学术投稿

多疣壁虎纤维连接蛋白在壁虎脊髓断尾再生中的表达变化及作用

宋红花;王勇军;吴尤佳;孙宝兰

关键词:纤维连接蛋白, 再生, Gsn3细胞, 增殖, 迁移
摘要:目的:通过研究多疣壁虎纤维连接蛋白(fibronectin ,FN )在多疣壁虎断尾再生过程中的表达变化及其对 Gsn3增殖、迁移和细胞突起生长的影响,初步探讨FN在脊髓再生中的作用及可能机制。方法:应用简并PCR技术从多疣壁虎组织中获得FN的一段特异性EST序列。采用实时定量聚合酶链式反应(real‐time quantitative polymerase chain reation ,qRT‐PCR)技术检测壁虎断尾损伤脊髓中 FN mRNA的变化。用体外人源 FN蛋白培养壁虎少突胶质细胞系Gsn3细胞,DiI染色观察FN对Gsn3细胞形态及增殖的影响;Transwell技术检测FN对Gsn3细胞迁移的影响。结果:在壁虎断尾损伤后再生脊髓远侧端,FN mRNA表达急剧上调,在断尾后1 d表达高,随着时间延长逐渐下降。在体外,人源FN促进壁虎Gsn3细胞增殖和迁移,但不能使细胞突起伸长。结论:FN可能通过促进少突胶质细胞的增殖和迁移参与壁虎断尾后脊髓的再生。
中国临床医学杂志相关文献
  • 术后早期认知功能障碍患者外周血血管内皮生长因子水平的变化

    目的:探讨气管插管全麻手术后患者术后认知功能障碍(postoperative cognitive dysfunction ,POCD)与外周血中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor ,VEGF)水平变化的相关性。方法:选择老年骨科手术患者,年龄≥65岁,无心脑血管疾病和精神类药物使用史。术前1 d和术后2 h分别采用简易精神状态检查表(mini‐mental state examination , MMSE)评分,明确患者的认知功能情况。实验分为两组:POCD组20例,对照组22例。分别于麻醉诱导前10 min、术中1 h、术后2 h和术后1 d采集外周血,检测VEGF水平。结果:两组患者的一般情况无明显差异。与术前相比,POCD组术后2 h的MMSE评分明显降低(P<0.001),而对照组差异不明显。与对照组相比,术后2 h时POCD组的VEGF水平明显升高(P<0.01);而在其余时间点POCD组与对照组间VEGF差异无统计学意义。结论:骨科老年患者全麻手术后2 h POCD的发生与术后2 h外周血中VEGF表达水平升高相关。

    作者:李星星;李元海 刊期: 2016年第06期

  • 斜仰卧位经皮肾镜取石术治疗上尿路结石临床疗效分析

    目的:评价斜仰卧位经皮肾镜取石术(percutaneous nephrolithotomy ,PNL )治疗上尿路结石的疗效和安全性。方法:回顾性分析2014年1月至2015年12月常熟市第二人民医院94例斜仰卧位行PNL的上尿路结石患者的临床资料,分析患者术后结石残留、出血、感染情况。结果:94例患者均顺利完成手术。术后一期清除结石90例,二期清除结石4例;需输血患者5例,其中保守治疗无效行肾动脉数字减影血管造影(digital subtraction angiography ,DSA)栓塞术止血1例;尿脓毒血症8例,经抗感染治愈;无败血症休克病例。随访2个月~2年,患者均健在,无结石复发需二次手术患者。结论:斜仰卧位PNL一期结石清除率较高,并发症可控,对于上尿路结石的治疗安全、有效。

    作者:付振宇;孙利国;马俊;张鸽;张杰;陈永昌 刊期: 2016年第06期

  • 无脑压板技术在自发性脑内出血手术中的应用

    目的:评估自发性脑内出血手术中应用无脑压板技术的安全性和有效性。方法:回顾分析2013年1月至2015年12月56例采用无脑压板技术治疗自发性脑内出血患者的临床资料,并与同期59例采用固定脑压板技术治疗的患者进行比较。观察两组患者脑牵拉伤发生率、血肿清除率、再出血率、手术时间、90 d改良Rankin评分、病死率。结果:无脑压板组所有手术均未使用脑压板而成功完成手术(完成率100%)。两组患者的血肿清除率、再出血率、手术时间和病死率差异均无统计学意义。无脑压板组脑牵拉伤发生率明显低于固定脑压板组( P<0.01)。无脑压板组90 d m RS评分明显优于固定脑压板组。结论:在自发性脑内出血患者手术中,无脑压板技术能减少脑压板导致的脑牵拉伤,改善患者预后。

