张伟国;曹桂范;杜惠莲;陶凯;杜喆
目的:构建小鼠黑色素瘤抗原A3 (MAGE-A3)基因真核表达载体,观察其对小鼠肝细胞癌的免疫保护作用.方法:化学合成小鼠MAGE-A3全长基因,以pcDNA3.1(+)质粒为载体,构建重组表达载体pcDNA3.1-MAGE-A.将pcDNA3.1(+)-MAGE-A3载体转染293T细胞,免疫印迹鉴定转染细胞MAGE-A3蛋白的表达.将纯化的重组质粒DNA肌肉注射免疫小鼠,5-Aza-Cdr诱导小鼠肝癌细胞H22表达MAGE-A3基因,观察小鼠成瘤情况与瘤体形态学改变.结果:成功构建pcDNA3.1-MAGE-A3真核表达载体,转染293T细胞后能正常高效表达MAGE-A3蛋白;MAGE-A3重组质粒DNA免疫小鼠后,小鼠成瘤的时间推迟,瘤体生长速度明显减慢,瘤体大小和质量与对照组相比,差异有统计学意义;光镜下显示MAGE-A3重组质粒组肿瘤细胞排列较为稀疏,间质炎症细胞浸润和淋巴细胞增殖更为明显.结论:MAGE-A3基因免疫可有效抑制肝细胞癌成瘤,产生对肝癌的免疫保护作用,提示MAGE-A3基因疫苗可作为肝癌防治手段之一.
作者:张永俊;黄爱民;陈裕庆;高美钦;张文敏 刊期: 2014年第02期
目前系统解剖学教学具有学时少、班次多的特点,我校在临床医学专业系统解剖学教学中采用“大班课理论精讲、小班课示教实习”的教学模式.为了更好地巩固大班课讲授的基础理论知识,在小班实习课中我们采用5个环节进行.本室自2008年引入山东易创电子有限公司开发的解剖学数码互动教学系统以来,已逐步将其应用于解剖学的实习课堂教学[1-3].教师在示教过程中,借助于解剖学数码互动系统的高清晰度摄像机,将示教标本的细微结构清晰展示于教师端的电子大屏幕以及教室两侧的电视显示器上,同时借助音响系统,教师的讲解也得以适时地呈现,提高了教学效果[4].
作者:蔺海燕;刘芳;许家军;杨向群;张传森 刊期: 2014年第02期
目的:研究自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3(LC-3)和beclin-1在子宫内膜异位症患者异位内膜组织中的表达情况,探讨其与临床分期的关系.方法:采用免疫组织化学及免疫印迹检测80例子宫内膜异位症患者(研究组)及20例正常子宫内膜(对照组)组织中LC-3和beclin-1蛋白的定位及定量情况.结果:研究组异位内膜组织中LC-3和beclin-1的表达较对照组显著下调,并且随着r-AFS期别程度的增加,LC-3和beclin-1蛋白表达呈逐渐下降趋势.结论:LC-3和beclin-1在子宫内膜异位症中处于低表达状态,且与子宫内膜异位症的发生发展及严重程度呈负相关.
作者:李月红;张春来;李欧;朱玉玲 刊期: 2014年第02期
预习是学生在课前预先独立地或协作地学习课堂及其有关内容,诊断已弄懂或还不懂的知识点,为学生有针对性听课和教师有针对性讲课提供信息[1];它是教学的一个重要环节,大家认同其重要性.多年来,解剖学教师总是不厌其烦地要求学生课前预习,但常常因缺乏组织和指导不力,学生难以坚持,预习没有起到提高效果的作用[2].自2011年初开始,在充分提供解剖学教学资源的同时,我们尝试将小组自主学习与课前预习有机结合起来,即小组式自学提前干预,取得了较好的教学效果.
