学术投稿

传代培养人胚胎生殖干细胞的生物学鉴定

陈永珍;张苏;朱旻;陈谦

关键词:胚胎生殖干细胞, 阶段特异性胚胎抗原, Oct-4, 人端粒酶逆转录酶
摘要:目的:通过对传代培养至第5代细胞分子标记物的表达分析,鉴定传代培养的细胞为人胚胎生殖干细胞(embrgomc germ stem cells,EGCs).方法:取5~10周人胚胎的生殖腺嵴和肠背系膜,进行组织块体外培养人EGCs,挑选传代培养至第5代生长良好的细胞,采用免疫细胞化学法分别检测SSEA-1、SSEA-3、Oct-4、hTERT的表达.结果:组织块体外培养得到的细胞,经免疫细胞化学法显示的单个细胞或细胞集落,均阳性表达SSEA-1、SSEA-3、Oct-4、hTERT.结论:组织块体外传代培养第5代所获得的细胞,为未分化的人EGCs.
解剖学杂志相关文献
  • 大鼠下丘脑部分核团形态学的测量及计算机三维重建

    目的:系统地反映下丘脑有关核团的立体模式,为深入探讨下丘脑的功能提供形态学依据.方法:制作正常成年SD大鼠冷冻冠状连续切片,运用MAPGIS 6.0测量下丘脑弓状核、室旁核、腹内侧核、背内侧核的截面积、体积等相关数据,并用3DS MAX 5.0软件三维重建出下丘脑及核团的立体图像.结果:三维重建的立体图像逼真自然,能够流畅地旋转、缩放,可在任一角度观察其形态,任一平面切割行切面观察,图像空间毗邻及定位准确,三维测量获得了精确的解剖参数.结论:下丘脑及核团的计算机重建图像可从多个外科手术角度进行观察,为脑的立体定向研究及颅部外科手术提供重要参考资料.

    作者:陈华;李世荣;张宝林;汪剑威 刊期: 2006年第06期

  • 提高组织学教学铺片质量之方法

    在组织学教学中,铺片(如间皮、疏松结缔组织等)标本是比较重要的教学标本.多年来实验工作者一直在对铺片制作技术进行摸索和改进,使之更加趋近于完美,制作方法有许多种且各有千秋,终的铺片质量也不尽相同.铺片制作的技术难点主要在于能否得到平展的膜组织、组织细胞结构是否对比清晰,本实验室通过十几年制作教学铺片的经验对提高铺片制作质量提出一些技术见解以供同行们参考.

    作者:赵荧;张栩胤 刊期: 2006年第06期

  • 颈前静脉变异1例

    笔者在解剖一成人女尸时,发现颈前静脉变异,现报告如下.该女尸身高160 cm,32岁,右侧颈前静脉变异,且主干管径较粗,为6~8 mm,全长14 cm,属支较多.左侧未见变异.连接左、右颈前静脉的颈静脉弓缺如.

    作者:李桂成;林新明 刊期: 2006年第06期

  • 中国大理市白族指纹纹型的分布

    目的:研究300名正常白族人的指纹纹型分布,为遗传学、医学、人类学提供正常参数.方法:在知情同意手续下,捺印调查对象的手纹.结果:L占52.7%,W占43.83%,A占3.47%,均有性别差异,无手别差异.A多见于拇指,Lu多见于小指,其次是中指,Lr多见于食指,W多见于拇指,其次是环指.对应指纹型组合频率为:L/L(45.1%)>W/W(37.1%)>L/W(12.2%)>A/L(3.40%)>A/A(1.73%)>A/W(0.53%),一手五指纹型组合频率为:OLW(64.83%)>同型组合(21%)>ALW(7.50%)>ALO(6.33%)>AOW(0.33%),双手十指同纹型频率为12.67%.结论:指纹纹型分布具有对称性,与其他民族有共性也有其特异性.

    作者:张本斯;李庄;洪虹;邹汝荣;王凡;李瑞祥 刊期: 2006年第06期

  • 当归补血汤含药血清体外诱导耳蜗干细胞的增殖分化

    目的:观察当归补血汤对耳蜗干细胞体外诱导分化的影响,并探讨浓度对其的影响.方法:分离新生大鼠Corti器的耳蜗干细胞进行细胞培养,在相差显微镜下观察细胞形态及生长状况,用Nestin免疫荧光法进行耳蜗干细胞鉴定.采用不同剂量当归补血汤进行诱导分化后,采用Myosin ⅦA、P27KIP1免疫荧光方法,鉴定内耳毛细胞和支持细胞,并进行细胞计数.结果:当归补血汤细胞诱导分化的内耳毛细胞和内耳支持细胞数量明显较对照组多,其中剂量为0.5 g/ml组向内耳毛细胞的分化比例高.结论:当归补血汤可以提高耳蜗干细胞体外分化为内耳毛细胞和支持细胞的数量.其中剂量0.5 g/ml组向内耳毛细胞的分化数量较高.

