学术投稿

双荧光逆向追踪法研究大鼠视网膜节细胞的中枢投射

郑华;万瑾;郑瑾;韩晓洁;俞亦龄;肖虹蕾;佘振珏;周国民

关键词:视网膜神经节细胞, 荧光金, DiI, 逆行追踪, 投射方式
摘要:目的:观察向上丘投射的大鼠视网膜神经节细胞(RGCs)在视网膜内的分布、密度及细胞类型上的差异.方法:将DiI与荧光金(FG)注射入SD大鼠的同侧和(或)对侧上丘,不同时相荧光显微镜下观察两种荧光标记RGCs的分布情况.结果:视网膜与视神经内均可见荧光标记;视网膜内标记RGCs的数目随时间延长略有增加,DiI与FG的标记效率无明显差异;RGCs大多数为对侧投射;视网膜颞背侧区域可见双侧投射细胞;视网膜颞腹侧周边区集中存在同侧投射细胞,多数胞体较大;视网膜其它区域可见零星同侧投射细胞.结论:DiI与FG可高效率逆行标记RGCs及部分突起;SD大鼠视网膜内并存着向对侧、双侧及同侧脑区投射的RGCs,后二者数量较少,分布局限;同侧投射以大胞体细胞为多.
解剖学杂志相关文献
  • 指端纹型与智力低下的相关关系

    目的:探讨指端纹型与智商的相关性.方法:以不同程度智力低下的83人(生理智商在25~83之间)作为研究对象,取指端纹型的14项指标结合生理智商进行相关性的多因素分析.采用逐步回归的方法,建立多元线性回归方程.结果:通过该方程所测得的智商(简称皮纹智商)与生理智商基本一致,二者相比无显著差异.该方程的回代符合率高于理论值达81.26%,尤其是对智商在70~89之间的弱智部分,回代符合率达96.92%,有较高的使用价值.结论:皮纹测试简单易行、易掌握,不受时空限制,测试结果稳定,是便于在广大基层推广的一种智力测试方法,对提高人口素质具有积极意义.

    作者:张丽敏;杨战军;陈海辉;朱丽华 刊期: 2006年第01期

  • 氧化应激与糖尿病血管并发症

    长期以来,糖尿病血管并发症一直是导致糖尿病致死致残的主要原因.导致糖尿病血管病变的确切机制尚不十分明确.研究表明,与高糖有关的许多生物途径均能增加机体氧化应激发生,在动物模型和临床研究中,抗氧化治疗能有效改善和逆转高糖对管壁细胞的损害,恢复血管功能、控制或延缓动脉硬化的进程,提示氧化应激(oxidative stress,OST)在糖尿病血管并发症的形成发展中发挥重要作用,抗氧化剂的开发应用及临床评估将成为今后研究的重要方向之一.本文就氧化应激与糖尿病血管并发症方面的研究进展作一综述.

    作者:叶勇;张传森 刊期: 2006年第01期

  • 大鼠卵泡颗粒细胞透射电镜制样的简便取材方法

    近年来,在很多妇科或更年期疾病的实验研究中,实验动物大鼠卵泡中颗粒细胞的超微结构观察是一个重要指标[1~4].由于大鼠卵巢卵泡都很小,而颗粒细胞又是半游离在卵泡液中,数量更少,因此,要得到足量的颗粒细胞进行电镜制样,并及时固定,显然取材比较困难.本实验中,我们在取材方面进行了一些技术上的处理,防止了目标细胞的流失与混淆,可以获得足量的颗粒细胞,方便制样,提高固定效果,方法简便易行,现介绍如下.