作者:姚柏春;黄琪;王军;唐杰;李文春;王配军;王汉琴 刊期: 2014年第02期
目的:克隆表达HIV-1反式激活蛋白TAT与白血病抑制因子(LIF)受体α亚基胞内区C末端序列(LIFRα-CT3)的融合蛋白(TAT-CT3),并检测其对HL-60细胞增殖的抑制作用.方法:重组构建TAT-CT3和SUMO融合表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导SUMO-TAT-CT3融合蛋白表达.表达产物经亲和层析柱纯化、去除SUMO蛋白标签后获得TAT-CT3融合蛋白,免疫印迹鉴定.采用CCK-8法检测HL-60细胞的抑制率.结果:构建了高表达重组子pET28a-SUMO-TAT-CT3,获得了相对分子质量约为26 kD的TAT-CT3融合蛋白.经活性检测,TAT-CT3融合蛋白能有效抑制HL-60细胞的生长.结论:成功地克隆、表达、纯化TAT-CT3融合蛋白,该融合蛋白具有生物活性,可抑制HL-60细胞的增殖.
作者:徐莎;王越;孙擎;刘厚奇 刊期: 2014年第02期
目的:研究丹参酮ⅡA对斑马鱼血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(VEGFR2)和血管发育的影响.方法:将丹参酮ⅡA处理的胚胎作为实验组,以0.5%二甲基亚砜(DMSO)作为对照组.受精后24 h(24 hpf)观察药物对转基因斑马鱼血管发育的影响,荧光显微镜观察新生血管状态,记录血管长度.分别从0、6、12和24 hpf时相的药物处理后的斑马鱼胚胎中提取总的RNA,采用实时定量RT-PCR方法检测VEGF及VEGFR2的表达变化.结果:丹参酮ⅡA可明显抑制斑马鱼血管发育,且在100 μg/ml和200 μg/ml浓度下可发挥抑制作用,无浓度递增关系.实验组较对照组VEGF及VEGFR2表达量降低,在药物作用的12 hpf和24 hpf具有显著性差异.结论:丹参酮ⅡA可下调VEGF及VEGFR2的表达,抑制斑马鱼血管发育.
作者:刘博;吕慧;王国坤;吴峰;李松华;秦永文 刊期: 2014年第02期
小胶质细胞是中枢神经系统(central nervous system,CNS)中主要的免疫防线.神经退行性疾病如阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD),帕金森病,舞蹈病等都会发生小胶质细胞形态和数量的变化,细胞因子水平增高,发生氧化应激,神经元进行性丢失等.许多证据表明,因为长期的多重神经毒性因素的影响使小胶质细胞激活,包括肿瘤坏死因子α(tumornecrosis factor,TNF-α),一氧化氮(NO),白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)[1],小胶质细胞可以成为细胞因子和ROS的长期来源,这些可以导致神经元进行性损伤[2].小胶质细胞与AD的关系引起了广泛的关注.本综述将探讨小胶质细胞的起源与功能,其在CNS的静息与活化,通过何种机制变得具有神经毒性,并着重探讨小胶质细胞与AD及β-淀粉样蛋白(amyloid β-protein,Aβ)的关系.
作者:刘恺;牛艳丽;邓锦波 刊期: 2014年第02期
目的:研究Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白致敏的骨髓来源树突状细胞(BMDCs)的抗肿瘤免疫生物学效应.方法:用Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白致敏BMDCs制成瘤苗,瘤苗的效应通过C57BL/6J小鼠肝细胞癌模型验证.皮下接种Hepal-6细胞8d后,成瘤小鼠随机分实验组,足垫部皮下注射Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白致敏BMDCs;无血清RPMI-1640注射组、BMDCs注射组和单纯Hepal-6细胞裂解蛋白致敏BMDCs注射组.取肿瘤组织分离成细胞悬液,FACS检测CD11c+细胞、CCR7+细胞、CD80+细胞和CD86+细胞;取淋巴结、脾、肿瘤冷冻切片并采用免疫组织化学检测淋巴结、脾、肿瘤内Foxp3+细胞浸润的改变;ELISA检测瘤内转化生长因子-p1(TGF-β1)、白细胞介素-10(IL-10)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)的表达.结果:实验组肿瘤组织比各对照组有更多的CD11c+细胞、CCR7+细胞、CD80+细胞和CD86+细胞浸润;与各组对照相比较,实验组Foxp3+细胞在淋巴结、脾、肿瘤内浸润明显减少;实验组细胞因子TGF-β1、IL-10低于各对照组,IFN-γ、IL-2则高于各对照组.结论:Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白致敏的BMDCs瘤苗能促进DCs在瘤内浸润和成熟,减少Foxp3+细胞在肿瘤内的浸润,下调免疫抑制细胞因子TGF-β1、IL-10和上调免疫促进因子IFN-γ、IL-2分泌,有较强的抗肿瘤免疫生物学效应.
