高帅；郭义峰
目的：用第三代流式细胞分选仪比较不同直径喷嘴分选的单细胞的得率及细胞活性，进一步完善单细胞微孔板分选的参数设置及条件优化。方法：用FACSAria Ⅲ流式细胞分选仪及96孔板对Raji细胞、A549、DT 40、RAW 264．7细胞系进行单细胞分选，分别采用70μm 、100μm和130μm喷嘴分选，比较分选后单细胞得率及克隆形成率。结果：在单细胞分选模式下，用3种不同直径喷嘴及96孔板分选后的单细胞得率为86．55％～93．44％，即96孔板有单细胞的孔数为84～92孔；分选后的单个细胞培养7 d后，经70μm 、100μm 和130μm喷嘴分选的单细胞克隆孔数分别为31～52孔、49～70孔、58～78孔。结论：进行单细胞微孔板分选时，在精确调节及优化实验参数的前提下，为了保证单细胞的活性，应优先选择100μm或130μm喷嘴。
作者：闵智慧；程韵枫 刊期： 2016年第06期
目的：探讨胃癌组织miR‐155的表达水平及其临床意义。方法：收集手术切除的胃癌标本116例，采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应（qRT‐PCR）检测癌及癌旁组织 miR‐155的表达水平，分析其与临床病理的关系及对临床预后的影响。采用免疫组织化学法检测癌组织中 PT EN的表达，分析其表达与miR‐155的相关性。结果：胃癌组织miR‐155表达高于配对癌旁组织，差异有统计学意义（P＜0．001）；miR‐155高表达与肿瘤 TNM 分期、侵犯层次、淋巴结转移有关（P＜0．05）。K‐M曲线分析表明，miR‐155高表达预示着较低的3年无病进展率（ P＜0．001）及总生存率（ P＜0．001）。PT EN 表达与miR‐155负相关，miR‐155高表达患者PT EN表达低（ P＜0．001）。结论：miR‐155与胃癌发生发展密切相关，可能是胃癌潜在的临床诊断及预后指标。
作者：周明；马建明 刊期： 2016年第06期
目的：探讨血清中白细胞介素‐18（IL‐18）、白细胞介素‐33（IL‐33）水平在支气管哮喘不同控制水平患者中的变化及其临床意义。方法：选择2014年1月—2015年12月于山东省交通医院呼吸内科诊治的90例哮喘患者（哮喘组）进行研究。根据哮喘控制水平分级，将哮喘组患者分为未控制组、部分控制组及控制组3个亚组，每组各30例。另选30例健康对象作为健康组。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组受试者血清中 IL‐18、IL‐33水平，并测定哮喘患者肺通气功能。结果：哮喘组患者血清中IL‐18、IL‐33水平高于健康组（ P＜0．05）。哮喘未控制组、部分控制组患者血清中IL‐18、IL‐33水平均高于控制组（ P＜0．05）；未控制组患者血清中这两项指标高于部分控制组（ P＜0．05）；IL‐18与IL‐33在控制组与健康组间差异无统计学意义（P＞0．05）。哮喘组患者第1秒用力呼气容积占预计值百分比（FEV1％ pred）与血清中IL‐18水平呈负相关（P＜0．05），但与IL‐33无显著相关性。在3个哮喘亚组中，患者血清中IL‐18和IL‐33的表达水平均与FEV1％ pred无显著相关性。结论：哮喘患者血清中IL‐18与IL‐33水平与其哮喘控制水平相关。
作者：解现金；叶伶 刊期： 2016年第06期
目的：调查肺癌疼痛患者对盐酸羟考酮缓释片服用依从性的现况，分析盐酸羟考酮缓释片依从性不足的原因。方法：采用整群抽样的方法，对2015年1月至6月在病房服用盐酸羟考酮缓释片的72例肺癌患者进行调查，服药共计1392次。应用数字评定量表（numerical rating scale ，NRS）、自行设计的肺癌疼痛患者盐酸羟考酮缓释片服用依从性量表，记录患者疼痛评分、疼痛部位、服药天数、服药次数、服药依从性差时疼痛评分及原因。结果：患者对盐酸羟考酮缓释片服用依从性差，依从性差的患者42例，占58．33％；依从性差的服药次数为780次，占56．03％。患者存在疼痛时服药，无疼痛时不服药的行为；服药依从性差与患者担心盐酸羟考酮缓释片成瘾性和耐药性、自认为病情未达到服用盐酸羟考酮缓释片的程度以及药物价格昂贵等因素有关。结论：肺癌疼痛患者对盐酸羟考酮缓释片服用依从性有待提高，可从患者对盐酸羟考酮缓释片认知的误区、患者对自身疾病的认识程度等方面进行干预，提高患者服药的依从性。