    作者:项晓人;马红;陈义芳 刊期: 2006年第01期

  • 大鼠坐骨神经横断后脊髓、背根神经节及坐骨神经Slit 2表达的变化

    目的:观察Slit 2在大鼠坐骨神经横断模型中的表达变化,为进一步研究Slit/Robo在周围神经再生中的作用提供实验依据.方法:SD大鼠坐骨神经横断后用原位杂交及免疫组织化学方法检测Slit 2在脊髓、背根神经节(DRG)和横断神经近、远端内的表达变化,图像分析方法测定阳性细胞数及平均积分光密度值.结果:正常脊髓前角运动神经元、DRG和神经干内Slit 2有一定的基础表达.损伤后近端神经胶质瘤、神经远端Slit 2表达增高;DRG内的Slit 2表达呈现一定的时间变化,7 d为表达高峰,14 d下降.结论:Slit 2存在于正常成年大鼠周围神经系统,损伤可致其表达改变,Slit 2可能在周围神经再生中发挥重要作用.

    作者:易西南;郑林丰;许愿忠;张建伟;罗学港 刊期: 2006年第01期

  • 视网膜祖细胞干细胞特性及移植入视网膜后的研究

    目的:研究视网膜祖细胞的干细胞特性及移植入视网膜后的存活和迁移.方法:体外培养胎龄18 d大鼠的视网膜细胞,用RT-PCR、细胞免疫荧光方法鉴定其增殖分化;成年SD大鼠腹腔注射N-甲基-N-亚硝基脲形成视网膜感光细胞退化的动物模型,培养的视网膜祖细胞用CM-DiI标记后,移植入模型鼠的玻璃体腔.结果:视网膜祖细胞体外表达中间神经丝蛋白nestin;表达Flk-1、Pax6及Notch1的mRNA;能掺入BrdU;分化后表达视网膜各类细胞特异性蛋白;移植后在实验组大鼠视网膜能存活及迁移,而在对照组中仅聚集在玻璃体腔.结论:视网膜祖细胞具有干细胞特性,移植入受损伤视网膜后,能存活、整合及迁移.

    作者:万瑾;郑华;俞亦龄;佘振珏;肖虹蕾;周国民 刊期: 2006年第01期

  • RNA干扰抑制BUB1基因表达对染色体分离的影响

    目的:研究BUB1基因表达调控对染色体分离的影响.方法:用定量RT-PCR比较RNA干扰前后的胚胎细胞内源性基因BUB1的mRNA水平,同时对染色体数目异常率进行比较分析.结果:干扰后BUB1基因mRNA拷贝数/GAPDH基因mRNA拷贝数的均值为干扰前的21.80%,染色体数目异常率均值由干扰前5.02%上升到29.61%.经统计分析,RNA干扰前后BUB1基因mRNA水平和染色体数目异常率有显著差异.结论:BUB1基因表达的降低会导致染色体分离的异常,本研究为染色体分离相关蛋白功能研究建立了新的研究手段和实验评价体系.

    作者:施琼;王箭;朱旦;翁亚光;王应雄;蔡燕;刘青松;刘子杰 刊期: 2006年第01期

  • 脂质体介导胶质细胞源性神经营养因子基因在体骨骼肌的转移和表达

    目的:研究脂质体介导胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因在大鼠骨骼肌内的表达.方法:将鼠GDNF cDNA克隆到真核表达载体pEGFP中,构建重组载体pEGFP-GDNF;将脂质体和重组质粒pEGFP-GD-NF cDNA混合后直接注入大鼠面神经支配的骨骼肌内.采用免疫组化技术和荧光显微镜检测GDNF基因转染后的体内表达.结果:转染2 d后,转染侧面肌细胞内有散在的绿色荧光,且有部分细胞呈GDNF免疫反应阳性,对照侧为阴性.结论:GDNF基因能通过脂质体介导转入骨骼肌内并表达GDNF蛋白,为神经营养因子基因肌内转染治疗周围神经损伤提供了初步的理论和实验依据.

