学术投稿

HPLC-MS测定芫花炮制前后5种成分含量变化

李林;关洪月;殷放宙;陆兔林;林家红;蔡宝昌

关键词:芫花, 含量, 炮制, 液质联用
摘要:目的:建立HPLC-MS同时测定芫花中木犀草素、芹菜素、羟基芫花素、芫花素以及芫花酯甲5种化学成分含量的方法,分析炮制前后含量的变化.方法:采用液质联用法,质谱采用大气压电喷雾离子源,选择性负离子模式监测.色谱柱为Agilent Zorbax C18(2.1 mm×50 mm,1.8 μm),流动相为0.05%甲酸乙腈(A)-0.05%甲酸水(B),流速0.6 mL· min-,柱温30℃,进样量2μL.结果:芫花炮制后5种毒效成分均发生了一定程度的变化.3种黄酮类有效成分木犀草素、羟基芫花素以及芫花素炮制后含量升高,二萜原酸酯甲代表成分芜花酯甲炮制后含量降低,黄酮类成分芹菜素经炮制后含量也发生了下降.结论:该方法简单、灵敏、准确,为芫花及其炮制品的质量评价提供了有效的方法.
中国实验方剂学杂志相关文献
  • 防己黄芪颗粒的真空带式干燥工艺优选

    目的:优选防己黄芪颗粒的真空带式干燥工艺条件.方法:采用HPLC测定粉防己碱、防己诺林碱及黄芪甲苷含量.以干燥物含水量、粉防己碱和防己诺林碱的总含量、黄芪甲苷含量的综合评分为指标,通过正交试验考察干燥温度、履带速度、进料速度对防己黄芪颗粒真空带式干燥工艺的影响.结果:佳真空带式干燥工艺条件为3个干燥区的温度依次为80,85,80℃,履带速度20 cm· min-1,进料速度12 L·h-1;含水量4.58%,粉防己碱和防己诺林碱总提取量11.97 mg·g-1,黄芪甲苷提取量0.54 mg·g-1.结论:优选的干燥工艺具有干燥速率高、产品质量好等优点,符合GMP要求,为防己黄芪颗粒的工业化生产提供实验依据.

    作者:张建岭;张路;李士栋;张淹;王林戈 刊期: 2013年第24期

  • 中药逆转肿瘤细胞多药耐药研究进展

    阐述了肿瘤多药耐药(MDR)是临床化疗失败的主要原因之一,己成为恶性肿瘤化疗过程急需解决的问题.中药有毒性小、安全有效、多靶点等优势,在逆转肿瘤MDR的研究中正受到越来越广泛的关注.中药通过作用于介导MDR形成的膜转运系统、药物代谢系统、促进肿瘤细胞凋亡等机制,对多种肿瘤的MDR具有逆转作用.如何有效地从浩淼庞大的中药资源库中快速筛选并定位到具有逆转MDR活性的分子仍是目前中药研发亟待解决的瓶颈问题之一.建立科学合理的抗肿瘤药物筛选模型和高效可靠的方法和系统,能够满足现代医学的科学阐述要求,又能兼顾中医药本身的整体观念和辨证论治的思想,还需要大量艰苦的科学工作.

    作者:张芳;徐春蕾;邱郑 刊期: 2013年第24期

  • 吴茱萸指纹图谱及化学模式识别研究

    目的:采用HPLC梯度洗脱法研究34批吴茱萸药材样品的色谱图,对不同产地、不同品种的吴茱萸中药材采用指纹图谱相似度评价及聚类分析和主成分分析等化学模式识别技术进行研究,以期为吴茱萸中药材品种鉴别与品质评控提供参考.方法:色谱条件为Ultimate XB-C18色谱柱(4.6 mm×150.0 mm,3μm),流动相乙腈-1%乙酸水溶液梯度洗脱,流速0.8 mL·min-1,检测波长245 nm,进样量10 μL,柱温25℃.结果:34批样品有11个共有峰,共有峰保留时间的RSD< 1%,峰面积的RSD比较大.各批次药材品质较为一致,化学成分组成及含量上均存在一定差异.聚类分析及主成分分析从化学成分上揭示了2010年版《中国药典》规定3种吴茱萸中药材种质的远近关系.结论:以指纹图谱数据为基础,将聚类分析与主成分分析结合起来不仅可以进行吴茱萸中药材的质量控制乃至品种鉴别,还可以为下一步制定新的吴茱萸质量控制模式提供参考依据.