    作者:郑鸿燕;邰浩清;曾水林 刊期: 2006年第06期

  • 十二指肠小乳头的应用解剖

    目的:为内镜下副胰管插管、十二指肠小乳头切开等提供解剖学基础.方法:在30例成人尸体上对十二指肠小乳头的形态、位置、开口以及与大乳头之间的关系进行解剖观察.结果:十二指肠小乳头的出现率为70%,可见明显开口的占55%.小乳头形态有半球形、圆锥形、半颗粒形、扁平形和不规则形.小乳头距离幽门、十二指肠第一环、大乳头的距离分别为(58.69±15.74)mm,(23.21±8.82)mm和(22.75±6.81)mm;大、小乳头开口连线与十二指肠纵襞纵轴线的夹角为(20.80±9.40)°.结论:十二指肠小乳头的出现率与副胰管的发育程度相关,本文结果为内镜下行十二指肠小乳头插管和小乳头切开术提供了参考.

    作者:王栋;党瑞山;陈尔瑜;孙振兴;李八斤;纪荣明 刊期: 2006年第06期

  • 单细胞显微操作法克隆技术

    普通和特殊单克隆细胞株(系)的选择与培育日益重要、广泛和普及.探索不用特殊设备、操作简单、高效并适合任意批量单克隆细胞株(系)的选育技术将有利于这一重要而繁重工作的简化和推广.在实验中作者曾试过多种细胞克隆技术[1].为了简化技术模式,争取一次性准确获得欲选育量的可靠单克隆细胞株(系)并节省耗材,提高效率,减轻工作量,作者探索了仅利用细胞培养室常规配置设备进行的单细胞显微操作法克隆技术.

    作者:王雪岷 刊期: 2006年第06期

  • 人体肠管标本的塑封

    大体标本的保存中,虽然有塑化标本此类较完美的保存方法[1~3],但其造价太高及工艺复杂[4~5],使其难以在国内普及使用,未能有效的解决相关专业的工作环境,使得解剖、病理等有关行业中,大体标本的保存使用,仍难以摆脱传统的脏、臭形象.近几年来,作者与科室同行经多方探索,积极尝试,初步在结构显示要求较简单的人体肠管标本上,采用简易的PVC膜压袋封装,并行简易加工,取得较满意效果.现介绍如下.

    作者:蔡雪彦;吕端远;李少华;欧华 刊期: 2006年第06期

  • 刺五加在心肌细胞缺血再灌注损伤中的保护作用

    目的:研究刺五加注射液对缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion,I/R)心肌细胞的保护作用.方法:体外培养心肌细胞并计数;721可见光分光光度计测量培养液中的乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量;激光扫描共聚焦显微镜观察细胞内钙离子荧光染色.结果:中药刺五加注射液各剂量组与I/R组相比,细胞存活率升高,LDH、MDA水平降低,SOD水平升高,荧光像素值及阳性染色面积降低,有统计学意义.结论:中药刺五加注射液对缺血再灌注损伤心肌细胞有保护作用,可能与其保护细胞膜、清除氧自由基和减少钙离子内流等机制有关,其佳浓度为40%.

    作者:王刚;隽兆东;刘效波;于利 刊期: 2006年第06期

  • 肌皮神经缺如1例

    作者在解剖教学过程中发现一具成年男性尸体左侧肌皮神经缺如,现报道如下:该例左侧正中神经由臂从内、外侧束的内、外侧根夹持腋动脉向下呈锐角合成,在臂部沿肱二头肌内侧沟伴肱动脉下行,行程中发出3个分支以替代缺如的肌皮神经:(1)喙肱肌支:其在距正中神经起始处14.7 mm、距缘突40.4 mm处由正中神经发出,起始处横径0.7 mm;(2)第2支:在距正中神经起始处18.6 mm处发出,起始处横径2.2 mm,向外下行73.8 mm发出分支,起始处横径1.9 mm,支配肱二头肌;主干下行,起始处横径1.7 mm,肌支配肱二头肌和肱肌,皮支参与前臂外侧皮神经的组成;(3)第3支:在距正中神经起始处141.0 mm处发出,行于肱二头肌和肱肌之间,起始处横径2.6 mm,肌支支配肱肌,皮支在肱肌与肱二头肌额外头(起于喙肱肌止点和肱肌起点间的骨面)之间向外下斜行达肱二头肌腱稍上方,与第2支的皮支合成前臂外侧皮神经.