    作者:陈传好;赵莉;王小标;单增强 刊期: 2006年第01期

  • 感光细胞缺失对视网膜节细胞melanopsin表达的影响

    目的:研究感光细胞缺失对视网膜节细胞melanopsin表达的影响.方法:SD大鼠腹腔注射60 mg/kg N-甲基-N-亚硝基脲建立感光细胞变性缺失的动物模型,用免疫荧光方法观察视网膜铺片及切片中melanopsin阳性细胞的分布及特征.结果:在药物注射12 h后动物视网膜感光细胞层开始凋亡,细胞数目随时相减少,13 d后完全消失.在正视网膜节细胞表达melanopsin,呈串珠样分布在胞体及突起的胞膜上,其树突穿过节细胞层,在内网层的两侧分叉形成网状结构.在感光细胞缺失动物模型组,12 h时,节细胞表达melanopsin更广泛;而后突起上的melanopsin表达随时减少.28 d时,melanopsin的表达主要局限于节细胞的胞体.结论:感光细胞缺失影响节细胞突起melanopsin的表达.

    作者:万瑾;郑华;韩秀引;肖虹蕾;佘振珏;周国民 刊期: 2006年第01期

  • P-BG显示神经髓鞘和结缔组织纤维组合染色法

    在神经组织染色中,为了更好的区别神经纤维髓鞘和结缔组织纤维成分,我们进行了实验方法学研究,选用Phloxine(萤光桃红)和Brillant green(亮绿)染色试剂,反复染色对照,结果发现能够较好地显示脊髓组织中的神经纤维髓鞘(呈红色)、结缔组织纤维(呈绿色).本文所建立的组合染色法,使组织形态结构,对比清晰、色彩鲜艳,同时方法简便,是一种较理想的组合染色法.

    作者:龚志锦;朱明华;郑建明;王建军;陶文照 刊期: 2006年第01期

  • 关于石蜡切片在染色中脱蜡的探讨

    石蜡切片无论是在进行常规染色或是免疫组化染色时,首先都要进行脱蜡,特别是在免疫组化的染色过程中,人们常把脱蜡不干净作为免疫组化染色失败的原因之一.因此人们为避免脱蜡不彻底,在脱蜡这一步骤使用各种办法保证这一过程的质量.常用方法有:(1)增加二甲苯的缸数.(2)延长二甲苯脱蜡时间,每缸达30~60 min.(3)将二甲苯放入温箱内加温至37℃,甚至在加温的情况下还要每二甲苯缸内放置60 min左右.而这样的操作往往导致切片脱片.本文仅就二甲苯脱蜡进行分析.

    作者:荣玮;刘海燕 刊期: 2006年第01期

  • 脑震荡对大鼠多巴胺能神经元及神经纤维的影响

    目的:探讨脑震荡(BC)鼠多巴胺能神经元和神经纤维内酪氨酸羟化酶(TH)含量的变化.方法:用金属单摆打击装置复制BC模型.动物随机分为对照组和伤后1~24 d损伤组;用免疫组织化学结合图像分析方法研究BC后中脑黑质致密区(SNC)和腹侧被盖区(VTA)多巴胺能神经元及基底节尾壳核多巴胺能神经纤维TH含量的变化.结果:在SNC和VTA及基底节,BC后1、4、8及16 d组的TH免疫反应阳性明显高于对照组,其中以4 d组反应强,24 d组在SNC和基底节与对照组比较无显著性差异,但在VTA,TH免疫反应阳性仍高于对照组.结论:BC后TH早期增高可能是脑损伤神经元过度兴奋的反应,随后持续增高一段时间可能是多巴胺能神经元上调其合成能力的一种代偿反应.

    作者:吴春云;于建云;林海英;郭泽云;许冰莹;李坪;赵旭东 刊期: 2006年第01期

  • 胰岛素对糖尿病大鼠海马内神经营养因子-3阳性神经元表达的影响

    目的:观察糖尿病大鼠海马中神经营养因子-3(NT-3)的表达变化及胰岛素治疗对其表达的影响.方法:将雄性大鼠随机分为对照组,糖尿病1,3月组,胰岛素治疗1,3月组,STZ腹腔注射制模,测体重与血糖值并取海马行HE和免疫组化SABC法染色,计算机图像分析系统测平均光密度值.结果:血糖在糖尿病组比对照组显著升高;胰岛素组与对照组无显著性差异.海马各区NT-3免疫阳性神经元的数量及阳性强度在糖尿病组有不同程度降低,以CA1区明显.胰岛素组则不降低.结论:糖尿病大鼠海马神经元NT-3表达减弱,胰岛素治疗可使海马神经元NT-3表达恢复正常.