    作者:陈骅;林忠;张健;吴有志;廖萍;吴鸣;刘振;史岩;罗良生 刊期: 2016年第06期

  • 葛根素在卵巢早衰患者中的免疫调节作用

    目的:探讨葛根素(Puerarin)对卵巢早衰(premature ovarian failure ,POF)患者的免疫调节机制。方法:随机选取抗卵巢抗体(AoAb)阳性的POF患者40例,采用葛根素‐安宫黄体酮序贯治疗。在治疗前和治疗第12个周期采用Kupperman评分法评价该方法的临床疗效;并检测患者AoAb ,CD3+、CD4+、CD8+ T淋巴细胞,CD4+/CD8+值,CD19+B淋巴细胞,抗核抗体(ANA)等指标。统计治疗过程中不良反应的发生情况。结果:治疗后患者的Kupperman评分、ANA转阴率、AoAb转阴率和AoAb浓度降低(P<0.05)。治疗后CD8+ T细胞数明显增加;而CD3+、CD4+ T淋巴细胞,CD4+/CD8+比值,CD19+B淋巴细胞数明显减少或降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。Kupperman评分改变与 AoAb ,CD3+、CD4+ T 淋巴细胞数, CD19+B淋巴细胞数,ANA变化正相关(P<0.05);Kupperman评分与CD8+ T细胞计数负相关(P<0.05)。结论:葛根素‐安宫黄体酮序贯疗法可能通过调节CD3+、CD4+、CD8+ T淋巴细胞功能来调节机体免疫功能,通过抑制CD19+B淋巴细胞的增殖及ANA、AoAb等的分泌来消除POF的免疫性损伤,从而实现卵巢的自我修复和功能恢复。

    作者:张金慧;杜洪灵;周琼青 刊期: 2016年第06期

  • 短程大剂量山莨菪碱联用地塞米松治疗危重型多发伤患者效果观察

    目的:探讨短程大剂量山莨菪碱联用地塞米松治疗危重型多发伤患者的临床效果,并阐述作用机制。方法:临床纳入危重型多发伤患者70例,根据随机数字表法分为研究组与对照组。研究组给予山莨菪碱联合地塞米松,对照组给予门冬氨酸钾镁联合地塞米松。观察两组患者临床疗效,同时对比治疗前后两组患者肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor ,TNF)、脂质过氧化物(lipid hydroperoxide ,LPO)水平。此外,观察两组患者治疗前后肝肾功能等安全性指标的变化。结果:研究组病死率为11.43%,对照组病死率为22.86%,差异有统计学意义( P<0.05);但治疗后,研究组血 T N F、L PO水平分别为(77.02±12.77)μmol/L、(2.94±0.72)μmol/L ,而对照组血TNF、LPO水平分别为(112.46±15.91)μmol/L、(5.03±1.03)μmol/L ,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗前后,两组患者肝肾功能等指标水平差异均无明显变化,差异无统计学意义。结论:短程大剂量山莨菪碱联用地塞米松能够显著降低危重型多发伤患者的死亡率,且应用安全可靠,其作用机制可能在于抑制机体TNF、LPO水平。

