潘云峰;张晓;胡爱玲;尹培达
对接种腹水型S180细胞的小鼠反复定量联合化疗,建立获得性多药耐药基因(MDR)表达小鼠模型,探讨临床早期发现化疗耐药、全面定量检测耐药程度的方法.应用流式细胞术动态检测MDR表达情况及S180细胞凋亡指标,同法检测同期外周血淋巴细胞上述指标.结果是实验组小鼠自化疗后1周MDR表达逐渐增高,自第5周后显著性增加(P<0.05);而S180细胞凋亡率、细胞杀伤率及Fas因子表达率则随化疗时间的延长而逐渐下降.MDR表达显著性增加时,S180细胞凋亡率等则显著性降低(P<0.05).第5周时实验组MDR阳性表达小鼠占61.4%、第7周占83.33%.实验组外周血淋巴细胞MDR、凋亡率与S180细胞有显著相关性.
作者:尹格平;顾清;陈铭;陈诵芬 刊期: 2001年第05期
本文构建特异性抗肝癌(HCC)噬菌体单链抗体(ScFv)库并观察其靶向性.应用噬菌体表面呈现技术,从经HCC细胞免疫的小鼠脾淋巴细胞构建特异性抗HCC噬菌体ScFv库,应用HCC细胞和正常肝细胞筛选.制备游离ScFv,以正常肝细胞作为对照,应用ELISA、点杂交和免疫组织化学方法以及流式细胞仪(FCM)检测ScFv与HCC细胞的特异性结合能力.结果显示抗体库库容为2.14×106;核酸序列分析显示ScFv基因结构正确;游离ScFv相对分子质量为32 000;ScFv抗HCC效价为1:16;点杂交和免疫组织化学技术检测显示HCC细胞被染成棕黄色,阴性对照、空白对照未着色;FCM检测发现ScFv 具有与HCC细胞特异性结合的能力.特异性抗HCC噬菌体ScFv具有与HCC结合的靶向特异性.
作者:毕向军;杨冬华;崔俊;李鹏;宁晓燕;范子荣;覃汉荣 刊期: 2001年第05期
类风湿性血管炎(RV)作为类风湿性关节炎(RA)全身表现的一种,其出现常预示病情的严重性.为探讨抗内皮细胞抗体(AECA)在RV中的致病作用,本文利用培养的人脐静脉内皮细胞作抗原,采用ELISA方法检测了21例RV,30例无关节外表现的RA患者和26例正常人血清中AECA,并作临床意义分析.
作者:潘云峰;张晓;胡爱玲;尹培达 刊期: 2001年第05期
随着免疫学、分子生物学与基因工程技术发展,以肿瘤免疫治疗为代表的肿瘤生物治疗已成为继手术治疗、化疗和放疗后肿瘤治疗的第四种模式[1].本文欲对肿瘤免疫及肿瘤免疫治疗,特别是其中一些新的思路和进展作一简要探讨和评述.
作者:魏于全;田聆 刊期: 2001年第05期
探讨IL-10抑制肾病患儿外周血单个核细胞(PBMC)培养上清液对大鼠肾小球上皮细胞(GEC)粘附的影响.应用同位素标记的方法检测GEC粘附率.结果显示,未治疗组初发肾病患儿PBMC上清液显著降低GEC粘附率,与激素治疗组及正常对照组比较,差异有非常显著性意义(P值均<0.01);人重组IL-10明显减弱肾病极期患儿PBMC上清液对GEC粘附的抑制性影响,GEC粘附率显著升高,并呈剂量依赖效应.表明肾病患儿PBMC产物抑制GEC对胶原基质的粘附,而IL-10能负向调节此抑制过程.
