张科技;张文元;杨亚冬;李颖;房国坚
目的 研究衢州地区708例宫颈病变女性感染各亚型人乳头状瘤病毒(HPV)的概率,探讨单一感染、双重感染、多重复合感染等感染机会分布情况.方法 采用PCR体外扩增和DNA反向点杂交相结合的DNA芯片技术检测宫颈脱落细胞HPV亚型,按不同分组统计分析708例宫颈病变女性感染不同亚型人乳头状瘤病毒(HPV)的机会.结果 708例感染标本检出各亚型阳性点数为1 001次,单一亚型感染占71.13%,双重感染占24.18%以及多重复合占4.70%,其中不同亚型在各感染机会中占所有阳性点位的比例为:高危型分别占49.05%、18.88%、4.00%,低危型分别占22.08%、5.29%、0.70%.高危型和低危型HPV感染机会的差异具有统计学意义.各种感染机会在不同年龄段分布比例不同,31岁~40岁年龄段单一亚型感染比例高(47.60%),比例差异均有统计学意义(X2=256.29,P<0.005).结论 HPV感染机会具有明显的亚型和年龄分布异质性,混合感染比例不容忽视,提示使用HPV预防性疫苗应同时考虑各亚型的感染机会和年龄因素.
作者:朱庆文;杨红斌;余晓 刊期: 2014年第23期
目的 了解肛周脓肿病原菌分布及主要病原菌的耐药性,以指导临床用药.方法 医院2012年-2013年收治242例肛周脓肿患者,于手术切开引流前抽取脓液,采用法国生物梅里埃ATB全自动细菌鉴定仪做需氧细菌鉴定,采用K-B法及MIC法进行药敏试验,并对结果进行统计分析.结果 162份标本分离病原菌91株,阳性率56.17%,全部为革兰阴性菌,大肠埃希菌77株,占84.62%,其中,产ESBLS菌14株,占大肠埃希菌的18.18%;克雷伯菌11株,占12.09%.大肠埃希菌对所有青霉素类及头孢硫脒耐药率达88%~ 96%;二三四代头孢耐药率为20%~42%;喹诺酮类、氨基糖苷类耐药率为22% ~ 28%.克雷伯菌对所有青霉素类及头孢硫脒100%耐药.结论 肛周脓肿病原菌以肠杆菌科为主,且菌株的耐药率较高,产ESBLS菌检出占一定比例,临床应根据药敏结果合理选用或调整用药,控制耐药菌的产生和传播.
作者:王赛君;殷黎;杨云;刘超基 刊期: 2014年第23期
目的 进行蚕丝-PLGA复合网状支架的力学强度检测及其与骨髓间充质干细胞的体外共培养.方法 采用纬编针织法制备蚕丝丝素-PLGA纤维复合网状支架,并进行力学强度测试.在网状支架上滴加Ⅰ型胶原并冷冻干燥,再用纤维连接蛋白表面修饰后,种植兔骨髓间充质干细胞进行体外共培养,观察细胞与支架复合生长情况.结果 蚕丝-PLGA网状支架宽约5 mm.支架的大载荷、抗拉强度、断点伸长率、弹性模量分别为(118.32±11.21)N、(52.90±5.03) MPa、49.79%±5.16%、(177.25±19.18) MPa.支架-MSCs复合物培养2 d的扫描电镜观察显示:MSCs细胞黏附于支架表面呈立体状生长,细胞呈梭形,增殖良好,并分泌基质.结论 蚕丝-PLGA复合网状支架具有良好的力学性能与细胞相容性,是一种较有潜力的组织工程韧带的支架材料.
作者:张科技;张文元;杨亚冬;李颖;房国坚 刊期: 2014年第23期
生活饮用水卫生标准将水中氯化物归为一般化学指标.作为一般化学指标,水中氯化物的浓度过高并不能直接影响到饮用者的身体健康,但却在某种程度上反映出水可能受到的污染,同时浓度过高的氯化物可使水产生咸味,对配水系统也具有腐蚀作用¨].1986年在吸取国际组织和发达国家饮用水标准的基础上首次将氯化物指标及检测方法纳入到我国的饮用水标准中,颁布实施了GB5749-1985《生活饮用水卫生标准》和GB/T5750-1985《生活饮用水标准检验方法》,虽然从2007年7月1日起新版GB5749-2006《生活饮用水卫生标准》、GB/T5750.1~ 13-2006《生活饮用水标准检验方法》同步实施,取代了1985年版生活饮用水卫生标准和标准检验方法,但还是保留了氯化物卫生标准和检验方法,可见氯化物指标在生活饮用水中的地位和作用.