作者:李日伦;周爽;秦杰;张浩如;梁春敏;罗国容 刊期: 2014年第02期
在目前的教育形势下,越来越多的教学活动更注重对学生动手能力和综合能力的提高[1].科技创新是培养创新型人才的有效途径,开展大学生科技创新活动已成为高校人才培养的一项重要内容[2].大学生科技创新是指为了培养大学生的科技意识、科研精神,加强大学生创新能力与实践能力,以学生为主体,在国家和学校有关部门组织引导下,依靠教师的指导帮助,自主开展的各种科技学术活动[3].我校作为医学院校,近几年也开展了丰富多彩的大学生科技创新活动,其主要形式为3~5个学生为1个小组,推选1个学生为负责人,学生在课余时间自己主动联系有课题的教师,教师根据自己的研究方向给学生布置相关文献,学生在课余时间查阅文献,撰写标书,上报学校科研部门,专家评议,择优立项资助,学生在教师指导下,进行相关的科研实验,实验完毕后,上交实验实物或撰写一定的科研论文.通过近几年大学生科技创新活动的实施,总结了一些经验和不足,现归纳如下.
作者:张连双;赵伟;王东;李红星 刊期: 2014年第02期
目的:研究β-淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)寡聚体诱导痴呆大鼠脑海马区的Bcl-2表达和caspase-3活性变化及其意义.方法:采用Morris水迷宫法筛选出逃避潜伏期少于60 s的60只SD雄性大鼠随机分为4组,即正常对照组、PBS对照组、Aβ1-42纤维组、Aβ1-42寡聚体组.通过脑立体定位仪将Aβ1-42纤维体、Aβ1-42寡聚体注入大鼠右侧脑室,制备AD大鼠模型.RT-PCR法检测大鼠海马Bcl-2 mRNA、caspase-3 mRNA的表达,用免疫印迹测定大鼠海马区Bcl-2蛋白表达和caspase-3活性.结果:与正常对照组及PBS对照组比较,模型组大鼠海马区Bcl-2 mRNA和Bcl-2蛋白表达较低,Aβ1-42纤维组Bcl-2的蛋白表达高于Aβ1-42寡聚体组;Aβ1-42寡聚体组的caspase-3 mRNA表达以及caspase-3蛋白活性高于Aβ1-42纤维组.结论:Aβ1-42寡聚体可下调Bcl-2表达,活化caspase-3.
作者:陈雪;孙婧霞;刘源劼;曹翠丽;蒋常文 刊期: 2014年第02期
人体断层影像解剖学包括断层解剖学和影像解剖学,前者是后者的基础[1-3],断层解剖学已成为医学院校的一门必修课程,而观察断层标本是有效的学习途径之一,因此,制作出具有代表性、连续、薄层的人体断层标本是为满足人体断层解剖学教学的需要[4-6].而传统制作方法采用木工带锯机冰冻切割,薄度难以达到理想的效果,我们通过摸索将普通的木工带锯机进行了改造,制作数十套不同断面的断层标本,现将经验与体会报告如下.
作者:向长和;谢正兰;张雪梅;杨懿农;梁山;饶利兵 刊期: 2014年第02期
笔者在解剖1具成年男性示教标本时,观测到心左、右肺静脉各有1条,经查询医学文献,尚未见报道.此类变异极为罕见,为国人统计心肺静脉变异类型积累资料,为临床房颤的患者进行射频消融术和其他相关手术提供解剖学依据,现报道如下.该男性心左肺静脉仅有1条,位于左心房左后外侧壁,相当于正常左肺上静脉的位置,直径10.0 mm;右肺静脉也仅有1条,位于左心房右后外侧壁,相当于正常右肺上静脉的位置,直径20.0 mm;左、右肺静脉之间的距离为32.0 mm.在左肺门处肺动脉、主支气管和肺静脉由上向下排列肺动脉、主支气管和肺静脉;由前向后排列肺静脉、主支气管和肺动脉.右肺门处肺动脉、主支气管和肺静脉由上向下排列主支气管、肺动脉和肺静脉;由前向后排列肺静脉、肺动脉和主支气管.经解剖观察心的其他结构无异常改变.