    作者:陈正钢 刊期: 2016年第06期

  • 大肠癌肝转移患者血清中相关癌基因甲基化水平的检测

    目的:探讨大肠癌肝转移患者血清相关癌基因甲基化水平的变化。方法:选择2011年9月—2013年12月因原发性大肠癌入院伴或不伴肝转移患者各32例,分别作为试验组A和试验组B。所有患者在入院之前均未进行化疗或放疗。另选择20例健康体检者作为对照组。提取研究对象血清中DNA ,采用甲基化特异性 PCR法检测 E‐cad、ID4、ESR1、APC或HACE基因甲基化异常。结果:试验组A检测出19例E‐cad、ID4、ESR1、APC或HACE甲基化异常;试验组B检测出10例E‐cad、ID4、ESR1、APC或HACE甲基化异常;对照组未检测出E‐cad、ID4、ESR1、APC或 HACE甲基化异常。3组间差异有统计学意义(P<0.01)。结论:血清 E‐cad、ID4、ESR1、APC和 HACE基因甲基化状态联合检测有利于大肠癌肝转移的临床诊治。

    作者:齐翀;郝总;洪亮;殷庆章 刊期: 2016年第06期

  • 肺癌疼痛患者盐酸羟考酮缓释片依从性调查与分析

    目的:调查肺癌疼痛患者对盐酸羟考酮缓释片服用依从性的现况,分析盐酸羟考酮缓释片依从性不足的原因。方法:采用整群抽样的方法,对2015年1月至6月在病房服用盐酸羟考酮缓释片的72例肺癌患者进行调查,服药共计1392次。应用数字评定量表(numerical rating scale ,NRS)、自行设计的肺癌疼痛患者盐酸羟考酮缓释片服用依从性量表,记录患者疼痛评分、疼痛部位、服药天数、服药次数、服药依从性差时疼痛评分及原因。结果:患者对盐酸羟考酮缓释片服用依从性差,依从性差的患者42例,占58.33%;依从性差的服药次数为780次,占56.03%。患者存在疼痛时服药,无疼痛时不服药的行为;服药依从性差与患者担心盐酸羟考酮缓释片成瘾性和耐药性、自认为病情未达到服用盐酸羟考酮缓释片的程度以及药物价格昂贵等因素有关。结论:肺癌疼痛患者对盐酸羟考酮缓释片服用依从性有待提高,可从患者对盐酸羟考酮缓释片认知的误区、患者对自身疾病的认识程度等方面进行干预,提高患者服药的依从性。

    作者:曹燕华;姜艳依;张燕;赵娟;侯黎莉;李玉梅 刊期: 2016年第06期

  • 原发性肝细胞肝癌中核不均一核糖核蛋白A1的定位及临床意义

    目的:观察核不均一核糖核蛋白 A1(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A 1,hnRNP A1)在原发性肝细胞肝癌(肝癌)中的定位,初步分析该蛋白定位与肝癌患者临床病理特征之间的相关性及其预测患者术后复发转移的临床价值。方法:由323例肝癌患者肝癌组织构成组织芯片集,采用免疫组织化学染色技术,观察肝组织中 hnRN P A1的定位,分析hnRNP A1定位与临床病理特征及患者预后的相关性。结果:hnRNP A1蛋白在正常肝细胞核中表达呈弱阳性,在肝癌组织的细胞核和细胞质中均有不同程度的阳性表达。hnRNP A1在肝癌细胞质中定位的肝癌患者的术后预后差。结论:hnRNP A1蛋白是较好的独立预后指标,其能准确预测肝癌患者术后的预后。

    作者:周正君;王晓怡;陈二宝;胡志强;周少来;周俭;樊嘉;代智 刊期: 2016年第06期

  • 第三代流式细胞分选仪及96孔板分选单个细胞的方法及参数优化

    目的:用第三代流式细胞分选仪比较不同直径喷嘴分选的单细胞的得率及细胞活性,进一步完善单细胞微孔板分选的参数设置及条件优化。方法:用FACSAria Ⅲ流式细胞分选仪及96孔板对Raji细胞、A549、DT 40、RAW 264.7细胞系进行单细胞分选,分别采用70μm 、100μm和130μm喷嘴分选,比较分选后单细胞得率及克隆形成率。结果:在单细胞分选模式下,用3种不同直径喷嘴及96孔板分选后的单细胞得率为86.55%~93.44%,即96孔板有单细胞的孔数为84~92孔;分选后的单个细胞培养7 d后,经70μm 、100μm 和130μm喷嘴分选的单细胞克隆孔数分别为31~52孔、49~70孔、58~78孔。结论:进行单细胞微孔板分选时,在精确调节及优化实验参数的前提下,为了保证单细胞的活性,应优先选择100μm或130μm喷嘴。

