罗灿峤;朱辛宇;莫木琼;聂钊铭;钟觉民;李宇彬
目的 了解广州地区海产品、淡水产品及外环境水体中溶藻弧菌污染状况,研究其毒力相关基因分布特征,为溶藻弧菌感染防治提供依据.方法 采集广州市市售水产品及外环境水体标本,进行溶藻弧菌分离鉴定,对分离到的溶藻弧菌毒力相关基因toxR、CollagenasevP、toxS、trh、tdh、tlh、CollagenaseVA、UreR、FlaA、ompW、AspA、fur等进行实验室检测,对结果进行统计分析.结果 共采集320份样品,溶藻弧菌检出率为20.31%,其中海产品的检出率高,为26.30%,淡水产品检出率为11.67%;65株食源性和环境分离株检测到toxR、Collagenase、tlh、FlaA、ompW、AspA、fur基因,未检测到toxS、trh、tdh、UreR基因.结论 广州地区海产品、淡水产品测到及外环境水体中溶藻弧菌污染严重,其致病因子具有复杂性及独特性,需加强水产品与外环境水体的监测,做好预防控制疾病工作.
作者:张晶;陈佳璇;伍业健;陶霞;吴新伟 刊期: 2016年第04期
目的 建立凝胶渗透色谱净化-高效液相色谱串联质谱法,对食品中的苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ、苏丹橙G、苏丹红G、苏丹黑B、苏丹红7B和奶油黄9种偶氮类工业染料进行检测.方法 采用环己烷-乙酸乙酯溶液对样品进行提取,通过凝胶渗透色谱系统(GPC)对样品提取液进行净化,浓缩后采用高效液相色谱串联质谱仪检测,外标法定量.结果 9种化合物线性范围为5 μg/kg~ 150 μg/kg,线性关系良好,检出限为5μg/kg.在熟肉制品(红肠)中,9种偶氮染料的回收率为70.1%~ 116.3%,相对标准偏差(RSD)均<10%;在水产制品(茄汁鱼罐头)中,9种偶氮染料的回收率为71.5% ~ 114.8%,相对标准偏差(RSD)均<10%.结论 样品提取液经凝胶渗透色谱系统(GPC)净化后,基质干扰明显降低,检测灵敏度提高,且重现性好,能够对食品中的苏丹红Ⅰ等9种偶氮类工业染料进行准确定量分析,同时能够通过离子丰度比排除其他干扰,避免出现假阳性的误判.
作者:刘畅;迟秋池;徐慧;高如威;王柯 刊期: 2016年第04期
目的 评价固体培养基螺旋接种代替涂布接种方法的可能性.方法 以国内外6个厂家的7种固体培养基(麦康凯琼脂、亚硫酸铋琼脂、HE琼脂、沙门菌显色培养基、平板计数琼脂、营养琼脂、胰蛋白胨大豆琼脂),分别用螺旋平板法与传统的涂布平板法对7株不同菌株(鼠伤寒沙门菌、伤寒沙门菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、福氏志贺菌)进行比对测定.结果 对用2种接种方法在各培养基上生长的菌落数进行方差统计,金黄色葡萄球菌菌株在平板计数琼脂和营养琼脂上差异有统计学意义(P<0.05),其余各菌株基本上在7种培养基上差异均无统计学意义(P>0.05).结论 对大部分菌株的接种,螺旋平板法可代替传统的涂布平板的接种方法.
作者:卢勉飞;蔡芷荷;叶青华;李艳嫦;吴清平;杨绪伟 刊期: 2016年第04期
目的 通过对瑞安市日常食品、公共场所、食物中毒样本中分离出的金黄色葡萄球菌进行肠毒素分型和耐药性检测,比较不同来源分离菌株的肠毒素分布和耐药性差异.方法 采用ELISA方法测定金黄色葡萄球菌肠毒素(SEA-SEE),用K-B法测定分离菌株对抗菌药物的耐药性.结果 72株金黄色葡萄球菌的肠毒素检出41株,阳性率为56.94%.其中30株产2种及2种以上肠毒素.食物中毒样本、公共场所、日常食品分离株的肠毒素阳性率依次为94.44%、53.33%、33.33%.不同来源样本分离株产肠毒素阳性率差异有统计学意义(x2=15.94,P<0.05).72株金黄色葡萄球菌除对左氧氟沙星、万古霉素不耐药外,对其他8种抗菌药物均存在不同程度耐药.结论 金黄色葡萄球菌对多数抗菌药物存在不同程度的耐药,临床治疗应建立在体外药敏试验基础上,有针对性地选择抗菌药物.
