学术投稿

Smads蛋白家族在慢性支气管哮喘大鼠肺组织中的定位及基因表达

孙祝美;李福凤;钱鹏;赵洁;温旭杰

关键词:慢性哮喘, Smad2、4、7, 免疫荧光染色, 逆转录聚合酶链反应
摘要:目的:探讨Smads蛋白家族在慢性哮喘大鼠肺组织中的定位表达及其mRNA变化情况,以反映其在哮喘大鼠气道重建过程的作用.方法:24只SD大鼠分为正常组和模型组各12只.模型组以10%卵蛋白+10%氮氧化铝生理盐水ip致敏,2周后用2%卵蛋白雾化吸入1 min,隔天1次,引喘,共2周后处死.取肺组织切片(HE染色)作形态学观察;荧光免疫组化法测定Smads蛋白家族在肺组织中的定位;RT-PCR测定Smads蛋白家族mRNA的变化情况.结果:HE染色显示模型组有较明显出血,肺泡均有一定程度扩张,有慢性炎细胞浸润;荧光免疫组化法显示Smads蛋白家族均在在支气管壁和肺泡壁上表达;RT-PCR测定显示模型组Smad2 mRNA较正常组高表达(P<0.05);模型组Smad7 mRNA较正常组显著低表达(P<0.05);两组Smad4 mRNA之间无差异.结论:Smads蛋白家族与慢性哮喘关系密切,在正常与哮喘模型中都可见Smads蛋白家族的表达,在哮喘发生过程中,受体型Smad2 mRNA表达增加,抑制型Smad7 mRNA表达下降,说明TGF-β/Smad信号途径可能被活化.
中国实验方剂学杂志相关文献
  • 阿魏化痞膏贴膏剂的制备工艺

    目的:以丙烯酸酯压敏胶为基质制备阿魏化痞膏贴膏剂,对制备工艺进行初步优化.方法:通过测定贴膏剂的持黏力和180°剥离强度结合外观指标优化贴膏剂组方.结果:优化过的阿魏化痞膏贴膏剂组方为水0.40g,乙醇0.30 g,丙烯酸酯压敏胶4.50 g,丙烯酸树脂0.30 g.贴膏剂,平均180°剥离强度0.33 kN·m-1,平均持黏力15.45 h.结论:贴膏剂外观指标良好.

    作者:苏玉珂 刊期: 2011年第20期

  • HPLC测定灯心草中去氢厄弗酚含量

    目的:建立灯心草中去氢厄弗酚含量的测定方法.方法:采用高效液相色谱法,Agilent HC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-水(65:35),流速1.0 mL· min-1,检测波长270 nm,柱温23℃.结果:去氢厄弗酚线性范围为0.017 4 ~0.870 4μg,与峰面积线性关系良好.平均加样回收率为98.3%,RSD 0.61%.结论:所建立的方法分离效果好、操作简便、准确、灵敏度高、重复性好,可用于灯心草中去氢厄弗酚的含量测定.

    作者:段琼;王杨;林婷婷;孙道涵;简伟杰;黄建梅 刊期: 2011年第20期

  • 黄芪消肿汤治疗膝关节滑膜炎

    目的:观察黄芪消肿汤治疗膝关节滑膜炎的临床疗效.方法:共观察150例,按2:1的比例随机分为试验组100例和对照组50例.试验组采用经验方黄芪消肿汤,对照组应用滑膜炎冲剂.28 d为1疗程.结果:试验组临床控制16例,显效41例,有效31例,无效4例,总有效率95.6%.对照组临床控制5例,显效13例,有效20例,无效8例,总有效率82.6%.总疗效试验组优于对照组(P<0.05).结论:黄芪消肿汤治疗膝关节滑膜炎效果满意,优于对照组.