作者:张宏;边江 刊期: 2014年第02期
目的:了解湖南宁乡城市汉族体型特征.方法:采用随机抽样方法,测量湖南宁乡地区319名(男149,女170)城市汉族的身高、体质量、上臂紧张围、小腿围等10项指标,按照Heath-Carter体型法进行统计分析.结果:湖南宁乡城市汉族男性平均体型值为4.2-5.5-1.6,属偏内胚层的中胚层体型;女性平均体型值为4.9-4.8-1.6,属偏中胚层的内胚层体型.男性以30岁为体型分界点、女性以40岁为体型分界点,随着年龄的增长,中因子值明显增加、外因子值则明显减少,肌肉和骨骼也逐渐趋向于发达,身体线性度下降,体型有明显的性别差异.结论:湖南宁乡城市汉族男性体格魁梧,女性体态丰满圆润;与其他群体相比,湖南宁乡城市汉族男性平均体型与山东乡村汉族为接近;湖南宁乡城市汉族女性平均体型与鄂温克族为接近.
作者:刘燕;陆舜华;李玉玲;李咏兰;傅媛;郑连斌 刊期: 2014年第02期
局部解剖学是介于基础医学与临床医学之间的一门桥梁课程,具有很强的实践性和应用性[1-2],通过实验教学模式和教学方法的改革,将局部解剖学内容与相关学科知识和临床实际相结合,培养学生的实际操作能力和运用解剖学知识解决实际临床问题的能力,成为我们目前的主要任务.国内各医学院校[3-5]都在进行积极探索,开展课程体系、教学内容、教学方法等方面的改革,达成了两点共识:即教会学生如何理解、掌握和运用知识比单位时间内定向传授书本知识重要;设计优化学生的知识结构比单纯的增加知识量重要.因此提出新课改模式,即精简第一课堂,拓展第二课堂.构建多元化局部解剖学实践教学体系.通过第二课堂的实践,增强学生的创新意识,增进团队协作精神,有利于学生综合素质的提高.
作者:汪坤菊;陈敏;林威威;易西南;赵久荭;张显芳;石小田 刊期: 2014年第02期
目的:通过磁共振成像测量技术,探讨水平位、冠状位、矢状位和斜冠状位上海马结构的形态特点,了解健康成人海马结构体积正常值,为临床相关疾病的预防和影像学诊断提供参考数据.方法;对50例健康成人颅脑进行3D-fSPGR序列扫描,对目标区域进行10等分,在等分后的图像上逐层勾画海马结构面积,然后计算体积,用协方差法对体积进行相对处理,数据通过SPSS 17.0软件分析.结果:海马结构体积与年龄无相关性,斜冠状位成像的海马结构体积有性别差异.水平位、冠状位和斜冠状位成像的海马结构体积左右两侧差异均有统计学意义.结论:健康成年人海马结构体积的大小与年龄无关,海马结构体积右侧大于左侧,斜冠状位成像的海马结构体积存在性别差异,通过冠状位成像对海马结构的形态进行测量研究其结果更具统一性和可比性.
作者:钟铧;李幼琼;程凯亮;毛新雨;付强;田勇;白玛多吉;达平 刊期: 2014年第02期
目的:探讨氢水治疗对急性脑缺血/再灌注损伤引起的脑组织一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶活力改变的影响.方法:成年SD大鼠随机分为假手术组、模型组、氢水治疗组.采用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注(MCAO)模型,免疫组织化学测定大脑皮层一氧化氮合酶的表达,硝酸还原酶法测定缺血侧脑组织匀浆中NO含量,分光光度计法测定脑组织提取液中一氧化氮合酶的活性.结果:术后6h时,模型组脑组织一氧化氮合酶阳性细胞灰度值、NO浓度及一氧化氮合酶活性均较假手术组显著升高,而氢水治疗后其水平较模型组显著下降,但仍高于假手术组.治疗24 h时,模型组一氧化氮合酶阳性细胞灰度值、NO浓度及一氧化氮合酶活性仍显著高于假手术组,但治疗组与模型组相比差异无统计学意义.结论:氢水治疗可通过早期减少缺血后脑组织中NO含量及降低一氧化氮合酶的活性来减轻脑缺血/再灌注损伤.