作者：曹燕华；姜艳依；张燕；赵娟；侯黎莉；李玉梅 刊期： 2016年第06期
目的：探讨以慢性肾脏病（CKD）一体化门诊为平台的优化营养指导模式对提高非透析患者低蛋白饮食依从性并改善其营养状况的作用。方法：将196例CKD 3B～4期非透析CKD患者随机分为优化模式组和传统模式组。两组均给予饮食蛋白质0．6 g／（kg · d）和30～35 kcal／（kg · d）的营养处方，接受两种不同模式的营养管理。随访12个月，每3个月通过MDRD公式估算肾小球滤过率（eGFR）；运用人体测量、生化营养指标和主观综合营养评估法（SGA）评估营养状况。结果：两组患者eGFR的变化差异无统计学意义。与传统模式组相比，优化模式组低蛋白饮食依从性更高，每日饮食蛋白质摄入量较低，饮食热量较高，血清白蛋白水平较高，体质量增加，血尿素氮和甲状旁腺激素下降，SGA评估的营养状况改善，差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论：优化营养指导模式有助于提高中晚期非透析 CKD患者对低蛋白饮食的依从性，改善其营养状况，且安全性良好。
作者：严艳；简桂花；张起铭；纪星星；程东生；陈玉强；汪年松 刊期： 2016年第06期
目的：通过建立A20过表达肺泡巨噬细胞株，研究A20对肺泡巨噬细胞炎症反应的影响及调控机制。方法：构建携带A20基因的慢病毒载体，转染大鼠肺泡巨噬细胞（NR8383），筛选出稳定过表达A20基因的细胞株并行体外培养。向培养基中加入脂多糖（LPS ，1μg／mL）进行干预，并于刺激后0．5、1、2、4 h收集上清液及细胞。ELISA法测定上清液中细胞因子（TNF‐α、IL‐1β）及核因子κB（NF‐κB）活性。Western印迹方法检测A20蛋白及核内p65含量。实时荧光定量PCR法测定A20 mRNA含量。结果：LPS刺激后，A20过表达组（A20组）及正常对照组（VEC组）A20蛋白及mRNA含量都升高，并于1 h达高峰，之后逐渐下降；且A20组较 VEC组 A20水平明显升高（P＜0．05）。与 VEC组相比，A20组培养上清液中细胞因子（TNF‐α、IL‐1β）水平明显降低（P＜0．05）；NF‐κB DNA结合活性及核内p65含量也降低（P＜0．05）。结论：A20能够抑制肺泡巨噬细胞NF‐κB活性及TNF‐α、IL‐1β分泌，进而抑制肺泡巨噬细胞炎症反应活性。
作者：朱晓丹；王颖；毕晶；童琳；刘洁；宋元林；白春学 刊期： 2016年第06期
目的：探讨图像引导放射治疗（image guided radiation therapy ，IGRT ）技术在测定并校正肺部恶性肿瘤体部立体定向放射治疗（stereotactic body radiation therapy ，SBRT ）过程中靶区位置误差的意义。方法：选择复旦大学附属肿瘤医院收治的14例肺部恶性肿瘤并接受SBRT的患者。每次治疗前后均进行千伏级锥形束 CT （kV‐CBCT ）扫描，与计划CT图像进行在线配准，校正误差后进行治疗。治疗后再次进行CBCT扫描并配准。分别记录治疗前后靶区位置误差。根据临床靶区（CTV）‐计划靶区（PTV）外放公式MPTV（外放）＝2．5Σ＋0．7σ计算PTV外扩大小。结果：治疗前靶区位置左右、头脚、腹背方向误差大值分别为10．0mm、16．9mm、8．7mm，误差平均值分别为（2．4±2．8）mm、（3．4±4．6）mm、（2．9±3．4）mm。在线校正并治疗后，靶区位置左右、头脚、腹背方向的误差大值分别为7．6mm、4．6mm、7．0mm，误差平均值分别为（2．1±2．0）mm、（1．5±1．6） mm、（1．7±2．0） mm。无图像引导PTV外扩大小为左右7．96 mm、头脚11．72 mm、腹背9．63 mm ，有图像引导并在线校正PT V外扩大小为左右6．65 mm、头脚4．87 mm、腹背5．65 mm。结论：IGRT技术可即时校正SBRT治疗前由摆位引起的靶区位置误差，并测定治疗过程中的靶区位置移动，能提高治疗精度，并有助于PTV外扩的制定。
作者：王昌民；胡伟刚；彭佳元；蔡旭伟；傅小龙；许青 刊期： 2016年第06期