    作者:曾金祥;魏娟;毕莹;张寿文;朱继孝;朱玉野;张忠立;罗光明 刊期: 2013年第24期

  • 气相色谱法测定人参皂苷Rg1中的有机溶剂残留量

    目的:建立气相色谱法测定人参皂苷Rg1中有机残留量的方法.方法:采用气相色谱法,FID检测器,DB-624(30m×0.32mm,0.25 μm),载气为氮气,柱温为恒温50℃,进样口温度200℃,检测器温度200℃,以水为溶剂配制对照溶液及供试品溶液.结果:在所考察的浓度范围内具有良好的线性,乙醇的检测限为1.0μg·L-1,精密度RSD< 1.0%.平均回收率为90% ~ 105%结论:经方法学验证,该检测方法简便灵敏,结果准确可靠,适用于人参皂苷Rg1原料药中有机溶剂残留量的检测.

    作者:张建民;张宇佳;相莉;陈少华;郑稳生;王锦玉 刊期: 2013年第24期

  • 密闭性中药复合敷料的提取工艺优选

    目的:优选密闭性中药复合敷料的提取工艺.方法:以人参皂苷Rg1,Rb1含量和浸膏得率为评价指标,通过单因素试验优选提取次数,利用正交试验考察乙醇体积分数、乙醇用量、提取时间对密闭性中药复合敷料提取工艺的影响.采用HPLC测定人参皂苷Rg1,Rb1含量,流动相水(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~10 min,81%A;10~38 min,81%~ 79% A;38 ~90min,79% ~66%A),检测波长203 nm.结果:各因素对提取工艺的影响顺序为乙醇体积分数>提取时间>乙醇用量.佳提取工艺条件为加8倍量70%乙醇提取2次,每次2h;平均浸膏得率25.45%,人参皂苷Rg1,Rb1平均质量浓度分别为0.46,0.37 g·L-1.结论:建立的含量测定方法准确、重复性好,优选的提取工艺稳定、合理、可行,为民间外伤验方的二次开发提供参考.

    作者:蔡文智;潘永毅;刘志刚;谢文鸿;黎莉莉;刘强;蔡保塔 刊期: 2013年第24期

  • 复方降脂胶囊对动脉粥样硬化大鼠血脂及炎性因子的影响

    目的:观察复方降脂胶囊(Fufang Jiangzhi capsule,FFJZ)对颈动脉内膜损伤后高脂诱导动脉粥样硬化(AS)大鼠血脂及炎症因子的影响.方法:SD大鼠50只,雌雄各半,右侧颈总动脉损伤、予高脂饮食、维生素D3肌肉注射复制动脉粥样硬化模型(AS).按体重随机分为模型组(生理盐水)、洛伐他汀组(7.48 mg·kg-1)、FFJZ高、中、低(按生药量计为53.34,26.67,13.33 g·kg-1)剂量组;另取10只正常大鼠作为空白组(生理盐水),予普通饲料饲养.每天灌胃1次,给药容积为10 mL·kg-1.给药12周后取血及右侧颈总动脉标本,检测血液中血脂及白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,并作病理组织切片,光镜下观察动脉壁变化情况.结果:造模12周后,模型组动物血液中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),IL-6,TNF-α的含量升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),IL-10的含量降低,与空白组比较具有显著性差异(P <0.05或P<0.01).与模型组比较,经FFJZ干预治疗可降低实验动物血液中TG,TC,LDL-C,IL-6,TNF-α的含量,升高血液中HDL-C,IL-10,的含量,并减少动脉管壁斑块的生成,降低内膜中泡沫细胞与脂质的沉积,减少AS斑块中巨噬细胞数量,与模型组比较具有显著性差异(P<0.05或P<0.01).结论:FFJZ可降低实验动物血液中脂质含量,减轻动脉血管内皮的损伤,抑制血管的炎性反应,可能是其抗动脉粥样硬化的机制之一.