作者:刘敏芝;陈端秀;林峰;李娜;叶环环;周邦瑶 刊期: 2016年第04期
目的 利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)快速对致泻性大肠埃希菌鞭毛抗原进行分型.方法 收集河南省食品安全风险监测网中分离出的致泻性大肠埃希菌84株,使用MALDI-TOF-MS对其鞭毛抗原进行分型,并与血清学分型结果相比较.结果 84株致泻性大肠埃希菌中76株(90.48%)与血清学分型结果一致,8株分型结果不一致,主要集中在H1和H19、H21和H11.结论 MALDI-TOF-MS分型方法与血清学分型方法相比,在诊断敏感性、诊断特异性、分析敏感性、分析特异性、结果判断、完成检测所需时间、检测粗糙型菌株的能力、稳定性和重现性、吞吐量、检测条件等10个方面均具有较大的优势,更加简便、快捷和准确.MALDI-TOF-MS可以作为一个快速、准确和价廉的工具,应用于致泻性大肠埃希菌鞭毛抗原的分型.
作者:炊慧霞;李艳芬;吴玲玲;张秀丽 刊期: 2016年第04期
目的 探讨平均血小板体积(MPV)对2型糖尿病肾损伤的临床价值.方法 选择本院2014年1月-2015年6月内分泌科收治的2型糖尿病患者355例,根据内生肌酐清除率(Ccr)分为4组:组1:Ccr≥90 ml/min(95例);组2:60 ml/min≤Ccr <90 ml/min(90例);组3:30 ml/min≤Ccr <60 ml/min(88例);组4:Ccr <30 ml/min(82例).所有受试者均检测MPV等相关指标水平,比较组间差异,并统计MPV与有关指标的相关性.结果 DN相关指标水平比较,4组间年龄、FPG、HbA1c、BUN、CREA、UA比较,差异均具有统计学意义(P<0.05),有差异的项目组间两两比较,只有BUN检测结果各组间差异具有统计学意义(P<0.05),且随Ccr降低而升高.血小板参数水平比较,4组间MPV和PLT差异具有统计学意义(P<0.05),有差异的项目组间两两比较,只有MPV检测结果各组间差异具有统计学意义(P<0.05),且随Ccr降低而升高.MPV与BUN、CREA、UA存在正相关(P<0.05).结论 MPV可以较早的反映2型糖尿病肾损伤,其水平高低与损伤的严重程度成正比.
作者:杨国灿;张丽红;包国祥 刊期: 2016年第04期
目的 建立HPLC快速测定乌头类生物碱中毒事件中毒患者尿液中乌头碱、次乌头碱、新乌头碱的方法.方法 收集乌头碱中毒患者48 h内尿液,经0.1 mol/L HCl酸化,Waters Oasis MCX固相萃取小柱净化,0.5%氨水的甲醇洗脱,氮气吹干,乙腈-10 mmol/L乙酸铵(50∶50,∥V)定容,经Agilent XDB C8(4.6 mm× 250 mm,5.0μm)分离,用紫外检测器,235 nm波长定性定量分析.结果 乌头碱中毒患者尿液中乌头碱、次乌头碱、新乌头碱的方法检出限为10 μg/L,2个水平的平均回收率为76.0%~ 115.0%,6次平行测定变异系数(CV)为4.1% ~8.2%.在草乌中毒患者的尿液中检出新乌头碱,含量为0.28 mg/L~1.60 mg/L,乌头碱和次乌头碱未检出.结论 该方法测定乌头类生物碱中毒事件中毒患者尿样的乌头碱、次乌头碱、新乌头碱方便、快速、准确、可靠、实用性强.
作者:林佶;杨艳国;张昆仑;赵世文 刊期: 2016年第04期
目的 了解宁波地区福氏c亚型志贺菌病原学特征、耐药性和毒力基因分布,为细菌性痢疾的有效防控提供依据.方法 收集来自腹泻患者的志贺菌株,对其进行生化鉴定、血清分型、药敏试验和5种毒力基因检测.结果 149株菌株中福氏(B群)志贺菌占63.76%,其中福氏1c、2c和4c亚型占36.91%;宋内(D群)志贺菌占36.24%;未检出A群和C群志贺菌.福氏1c、2c和4c亚型菌株生化结果与ATCC标准菌株一致;血清凝集抗原结构式分别为Ⅰ:7(8)、Ⅱ∶3,4∶7(8)和Ⅳ∶7(8),均为多耐药性菌株;5种毒力基因(ipaH、set1、sen、ial和virA)的阳性率分别为100.00%、85.45%、85.45%、90.91%和87.27%.43株菌株(78.18%)携带全部毒力基因.结论 福氏c亚型志贺菌已成为宁波地区主要流行株之一,除血清变异外,生化等生物学特性未变异,菌株为多重耐药菌,携带多种毒力基因,有较强的致病力,应加强志贺菌检测与菌型分析.