    作者:闵智慧;程韵枫 刊期: 2016年第06期

  • 安徽汉族人群血小板膜糖蛋白Ⅱb基因多态性与冠心病的相关性

    近年来,我国冠心病(coronary heart disease , CHD)的发病率呈上升趋势,严重威胁人们的健康。血栓形成易导致冠状动脉闭塞,引起心肌梗死、心绞痛,是CHD 患者病情加重的主要始发因素[1]。血小板膜糖蛋白(glycoprotein ,GP)覆盖在血小板质膜表面,在血小板活化和血栓形成中发挥关键作用[2‐3]。目前已发现 GP的5种血小板膜受体;GP与受体在一定条件下形成复合体,调节血小板性血栓的形成,其中 GP Ⅱ b HPA‐3基因具有重要作用[4]。HPA‐3基因长17.2 kb ,含30个外显子,编码1039个氨基酸,其中第26外显子上存在I843S多态性,形成 HPA‐3血型[5]。因此,本研究对安徽汉族人群GPⅡb HPA‐3基因多态性进行研究,探讨其与冠心病发生的相关性,为后续研究奠定基础。

    作者:张志;刘萍 刊期: 2016年第06期

  • 胃癌组织miR-155的表达及其与临床预后的关系

    目的:探讨胃癌组织miR‐155的表达水平及其临床意义。方法:收集手术切除的胃癌标本116例,采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(qRT‐PCR)检测癌及癌旁组织 miR‐155的表达水平,分析其与临床病理的关系及对临床预后的影响。采用免疫组织化学法检测癌组织中 PT EN的表达,分析其表达与miR‐155的相关性。结果:胃癌组织miR‐155表达高于配对癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.001);miR‐155高表达与肿瘤 TNM 分期、侵犯层次、淋巴结转移有关(P<0.05)。K‐M曲线分析表明,miR‐155高表达预示着较低的3年无病进展率( P<0.001)及总生存率( P<0.001)。PT EN 表达与miR‐155负相关,miR‐155高表达患者PT EN表达低( P<0.001)。结论:miR‐155与胃癌发生发展密切相关,可能是胃癌潜在的临床诊断及预后指标。

    作者:周明;马建明 刊期: 2016年第06期

  • 微小RNA在叉头转录因子M1激活非小细胞肺癌上皮向间质转化中的作用

    目的:探讨微小RNA(microRNA)在叉头转录因子M1(Fox M1)激活非小细胞肺癌(non‐small cell lung cancer , NSCLC)细胞上皮向间质转化(epithelial‐mesenehymal transition ,EMT)中的作用。方法:将 Fox M1过表达质粒,Fox M1‐shRNA ,miR‐539、miR‐485‐5p模拟物及其抑制物转染至人 NSCLC细胞株中,应用Western印迹和real‐time PCR检测细胞株中Fox M1蛋白和mRNA及miR‐539、miR‐485‐5p的表达。同时应用CCK‐8和细胞迁移实验观察 Fox M1、miR‐539和 miR‐485‐5p对NSCLC细胞的增殖和侵袭功能的影响。应用荧光素酶报告基因实验检测miR‐539和miR‐485‐5p与EM T调控蛋白ZEB1和Snail1的关系。结果:Fox M1过表达下调NSCLC细胞中miR‐539、miR‐485‐5p ,转染Fox M1‐shRNA后NSCLC细胞中miR‐539、miR‐485‐5p升高。MiR‐539和miR‐485‐5p抑制Fox M1对NSCLC细胞增殖和侵袭的促进作用。NSCLC细胞中miR‐539对EM T调控蛋白ZEB1,miR‐485‐5p对EM T调控蛋白Snail1的表达有抑制作用。结论:miR‐539和miR‐485‐5p能抑制NSCLC细胞中Fox M1‐EM T通路,从而影响NSCLC细胞的增殖和侵袭,抑制NSCLC的远处转移。