    作者:周静;王晓宇;曾小兰;方泰惠 刊期: 2013年第24期

  • 铁包金根、茎特征图谱的研究

    目的:建立铁包金根、茎HPLC特征图谱,为该药材质量评价研究提供参考.方法:采用HPLC构建24批不同产地不同种类铁包金根、茎的特征图谱,通过聚类分析和主成分分析对特征图谱进行化学模式识别.结果:以11个共有峰为特征指纹信息构建HPLC特征图谱,9批细叶勾儿茶和多叶勾儿茶根为一类,12个细叶勾儿茶和多叶勾儿茶的茎和3个多叶勾儿茶的根聚为一类.结论:HPLC特征图谱的构建为铁包金根、茎的质量评价研究提供参考依据.

    作者:谢明容;周伟平;徐煜纯;董雷;严寒静;高晓霞 刊期: 2013年第24期

  • 补肾利湿法对急性痛风性关节炎大鼠VEGF表达水平的影响

    目的:观察补肾利湿法对痛风性关节炎大鼠血管内皮生长因子(VEGF)表达水平的影响,探讨补肾利湿法防治急性痛风性关节炎(GA)的作用机制.方法:将70只Wistar大鼠随机分为7组:空白组、模型组、中药对照组、西药对照组及中药低、中、高剂量组,每组10只.采用尿酸钠联合氧嗪酸钾诱导大鼠急性痛风性关节炎模型,应用ELISA法,分别检测各组大鼠血清VEGF的含量,并对关节滑膜组织进行病理组织学检查.结果:7组VEGF水平差异均有统计学意义(P<0.01),模型组VEGF含量明显高于空白组(P<0.01);中药对照组、西药对照组和中药低、中、高剂量组VEGF含量均较模型组低(P<0.01),其中,西药对照组和中药中剂量组效果更明显;中药中剂量组与中药对照组、中药低剂量组、中药高剂量组相比有显著性差异(P<0.01),但与西药对照组相比无显著性差异.结论:补肾利湿法处方可抑制急性痛风性关节炎大鼠VEGF的表达,对防治痛风性关节炎具有一定作用.

    作者:姜德友;刘爽;韩洁茹;解颖;陈飞;常佳怡;李富震;乔羽 刊期: 2013年第24期

  • 复方三七纳米颗粒对颅脑损伤大鼠血脑屏障和血清TNF-α和IL-6的影响

    目的:观察复方三七纳米颗粒对脑创伤后大鼠血脑屏障、肿瘤坏死因子-α(TN F-α)和白介素-6(IL-6)的影响作用.方法:用Feeney自由落体撞击法建立成年雄性大鼠脑创伤模型,96只实验动物随机分为空白对照组、创伤模型组、复方三七纳米颗粒低、高剂量组(0.6,2.4 g·kg-1),每组24只大鼠.第1,3,5天参照ZeaLonga法,对各组实验大鼠进行神经功能缺损评分;之后经腹主动脉穿刺取血,用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测量各组不同时间点大鼠(n=8)血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)含量的变化;之后处死大鼠,取造模损伤部位脑组织(约4 mm×4 mm×3 mm)称重计算脑组织含水量,观察用药后各时间点大鼠脑水肿情况.结果:与空白对照组比较,模型组神经功能缺损评分升高,脑组织含水量、TNF-α和IL-6含量均增加;与模型组比较,复方三七纳米颗粒干预组中神经功能缺损评分降低,脑组织含水量、TNF-α和IL-6含量均降低,并且随着剂量的增加上述变化显著(P<0.05).结论:复方三七纳米颗粒对大鼠脑创伤后有保护作用,与TNF-α的含量降低和IL-6含量增加有关.