    作者:杜文生;徐英敏;韩付伟;郭会卿 刊期: 2011年第20期

  • 柴胡总皂苷提取物体外溶血作用

    目的:考察柴胡总皂昔提取物的溶血作用和抗氧化剂对柴胡总皂苷溶血的影响.方法:通过肉眼观察和分光光度法考察不同浓度柴胡皂苷的溶血作用及抗氧化剂对柴胡总皂苷溶血的影响.结果:柴胡总皂苷质量浓度为在0.01,0.02 g·L-1时,其溶血曲线呈S形,溶血当量为0.01 mg,溶血指数为1∶10万,抗氧化剂与柴胡总皂苷组溶血率低于同浓度柴胡总皂苷组.结论:柴胡总皂苷具有一定的溶血作用,且溶血强度与浓度呈剂量依赖性,抗氧化剂的加入能减轻柴胡总皂苷的溶血作用.

    作者:张国松;封传华;罗晓健;胡鹏翼;肖志强;王跃生 刊期: 2011年第20期

  • 加味附子理中免煎颗粒对急性马兜铃酸肾病大鼠细胞凋亡的影响

    目的:通过研究加味附子理中免煎颗粒对急性马兜铃酸肾病(AAN)大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响探讨其治疗急性AAN的作用机制.方法:将90只SD大鼠随机分为正常组、模型组、中药组、强的松组、中药+强的松组,其中正常组10只,其余各组均为20只.模型组、中药组、强的松组及中药+强的松组按100 mg·kg-1·d-1剂量予马兜铃酸A纯品连续ig3 d建立AAN模型;从实验第6天开始,中药组予加味附子理中免煎颗粒(按生药量计为3.55 g·kg-1·d-1,10 mL·kg-1 ·d-1)ig,强的松组予强的松(0.5 mg·kg -·d-1 )ig,中药+强的松组予加味附子理中免煎颗粒(3.55 g·kg -·d-1)+强的松(0.5 mg·kg-1·d-1)ig,模型组和正常组则予蒸馏水10 mL·kg-1·d-1ig;连续给药3周后处死各组大鼠.以RT-PCR检测各组大鼠肾组织Bcl-2mRNA,Bax mRNA的表达,免疫组化法及Western blot法检测各组大鼠肾组织Bcl-2,Bax蛋白的表达,原位末端标记法(TUNEL)检测肾小管上皮细胞凋亡.结果:模型组大鼠肾组织Bcl-2 mRNA和蛋白表达明显减少,而Bax mRNA和蛋白表达增多;与模型组比较,中药组、强的松组和中药+强的松组均能不同程度增加Bcl-2 mRNA和蛋白的表达,降低Bax mRNA和蛋白的表达,差异均有统计学意义(P<0.05);其中以中药+强的松组的作用佳(P<0.05).TUNEL结果显示,正常组大鼠肾小管可见少量凋亡细胞,模型组则有大量凋亡的肾小管上皮细胞,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,中药组、强的松组和中药+强的松组凋亡细胞数均减少(P<0.05);而中药+强的松组凋亡细胞数减少为明显(P<0.05).结论:肾小管上皮细胞凋亡参与了急性马兜铃酸肾病的发病,加味附子理中免煎颗粒能减轻急性马兜铃酸肾病大鼠肾小管上皮细胞的凋亡,但联合强的松治疗疗效更佳.

    作者:史伟;黄仁发;陈延强 刊期: 2011年第20期

  • 氮酮对如意金黄乳膏体外透皮吸收的影响

    目的:研究氮酮对如意金黄乳膏体外透皮吸收的影响.方法:采用改良Franz扩散池,选择大鼠腹部皮肤为渗透屏障,用HPLC测定样品中大黄酚含量,比较氮酮质量浓度对如意金黄乳膏透皮吸收的影响,得出不同时间段的累积渗透率,计算渗透速率常数.结果:氮酮质量浓度为0,1%,2%,3%,4%的如意金黄乳膏样品渗透速率常数分别为0.006 06,0.009 47,0.018 74,0.019 18,0.015 05 μg·cm-2·h-1.结论:可选择氮酮作为如意金黄乳膏的促透剂,佳质量浓度为3%.

