学术投稿

HLA-Cw基因测序分型的研究

蓝欲晓;邓志辉

关键词:人类白细胞抗原, HLA-Cw位点, 测序分型, 高分辨水平
摘要:目的 建立HLA-Cw位点测序分型技术,以用于无关供/受者HLA-Cw基因配型等基础应用研究.方法 对HLA-Cw位点的第2和第3外显子,设计、合成一对PCR引物和4条测序引物,探索佳的PCR反应体系和扩增条件,采用PCR引物扩增HLA-Cw基因的第2、第3外显子和第2内含子,扩增产物经纯化后作为测序模板,进行4个测序反应,产物经酒精/EDTA/NaAc法纯化,用ABI PrismTM3100测序仪电泳检测,相关的分析软件分析HLA基因型.检测分型结果的可靠性采用基因型已知的U-CLA国际HLA室间质控的DNA样本进行验证.结果 检测6例UCLA国际HLA室间质控的DNA样本,HLA-Cw等位基因型与UCLA公布的结果完全一致.结论 本文的HLA-Cw基因测序分型方法准确、可靠,具有广泛的应用前景.
实验与检验医学杂志相关文献
  • 2006年CLSI/NCCLS药敏标准的更新(CLSI/NCCLS M100-S16代替M100-S15)

    CLSI/NCCLS于2006年1月发布的M100-S16文件的主要变化如下.1 进一步明确细菌培养的温度和时间培养温度为35℃±2℃,一般培养18~20小时.苯唑青霉素,甲氧西林,Nafcillin和万古霉素的时间必须24小时.培养温度低于35℃可能不能检出MRSA.

    作者:李雅军;张斌;王华 刊期: 2006年第04期

  • 尿妊娠试验结果的质量控制方法

    目的 建立一种尿妊娠试验结果的质量控制方法.方法 制作尿妊娠试验板,审核人员必须再与尿妊娠试验板上对应编号位置的结果核对无误后才能签发报告.结果 检测尿妊娠试验45990例,未出现尿妊娠试验结果错误及其被投诉的记录.结论 该方法简单易行,质控效果良好,值得推广.

    作者:冯春颜;谭辉;席雅娟;凌云;罗国胜;章岚 刊期: 2006年第04期

  • 高产β-内酰胺酶革兰阴性杆菌质粒AmpC的检测

    目的 了解产β-内酰胺酶革兰阴性杆菌中质粒AmpC的分布,建立特异,灵敏的质粒AmpC检测方法.方法 利用头孢西丁敏感试验筛选出临床分离革兰阴性杆菌中的产酶菌,再经三维试验筛选出高产酶菌,对高产酶菌进行PCR检测质粒AmpC.结果 531株革兰阴性杆菌中有89株产酶菌,其中高产酶菌分别有17株大肠埃希菌,其质粒AmpC阳性的有5株,阳性率29.4%;11株肺炎克雷伯菌,其质粒AmpC阳性的有3株,阳性率27.3%;7株铜绿假单胞菌,其质粒AmpC阳性的有2株,阳性率28.6%;5株阴沟肠杆菌,其质粒AmpC阳性的有1株,阳性率20%.结论 本院高产β-内酰胺酶革兰阴性杆菌中质粒AmpC的阳性率比较高,应引起临床的重视,PCR检测方法灵敏,可靠,值得向临床推广使用.

    作者:潘芸;徐瑞龙;单小云;卜黎红 刊期: 2006年第04期

  • β溶血性黏质沙雷氏菌一例报告

    黏质沙雷氏菌已证实为条件致病菌,是医院感染的重要条件致病菌之一,是引起肠道外感染的重要病原菌.2006年2月,我室从一脑梗塞患者的痰中检出β溶血性黏质沙雷氏菌,经对症用药治疗,病人情况好转.笔者查阅了国内所有文献,未发现β溶血黏质沙雷氏菌的报道,特简要报道.