    作者:安月勇;曲永松;裴燕芳 刊期: 2006年第06期

  • 发育大鼠心肌细胞间隙连接蛋白43表达特性

    目的:探讨大鼠心肌细胞间隙连接蛋白43(Cx43)表达的发育特性.方法:应用SP免疫组化和图像分析方法,观察胎大鼠、出生1 d、5 d、10 d和25 d大鼠心肌细胞Cx43的蛋白表达.结果:(1)胎鼠心肌细胞Cx43呈斑点状遍布于心肌细胞侧-侧连接、细胞质内和闰盘处.(2)出生后1 d大鼠心肌细胞的Cx43分布与胎鼠相似,5 d和10 d组逐渐向闰盘处聚集.25 d时部分已聚集于端闰盘处,其余仍呈斑点状散在分布.(3)出生前后心室肌细胞Cx43分布有差异.分布密度总规律是:胎大鼠>出生1 d>5 d>10 d>25 d.结论:出生前后大鼠心肌细胞Cx43分布随心脏发育逐渐向闰盘处重排,其分布密度呈逐渐下降趋势.

    作者:徐振平;张进忠;郭志坤;张光谋 刊期: 2006年第06期

  • MK-801对新生大鼠脑外伤后神经元凋亡的影响

    目的:探讨N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂MK-801对新生大鼠创伤性脑外伤(traumatic braininjury,TBI)后神经元凋亡的影响.方法:建立新生7 d大鼠顶叶皮质挫伤模型,在TBI前30 min、TBI后即刻、TBI后30 min分别给予腹腔注射MK-801 1 mg/kg,在TBI后24 h取脑,连续切片,行H-E染色和Caspase-3免疫组化染色,检测脑神经元细胞的损伤和凋亡.结果:MK-801三组不同时间用药组与TBI组相比,在创伤同侧的扣带皮质、顶叶皮质和丘脑神经元凋亡细胞数减少,有显著性差异,其中TBI后即刻用MK-801治疗效果好.结论:MK-801能明显减少TBI后神经元的凋亡.

    作者:顾峻;顾红玉;陈玉英;何正瑞;丁文龙 刊期: 2006年第06期

  • 结扎切断法制作大鼠后肢缺血模型的效果

    下肢缺血是临床上的常见疾病.动物后肢缺血模型是下肢缺血性疾病发病机制和治疗研究的基本前提.从制作方法看,除了缺血-再灌注模型采用暂时阻断动物后肢股动脉的方法之外[1,2],多数研究均采用通过结扎并切断动物股动脉及其主要分支的方法来达到持久阻断后肢供血的目的[3~5].但如此制作的肢体缺血模型效果究竟如何,文献中少有描述.本研究采用结扎并切断大鼠后肢供血动脉的方法制作肢体缺血模型,希望能够就其制作方法的可靠性进行分析探讨.

    作者:梁翠宏;田铧;徐蕴;李贵宝;田广平;李盛梅 刊期: 2006年第06期

  • 宁心红杞胶囊对老龄雌性大鼠卵巢颗粒细胞超微结构的影响

    目的:观察天然药物干预下老龄雌性大鼠卵巢颗粒细胞超微结构的变化.方法:以自然衰老雌性大鼠为实验模型,按临床等效剂量胃饲由天然植物药加工制成的宁心红杞胶囊8周后,取其卵泡中颗粒细胞,用透射电镜进行观察.结果:模型组颗粒细胞胞体变小,胞质中的各种细胞器和分泌颗粒数量明显减少,可见较多的凋亡细胞和凋亡小体.用药组细胞体积增大,胞质内细胞器数量增多,线粒体、滑面内质网、粗面内质网、高尔基复合体等结构大体正常,细胞间缝隙连接增多.偶见凋亡的颗粒细胞,未见凋亡小体.结论:宁心红杞胶囊具有调控颗粒细胞凋亡的作用,能抑制凋亡进程,这可能是其临床治疗围绝经期综合征的作用机制之一.

    作者:吕晔;马红;项晓人;徐立;王明艳;李育 刊期: 2006年第06期

  • 大鼠寰椎的解剖学特点及其内椎动脉的走行

    Pulsinelli大鼠四血管闭塞法全脑缺血模型[1]是公认的研究全脑缺血尤其是迟发性神经元缺血损伤的适宜模型,其大优点是缺血效果确切.但此模型的操作复杂、成功率较低,热灼凝闭大鼠双侧椎动脉是整个模型成功的关键.大鼠椎动脉非常细小,而且在第1颈椎(寰椎)处很难被直视,很难判断该动脉是否被完全凝闭.另外部分大鼠在分离肌肉暴露寰椎时大出血、凝闭椎动脉时呼吸骤停或术后出现偏瘫、癫痫等.欲提高此模型成功率,弄清楚大鼠寰椎的解剖特点和椎动脉在其内的走行是关键的环节.目前文献中叙述简单[2,3],应予调查澄清.