作者:高红;徐景野;沈玄艺;章丹阳;闫鹏;许小敏 刊期: 2016年第04期
目的 建立植物源性食品中多效唑、赤霉素、2,4-二氯苯氧乙酸、噻苯隆、氯吡脲、4-氯苯氧乙酸6种植物生长调节剂的超高效液相色谱-串联质谱测定方法.方法 样品经QuEChERS法进行预处理,选用含1%乙酸的乙腈溶液提取,十八烷基硅烷(Gi8)和无水硫酸镁粉末净化,采用BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7 μm)色谱柱为分离柱,以乙腈-0.1%氨水为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 ml/min,柱温为35℃.除多效唑质谱检测条件为ESI+外,其余均为ESI-.结果 6种植物生长调节剂在测定浓度范围具有良好的线性关系(r≥0.999 0),各组分检出限:多效唑为0.05 μg/kg;赤霉素和4-氯苯氧乙酸为1.0 μg/kg;2,4-二氯苯氧乙酸和噻苯隆为0.5 μg/kg;氯吡脲为0.1μg/kg.加标回收率为80.2%~ 115.8%,相对标准偏差为2.34% ~ 5.20%.结论 该方法操作简便,灵敏度和准确度均能满足植物源性食品中6种植物生长调节剂的检测要求.
作者:刘思洁;崔勇;姜楠;王博;石矛 刊期: 2016年第04期
目的 了解异种移植人卵巢组织病理学的变化.方法 无菌条件下,随机将冻融后的人卵巢组织细片移植到不同性别的小鼠皮下,按移植后1周、4周、8周、10周的时间分别处死小鼠,收集移植后人卵巢组织,以解冻后移植前的人卵巢组织作对照,所有组织常规脱水包埋制片,HE染色,镜下观察,比较移植后的人卵巢组织片的卵泡存活、生长、凋亡以及间质重构等情况.结果 移植1周后,有大量的新生血管满布于人卵巢组织间质并穿插蔓延,无规律性,与人卵巢组织自然生理血管分布有明显的差别;小鼠性别对移植1周的人卵巢组织中原始卵泡无影响.随着移植时间的推移,卵巢组织间质中的血管逐渐减少,与人卵巢组织正常生理血管分布相似;生长卵泡明显增加.结论 人卵巢组织可以移植在不同性别小鼠身上并成活;移植后人卵巢组织的闭锁卵泡及生长卵泡都增加,能产生窦卵泡.
作者:罗灿峤;朱辛宇;莫木琼;聂钊铭;钟觉民;李宇彬 刊期: 2016年第04期
目的 分析甲苯对24 h尿液蛋白定量检测的影响,探讨24h尿液中加入甲笨防腐剂的必要性.方法 在同一时间收集6L尿液后,加入蛋白标准品,平均分为6等份,并分为2组,其中一组不加入甲苯,为对照组,另一组加入甲苯,为实验组,分别于4℃、25℃、30℃保存,在0h、4h、8h、12 h、24h、28 h、32 h不同的保存时间条件下测尿总蛋白、尿微量白蛋白、尿肌酐的量,并同时进行尿液细菌培养,18 h后进行菌落计数.结果 在不同的温度下,不加防腐剂的情况下,尿总蛋白、尿微量白蛋白、尿肌酐可稳定保持32 h,且细菌菌落>105 cfu/ml.结论 用于24h尿总蛋白、尿微量白蛋白、尿肌酐定量检测的标本可以不加入甲苯,甲苯在尿液中没有防腐效果.