    作者:侯立胜;韩卉;贾雪梅;王盛花;吴学平;张孝林;汪渊 刊期: 2006年第01期

  • 肌内神经走行和分布的研究进展

    支配人体骨骼肌的神经,多数形成神经血管束,通过肌门入肌.临床上常用带血管神经的肌瓣经游离移植进行功能的修复重建.Taylor等[1]已经对肌内血管的分支走行作了较为详尽的研究.迄今,对骨骼肌内神经走行和分布尚缺乏详尽的描述.揭示神经在肌内的分布规律可指导临床进行肌移植,指导手术入路,避免神经损伤.目前研究肌内神经走行分布的方法有3种:大体和显微外科解剖、组织切片加计算机三维重建、Sihler's神经染色.本文对肌内神经走行分布研究进展、研究方法和存在问题作一综述.

    作者:陈刚;江华;林子豪;党瑞山 刊期: 2006年第01期

  • 糖尿病大鼠神经生长因子的表达与阴茎勃起功能障碍的关系

    目的:探讨糖尿病(DM)大鼠神经系统中NGF的表达与阴茎勃起功能障碍(ED)的相关性.方法:建立糖尿病大鼠模型,分别于造模1~4月注射阿扑吗啡(APO)作阴茎勃起功能试验,然后取大鼠的大脑、胸腰段交感干、阴茎和前列腺,用免疫组织化学法和荧光免疫组化法显示NGF阳性神经元或神经纤维,并作图像分析.结果:糖尿病1个月时尚无ED出现,但各处的NGF阳性神经元及纤维开始下降,与对照组相比有显著性差异,随着病程延长差异更明显;2个月时DM大鼠阴茎勃起次数与对照组已有显著差异3个月和4个月时差异非常显著.结论:糖尿病性早期中枢和周围神经系统内NGF减少,NGF的减少与糖尿病性ED的发生发展密切相关.

    作者:顾红玉;胡金家;丁文龙;原淑娟;钟梅芳 刊期: 2006年第01期

  • 大鼠肾小体发育的生长曲线

    目的:探讨大鼠肾小体发育中体积生长曲线的变化规律.方法:采用连续切片技术,光镜观察并结合体视学分析方法,对不同发育阶段大鼠肾小体的体积进行测量,定量研究肾小体体积的变化规律.结果:胚龄16 d时逗号小体及S小体出现,胚龄18 d,出现了Ⅲ期和Ⅳ期肾小体,生后7 d,逗号小体及S小体消失,肾小体的体积从胚龄18 d到生后40 d大约增大86倍.结论:大鼠肾小体于胚龄16 d发生,生后40 d达到成年水平.

    作者:宋小峰;郭敏 刊期: 2006年第01期

  • 前臂桡侧头静脉-皮神经的营养血管的解剖学

    目的:为前臂桡侧头静脉-皮神经营养血管远端蒂复合瓣设计提供解剖学基础.方法:动脉灌注红色乳胶成人上肢标本,解剖观测头静脉-前臂外侧皮神经下1/3段营养血管的来源、分支及其与桡骨膜血管的关系.结果:头静脉-前臂外侧皮神经下1/3段的营养血管来自:桡动脉皮支,掌浅支皮支,桡骨茎突返支皮支和桡动脉肌间隙骨皮支.上述诸支血管发皮支、筋膜支、骨膜支、神经-浅静脉营养血管,形成皮神经-头静脉血管链以及深、浅筋膜和骨膜血管网.结论:前臂桡侧缘头静脉-皮神经营养血管与肌、骨、皮营养血管同源,以桡骨茎突返支为蒂的远端蒂复合瓣,旋转轴点在腕关节平面,可用于手部远处组织缺损修复.