    作者:朱倩云;李筱青;李成网 刊期: 2011年第20期

  • 心房钠尿肽对游泳力竭小鼠腓肠肌抗运动性疲劳及其机制研究

    目的:观察和探讨心房钠尿肽(atria1 natriuretic peptide,ANP)对小鼠的抗疲劳作用及其机制.方法:观察ANP13.10,6.55 ng· kg -iv对小鼠负重游泳时间及对游泳力竭小鼠腓肠肌MDA含量的影响;离体试验观察ANP高质量浓度13.10ng·kg-1对H202 (0.2mol· L-1)诱导小鼠腓肠肌MDA含量的影响.结果:ANP 13.10 ng·kg-1能够明显延长小鼠的游泳力竭时间(P<0.01);并能使小鼠腓肠肌MDA含量显著降低(P <0.05);ANP 13.10 μg·L-1对H2O2致小鼠腓肠肌组织损伤有保护作用(P<0.001),而蛋白激酶G的阻断剂LY83583可阻止这种保护作用(P<0.01).结论:ANP具有抗运动性疲劳的作用,其作用与ANP-环磷酸鸟苷-蛋白激酶G(ANP-cGMP-PKG)信号转导途径有关.

    作者:李大勇;洪兰;于丽;李海雁;刘丽萍 刊期: 2011年第20期

  • 脂脉宁对动脉粥样硬化家兔氧化应激反应及LDL-R,VCAM-1基因表达的影响

    目的:探讨脂脉宁抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制.方法:用高脂饲料复制家兔AS模型,于4周后再灌服脂脉宁4周,检测血脂、氧化指标及主动脉低密度脂蛋白受体(LDL-R) mRNA及血管细胞黏附分子-1(VCAM-1) mRNA的表达.结果:模型组血脂4项及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)均明显较空白组升高,谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-Px)降低,主动脉内膜、斑块明显增厚;脂脉宁0.375,0.188 g·kg-1血脂及MDA含量均明显较模型组降低,GSH,GSH-Px升高,动脉斑块减小,高剂量组效果更明显.模型组LDL-R mRNA表达明显降低,VCAM-1 mRNA表达升高;给药2组LDL-RmRNA表达则明显升高,VCAM-1 mRNA表达降低,高剂量组尤为明显.结论:脂脉宁抗AS作用与其调整脂质代谢、抗氧化及调控LDL-R mRNA及VCAM-1 mRNA表达有关.

    作者:刘应柯;张玉峰;刘尚岭;张希卿 刊期: 2011年第20期

  • Smads蛋白家族在慢性支气管哮喘大鼠肺组织中的定位及基因表达

    目的:探讨Smads蛋白家族在慢性哮喘大鼠肺组织中的定位表达及其mRNA变化情况,以反映其在哮喘大鼠气道重建过程的作用.方法:24只SD大鼠分为正常组和模型组各12只.模型组以10%卵蛋白+10%氮氧化铝生理盐水ip致敏,2周后用2%卵蛋白雾化吸入1 min,隔天1次,引喘,共2周后处死.取肺组织切片(HE染色)作形态学观察;荧光免疫组化法测定Smads蛋白家族在肺组织中的定位;RT-PCR测定Smads蛋白家族mRNA的变化情况.结果:HE染色显示模型组有较明显出血,肺泡均有一定程度扩张,有慢性炎细胞浸润;荧光免疫组化法显示Smads蛋白家族均在在支气管壁和肺泡壁上表达;RT-PCR测定显示模型组Smad2 mRNA较正常组高表达(P<0.05);模型组Smad7 mRNA较正常组显著低表达(P<0.05);两组Smad4 mRNA之间无差异.结论:Smads蛋白家族与慢性哮喘关系密切,在正常与哮喘模型中都可见Smads蛋白家族的表达,在哮喘发生过程中,受体型Smad2 mRNA表达增加,抑制型Smad7 mRNA表达下降,说明TGF-β/Smad信号途径可能被活化.