作者:牛余宗;韩林;张圣明;王彩霞;郭宝强 刊期: 2001年第05期
病毒性心肌炎以小儿多见,柯萨奇B组病毒(CoxB)是主要病原.IL-6、IL-8和TNF-α是免疫和炎症的重要调节因子.我们采用ELISA测定血清中IL-6、IL-8和TNF-α三种因子,观察到在病毒性心肌炎的早期,IL-6、IL-8和TNF-α水平较正常儿水平均显著增高,且与临床表现、心电图改变、心肌酶的升高是一致的.这三种因子水平的升高可以作为病毒性心肌炎急性阶段的一个重要指标,4周后病情进入恢复期,IL-6和TNF-c水平已降至正常而IL-8仍显著高于正常,说明疾病仍未治愈.因此我们认为IL-8恢复至正常可以作为判断病毒性心肌炎治愈及预后判断的主要指标.
作者:牛静;李培杰;张松青;王念亮 刊期: 2001年第05期
本文用FasL单抗NOK-1与CNBr-Sepharose4B偶联,制备亲和层析柱,从表达FasL的HEpG2细胞膜蛋白抽提液中分离纯化FasL分子.实验证明用本法纯化的FasL其相对分子质量为31 000~33 000,SDS-PAGE呈现单一条带,Western blot表明具有一定的抗原性,能诱导表达Fas的细胞发生凋亡,在一定浓度范围内呈现量-效关系,为进一步研究FasL分子的结构功能及制备抗体提供了实验材料.
作者:陈兴国;聂红;马安伦;余奇文;李宁丽;张冬青;周光炎 刊期: 2001年第05期
作者: 刊期: 2001年第05期
本文通过检测慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单个核细胞(PBMC)培养上清中IFN-γ、IL-10含量,以探讨病毒定量、肝脏炎症病变程度及是否存在HBeAg等因素与细胞因子生成量之间的关系.取CHB患者和健康对照者PBMC,分别加人特异性刺激剂rHBcAg和非特异刺激剂PHA,培养72 h后收集上清,采用双抗体夹心法检测IL-10和IFN-γ.结果表明rHBeAg 刺激CHB患者生成的IFN-γ与正常对照组无明显差异,IL-10较正常对照组高(P<0.01).病毒量明显影响IFN-γ和IL-10的产主,IL-10的生成在高病毒量组较高,而IFN-γ与此相反.按肝脏炎症活动程度分组发现,G4、G3组IL-10明显低于G1、G2组,但rHBcAg刺激产生的IFN-γ在各组间无明显差异.HBeAg(+)组较HBeAg(-)组生成的IL-10高,而IFN-γ低.高病毒量、HBeAg抑制CHB患者IFN-γ生成,而IL-10的生成相对增加,肝功能损害程度与IL-10明显负相关
作者:胡章勇;章廉;张明霞;文维群;钱毅;王燕军;骆抗先 刊期: 2001年第05期
用W6/32单抗对JEG-3细胞进行免疫荧光染色,可见在JEG-3细胞膜表面有高强度的黄绿色荧光.HLA-G+的JEG-3细胞作为刺激细胞,观察其对淋巴细胞增殖反应的影响,结果JEG-3细胞不能刺激淋巴细胞增殖.采用经典的单向混合淋巴细胞培养的方法,以转染及未转染HLA-G分子的K562细胞作为抑制细胞,按一定的比例加人反应体系,结果表明,转染HLA-G的K562细胞能抑制淋巴细胞的增殖反应,该抑制以刺激细胞:反应细胞:抑制细胞的比例为1:1:2时效果明显,抑制率为54.1%(P<0.01),转染空质粒和未转染HLA-G的K562细胞均无明显抑制作用.外周血淋巴细胞与JEG-3细胞共同孵育,碘化丙啶(PI)染色,流式细胞仪观察,结果发现,HLA-G分子能诱导淋巴细胞的凋亡.