    作者:杨建安;徐友妹;魏娟 刊期: 2006年第04期

  • 脑脊液免疫固定电泳酶标抗体染色及154例结果分析

    目的 评价脑脊液免疫固定电泳结合酶标抗体染色技术的使用和154例检测结果应用价值.方法 对脑脊液和血清标本同时进行琼脂糖凝胶电泳,使用酶标抗人免疫球蛋白IgG,采用免疫固定技术后,用TTF3显色.显色后使脑脊液标本呈现出寡克隆条带.结果 154例脑脊液和血清标本,经电泳免疫固定酶标显色后,出现血脑屏障受损病例8例,寡克隆条带病例9例.其中18例多发性硬化病人中,有7例出现寡克隆条带,2例出现血脑屏障受损.结论 脑脊液免疫固定电泳酶标抗体染色技术,脑脊液无须浓缩,检测灵敏度高,是检测脑脊液中内源性合成免疫球蛋白的直观和可靠的方法.

    作者:桂晓美;邓荣春;曹毅 刊期: 2006年第04期

  • 血清Ⅳ型胶原测定对肝病诊断的意义

    肝脏纤维化是肝硬化的早期表现.其特点为汇管区和肝小叶内有大量纤维组织增生和沉积,但未形成假小叶.尽早对慢性活动性肝炎病人的纤维化进展作出诊断有助于临床治疗.

    作者:谭雅玲 刊期: 2006年第04期

  • 多肿瘤蛋白芯片技术在健康体检人群中的应用评价

    肿瘤蛋白芯片是基于多指标检测的思路,发挥蛋白芯片的优势建立的一种肿瘤实验室检测技术,通过同时定量分析被检者血清中12种肿瘤标志物的含量,对常见的肿瘤进行联合分析[1].该方法具有高灵敏度、高特异性、快速和微量的优点.通过对我院2005年1~10月所测1497名健康体检患者进行多肿瘤蛋白芯片检测,现将检验结果报道如下.

    作者:陈琪;梁军兵;李招云;李素珍 刊期: 2006年第04期

  • 半自动特定蛋白分析仪检测补体C3的临床应用评价

    目的 了解半自动特定蛋白分析仪检测补体C3的临床应用情况.方法 通过用定值质控血清及50份病人新鲜血清,分别对两种检测仪器进行比对试验.结果 仪器检测三种浓度质控血清批内精密度,各CV值不超过4%,具有良好的重复性,线性测试相关系数r在0.9800、污染率测试测定值为1.34%、回收率在97%以上,与Immage比较两者测定结果差异无显著性意义(P>0.05),相关系数r在0.9737以上,显示两者相关性显著.结论 半自动特定蛋白分析仪精密度高,准确性好,技术上能满足临床上的要求.但检测速度较慢,适合中小实验室使用.

    作者:蒋涛;邹伟民;苏峻 刊期: 2006年第04期

  • HC-1020血细胞分析仪稀释液的研制与运用

    HC-1020型血细胞分析仪是美国DANAM(丹能)电子公司研制生产的一种多参数血细胞分析仪.该机自动化程度高、用血量少、测试速度快、有较高的准确性和精密度.但配套原装进口试剂价格昂贵,定货手续繁琐,不能及时供应.为此我们对日常工作下耗量大的稀释液进行了实验研究,设计研制出适用于该机的等渗稀释液(DIFF).经与进口溶血剂对比实验及临床应用,结果满意.现将研究结果报告如下.

    作者:唐宏枝;丁仁军 刊期: 2006年第04期

  • 血清CA125与超声在诊断卵巢恶性肿瘤中的应用

    目的 研究血清CA125和超声及联合应用在检查卵巢恶性肿瘤中的应用价值.方法 取术后病理确诊的卵巢恶性肿瘤58例,并以76例良性肿瘤为对照组.两组病例术前均行超声检查和CA125测定.结果 CA125测定与超声检查及联合检测对术前卵巢恶性肿瘤诊断的敏感度分别为81.0%,89.7%,94.8%;特异度分别为88.2%,88.2%,97.4%;准确度分别为85.1%,88.8%,96.3%;阳性率分别为81.0%,89.7%,94.8%;阳性预测值分别为83.9%,85.2%,96.5%;阴性预测值分别为85.9%,91.8%,96.1%;阳性似然比分别为6.84,7.57,36.0;阴性似然比分别为0.22,0.12,0.05.结论 以65kU/L为血清CA125水平临界值检测卵巢恶性肿瘤可提高其特异性,但对早期患病者可能会发生漏检现象;超声检测的实验评价指标比CA125更为优越,但在肿瘤图象定性诊断上存在着一定局限;CA125联合超声对诊断卵巢恶性肿瘤有重要价值,可提高术前确诊率.