    作者:张敏;郭莉华;李文斌;耿进霞;李清君 刊期: 2006年第06期

  • 超声观察大鼠颈总动脉机械损伤模型

    目的:用超声指标和病理指标评价大鼠颈总动脉机械损伤模型.方法:建立大鼠颈总动脉内皮剥脱模型,在术后1、7、28 d分别超声观察颈总动脉管腔、血流速度、脉动指数(PI)和阻力指数(RI),与病理切片对照.结果:大鼠颈总动脉内皮剥脱后管腔狭窄,血流速度减慢,PI、RI增高,均于损伤第28天达峰值.结论:超声指标能够无创动态观察大鼠颈总动脉损伤及修复过程.

    作者:刘继东;崔连群;耿海华;张楠;朱梅;李锋;盖玉生 刊期: 2006年第06期

  • 石蜡切片上做酶组织化学的方法

    酶组织化学用来显示酶在组织或细胞内的活性及定位,酶组织化学能否成功很大程度取决于材料的制备,固定液能很好的保存组织的形态结构,使酶的活动保持在生活时的位置,定位准确.但实验室常常用固定液可导致酶部分或完全失活.故酶组织化学局限使用冰冻切片.但冰冻切片存在3个方面不足:(1)损伤结构的完整性,使酶不能很好定位;(2)可溶性酶可因弥散而失活;(3)不能作回顾性研究.作者经反复实验成功的设计出一种用石蜡片做酶组织化学的方法,现介绍如下.

    作者:王威;张辉 刊期: 2006年第06期

  • 上海地区成人鼻面部的观察和测量

    目的:收集上海地区汉族成年人的外鼻特征和鼻面部数据,为鼻整形手术和颌面部赝复学提供依据,并丰富人体测量学数据库.方法:采用人体测量方法,对190名上海地区健康汉族成年人的外鼻进行观察与测量.结果:获得所有被测者的面宽、面长、鼻高、鼻长、鼻宽、鼻深、鼻根高、鼻根宽、内眦间距、鼻孔宽和鼻孔高数据,同时获得各种外鼻形态、以及鼻尖、鼻翼和鼻侧面形态分类并获得鼻面比例.结论:上海地区汉族成年人的外鼻形态多为理想鼻型,鼻侧面形态多为直型,鼻尖中等,鼻翼高度适中,男女鼻指数都为中鼻型.

    作者:熊耀阳;孙健;张富强 刊期: 2006年第06期

  • 中国汉族人群白细胞介素10启动子区基因多态性的等位基因频率

    目的:了解中国汉族人群中白细胞介素10(IL-10)启动子区基因多态性的等位基因频率.方法:应用聚合酶链-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)技术,对131例健康中国汉族受检样本进行IL-10-592、-819、-1082三个位点的基因型检测.结果:IL-10-592位点A/A、C/A、C/C基因型频率分别为42.7%、36.6%、20.7%,IL-10-819位点T/T、T/C、C/C基因型频率分别为42.7%、36.6%、20.7%;其相关等位基因频率与意大利高加索人及英国曼彻斯特人相比有显著性差异,但与韩国人之间的差异无统计学意义.结论:不同国家人群间存在IL-10启动子区基因多态性的差异.

    作者:杜冉;潘速跃;陆兵勋 刊期: 2006年第06期

  • 动物组织细胞分离纯化方法学

    要了解某种特定细胞的结构、功能或表面标志等特征,就必须将其在体外培养增殖获得足够的数量以供研究,这首先就必须获取种子细胞.从血液、淋巴液等液体中分离细胞时,可直接进行纯化,从心脏、肝脏等器官分离细胞时,一般的方法是先获得细胞悬液,再对其进行分离纯化.近年来细胞分离纯化技术发展较迅速,它们主要依据两类原则:(1)各种细胞不同的物理性状,如:大小、密度、表面电荷及黏附能力等;(2)各种细胞表面受体或抗原的差异.本研究对其中一些方法在比较的基础上进行综述.

    作者:姜俊芬;韩伟 刊期: 2006年第06期

解剖学杂志

解剖学杂志

主管:中国科学技术协会

主办:中国解剖学会