    作者:王珠;赵雅宁;李建民;黄海玲;刘文倩 刊期: 2013年第24期

  • 蟾皮活性组分的分离与体外抗肿瘤活性考察

    目的:分离蟾皮活性组分并考察大孔树脂不同洗脱部位对肺癌细胞A549生长的抑制作用.方法:采用静态吸附-洗脱试验筛选大孔树脂型号,单因素试验优选蟾皮活性组分的大孔树脂纯化工艺.建立乙醇洗脱液中总生物碱和4种蟾毒二烯内酯类成分的含量测定方法,通过MTT试验测定不同洗脱部位对肺癌细胞A549的抑制率.结果:AB-8型大孔树脂对蟾皮总生物碱和4种二烯内酯类成分均具有较好的吸附分离性能,4个不同乙醇洗脱部位对肺癌细胞A549均表现出抑制作用,30%乙醇和70%乙醇洗脱液的细胞抑制率较高,IC50分别为1.83,2.23 mg·L-1.结论:大孔树脂可用于分离纯化蟾皮中活性组分,不同洗脱部位对肺癌细胞A549的抑制率呈现一定的浓度依赖性,30%乙醇和70%乙醇洗脱部位可作为蟾皮抗肿瘤制剂的重点有效组分.

    作者:曹伟;刘聪燕;陈彦;袁菱;王莹 刊期: 2013年第24期

  • 猫爪草化学成分的分离与结构鉴定

    目的:分离、鉴定猫爪草Ranunculus ternatus块根的化学成分.方法:采用Sephadex LH-20及硅胶等色谱技术进行分离,制备HPLC纯化,根据理化性质及NMR等波谱方法进行结构鉴定.结果:从猫爪草中分离得到了8个化合物,分别鉴定为:4-氧代-5-(O-β-D-葡萄糖基)-戊酸(1),正丁基β-D-吡喃果糖苷(2),腺苷(3),3-[(3-羟基)-(4-β-D-葡萄糖基)-苯基]-2-丙烯酸(4),5-羟甲基糠酸(5),3,4-二羟基苯甲醛(6),邻羟基苯甲酸(7),3,5-二甲氧基-4-羟基苯甲酸(8).结论:化合物1~3,7,8为首次从该属植物中分离得到.

    作者:邓可众;熊英;周斌;罗永明;李汉兴 刊期: 2013年第24期

  • “一测多评”法测定甘草中6种有效成分含量

    目的:采用“一测多评”法测定甘草中6种成分的含量.方法:采用HPLC测定甘草中6种成分的含量,流动相乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0~20 min,90%~68%B;20 ~ 45 min,68% ~ 30%B;45 ~ 75 min,30% ~ 5%B),检测波长(0 min,275 nm;32 min,250 nm;33.5 min,300 nm;34.5 min,360 nm;53 min,280 nm;55 min,270 nm;57.5 min,265 nm).以甘草酸为内标物,测定与甘草苷、甘草素、异甘草素、甘草次酸、甘草查尔酮A的相对校正因子,计算甘草中6种成分含量,并比较“一测多评”法的计算值与外标法实测值的相似度.结果:“一测多评”法和外标法测得的甘草苷、甘草素、异甘草素、甘草查尔酮A及甘草次酸的含量相似度均为0.999 9,“一测多评”法的计算值与外标法的实测值间无显著性差异.结论:建立的“一测多评”法适用于甘草中6种有效成分的含量测定,相对校正因子可信.