    作者:孙祝美;李福凤;钱鹏;赵洁;温旭杰 刊期: 2011年第20期

  • 8-乙酰哈巴苷大鼠体内药代动力学

    目的:建立血浆中8-乙酰哈巴苷的HPLC测定方法,研究大鼠不同给药途径给予8-乙酰哈巴苷后的药代动力学特征.方法:大鼠分别注射和灌胃8-乙酰哈巴苷,于不同时间点取血;采用HPLC,流动相乙腈-异丙醇-水(1.8:10.2:88),检测波长207 nm,流速1.0 mL·min-1,绘制药-时曲线,建立药代动力学模型,计算药代动力学参数.结果:8-乙酰哈巴苷在血浆中的回归方程为Y=613 753.13X -86 995.55(r =0.999 2),在0.015 3~22.995 μg线性关系良好.高、中、低3个剂量组日内精密度RSD分别为0.59%,0.38%,0.55%;日间精密度RSD分别为3.9%,2.1%,1.5%.回收率分别为94.89%,95.85%,95.25%.灌胃途径在体内基本检测不出;注射途径3个剂量组主要药代动力学参数t1/2分别为(21.15±3.36),(24.26±5.50),(16.58±5.65) min;tmax分别为(4.98±0),(4.98±0),(4.98±0) min;Cmax分别为(2.25±1.41),(0.09±0.03),(0.02±0.007) g·L-1.结论:该法灵敏度高,专属性强,准确可靠,操作快速简便,可用于8-乙酰哈巴苷在大鼠体内的药代动力学研究,注射给予8-乙酰哈巴苷在大鼠体内吸收快且不完全,消除相对较慢,但具有良好的药代动力学特征,房室模型拟合分析为一房室模型.

    作者:刘德文;张毅;李德凤;王锦玉;游云;曹岚;王芳;冯伟红;刘晓谦;陈两绵;仝燕 刊期: 2011年第20期

  • 小儿泻痢片质量标准

    目的:建立小儿泻痢片质量标准.方法:采用薄层色谱法对处方中的白芍进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定黄连中盐酸小檗碱含量.结果:TLC鉴别分离度好,阴性对照无干扰.HPLC分析过程中,盐酸小檗碱与样品中其他组分分离效果好,盐酸小檗碱进样浓度在0.03 ~0.48 g·L-1具有良好线性关系(r =0.999 9),平均回收率97.36%,RSD 1.41%(n=6).结论:采用此法测定小儿泻痢片黄连中的盐酸小檗碱含量,准确可靠,简便易行,所建的标准可用于小儿泻痢片的质量控制.

    作者:高玉琼;刘文炜;李凤;刘建华;霍昕;杨迺嘉 刊期: 2011年第20期

  • 健脾平肝法辅助治疗Tourette综合

    目的:探索Tourette综合征(TS)的中西医结合治疗,以期寻求有效的治疗方法.方法:将62例Tourette综合征患者随机分为2组,对照组用氟哌啶醇治疗0.05 g·kg-1 ·d-1,分3次口服,中西医结合组在健脾平肝的基础上,同时服用氟哌啶醇治疗0.05 g·kg-1 ·d-1,分3次口服.2个疗程后进行评定.治疗前后使用耶鲁抽动抽动程度综合量表(YGTSS)及治疗中需处理的不良反应症状量表( TESS)评估其疗效及不良反应.结果:两组比较总有效率有显著差异(P<0.05);两组治疗后TGTSS评分均较治疗前降低,具有显著性差异(P<0.0l).治疗后中两医结合组评分低于对照组,差异有统计意义(P<0.05);中医症候积分两组治疗前后统计均有显著性差异(P<0.0l),治疗后两组比较也有显著性差异(P<0.01).结论:健脾平肝法能提高治疗TS的疗效.