    作者:吴艳;邹黎菲;惠复新;汪家坤 刊期: 2016年第06期

  • IGRT技术在肺癌SB RT治疗靶区位置误差测定中的应用

    目的:探讨图像引导放射治疗(image guided radiation therapy ,IGRT )技术在测定并校正肺部恶性肿瘤体部立体定向放射治疗(stereotactic body radiation therapy ,SBRT )过程中靶区位置误差的意义。方法:选择复旦大学附属肿瘤医院收治的14例肺部恶性肿瘤并接受SBRT的患者。每次治疗前后均进行千伏级锥形束 CT (kV‐CBCT )扫描,与计划CT图像进行在线配准,校正误差后进行治疗。治疗后再次进行CBCT扫描并配准。分别记录治疗前后靶区位置误差。根据临床靶区(CTV)‐计划靶区(PTV)外放公式MPTV(外放)=2.5Σ+0.7σ计算PTV外扩大小。结果:治疗前靶区位置左右、头脚、腹背方向误差大值分别为10.0mm、16.9mm、8.7mm,误差平均值分别为(2.4±2.8)mm、(3.4±4.6)mm、(2.9±3.4)mm。在线校正并治疗后,靶区位置左右、头脚、腹背方向的误差大值分别为7.6mm、4.6mm、7.0mm,误差平均值分别为(2.1±2.0)mm、(1.5±1.6) mm、(1.7±2.0) mm。无图像引导PTV外扩大小为左右7.96 mm、头脚11.72 mm、腹背9.63 mm ,有图像引导并在线校正PT V外扩大小为左右6.65 mm、头脚4.87 mm、腹背5.65 mm。结论:IGRT技术可即时校正SBRT治疗前由摆位引起的靶区位置误差,并测定治疗过程中的靶区位置移动,能提高治疗精度,并有助于PTV外扩的制定。

    作者:王昌民;胡伟刚;彭佳元;蔡旭伟;傅小龙;许青 刊期: 2016年第06期

  • 肺肉瘤样癌临床诊治分析

    肺肉瘤样癌(pulmonary sarcomatoid carcinoma , PSC )是一种少见的肺癌,属于非小细胞肺癌(nonsmall‐cell lung cancer ,NSCLC )的一种类型。本研究对2003年1月至2015年12月在复旦大学附属中山医院治疗的11例PSC患者的临床资料进行回顾性分析,旨在提高临床对PSC的诊治水平。

    作者:唐利明;王健 刊期: 2016年第06期

  • 鼻咽癌放化疗过程中的不良反应

    鼻咽癌是我国南方地区高发的头颈肿瘤之一。由于其病理类型多为低分化鳞癌,因此调强放疗联合化疗取得了较好的疗效。同时放化疗也会对机体产生严重的急性和迟发性毒性反应,而严重的不良反应会对患者造成生理和心理上的创伤,亦会导致治疗中断甚至失败。重视不良反应并及时进行干预,对提高患者依从性及改善预后具有重要意义。本文就鼻咽癌患者放化疗过程中的不良反应和影响因素进行综述。

    作者:李骥;王培林;黄新生 刊期: 2016年第06期

  • 基于SOX9的生物学研究及其在肝癌干细胞中的研究进展

    肿瘤干细胞是指在肿瘤组织中高度恶性的细胞亚群,具有高侵袭性、易转移性、多耐药性特点,与肿瘤复发密切相关。因此,肿瘤干细胞可能成为未来肿瘤治疗的靶点。目前发现的肿瘤干细胞标志物包括CD133、CD90、CD44等。SOX9(sex determining region Y box‐9)除了参与多个器官的生长发育外,还与组织纤维化及肿瘤的发生有着密切关系,尤其在多种肿瘤干细胞中高表达。SOX9亦在肝癌干细胞中高表达,并通过相关信号通路影响肝癌干细胞的自我更新、增殖以及耐药,因此成为肝癌潜在的预后判断指标和治疗靶点。