    作者:刘香南;李明珠;尚晓娜;宋平顺;赵建邦 刊期: 2013年第24期

  • 加味五子衍宗方抑制脂多糖诱导的BV-2小胶质细胞炎症反应及机制研究

    目的:研究加味五子衍宗方(MWP)对脂多糖(LPS)诱导的BV-2小胶质细胞炎症反应的抑制作用及潜在机制.方法:体外培养BV-2小胶质细胞系,用LPS(1 mg·L-1)诱导炎症模型,将细胞分为空白对照组,炎症模型组和MWP药物组,药物组MWP设置50,100,200 mg·L-13个质量浓度.LPS和药物处理细胞后分别检测各组细胞炎症因子一氧化氮(NO)的表达、诱导型一氧化氮合成酶(iNOS),环氧合酶-2(COX-2)的表达、核转录因子-κB(NF-κB)核转位以及还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶活性和活性氧(ROS)的表达.结果:MWP可剂量依赖性降低LPS激活的BV-2小胶质细胞内iNOS,COX-2的蛋白表达和NO的释放,抑制NF-κB的核转位,此外还可剂量依赖性降低NADPH氧化酶活性并明显降低ROS的产生.结论:MWP可有效抑制LPS诱导的BV-2小胶质细胞炎症反应,可能是通过抑制NF-κB信号通路介导的炎症反应以及NADPH氧化酶介导的氧化应激实现的.

    作者:宋芳娇;宋宜祥;曾克武;屠鹏飞;王学美 刊期: 2013年第24期

  • 基于中医传承辅助系统的痹证治疗方剂组方规律分析

    目的:基于中医传承辅助系统软件,挖掘《中医方剂大辞典》中收载的治疗痹证方剂组方规律.方法:收集《中医方剂大辞典》中主治痹证的方剂,录入中医传承辅助系统,采用软件集成的数据挖掘方法,分析痹证方剂的组方规律.结果:筛选出94个具有痹证典型症状的处方,并进行分析.确定处方中药物出现的频次,常用药对25个,核心组合40个,演化新处方9个.结论:明确《中医方剂大辞典》中治疗痹证方剂的组方规律.中医传承辅助系统可实现方剂数据的录入、管理、查询和分析,是一个有价值的中医药研究辅助工具.

    作者:韩锋;刘国伟;刘超;季旭明 刊期: 2013年第24期

  • 脱氢水飞蓟宾的溶解度及大鼠在体肠吸收特性考察

    目的:测定脱氢水飞蓟宾(DHS)的溶解度并探讨DHS在小肠的吸收动力学特征.方法:采用HPLC测定DHS含量,流动相甲醇-0.2%甲酸水溶液(60∶40),检测波长255 nm.应用大鼠在体肠循环模型考察DHS在大鼠十二指肠、空肠、回肠的吸收特性.结果:DHS于20,37℃振荡24h的溶解度分别为0.46,1.23 mg·L-1.DHS在十二指肠、空肠及回肠中单位时间吸收率(n=3,x-±s)分别为(17.81 ±6.37)%,(8.41±2.43)%,(12.95 ±5.06)%,吸收速率常数(Ka)依次为(0.176±0.069),(0.089 ±0.053),(0.158±0.058) h-1;DHS在十二指肠的Ka随药物质量浓度的增加基本保持不变.结论:温度对DHS溶解度存在一定影响.DHS在十二指肠、空肠、回肠均有吸收,在十二指肠段吸收量和Ka显著高于空肠段.DHS在小肠的吸收机制以被动扩散为主.

    作者:许颖;金雪锋;童珊珊;陈美;徐希明 刊期: 2013年第24期

  • 脑脉舒康胶囊对小鼠急性脑缺血模型的影响

    目的:探讨脑脉舒康胶囊(NMSKC)对小鼠脑缺血模型的影响.方法:采用昆明种小鼠,分为脑脉舒康胶囊组(4.0,2.0,1.0 g·kg-1)、模型对照组、阳性药(华佗再造丸2.67 g·kg-1,尼莫地平0.02 g·kg-1)对照组,各组连续灌胃9d,于第10天给药1h后,快速断头法制备小鼠急性全脑缺血模型,记录小鼠的喘息次数和喘息维持时间,取小鼠脑组织测定丙二醛(M DA)、乳酸(LD)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)的活力.结果:脑脉舒康胶囊可以明显增加断头小鼠的呼吸次数及延长呼吸持续时间,并可降低MDA和LD含量,提高SOD和LDH的活力.结论:脑脉舒康胶囊对小鼠脑缺血机体有一定的保护作用.