    作者:孟红旗;杨安平;刘雪梅;孙宜芬 刊期: 2011年第20期

  • 醉鱼草苷Ⅳ对大鼠肝星状细胞增殖、活化的影响

    目的:观察醉鱼草苷Ⅳ对大鼠贮脂细胞株(HSC-T6)增殖及活化的影响.方法:用不同质量浓度的醉鱼草苷Ⅳ处理HSC-T6,采用噻唑蓝(MTT)法测定醉鱼草苷Ⅳ对HSC-T6增殖的影响.采用20,14,9.8,6.86 mg·L-1醉鱼草苷Ⅳ干预细胞24 h,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ),Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)mRNA的表达;Annexin V/PI双染色法结合流式细胞术检测醉鱼草苷Ⅳ对HSC-T6凋亡的影响.结果:醉鱼草苷Ⅳ可显著抑制HSC-T6的增殖,且呈明显的量效关系.醉鱼草苷Ⅳ(6.86 mg·L-1)对HSC-T6 Col-ⅢmRNA表达具有显著的抑制作用(P<0.05);醉鱼草苷Ⅳ(9.8 mg·L-1)对细胞分泌羟脯氨酸(Hyp)和HSC-T6 Col-Ⅰ mRNA表达具有显著的抑制作用(P<0.05,P<0.01)及对HSC-T6具有显著的诱导凋亡作用(P<0.01),从而达到抗肝纤维化的作用.结论:醉鱼草苷Ⅳ可体外抑制HSC-T6的增殖和活化,对肝纤维化有潜在的干预作用,其机制可能与抑制贮脂细胞增殖及细胞外基质的合成有关.

    作者:陈月圆;李典鹏;黄永林;卢凤来;刘金磊;文永新 刊期: 2011年第20期

  • 李萍萍:坚持中西医结合开拓肿瘤治疗新途径——记北京肿瘤医院李萍萍教授及其科研团队

    作者: 刊期: 2011年第20期

  • 旋覆代赭汤联合针刺治疗胃癌术后胃瘫13例

    目的:观察旋覆代赭汤联合针刺治疗胃癌术后胃瘫的疗效.方法:13例术后胃瘫患者采用旋覆代赭汤加减联合针刺治疗,采用自身前后对照.结果:13例患者均治愈出院,胃瘫缓解时间(16.60±7.21)d.痊愈率7.69%;有效率92.31%.症状显效率30.77%;症状有效率69.23%.结论:旋覆代赭汤联合针刺治疗有助于胃癌术后胃瘫的恢复.

    作者:杨中;杨国旺;徐咏梅;唐武军;韩冬;张萃;王笑民 刊期: 2011年第20期

  • 3种增溶性辅料致大鼠肝肾损伤

    目的:研究聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯(吐温80),solutol HS 15,聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油3种辅料对大鼠肝、肾损伤作用.方法:吐温80,solutol HS 15,聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油3种辅料分别按以下方式染毒.将大鼠72只按雌雄各半随机分为4组,每组6只,分别为生理盐水对照组、辅料低、中、高剂量组,按每只im 0.22 mL,每日注射1次,注射4周后,心脏取血后处死大鼠,称肝、肾质量计算脏器系数,测定大鼠血清中反映大鼠肝、肾功能的生化指标,并对肝、肾组织进行病理学观察.结果:吐温80 3个剂量组与对照组以及各剂量组之间对比无明显差异.solutol HS 15的高、中、低剂量组与对照组对比,AST,TP,ALP,ALB无明显差异,各剂量组之间对比,高剂量组与对照组、低剂量组与高剂量组的肝器系数存在显著性差异(P<0.05);高剂量组与对照组之间ALT存在显著性差异(P<0.05);低剂量组与高剂量组的ALB,TP,ALT存在显著性差(p<0.05);低、中剂量组之间TP存在显著性差异(P<0.05);高、中剂量组之间ALT存在显著性差异(P<0.05).聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油3个剂量组,AST,ALT,ALB,ALP,TP与对照组对比无明显差异,各剂量组之间对比,低、中剂量组之间、低、高剂量组之间,AST,ALT,ALB,ALP存在显著性差异(P<0.05).光镜下3种辅料的剂量组与对照组对比,大鼠肝细胞、肾细胞除了炎症之外无明显病理改变.结论:通过3种辅料的比较,发现吐温80致大鼠肝、肾损伤较小.