作者:韩子英;王利;马宝骊;张继英;张汉明;柏峻;张莉 刊期: 2001年第05期
本文用3H-TdR掺人法和MTT法观察5HT3受体激动剂1-phenylbiguanide(PBG)、5HT3受体拮抗剂格拉司琼(granisetron)和托烷司琼(tropisetron)对体外培养ICR小鼠脾淋巴细胞ConA,LPS刺激的增殖和NK细胞活性的影响.结果表明PBG(10-6~10-4mol/L)抑制ConA刺激的脾细胞增殖反应和脾细胞IL-2的生成(P<0.05);增强LPS剌激的脾细胞增殖反应(P<0 05):格拉司琼和托烷司琼双相影响,即在低浓度(10~~10-6mol/L)促进、在较高浓度(10-5~10-4mol/L)抑制ConA刺激的增殖反应(P<0.05);二药均浓度依赖抑制LPS刺激的脾细胞增殖效应.PBG对脾淋巴细胞增殖的影响被同时加入格拉司琼或托烷司琼拮抗,格拉司琼和托烷司琼减弱PBG 10-5mol/L对脾细胞增殖反应的影响.本实验5HT3受体激动剂或拮抗剂浓度不明显影响脾NK细胞活性和无丝裂原刺激的增殖反应.结果提示小鼠脾T细胞和B细胞表面可能存在对淋巴细胞增殖有不同影响的5HT3受体.
作者:贾洪彬;许德义 刊期: 2001年第05期
本文研究慢性肾小球肾炎(CGN)、原发性肾病综合征(PNS)和慢性肾衰(CRF)等慢性肾小球疾病患者外周血血小板P-选择素和淋巴细胞的细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的变化,并探讨其与治疗效果之间的关系.采用流式细胞仪对30例CGN、34例PNS和34例CRF的外周血血小板P-选择素和淋巴细胞ICAM-1的表达水平进行定量检测.结果,(1 ) CGN、PNS和CGF患者的P-选择素阳性细胞百分率与正常对照组比较,有显著性差异(P<0.01);CGN、PNS和CCF患者的ICAM-1阳性细胞百分率与正常对照组比较,也有显著性差异(P<0.01);(2)CGN、PNS和CGF患者中病情好转者,治疗后的P-选择素阳性细胞百分率较治疗前有明显的下降(P<0.05);而ICAM-1于PNS、CRF组有明显下降(P<0.01),于CGN组无明显变化(P>0.05).3组患者中病情无明显好转者,治疗前后的p-选择素和ICAM-1的阳性细胞百分率,均无显著性差异(P>0 05).CGN、PNS和CRF等慢性肾小球疾病患者P-选择素和ICAM-1的表达水平增高,提示P-选择素和ICAM-1参与了这些慢性肾小球疾病的病理过程;P-选择素和ICAM-1表达水平的高低还与这些慢性肾小球疾病的治疗效果有密切关系,因此它们还可作为在临床判断治疗效果的指标.
作者:涂晓文;张爱平;尹格平;杨剑辉;丁尧海 刊期: 2001年第05期
本文研究SLE患者外周血淋巴细胞(PBL)在IL-18刺激下细胞凋亡及凋亡相关基因表达情况.采用ArnexinV联合PI染色定量法及免疫荧光染色法.结果显示在IL-18刺激培养作用下,活动期SLE患者PBL凋亡发生率明显增高(P<0.01),而静止期则无明显区别(P>0,05),疾病活动性与PBL凋亡率呈正相关(P<0.01).Bcl-2表达活动期显著性升高(P<0.05),静止期无明显著性差异(P>0.05).Fas表达活动期显著升高(P<0.001,静止期明显升高(P<0.05).IL-18可引起SLE患者PBL凋亡率的增高,并导致调节紊乱,故在SLE发病机制中起作用.
作者:李富荣;叶志中;戴勇;陈晓琳;洪小平;谭艳红;王新根 刊期: 2001年第05期
据报道炎性细胞因子与心力衰竭(HF)的发病密切相关1.本文测定36例HF患者血清白细胞介素6(II-6)和白细胞介素6受体(IL-6R)水平,旨在探讨它们之间的关系及临床意义.1 材料和方法1.1 研究对象 HF组36例,男22例,女14例,平均年龄(36.5±11.3)岁,其中心衰(按NYHA分级)分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ度3组(表1).正常健康人对照组30例,男女各15例,平均年龄(33 5±8 9)岁.