    作者:张发惠;郑和平;张国栋;林永绥 刊期: 2006年第01期

  • 脑源性神经营养因子对急性高眼压后大鼠视网膜Müller细胞的影响

    目的:检测脑源性神经营养因子(BDNF)干预急性高眼压后大鼠视网膜Müller细胞谷氨酰胺合成酶(GS)和谷氨酸/天冬氨酸转运体(GLAST)表达的变化,探讨BDNF保护节细胞(RGCs)的可能机制.方法:成年大鼠分为3个BDNF干预组和3个溶媒对照组并进行玻璃体内注射.2d后将预处理动物左眼眼压升高至闪光视网膜电图b波消失的临界眼压且维持缺血60 min.实验动物分别存活1、3或7 d后通过免疫组织化学检测大鼠视网膜GS和GLAST的表达变化.结果:与正常对照组比较,溶媒对照组GS和GLAST在存活1 d和3 d时表达上调,7d时下降;BDNF干预组未出现表达明显变化.结论:BDNF可能不是通过Müller细胞上调GS和GLAST,降低胞外Glu来保护RGCs.

    作者:熊鲲;黄菊芳;蒋丽珠;陈旦;王慧;童建斌;罗学港 刊期: 2006年第01期

  • 小鼠noggin基因的重组腺病毒构建与鉴定

    目的:构建小鼠noggin基因的重组腺病毒载体并鉴定.方法:采用基因工程技术,经过2次亚克隆将noggin基因片段克隆至穿梭质粒AdTrack-CMV上,利用pAdEasy-1系统进行细菌内同源重组后,脂质体转染293T细胞包装、扩增.采用PCR方法对重组体腺病毒进行鉴定,利用穿梭质粒中带有绿色荧光蛋白GFP报告基因,对病毒滴度和感染效率进行监测.结果:酶切鉴定及PCR结果证明noggin基因重组腺病毒载体构建成功,病毒滴度达6.3×1010pfu/ml.结论:应用细菌内同源重组法成功构建了含小鼠noggin基因的重组腺病毒载体.

    作者:余资江;应大君;董世武;张伟;崔晓萍;糜建红 刊期: 2006年第01期

  • 浅论硕士研究生细胞培养实验的教学

    细胞培养技术现已广泛应用于生物医学各领域.1996年始我室向硕士研究生开设细胞实验课程,32学时,8个实验,2个学分.目前已建立一套适合培养硕士生学习的实验教材、教学资料和能让270位学生在14 d内完成的一个系列实验,获得了较好的教学效果并受到学生的广泛欢迎.在有限的条件(包括时间和经费)下学习实验技术,这要求教师尽可能多地增加细胞培养知识信息量和尽可能地提高授课质量.在实践中我们发现以我要开展细胞培养课题研究--问题式为中心授课方式,有助于调动学生的学习兴趣和提高学生综合运用知识解决问题的能力.

    作者:李京培;方海红;余莉;姚娟;吕树娟;王明丽 刊期: 2006年第01期

  • 晶状体损伤促进视神经再生的作用及机制

    目的:研究晶状体损伤对视神经再生的促进作用,并探讨巨噬细胞所起的作用.方法:成年SD大鼠钳夹造成视神经损伤模型(NC),戳伤晶状体(LP),玻璃体内注射酵母多糖(ZI)或注射体外活化的单核/巨噬细胞(MI),动物以此分组.用Nissl染色法显示存活的视网膜节细胞(RGCs),用抗GAP-43抗体标记轴突再生RGCs,用抗ED-1抗体标记活化的单核/巨噬细胞.结果:NC+LP组存活的RGCs比NC组明显增加,再生的RGCs及活化的单核/巨噬细胞都有明显增多的结果.NC+ZI组与NC+MI组也有类似结果.结论:晶状体损伤具有显著促进视神经再生的作用,其机制可能与趋化并激活巨噬细胞有关.

    作者:潘凌;郑华;万瑾;佘振珏;肖虹蕾;胡宝洋;周国民 刊期: 2006年第01期

解剖学杂志

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