    作者:张海燕;韦迎春;邬伟魁;杨军宣;杨明 刊期: 2011年第20期

  • 羌活油微乳液的配制及其稳定性考察

    目的:制备稳定的羌活油微乳液.方法:羌活挥发油加入微乳组分制备成O/W型的微乳液并测定其平均粒径,通过观察微乳液外观性状的变化,考察温度、盐、氢氧化钠和高速离心等因素对微乳液稳定性的影响.结果:羌活油微乳液平均粒径为18.6 nm,加温、高速离心试验对羌活油微乳液稳定性无影响;盐类对微乳液稳定性有一定的影响.结论:羌活油制成微乳后稳定性较好.

    作者:王巍;田雪峰;张国兴;鞠海 刊期: 2011年第20期

  • 泽漆化学成分

    目的:研究大戟属植物泽漆的化学成分.方法:采用正相硅胶色谱、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20、反相制备色谱等手段进行分离纯化,并通过理化性质和光谱数据进行结构鉴定.结果:从石油醚层和乙酸乙酯层中分离得到12个化合物,分别鉴定为大戟苷(Ⅰ)、大戟苷D(Ⅱ)、豆甾醇-3-O-β-D-吡哺葡萄糖苷(Ⅲ)、胡萝卜苷(Ⅳ)、柚皮素(Ⅴ)、木犀草素(Ⅵ)、木犀草苷(Ⅶ)、4,2',4'-三羟基查尔酮(Ⅷ)、山柰酚(Ⅸ)、槲皮素-3-0-β-D-半乳糖苷(X)、咖啡酸(Ⅺ)和没食子酸乙酯(Ⅻ).结论:化合物Ⅲ~Ⅶ为首次从该种植物中分离得到.

    作者:庞维荣;杜晨晖;闫艳 刊期: 2011年第20期

  • 微波协助提取在中药材含量测定中的应用(2)——微波法与药典法测定白芷中欧前胡素含量比较

    目的:比较微波协助提取法与药典法提取欧前胡素优势.方法:采用Dikma Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×150mm,5μm),流动相为甲醇-水(55:45),检测波长300 nm,柱温30℃,流速1 mL·min-1.结果:微波提取时间10 min,提取温度80℃,提取溶剂乙醇.欧前胡素在0.01 ~0.2 μg呈良好线性关系(r =0.999 9).平均回收率97.48% (n =6).结论:微波提取法较药典法提取欧前胡素更简便快速、结果准确,为一种符合环保绿色理念的含量测定方法,可用于检测白芷药材中有效成分欧前胡素含量.

    作者:方婧;付梅红;杨洪军;张贝贝;王祝举;杨岚;张东 刊期: 2011年第20期

  • 桂枝颗粒成型辅料的优选

    目的:优选桂枝颗粒的成型辅料.方法:考察不同种类和比例的辅料对桂枝颗粒成型性、溶化性和吸湿性的影响,并用综合评分法筛选出制备桂枝颗粒的优辅料及辅料比例.结果:制备桂枝颗粒的优辅料为糊精和乳糖,两者使用比例为1:1.结论:采用该方法制成的桂枝颗粒成型性、溶解性好,不容易吸湿,效果理想.

    作者:张卫兵;杨保彦 刊期: 2011年第20期

中国实验方剂学杂志

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主管:国家中医药管理局

主办:中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会