作者:邓敬仪;董慧敏;李小嫩;林美玲;王丽芳;张宏斌 刊期: 2016年第04期
目的 建立饮用水中微量丙烯腈的顶空气相色谱-氮磷检测器(HS-GC-NPD)测定方法.方法 吸取10.00 ml水样,加入3.0g氯化钠,加盖密封,经50℃平衡60 min,吸取顶空气体1.00 ml,进气相色谱分析,用HP-INNOWAX毛细管色谱柱程序升温分离,经NPD检测器分析,以保留时间定性,外标法定量.结果 本试验方法测定饮用水中丙烯腈的检出限为0.002 mg/L.线性范围为0.04μg/ml~2.00 μg/ml.样品加标回收率为87.0%~112.0%.8次平行测定结果的相对标准偏差(RSD)为2.16%~ 3.24%.结论 该方法具备操作简单快速、灵敏度高、准确度及重现性好等优点,对检测饮用水中的丙烯腈具有一定的实用性和可操作性.
作者:王钟;何漪;曹楷华;邢燕 刊期: 2016年第04期
目前全球育龄夫妇不孕不育的发病率约为15%,并有逐年升高趋势[1-3].体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)发展30多年来,尽管促排卵及培育技术有了很大改善,但临床妊娠率却始终徘徊在30%~50%[4-5],远未达到人们的期望,并且部分患者出现不明原因的反复种植失败.如何改变此类患者的治疗结局、提高种植成功率一直是生殖专家和胚胎学家探讨的热点问题.
作者:于朝;李颖;刘敬党 刊期: 2016年第04期
目的 探讨尿中微量蛋白和N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)的检测对儿童过敏性紫癜肾炎的意义.方法 根据尿常规结果将过敏性紫癜患儿分为过敏性紫癜(HSP)组和过敏性紫癜肾炎(HSPN)组,同时选取健康儿童为对照组.比较各组尿中mAlb、α1-MG、β2-MG、TRf、IgG和NAG的水平.结果 HSPN组中尿mAlb、α1-MG、β2-MG、TRf、NAG和IgG的含量均明显高于HSP组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05);HSP组中尿mAlb、α1-MG、β2-MG、TRf和NAG的含量均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);IgG含量与对照组比较,差异无统计意义(P>0.05).HSP组中尿中微量蛋白和NAG联合检测阳性率为77.8%,明显高于各单项检测的阳性率,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 联合检测尿中微量蛋白和NAG的水平可较好的反映过敏性紫癜患儿的早期肾损伤.
作者:李梅爱;谭晓明;邝婉仪;杨丽媛;冯纾琪;刘穗华 刊期: 2016年第04期
目的 探讨HBV-M大批量标本自动化检测实验方法,观察ECLIA法与ELISA法对HBV-M弱阳性标本的检出情况.方法 首先使用全自动酶标仪ELISA-STAR对58 700例体检标本进行HBV-M自动化检测,然后采用ECLIA对HBsAg阳性及HBV-M灰区结果复查,并进行统计学分析.结果 健康人检出13种乙肝五项模式,以ECLIA为标准,ELISA检测HBsAg存在假阳性,两法符合率为85.4%,应用ELISA法检测HBsAb、HBeAb、HBcAb 3抗体有假阴性,漏诊率分别为17.1%、26.2%、24.7%.结论 全自动酶标仪集加样、温浴、洗板、判读于一体自动化程度高,大大减低了劳动强度,适于大批量标本筛查.ECLIA法是定量检测,作为“金标准”,灵敏度高,减少实验的假阳性和假阴性,2种自动化检测方法互补,经济实用.
作者:于瑞珍;徐传胜 刊期: 2016年第04期
目的 探讨临床分离白色念珠菌ERG5基因突变、高表达与唑类抗真菌药物耐药的关系.方法 对36株临床白色念珠菌进行药物敏感性试验,并对其ERG5基因进行扩增测序,将测序结果与GenBank中已发表的序列(GenBank 序列号:AF069572)进行比对,分析基因突变情况;抽提白色念珠菌临床菌株的总RNA,并反转录合成cDNA,采用实时荧光定量PCR(FQ-RT-PCR)方法检测ERG5基因的表达水平.结果 36株白色念珠菌临床菌株中,共检测出ERG5基因存在1个错义突变位点;氟康唑耐药组有11株发生ERG5高表达,占61.11%,敏感组中5株发生高表达,占31.25%.耐药菌株组ERG5基因的表达量ACt值与敏感组比较,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 白色念珠菌ERG5基因的高表达可能与FCA产生耐药有关,并未发现ERG5耐药菌株在同一位点发生错义突变,白色念珠菌ERG5基因突变、高表达在耐药中的作用还有待于进一步研究证实.