作者:刘学彬;曾泽华 刊期: 2014年第23期
目的 比较全自动细菌鉴定仪、显色培养基与mecA基因扩增3种方法鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的差异.方法 对临床连续收集的66株金黄色葡萄球菌(S.au),使用VITEK全自动细菌鉴定仪、科玛嘉显色培养基和mecA基因PCR扩增方法检测MRSA,对结果进行统计分析.结果 66株S.au中3种方法检测到MRSA分别为14株(21.21%)、12株(18.18%)和17株(25.76%).3种检测方法对MRSA检出率差异无统计学意义,P>0.05.所有全自动细菌鉴定仪和科玛嘉显色培养鉴定为MRSA菌株都扩增到了mecA基因.结论 全自动细菌鉴定仪、显色培养基和mecA基因扩增3种方法检测MRSA结果差异无统计学意义,但是全自动细菌鉴定仪和显色培养基方法可能会产生漏检,mecA基因检测的方法应该进一步得到推广.
作者:刘国栋;何秀娟;王劲;于礼;肖潇;佟颖 刊期: 2014年第23期
目的 为了初步了解宁波地区复治肺结核患者对4种一线抗结核药物的耐药状况及相关危险因素,并为完善本地区结核病防控策略提供相应的科学依据.方法 采用WHO/IUATLD推荐的1%药敏比例法,对332株临床分离的复治患者结核分枝杆菌进行异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)及乙胺丁醇(EMB)4种药物的耐药性测定,运用单因素及多因素logistic回归分析复治病例耐药的相关因素.结果 纳入的复治肺结核患者总耐药率、耐多药率分别为57.2%和36.1%.耐药谱以耐异烟肼为高.户籍情况是复治肺结核患者耐药的影响因素.结论 宁波地区复治肺结核患者一线抗结核药物的耐药趋势依然严峻,需进一步加强复治肺结核患者的防控工作.
作者:车洋;于梅;许国章;平国华 刊期: 2014年第23期
目的 建立亲水作用色谱快速测定茶氨酸含量的方法,并应用于茶叶中茶氨酸的测定,为茶叶中茶氨酸的质量控制提供方法参考.方法 茶叶样品粉碎混匀后,经水溶液加热提取过滤后,上清液采用Phenomenex Luna NH2(250 mm×4.6 mm,5μm)亲水色谱柱分离,以乙腈∶水=70∶30为流动相洗脱,流速1.0 ml/min,柱温25℃,紫外检测波长为203 nm.根据保留时间定性,外标峰面积法定量.结果 茶氨酸的浓度与峰面积呈良好的线性相关性,相关系数r=0.9999,方法检测限为0.12 μg/ml,相对标准偏差RSD为0.46%(n=9);2个浓度水平的样品加标回收率在94%~ 104%之间.结论 本方法克服了传统反相液相色谱测定中使用离子对和衍生等方法的缺点,具有分离效果好、快速简易、平衡时间短、精密度和准确性高的特点,可用于茶叶中茶氨酸的质量控制方法.
作者:孙丽华;江月仙;鲁健章;郑秋岚;王茵 刊期: 2014年第23期
目的 探讨胃幽门螺杆菌(Hp)感染情况诊断中快速尿素酶试验(RUT)检测应用的价值.方法 从本院消化内科2010年5月-2013年5月收治的住院患者中,随机选择100例进行研究,分为2组,分别予以快速尿素酶试验检测和14C尿素呼气试验(14C-UBT)检查.观察记录2组的检查结果,并进行比较.结果 经统计,100例患者中,经RUT检测Hp阳性率为86.0%,同时经14C-UBT检测Hp阳性率为60.0%.2种方法的阳性检出情况比较差异有统计学意义(X2=8.57,P<0.05,).2组在消化性溃疡和慢性胃炎、十二指肠炎阳性检出率方面差异均有统计学意义(X2=19.82,x2=21.25,均P<0.05);但在急性糜烂出血性胃炎和胃食管反流病,以及胃癌和胃息肉的阳性检出率方面差异均无统计学意义(X2=2.72,X2 =5.13,X2=5.28,X2 =4.11,均P>0.05).结论 快速尿素酶试验用于检测胃幽门螺杆菌感染情况具有较高的应用价值,且操作简单,值得临床大力推广应用.
作者:王翔军;任永强;王新花 刊期: 2014年第23期
目的 探讨病毒癌基因HPV E6/E7联合液基薄层细胞(TCT)在宫颈病变诊断中的应用价值.方法 将2 085例患者同时进行HPV E6/E7 mRNA及TCT检测,TCT异常者再进行阴道镜下活检,以病理组织学诊断为金标准,并分析其结果.结果 TCT检测异常者171例,检出率为8.2%,且随着宫颈病变程度增加,HPV E6/E7 mRNA拷贝数也升高,按TBS报告系统分组,每相邻2组间差异有统计学意义(P<0.05).TCT(+)且HPV E6/E7 mRNA(-)组45例,病理阳性31例,符合率为68.9%;TCT(+)且HPV E6/E7 mRNA(+)组126例,病理检查结果阳性115例,阳性符合率为91.3%,2组的病理阳性符合率差异有统计学意义(P<0.01).结论 HPV E6/E7 mRNA联合TCT检测与病理检查的阳性符合率明显高于单纯TCT检测的阳性率,从而大大提高了宫颈癌前病变和宫颈癌的检出率,并更能直观反映病毒癌基因的表达活性.因此,HPV E6/E7 mRNA检测可作为高危型HPV感染的妇女进行风险评估、宫颈癌筛查及宫颈癌术后病情观察,具有重要的临床应用价值.