作者:许金成;王淑斐;王胜春;陈群 刊期: 2001年第05期
本文探讨白细胞介素10(IL-10)在小儿原发性肾病综合征(PNS)中的变化及其与病理形态之间的关系.应用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)及ELISA法检测了PNS患儿PBMC IL-10 mRNA及蛋白水平的变化,并分析其与病理形态改变关系.结果:(1)PNS患儿急性期IL-10 mRNA与蛋白水平较正常对照组显著升高(P均<0.01);而缓解期与正常对照组相比较无显著差异(P均>0.05);(2)IL-10表达与患儿肾脏病理形态存在一定关系,系膜增生性肾炎及IgA肾病明显高于正常对照组,微小病变、局灶节段性肾小球硬化和膜增生性肾小球肾炎与正常组比较无显著差异.PBMC IL-10可作为观察病情活动、判断病理类型的一个免疫学指标.IL-10在PNS发病中可能具有一定的抗炎作用.
作者:吴元俊;陈荣华;陈吉庆;张爱华;潘晓勤;蔡教 刊期: 2001年第05期
本文以T细胞亚群、IL2、IL-6、IL-10为指标,以40例健康人群作对照,了解69例静脉注射海洛因患者脱毒前后细胞免疫的情况.结果发现:海洛因依赖者外周血中的CD3+细胞、CD4+T细胞数和CD4+/CD8+细胞比值脱毒前与对照组比较,有明显的降低,脱毒4个月后比脱毒前有升高,但尚未恢复正常.海洛因依赖者的白介素水平:IL-2、IL-6、IL-10脱毒前后与正常对照组相比,均有显著差异(P<0.01).说明长期使用海洛因可使人体细胞免疫功能低下.
作者:韦丽华;方芳;薛云松;支国华;冯倩;周林华;高宗鹰 刊期: 2001年第05期
树突状细胞(dendritic cells,DC)根据其来源、表型及分泌的细胞因子不同可分为髓系DC(DC1)和淋巴系DC(DC2).DC1诱导Th1细胞应答,DC2诱导Th2细胞应答.本文就DC和Th细胞分化的关系作一简要综述,包括DC分类及其对Th细胞分化的诱导以及Th细胞亚类对DC的反馈作用.
作者:王明军;谭锦泉 刊期: 2001年第05期
为了观察IL-l3对肾小球系膜细胞核因子-κB(NF-κB)活性的影响,探讨IL-13抑制免疫及炎症反应的分子机制.体外培养的大鼠系膜细胞经LPS激活及不同浓度IL-13处理后,利用凝胶电泳迁移率试验(EMSA)检测系膜细胞NF-κB的活性.在含5%FCS的RPMI 1640培养状态下的肾小球系膜细胞存在一定的NF-κB活性;LPS激活后系膜细胞NF-κB活性显著增高;IL-13可抑制基础状态及LPS激活的系膜细胞NF-κB活性.结果表明,IL-13可抑制体外培养系膜细胞的NF-κB活性.从而抑制NF-κB参与调控的细胞因子的表达而终对系膜细胞炎症效应产生调节作用.
作者:郭汉城;江黎明;陈孝文 刊期: 2001年第05期
为探讨血、尿IL-6水平在狼疮性肾炎(LN)的病理诊断、病程监测中的意义。我们检测了LN患者血清IL-6(sIL-6)和尿IL-6(uIL-6)的含量,结合肾脏活组织病理检查及临床资料进行相关性分析。
作者:郝丽;梁维龙;卢文 刊期: 2001年第05期
对29例重症肌无力(MG)患者同时进行了HLA-DPB1分型(聚合酶链反应-限制性片段长度多态性多酶共同消化法)及AchRAb、Pre-SmAb(ELISA)测定,籍以探讨MG患者HLA-DPB1与AchRAb及Pre-SmAb的相关关系。结果表明AchRAb阳性患者与DPB1*0501、2701及3601密切相关,而AchRAb阴性患者与DPB1*3601及0101相关;Pre-SmAb阳性患者与DPB1*0501、3601、2701相关外,还与0101相关,而Pre-SmAb阴性患者与这些等位基因无明显相关关系。上述结果提示HLADPB1与MG的AchRAb和Pre-SmAb关联。
作者:黄文;莫雪安;韦志益;郑金瓯;马朝桂 刊期: 2001年第05期