作者:杨静;冯文莉;王一如;陈晋宇;奚志琴;冀英 刊期: 2016年第04期
目的 探讨食物过敏性疾病中血清特异性IgG抗体与IgE抗体检测水平的临床意义.方法 选择临床诊断为食物过敏性疾病患者100例,检测14种食物过敏原中血清特异性IgG与IgE抗体水平,分析2种特异性抗体在性别、年龄、食物种类的分布情况.结果 14种食物过敏原特异性IgG抗体检测阳性率依次为牛奶(32.0%)、鸡蛋(29.0%)、大豆(18.0%)、大麦(18.0%)、小麦(18.0%)等;血清特异性IgE水平较高的依次是蟹(38.0%)、鳕鱼(20.0%)、牛奶(18.0%)等.血清特异性IgG抗体与IgE抗体阳性率在以上过敏原中检测率较高,且检出率不同;不同性别、年龄段2种抗体检测率也不同.结论 牛奶、鸡蛋、大豆、蟹等容易引起食物过敏性疾病,特异性IgG、IgE抗体水平在不同食物引起的过敏性疾病中作用不同,差异较大,联合检测有益于过敏性疾病的准确判断.
作者:卢玲玲;郑国军;董璐璐;涂斐佩;吴海鸥;林晓琼 刊期: 2016年第04期
脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)是全球性的、常见的谷物真菌毒素污染物,广泛存在于大麦、小麦、玉米等霉变粮食作物和动物饲料中[1],在我国,小麦及其制品受DON污染为严重.2010年,王伟等对我国13省市售小麦粉的调查中发现DON在小麦粉中的污染率为100%,污染含量高为2 995.10 μg/kg[2].此外,玉米粉DON的污染也非常严重,阳性率为97.41%,高含量为2 802.80 μg/kg.DON在体内可能有一定的蓄积,具有很强的细胞毒性.
作者:夏义平;李建平;党亚敏;渠志华;王辰 刊期: 2016年第04期
目的 研究聊城地区肠道病毒EV71的基因特征,为HFMD的预防控制提供病原学资料.方法 检测标本肠道病毒EV71,用人横纹肌瘤(RD)细胞对阳性标本进行病毒分离,对分离到的EV71病毒分离株进行VP1区基因扩增,并对扩增产物进行序列测定,利用DNAStar 5.01和Mega 4.0分析软件进行同源性分析和构建系统进化树.结果 2010年-2013年聊城市累计报告手足口病30 947例,每年3月-7月发病较多,≤3岁患儿阳性率高,占全部阳性患儿的90.92%.2010年-2013年聊城辖区内共送检手足口标本862份,分离到EV71阳性毒株160株,对毒株进行基因序列分析显示,2010年-2013年聊城市流行的EV71病毒株为C4a亚型群,16株EV71毒株VP1区核苷酸和氨基酸同源性分别为92.8%~99.9%和97.8% ~ 100.0%,与近缘的C4a型代表株相比,聊城优势株的氨基酸变异一般发生在VP1第98位(E→K)、145位(E→G).结论 聊城市分离株EV71是我国的优势基因型C4a,存在不同的传播链,流行的EV71相对保守,但已出现一定程度的变异.
作者:杜银菊;丁淑军;刘莉;徐可心;王飞;赵宪敬 刊期: 2016年第04期
目的 评价不同消毒方式对布鲁菌的消毒效果,为建立高等级生物安全实验室及疫苗生产车间中布鲁菌的消毒标准操作规范提供实验证据.方法 筛选粗糙型及光滑型布鲁菌作为模式菌.将模式菌的高浓度菌液和低浓度菌液分别经紫外线、有效氯含量为2 000 mg/ml三氯异氰尿酸及75%乙醇,经过15 min、30 min、60 min杀菌处理,将处理后的细菌置于37℃培养5d,观察其存活情况,进行消毒效果评价.结果 紫外线能在15 min内完全杀灭生物安全柜中的高浓度及低浓度布鲁菌.2 000 mg/ml三氯异氰尿酸在15 min内不能完全杀灭较高浓度布鲁菌,但对低浓度布鲁菌的杀灭效果较好.75%乙醇能在15 min内完全杀灭高浓度及低浓度布鲁菌.结论 紫外线、75%乙醇对布鲁菌有较好的消毒效果,可用于高等级生物安全实验室及布鲁菌活疫苗生产车间的常规消毒.
作者:尤明强;李天柱;陈成;李恪梅;王国治;魏东 刊期: 2016年第04期