    作者:王孟超;黄罡;周伟平 刊期: 2016年第06期

  • 实时三维经食管超声心动图测定房间隔缺损大径的价值评估

    目的:探讨实时三维经食管超声心动图(real‐time three‐dimensional transesophageal echocardiography ,RT3D‐TEE)在测量房间隔缺损(atrial septal defect ,ASD)大径中的应用价值。方法:前瞻性分析2011年1月至2014年6月单中心筛查的继发孔中央型单孔 ASD并接受封堵术患者的临床资料。比较 RT3D‐TEE、二维经胸超声心动图(two‐dimensional transthoracic echocardiography ,2D‐TTE)、二维经食管超声心动图(two‐dimensional transesophageal echocardiography ,2D‐TEE)测得的ASD大径,并将三者与封堵器释放后的实际腰部直径进行相关性分析。结果:共31例患者入选,经RT3D‐TEE[(21.81±8.57) mm]、2D‐TEE[(20.31±8.50) mm]、2D‐TTE[(23.08±10.89) mm]测得的缺损大径与封堵器释放后实际腰部直径[(20.99±8.15) mm]比较,差异均无统计学意义。经RT3D‐TEE、2D‐TEE、2D‐TTE测得的缺损大径与实际腰部直径均高度相关,相关系数(r值)分别为0.902、0.981、0.897(P=0.000)。结论:RT3D‐TEE在测定ASD大径方面较二维超声并无明显优势。

    作者:郭丽娜;吴卫华;马兰;陆静;宫霞;谢晓奕 刊期: 2016年第06期

  • 过表达锌指蛋白A20可抑制肺泡巨噬细胞炎症反应

    目的:通过建立A20过表达肺泡巨噬细胞株,研究A20对肺泡巨噬细胞炎症反应的影响及调控机制。方法:构建携带A20基因的慢病毒载体,转染大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383),筛选出稳定过表达A20基因的细胞株并行体外培养。向培养基中加入脂多糖(LPS ,1μg/mL)进行干预,并于刺激后0.5、1、2、4 h收集上清液及细胞。ELISA法测定上清液中细胞因子(TNF‐α、IL‐1β)及核因子κB(NF‐κB)活性。Western印迹方法检测A20蛋白及核内p65含量。实时荧光定量PCR法测定A20 mRNA含量。结果:LPS刺激后,A20过表达组(A20组)及正常对照组(VEC组)A20蛋白及mRNA含量都升高,并于1 h达高峰,之后逐渐下降;且A20组较 VEC组 A20水平明显升高(P<0.05)。与 VEC组相比,A20组培养上清液中细胞因子(TNF‐α、IL‐1β)水平明显降低(P<0.05);NF‐κB DNA结合活性及核内p65含量也降低(P<0.05)。结论:A20能够抑制肺泡巨噬细胞NF‐κB活性及TNF‐α、IL‐1β分泌,进而抑制肺泡巨噬细胞炎症反应活性。

    作者:朱晓丹;王颖;毕晶;童琳;刘洁;宋元林;白春学 刊期: 2016年第06期

  • 优化营养指导模式对改善中晚期慢性肾脏病患者营养状况的作用

    目的:探讨以慢性肾脏病(CKD)一体化门诊为平台的优化营养指导模式对提高非透析患者低蛋白饮食依从性并改善其营养状况的作用。方法:将196例CKD 3B~4期非透析CKD患者随机分为优化模式组和传统模式组。两组均给予饮食蛋白质0.6 g/(kg · d)和30~35 kcal/(kg · d)的营养处方,接受两种不同模式的营养管理。随访12个月,每3个月通过MDRD公式估算肾小球滤过率(eGFR);运用人体测量、生化营养指标和主观综合营养评估法(SGA)评估营养状况。结果:两组患者eGFR的变化差异无统计学意义。与传统模式组相比,优化模式组低蛋白饮食依从性更高,每日饮食蛋白质摄入量较低,饮食热量较高,血清白蛋白水平较高,体质量增加,血尿素氮和甲状旁腺激素下降,SGA评估的营养状况改善,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:优化营养指导模式有助于提高中晚期非透析 CKD患者对低蛋白饮食的依从性,改善其营养状况,且安全性良好。

    作者:严艳;简桂花;张起铭;纪星星;程东生;陈玉强;汪年松 刊期: 2016年第06期

  • 《中国临床医学》2016年第23卷总目次

    作者: 刊期: 2016年第06期

中国临床医学杂志

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主管:中华人民共和国教育部

主办:复旦大学附属中山医院