    作者:白明;刘丹丹;王灿;耿新生;苗明三 刊期: 2013年第24期

  • 正交试验优选蛇黄凝胶提取工艺

    目的:优选蛇黄凝胶的提取工艺.方法:采用L9(34)正交试验设计,以三羽新月蕨苷A、大黄素和干膏得率为评价指标,在单因素试验基础上,通过综合评分优选蛇黄凝胶的提取工艺.采用HPLC测定三羽新月蕨苷A、大黄素含量,流动相乙腈(A)-0.1%磷酸水(B)-水(C)梯度洗脱(0 ~ 40 min,10% ~ 70%A,10%B,80%~20% C),检测波长226 nm.结果:佳提取工艺条件为加14倍量70%乙醇提取3次,每次30 min;大黄素、三羽新月蕨苷A平均提取量依次为0.37,0.76 mg·g-1.结论:优选的提取工艺稳定可行,对蛇黄凝胶的生产工艺具有一定的指导和参考意义.

    作者:汪亚飞;钟希文;梅全喜;张文霞;王贤儿 刊期: 2013年第24期

  • RP-HPLC测定不同海拔新疆假龙胆中3种有效成分的含量

    目的:建立不同海拔蒙药新疆假龙胆中3种有效成分的RP-HPLC测定方法.方法:采用ZORBAX SB-C18柱(4.6mm×250 mm,5μm)色谱柱,流速1.0 mL· min-1,獐牙菜苦苷、龙胆苦苷的流动相为甲醇-水(20∶80),芒果苷的流动相为甲醇-0.5%乙酸(25∶75),检测波长分别为獐牙菜苦苷238 nm,龙胆苦苷270 nm,芒果苷254 nm,柱温25℃.结果:实验所建立的测定方法简便准确,在1 900~3 035 m的不同海拔的新疆假龙胆中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、芒果苷的含量变化范围分别是1.30% ~2.48%,0.377% ~0.508%,0.041% ~0.071%.结论:不同海拔的新疆假龙胆中3种有效成分含量随海拔高度增高均呈增加趋势.

    作者:阿力同其米克;姜湘英;郭继娜 刊期: 2013年第24期

  • 相向双频超声法提取陈皮中黄酮类化合物

    目的:优选相向双频超声提取陈皮总黄酮的工艺条件.方法:利用水听器法考察不同频率及功率下单频、相向双频超声的空化效应.以陈皮总黄酮提取率为指标,通过单因素试验考察超声电功率、提取时间、乙醇体积分数及不同频率/功率组合方式对提取工艺的影响.结果:相向双频超声(20+25) kHz的空化效应大于单频超声(频率分别为20,25 kHz);在温度(20±0.5)℃,提取时间10 min,乙醇体积分数60%,相向双频超声组合(20 kHz,25 kHz)条件下,陈皮总黄酮提取率4.52%,高于同样条件下单频超声的提取率(3.95%,4.03%).结论:相向双频超声提取中草药有效成分是一种较理想的方法,与反应器形状、换能器空间位置等因素密切相关.

    作者:马艳;张宁宁 刊期: 2013年第24期

  • HPLC-MS测定芫花炮制前后5种成分含量变化

    目的:建立HPLC-MS同时测定芫花中木犀草素、芹菜素、羟基芫花素、芫花素以及芫花酯甲5种化学成分含量的方法,分析炮制前后含量的变化.方法:采用液质联用法,质谱采用大气压电喷雾离子源,选择性负离子模式监测.色谱柱为Agilent Zorbax C18(2.1 mm×50 mm,1.8 μm),流动相为0.05%甲酸乙腈(A)-0.05%甲酸水(B),流速0.6 mL· min-,柱温30℃,进样量2μL.结果:芫花炮制后5种毒效成分均发生了一定程度的变化.3种黄酮类有效成分木犀草素、羟基芫花素以及芫花素炮制后含量升高,二萜原酸酯甲代表成分芜花酯甲炮制后含量降低,黄酮类成分芹菜素经炮制后含量也发生了下降.结论:该方法简单、灵敏、准确,为芫花及其炮制品的质量评价提供了有效的方法.

    作者:李林;关洪月;殷放宙;陆兔林;林家红;蔡宝昌 刊期: 2013年第24期

中国实验方剂学杂志

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主管:国家中医药管理局

主办:中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会