    作者:朱呖呖;陈忠诚;陈文思 刊期: 2006年第04期

  • HLA-Cw基因测序分型的研究

    目的 建立HLA-Cw位点测序分型技术,以用于无关供/受者HLA-Cw基因配型等基础应用研究.方法 对HLA-Cw位点的第2和第3外显子,设计、合成一对PCR引物和4条测序引物,探索佳的PCR反应体系和扩增条件,采用PCR引物扩增HLA-Cw基因的第2、第3外显子和第2内含子,扩增产物经纯化后作为测序模板,进行4个测序反应,产物经酒精/EDTA/NaAc法纯化,用ABI PrismTM3100测序仪电泳检测,相关的分析软件分析HLA基因型.检测分型结果的可靠性采用基因型已知的U-CLA国际HLA室间质控的DNA样本进行验证.结果 检测6例UCLA国际HLA室间质控的DNA样本,HLA-Cw等位基因型与UCLA公布的结果完全一致.结论 本文的HLA-Cw基因测序分型方法准确、可靠,具有广泛的应用前景.

    作者:蓝欲晓;邓志辉 刊期: 2006年第04期

  • 1495例孕产妇传染病标志物检测结果分析

    为了降低传染病的感染率,保护孕产妇、胎儿、新生儿和医护人员的健康,预防院内感染和医疗纠纷的发生,笔者对来院产前体检与生育的孕产妇的乙肝5项、抗-HCV、梅毒血清试验、抗-HIV检测结果进行了临床分析.

    作者:林红;陈林俊 刊期: 2006年第04期

  • 284株凝固酶阴性葡萄球菌替考拉宁药敏试验分析

    目的 监测凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)对替考拉宁(TEC)药物活性的变化,以期引起临床医师的重视.方法 利用K-B纸片扩散法对284株CNS分别做TEC、头孢西丁药敏试验,TEC中介菌株用E-test法进行确证试验.结果 检出282株对TEC敏感,2株中介,未检出耐药株.用头孢西丁筛选出甲氧西林耐药的凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)156株,甲氧西林敏感的凝固酶阴性葡萄球菌(MSCNS)128株.两株纸片法中介菌株经E-test试验确证,MIC值均为16μg/ml,推断为中介菌株,属于MRCNS中的溶血葡萄球菌.结论 TEC对CNS的药物活性在逐年降低,对溶血葡萄球菌的活性弱,对MRCNS的药物活性明显较MSCNS弱.

    作者:万向农;胡建华;毛文义 刊期: 2006年第04期

  • 尿微量蛋白测定在糖尿病肾病早期诊断及病情进展中的应用

    目的 探讨尿微量白蛋白(Micro-Albumin,mALB),转铁蛋白(Transferrin,TRF),免疫球蛋白G(ImmunoglobulinG,IgG),β 2微球蛋白(β2-Microglobulin,β2-MG)的检测在糖尿病肾病早期诊断及病情进展中的应用价值.方法 把91例糖尿病患者分为尿蛋白阴性、尿蛋白+、尿蛋白++、尿蛋白+++、尿蛋白++++共5组,采用免疫散射比浊法测定5组病人尿的mALB,TRF,IgG及β2-MG含量,并与正常对照组比较.结果 糖尿病患者尿蛋白阴性时,尿微量蛋白高于正常对照组,尿蛋白定性阳性时,上述指标随着尿蛋白阳性程度的增加而增高.当尿蛋白定性呈阴性结果时,病人主要呈现中、小分子量的微量蛋白升高;随着病情进展,出现大分子量微量蛋白的病例数也逐渐增多.结论 四项指标联合检测更有助于提高糖尿病肾病的早期检出率以及确切判断其病变的部位和损伤程度,对糖尿病肾病的防治具有重要的临床应用价值.

