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)多糖(Polyribosylribitolphosphate,PRP)的ELISA检测方法.方法 用灭活的Hib菌免疫家兔,1周免疫4次,共免疫6周,采血,检测血清抗体滴度.对兔免疫血清进行非特异性抗体免疫吸附,纯化兔抗PRP抗体,用纯化的兔抗PRP抗体包被酶标板,HRP标记的羊抗兔IgG作为二抗,建立双抗体夹心ELISA法检测PRP.确定标准曲线的佳线性范围,并对方法进行特异性、准确性和精密性验证.结果 兔免疫血清的抗体效价可达1∶2 800.该方法的线性检测范围为0.030~0.500 ng/ ml,检测限为0.030 ng/ml.该方法检测大肠杆菌上清蛋白、牛血清白蛋白、LB培养基及破伤风-乙脑结合疫苗均无特异性反应;检测0.500、0.250、0.150 ng/ml的PRP标准品试验内变异系数(CV)在1.16%~2.40%之间,回收率在93.2%~107.2%之间;试验间CV在1.57%~4.11%之间,回收率在101.3%~101.6%之间.结论 该方法特异性、准确性和精密性均较好,可以特异性检测b型流感嗜血杆菌多糖.
作者:祝婧烨;沈坚;秦洁;马相虎;王维;瞿爱东 刊期: 2011年第11期
目的 建立重组戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)抗原双抗体夹心ELISA定量检测方法,用于HE疫苗中HEV抗原含量的检测.方法 以重组HEV病毒样颗粒作为免疫原,免疫母鸡,制备抗HEV-IgY多克隆抗体,纯化后作为包被抗体,HRP标记的抗HEV单克隆抗体作为检测抗体,建立HEV抗原双抗体夹心ELISA定量检测方法,并对其进行验证.用建立的方法检测3批HE疫苗成品的HEV抗原含量,计算HEV抗原对氢氧化铝的吸附率.结果 建立的ELISA方法线性范围为2~128 ng/ml,低定量限为2 ng/ml;该方法检测冻干甲肝减毒活疫苗、重组人白介素-2( IL-2)、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、人血白蛋白、小牛血清及健康人血清均无交叉反应;该方法检测3个浓度的HEV抗原内部参考品的回收率在95. 13%~104.50%之间,试验内及试验间变异系数均<15%;包被抗HEV-IgY的酶标板于37℃放置5d,其检测HEV抗原内部参考品的A 450值及敏感性均未发生显著变化;3批HE疫苗成品中HEV抗原对氢氧化铝的吸附率均大于95%,符合相关质控要求.结论 已成功建立了HEV抗原双抗体夹心ELISA定量检测方法,可用于HEV抗原含量的检测.
作者:陈子杨;吴业红;张健锋;常军亮;时成波;贾媛;郭立君;李春晖 刊期: 2011年第11期
目的 探讨不同培养条件下乳腺癌MCF-7细胞的分裂特点,建立快速、有效的乳腺癌干细胞富集方法.方法 将MCF-7细胞分别采用完全培养基静置培养(A组)、完全培养基摇动培养(B组)、细胞因子静置培养(C组)和细胞因子摇动培养(D组)12、24、36 h,倒置相差显微镜下观察各组细胞分裂情况,计算克隆形成率,采用流式细胞术检测CD44+/CD24-/low细胞亚群的比例变化.结果 B组和C组培养12h,棒状分裂细胞约占30%;24 h后分别约占50%和60%;36 h后形成大的细胞克隆.D组培养12 h,棒状分裂细胞约占50%;24 h后约占80%,可见多个细胞克隆;36 h后克隆细胞数减少.D组培养12 h,CD44+/CD24-/low细胞亚群比例(8.05%)为B组(0.99%)的8倍,C组(3.80%)的2.1倍;培养24 h,D组(15.24%)为B组(4.83%)的3倍,C组(2.30%)的6倍;培养36 h,D组CD44+/CD24-/low细胞亚群比例降至9.68%,约为B组(0.95%)和C组(1.03%)的9倍.结论 在细胞因子摇动培养条件下,MCF-7细胞分裂加快,分裂象增多,细胞系中CD44+/CD24-/low亚群比例增加较快,干细胞池增加明显,表明无血清摇动悬浮培养为富集乳腺癌干细胞的快速、有效的方法.
作者:闫文星;陈玉丙;张红梅;国春龙;王铁君 刊期: 2011年第11期
目的 观察人禽流感裂解疫苗对小鼠的免疫原性.方法 将不同血凝素含量(20、30、45 μ,g/ml)的铝佐剂和无佐剂人禽流感裂解疫苗各3批分别经腹腔注射免疫小鼠,0.5ml/只,每批疫苗又分为1针、2针和3针组,每组10只,每针间隔1周,同时设空白对照组.首针免疫后21 d,分别采血,分离血清,检测血凝抑制抗体效价和中和抗体效价.结果 1针、2针组各3批无佐剂疫苗免疫小鼠的血凝抑制抗体效价和中和抗体效价分别小于1∶40和1∶200;2针、3针组各3批铝佐剂疫苗的血凝抑制抗体效价均大于1∶50,2针组20、30μg/ml血凝素铝佐剂疫苗的中和抗体效价均大于1∶200;2针、3针组20、30与45 μg/ml血凝素铝佐剂疫苗的血凝抑制抗体效价和中和抗体效价差异均无统计学意义(P>0.05);且2针、3针组3批铝佐剂疫苗的血凝抑制抗体效价和中和抗体效价均明显高于相应的3批无佐剂疫苗.结论 铝佐剂疫苗对小鼠的免疫原性明显优于无佐剂疫苗,且20、30 μg/ml血凝素铝佐剂疫苗接种2针可获得理想的免疫效果.
作者:刘书珍;闫昆明;周蕾;王飞宇;傅连弟;高伟星;周长民;聂飞;王敏文 刊期: 2011年第11期
钩端螺旋体病(钩体病)为一种分布广泛的人兽共患病,呈世界范围流行,我国为该病的高发地区之一.接种安全、有效的疫苗是预防钩体病的有效手段.为研究人用钩体疫苗免疫小鼠的佳剂量,为进一步研究疫苗的安全性及有效性提供依据,本文采用上海生物制品研究所生产的三价钩体疫苗(包括黄疸出血型、流感伤寒型、秋季型,每型菌不少于1.5×108条/ml,剂量5ml)免疫小鼠,筛选佳免疫剂量,为下一步多种疫苗联合接种的研究奠定基础.
作者:王亚玉;易彬樘;卢娟;闫永平 刊期: 2011年第11期