作者:张连双;路青忠;王秀秀;撒焕兰;刘同慎;冯国营;赵伟;王希锋 刊期: 2014年第02期
目的:研究创伤后应激障碍(PTSD)样大鼠伏隔核神经元内多巴胺D2受体表达变化.方法:用连续单一刺激(SPS)方法刺激大鼠制作PTSD模型,取SPS后12h、1d、7d大鼠脑组织;非刺激的脑组织为对照组,分别用免疫组织化学和免疫印迹进行各组伏隔核中神经元多巴胺D2受体表达的观察.结果:免疫组织化学和免疫印迹结果显示,经SPS处理后,伏隔核神经元多巴胺D2受体表达于刺激后12h低于正常组,1d时可见高于正常,7d时仍处于较高水平.结论:大鼠经SPS处理后,伏隔核内多巴胺D2受体表达先降低后升高,提示该受体表达与PTSD血浆糖皮质激素变化有关,进而促进PTSD的精神症状的产生.
作者:张伟国;曹桂范;杜惠莲;陶凯;杜喆 刊期: 2014年第02期
视频公开课是中国高等教育为适应世界高等教育发展的新趋势,通过现代信息技术手段,面向社会公众免费开放的优质视频课程.首批20门由国内知名高校共同打造的“中国大学视频公开课”2011年11月已成功通过“爱课程”网及其他网络平台对外免费公开,反响良好[1].根据2011年6月教育部《关于启动2011年精品视频公开课建设工作的通知》[2],中南大学人体解剖学与神经生物学系推出的人体解剖学课程经申请审批成为第二批中国大学优质视频公开课.
作者:蔡艳;王慧;吴晓英;熊鲲 刊期: 2014年第02期
解剖学标本透明技术常用于胚胎骨骼、内脏器官和血管透明标本的制作[1-8],在比较难透明的成人骨血管方面也有比较成功的案例[9-10];闫广照等[11]在剥离皮肤等结缔组织的手上,对手动脉及腱鞘的透明进行了探索.由于手掌皮肤角质层较厚,带有皮肤和皮下组织的完整手动脉透明标本的制作难度相对较大,尤其是标本的脱水和透明.为了教学和科研的需要,笔者对完整手及动脉透明标本的制作方法进行了研究,取得了较好的效果,现报道如下.
作者:黄会龙;刘镇;姬瑞娟;党瑞山 刊期: 2014年第02期
目的:探讨山楂叶总黄酮(TFHL)对血管性痴呆大鼠空间学习记忆障碍的改善作用及对脑内胆碱能系统功能活性的影响.方法:健康雄性SD大鼠80只,随机分为Sham、模型组、TFHL 70 mg/kg组、TFHL 140 mg/kg组和盐酸多奈哌齐0.52mg/kg组,每组16只.采用永久性双侧颈总动脉结扎法制备血管性痴呆大鼠模型,TFHL 70、140mg/kg及盐酸多奈哌齐0.52mg/kg组连续给药36 d.采用Morris水迷宫评价大鼠的空间学习记忆能力,H-E染色观察大鼠海马CA1区神经元形态及密度,酶联免疫法检测大鼠皮质、基底节、海马乙酰胆碱酯酶(AchE)和胆碱乙酰基转移酶(ChAT)活性变化.结果:与Sham比较,血管性痴呆模型组大鼠学习记忆能力显著降低,大鼠逃避潜伏期明显延长,穿越平台区次数显著减少,平台象限游泳距离百分比显著降低;ChAT活性明显降低,AChE活性显著增强.TFHL组缩短大鼠逃避潜伏期,增加大鼠穿越平台次数及平台象限游泳距离百分比,增强ChAT活性,降低AChE活性.结论:TFHL可改善血管性痴呆大鼠胆碱能神经系统的功能,从丽提高血管性痴呆大鼠的学习记忆功能.
作者:苗光新;毛晓霞;吴晓光;陈志宏;曹慧;王娇;檀荣方;王妍 刊期: 2014年第02期