    作者:陈文思;林美玲;陈忠诚;胡波 刊期: 2006年第04期

  • 胱抑素C对诊断治疗肾脏疾病检测的预试验

    目的 引进新项目乳胶胱抑素C,进行预试验,对肾脏滤过功能及其损害程度进行监测,以应用于肾脏疾病的临床诊断与治疗.方法 使用美国德灵全自动特定蛋白分析仪BN-100、校准和质控与试剂标准系列,采用粒子增强免疫法定量方法测定人体血清和肝素抗凝血浆中胱抑素C.结果 乳胶胱抑素试剂敏感性0.002mg/L.特异性高,试剂没有交叉性特异抗体.重复性实验批内批间差小.方法 学比较相关性r=0.891.结论 乳胶胱抑素C预实验无论是敏感性,特异性,重复性,相关性等均符合医学检验要求,其对肾功能损害程度检测能应用于临床.

    作者:程献;梁林 刊期: 2006年第04期

  • 菌阴肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌rpoB耐药基因突变的检测

    目的 应用套式PCR-DNA测序方法直接检测菌阴肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌相关的rpoB基因突变,以期建立一种判定菌阴肺结核患者是否对利福平有无耐药性的方法.方法 采用套式PCR-DNA测序方法直接检测112例活动性肺结核患者和20例非结核性肺部疾病患者痰标本中结核分枝杆菌rpoB基因突变情况.同份痰标本同时做涂片抗酸染色、罗氏培养.结果 112例活动性肺结核患者痰标本39例为菌阴(涂阴培阴),39例菌阴痰中套式PCR扩增18例呈阳性,产物DNA测序2例有rpoB基因突变,位点为第526发生了CAC→GAC突变和第531发生了TCG→TTG突变.20例非结核性肺部疾病患者标本套式PCR扩增均为阴性,特异性100%.结论 套式PCR-DNA测序可望为直接检测菌阴肺结核患者临床痰标本中结核分枝杆菌耐利福平的准确、特异、快速的方法.

    作者:XIONG Guoliang;熊国亮;张慧慧;刘珍琼;辛茶香;张周云 刊期: 2006年第04期

  • VWF、D二聚体、SFMC水平与Ⅱ型糖尿病并发血管病变的相关性研究

    糖尿病是由多种原因引起的代谢紊乱综合征,Ⅱ型糖尿病患者中合并血管病症较正常人群高3~10倍.本研究对60例Ⅱ型糖尿病患者血浆血管性假血友病因子(VWF)、D二聚体(D-D)、SFMC水平进行检测,探讨血浆VWF、D-D、SFMC与血管病变的关系及临床意义,现报告如下.

    作者:梁劲松;夏贞莲;黎湘娟 刊期: 2006年第04期

  • 缺血修饰白蛋白、肌红蛋白和肌钙蛋白联合检测诊断早期急性心肌梗死

    目的 探讨缺血修饰白蛋白(IMA)、肌红蛋白(Mb)、肌钙蛋白(CTnI)联合检测对急性心肌梗死(AMI)的早期诊断评价.方法 连续监测急性胸痛者225例,入院后分别于即刻、3 h、6 h、9h、24h测定IMA、Mb、CTnI三项指标,观察其变化规律.结果 即刻测定IMA、Mb、CTnI敏感性分别为89.6%、78.0%、55.0%,联合检测敏感性为94.6%.两者比较有显著性差别(P<0.05).在9h内联合检测敏感性均高于单项检测,有显著性差异(P<0.05).结论 IMA、Mb、CTnI联合检测诊断急性心肌梗死,其敏感性明显优于单项检测,具有重要的临床应用价值.

    作者:罗丹;谢曙光 刊期: 2006年第04期

  • BacT/ALERT3D全自动培养仪在分枝杆菌培养中的临床应用

    为了提高酸分枝杆菌的阳性分离率,缩短报告时间.我们利用BacT/ALERT 3D全自动微生物监测系统和传统的改艮罗氏(L-J)培养基对336例临床标本分枝杆菌的监测培养结果的分析探讨.现将结果报告如下.

    作者:肖承康;童桂兰 刊期: 2006年第04期

  • 肌钙蛋白的检测对诊断患者心肌梗死的临床分析

    急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)是心肌缺血性坏死,在冠状动脉病变基础上,发生冠状动脉供血剧烈减少或中断,使相应的心肌严重而持久地急性缺血导致心肌坏死,是目前死亡率较高的疾病之一.

    作者:刘光金;谭立明 刊期: 2006年第04期

实验与检验医学杂志

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主管:江西省卫生厅

主办:江西省医学会