目的：评价经阴道超声测量对绝经后子宫内膜癌的诊断价值。方法：选择因经阴道超声提示宫腔占位行宫腔镜检查术绝经后妇女520例，分析绝经后子宫内膜癌患者的相关特征。以病理诊断结果为金标准，评价经阴道超声和宫腔镜诊断子宫内膜癌的灵敏度和特异度。以ROC曲线下面积确定经阴道超声测量宫腔占位大小诊断绝经后子宫内膜癌的佳临界值。结果：绝经后阴道流血（postmenopausal bleeding ，PMB）、宫腔占位大及宫腔积液多与绝经后子宫内膜癌相关，而年龄、绝经年龄、绝经时间、内膜厚度与绝经后子宫内膜癌无关。伴PMB妇女的子宫内膜癌发生率是无PMB妇女的6．4倍。宫腔镜诊断绝经后子宫内膜癌的准确性高于经阴道超声。超声测量宫腔占位大小诊断无 PM B子宫内膜癌的佳临界值为14．5 mm ，此时阳性预测值为10．75％、阴性预测值为99．14％。超声测量宫腔占位大小诊断伴 PMB绝经后子宫内膜癌的佳临界值为18．5 mm ，此时阳性预测值为55．56％、阴性预测值为91．94％。结论：对于无PMB的妇女，经阴道超声测量宫腔占位大于14．5 mm作为行宫腔镜检查的指征较合理；而对于经阴道超声发现宫腔占位且伴 PMB的妇女，子宫内膜癌发生率较高，建议均行宫腔镜检查。
作者：姚莉；谢锋 刊期： 2016年第06期
目的：评价多个生物学指标在老年女性妇科肿瘤术后并发心衰的预测作用。方法：采用回顾性研究，纳入416例老年妇科肿瘤患者，均接受外科手术治疗。根据心功能不全NYHA分级，将接受手术的患者分为心衰组和无心衰组。患者术前均接受体检、实验室检查、心电图监测、心脏彩超监测及妇科术前评估，术后再次行心脏彩超评价心功能。选取白细胞计数（WBC）、心电图碎裂QRS波（fQRS）、血清肌钙蛋白I（TnI）及氨基末端脑钠肽前体（NT‐proBNP）等作为预测心功能的评价指标。结果：fQRS在心衰组发生率明显高于非心衰组，差异有统计学意义（P＜0．05）；心衰组WBC、TnI及NT‐proBNP含量明显高于非心衰组，差异有统计学意义（P＜0．05）；联合多个生物学标志物预测性诊断老年女性妇科肿瘤术后并发心衰的敏感度为96．2％、特异度为85．4％。结论：联合检测多个生物学标志物可用于预测老年女性妇科肿瘤术后并发心衰，操作方法简易、预测结果有效。
作者：王楠；张若溪；侯静波；董玲；孟胜楠 刊期： 2016年第06期
鼻咽癌是我国南方地区高发的头颈肿瘤之一。由于其病理类型多为低分化鳞癌，因此调强放疗联合化疗取得了较好的疗效。同时放化疗也会对机体产生严重的急性和迟发性毒性反应，而严重的不良反应会对患者造成生理和心理上的创伤，亦会导致治疗中断甚至失败。重视不良反应并及时进行干预，对提高患者依从性及改善预后具有重要意义。本文就鼻咽癌患者放化疗过程中的不良反应和影响因素进行综述。
作者：李骥；王培林；黄新生 刊期： 2016年第06期
目的：探讨具有乙肝背景的肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma ，HCC）患者射频消融术（radiofrequency ablation ， RFA ）术前血清乙型肝炎e抗原（HBeAg ）水平与术后肿瘤复发的相关性。方法：回顾性分析2006年6月至2012年6月复旦大学附属中山医院收治的具有乙肝背景的小 HCC行RFA治疗的391例患者的临床资料。根据术前 HBeAg水平，将患者分为HBeAg阳性组（n＝112）和HBeAg阴性组（n＝279）。术后定期规律随访，分析RFA术前 HBeAg水平和RFA术后肿瘤复发的相关性。结果：HBeAg阳性组术后中位无复发生存期（recurrence‐free survival time ，RFS）为（23．00±1．99）个月，HBeAg阴性组术后中位RFS为（31．00±3．49）个月，差异有统计学意义（P＝0．002）。多因素Cox风险回归分析显示，术前甲胎蛋白（alpha fetal protein ，AFP）水平（HR 1．393，95％ CI 1．052～1．845， P＝0．021）、血清HBV‐DNA水平分级（HR 1．402，95％ CI 1．013～1．939，P＝0．041）和HBeAg水平（HR 1．389，95％ CI 1．017～1．896，P＝0．039）是影响乙肝背景小 HCC RFA术后无瘤生存时间的独立危险因素。结论：原发性 HCC RFA 术前血清 HBeAg水平与术后肿瘤复发密切相关，是原发性 HCC RFA术后复发的独立危险因素。
作者：周颖婷；谢晓莺；干育红；葛宁灵；陈漪；任正刚；张岚 刊期： 2016年第06期
缺血预适应（ischemic preconditioning ，IPC）是指通过1次或反复多次短暂、低强度的缺血预处理能减轻和抵抗随后长时间的缺血、缺氧造成的组织损伤。前期研究集中于血流丰富、易受缺血损伤的器官，如心、脑、肾。近年来对模型构建、机制研究、临床应用都作了进一步的深入研究。本研究对缺血预适应研究进展及其在肾脏中的应用前景作一综述。
作者：高帅；郭义峰 刊期： 2016年第06期
目的：探讨多发性硬化（multiple sclerosis ，MS）患者外周静脉血血清钙结合蛋白复合物（S100A8／A9）、Toll‐样受体4（Toll‐like receptor 4，TLR4）和基质金属酶蛋白2（matrix metalloproteinase‐2，MMP‐2）表达水平的变化。方法：选取MS患者16例作为MS组，健康体检者16例作为对照组。采用蛋白芯片检测法对血清样本进行检测，定量分析血清S100A8／A9、TLR4和MMP‐2表达水平的变化。结果：MS组血清S100A8／A9、TLR4和MMP‐2水平均高于对照组（P＜0．01）；MS组患者血清中上述3个指标具有明显相关性（P＜0．05）。结论：MS患者血清S100A8／A9、TLR4和MMP‐2表达上调，联合检测三者可能有助于临床MS疾病活动状态的判断。
作者：刘大进；吴明凤；余浩；张振中；马丽；姚瑞芹 刊期： 2016年第06期
肺肉瘤样癌（pulmonary sarcomatoid carcinoma ， PSC ）是一种少见的肺癌，属于非小细胞肺癌（nonsmall‐cell lung cancer ，NSCLC ）的一种类型。本研究对2003年1月至2015年12月在复旦大学附属中山医院治疗的11例PSC患者的临床资料进行回顾性分析，旨在提高临床对PSC的诊治水平。
作者：唐利明；王健 刊期： 2016年第06期
目的：探讨微小RNA（microRNA）在叉头转录因子M1（Fox M1）激活非小细胞肺癌（non‐small cell lung cancer ， NSCLC）细胞上皮向间质转化（epithelial‐mesenehymal transition ，EMT）中的作用。方法：将 Fox M1过表达质粒，Fox M1‐shRNA ，miR‐539、miR‐485‐5p模拟物及其抑制物转染至人 NSCLC细胞株中，应用Western印迹和real‐time PCR检测细胞株中Fox M1蛋白和mRNA及miR‐539、miR‐485‐5p的表达。同时应用CCK‐8和细胞迁移实验观察 Fox M1、miR‐539和 miR‐485‐5p对NSCLC细胞的增殖和侵袭功能的影响。应用荧光素酶报告基因实验检测miR‐539和miR‐485‐5p与EM T调控蛋白ZEB1和Snail1的关系。结果：Fox M1过表达下调NSCLC细胞中miR‐539、miR‐485‐5p ，转染Fox M1‐shRNA后NSCLC细胞中miR‐539、miR‐485‐5p升高。MiR‐539和miR‐485‐5p抑制Fox M1对NSCLC细胞增殖和侵袭的促进作用。NSCLC细胞中miR‐539对EM T调控蛋白ZEB1，miR‐485‐5p对EM T调控蛋白Snail1的表达有抑制作用。结论：miR‐539和miR‐485‐5p能抑制NSCLC细胞中Fox M1‐EM T通路，从而影响NSCLC细胞的增殖和侵袭，抑制NSCLC的远处转移。
作者：吴艳；邹黎菲；惠复新；汪家坤 刊期： 2016年第06期
目的：通过研究多疣壁虎纤维连接蛋白（fibronectin ，FN ）在多疣壁虎断尾再生过程中的表达变化及其对 Gsn3增殖、迁移和细胞突起生长的影响，初步探讨FN在脊髓再生中的作用及可能机制。方法：应用简并PCR技术从多疣壁虎组织中获得FN的一段特异性EST序列。采用实时定量聚合酶链式反应（real‐time quantitative polymerase chain reation ，qRT‐PCR）技术检测壁虎断尾损伤脊髓中 FN mRNA的变化。用体外人源 FN蛋白培养壁虎少突胶质细胞系Gsn3细胞，DiI染色观察FN对Gsn3细胞形态及增殖的影响；Transwell技术检测FN对Gsn3细胞迁移的影响。结果：在壁虎断尾损伤后再生脊髓远侧端，FN mRNA表达急剧上调，在断尾后1 d表达高，随着时间延长逐渐下降。在体外，人源FN促进壁虎Gsn3细胞增殖和迁移，但不能使细胞突起伸长。结论：FN可能通过促进少突胶质细胞的增殖和迁移参与壁虎断尾后脊髓的再生。
作者：宋红花；王勇军；吴尤佳；孙宝兰 刊期： 2016年第06期
目的：探讨短程大剂量山莨菪碱联用地塞米松治疗危重型多发伤患者的临床效果，并阐述作用机制。方法：临床纳入危重型多发伤患者70例，根据随机数字表法分为研究组与对照组。研究组给予山莨菪碱联合地塞米松，对照组给予门冬氨酸钾镁联合地塞米松。观察两组患者临床疗效，同时对比治疗前后两组患者肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor ，TNF）、脂质过氧化物（lipid hydroperoxide ，LPO）水平。此外，观察两组患者治疗前后肝肾功能等安全性指标的变化。结果：研究组病死率为11．43％，对照组病死率为22．86％，差异有统计学意义（ P＜0．05）；但治疗后，研究组血 T N F、L PO水平分别为（77．02±12．77）μmol／L、（2．94±0．72）μmol／L ，而对照组血TNF、LPO水平分别为（112．46±15．91）μmol／L、（5．03±1．03）μmol／L ，差异均有统计学意义（P＜0．05）；治疗前后，两组患者肝肾功能等指标水平差异均无明显变化，差异无统计学意义。结论：短程大剂量山莨菪碱联用地塞米松能够显著降低危重型多发伤患者的死亡率，且应用安全可靠，其作用机制可能在于抑制机体TNF、LPO水平。
作者：陈正钢 刊期： 2016年第06期
目的：探讨大肠癌肝转移患者血清相关癌基因甲基化水平的变化。方法：选择2011年9月—2013年12月因原发性大肠癌入院伴或不伴肝转移患者各32例，分别作为试验组A和试验组B。所有患者在入院之前均未进行化疗或放疗。另选择20例健康体检者作为对照组。提取研究对象血清中DNA ，采用甲基化特异性 PCR法检测 E‐cad、ID4、ESR1、APC或HACE基因甲基化异常。结果：试验组A检测出19例E‐cad、ID4、ESR1、APC或HACE甲基化异常；试验组B检测出10例E‐cad、ID4、ESR1、APC或HACE甲基化异常；对照组未检测出E‐cad、ID4、ESR1、APC或 HACE甲基化异常。3组间差异有统计学意义（P＜0．01）。结论：血清 E‐cad、ID4、ESR1、APC和 HACE基因甲基化状态联合检测有利于大肠癌肝转移的临床诊治。
作者：齐翀；郝总；洪亮；殷庆章 刊期： 2016年第06期
输血是现代医疗中重要的救治手段之一，正确的血型鉴定在输血工作中有极其重要的意义。ABO血型有多个亚型［1‐2］。若血清学显示 ABO血型正反定型不符及抗原性减弱，很容易造成忽视和漏检，给临床血型鉴定、交叉配血及器官移植等带来极大的困扰，给临床输血带来危险。近我们在临床送检样本中发现了1例正反定型不符的样本，并对其进一步做血清学以及基因测序分析，终确定为Bx亚型，现报告如下。
作者：乔郑磊；戎瑞明；吴擘颋；陆琼；蒋密 刊期： 2016年第06期
目的：探讨全程优化护理在严重创伤患者急救中的临床价值。方法：选择2015年3月至2016年2月南通大学附属医院急诊收治的44例严重创伤患者为研究对象，随机分为观察组和对照组，各22例。观察组患者采用全程优化护理，对照组接受常规急救护理，两组患者排除基础性疾病，对比两组患者的护理效果。结果：观察组患者住院时间短于对照组[（10．4±4．1） d vs （20．7±6．6） d]，差异有统计学意义（P＜0．05）；观察组患者和家属满意度优于对照组（100％ vs 76．5％）。结论：全程优化护理按照流程进行急救，有利于构建快捷、高效的救治链，提高严重创伤患者的救治效果。
作者：姜丽娟；张学梅；陈小燕；严海霞；朱玉琴 刊期： 2016年第06期
中国临床医学杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：复旦大学附属中山医院