作者:应香岚;赵湘婉;吴晨曦;文小凤;王玲玲 刊期: 2014年第23期
目的 建立粪便中隐孢子虫的提取与检测技术,分析腹泻病人粪便中隐孢子虫的感染情况,为该病的诊断、防治提供科学依据.方法 选择经病原学检测已经确诊的5份隐孢子虫阳性和4份阴性粪便,分别采用FTA卡和商业化DNA抽提试剂盒抽提粪便样本中DNA,经荧光PCR法进行扩增,比较核酸提取效果;同时用直接涂片法、改良抗酸染色法及荧光PCR法对63例腹泻病人隐孢子虫感染情况进行粪样检测分析.结果 应用FTA卡抽提DNA效果优于应用商业化DNA抽提试剂盒抽提DNA.同时对63份腹泻病人粪便运用直接涂片法、改良抗酸染色法及荧光PCR法都未检出隐孢子虫.结论 应用FTA卡进行粪便样本中隐孢子虫DNA的抽提方法具有简单有效、快速灵敏、准确可靠等特点,可以应用于粪便中隐孢子虫的检测,同时可联合多种检测手段来提高腹泻病人原虫感染的检出率.
作者:黄达娜;唐屹君;李迎慧;阳帆;吴春利;李玥 刊期: 2014年第23期
目的 分析许昌市流行性感冒监测结果,了解流感流行特征及毒株的型别分布,为流感防控提供科学依据.方法 通过中国流感监测信息系统收集许昌市流感及流感样病例(IU)监测资料,对其流行病学、病原学进行分析.采用狗肾传代细胞(MDCD)对流感病毒进行培养,对分离到的毒株采用血凝抑制实验进行型别和亚型鉴定.结果 许昌市2011年-2013年ILI全年均有病例发生,ILI%呈上升趋势,就诊高峰出现在12月份至次年3月份;人群分布主要集中在≤15岁年龄组,占66.81% (24 915/37 291);在1 219份ILI标本中核酸阳性检出率为11.48%.77份核酸阳性标本中分离到流感病毒38株,病毒分离阳性率为49.35%.结论 许昌市流感病毒活动高峰在冬季和春季,流行有明显的季节性,甲3亚型和B型病毒为主要流行株,须加强监测与防控.
作者:从克;夏晖 刊期: 2014年第23期
目的 监测清远市某工业区农村饮用水中A1、As、Se、Cd、Sb、Pb 6种重金属含量并评价其健康风险.方法 在清远市某工业区选择104个水井作为监测对象,检测重金属含量;按《生活饮用水卫生标准》GB5749-2006进行评价,并采用美国环境保护署健康风险评价模型评价其致癌风险与非致癌风险.结果 通过饮用水途径所致健康风险中,非致癌物和致癌物所致风险都低于国际辐射防护委员会(ICRP)推荐的,污染物所致健康危害的个人致癌风险可接受大值(5.00×10-5/a),其中致癌物引起的年均风险As(1.42×10-6/a)> Cd(8.24× 10-8/a),非致癌物引起的年均风险A1(1.20×10-8/a)> Pb(5.41×10-9/a)> Se(1.77×10-10/a) >Sb(6.76×10-n/a).结论 清远市某工业区农村饮用水中重金属存在一定健康风险,As为产生健康风险的主要污染物,应优先考虑防治.
作者:何健飞;王国彬;赖婧 刊期: 2014年第23期
目的 分析2013年江西省甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶(NA)基因第275位氨基酸变异情况,掌握甲型H1N1流感病毒耐药特性,为甲型H1N1流感临床治疗和疾病控制提供参考.方法 收集江西省流感监测哨点医院采集的流感样病例的鼻咽拭子标本,采用狗肾传代细胞(MDCK)对标本进行病毒分离,对分离的31株新型甲型H1N1流感病毒进行核酸提取,采用一步法逆转录-聚合酶链反应(One-step RT-PCR)扩增病毒M基因部分片段,采用限制性内切酶片段长度多态性分析(RFLP)方法,分析扩增的部分NA基因第275位是否发生组氨酸(H)到酪氨酸(Y)的突变.结果 2013年江西省31株甲型H1 N1流感病毒NA基因第275位氨基酸均为组氨酸,未发生变异.结论 2013年31株毒株均对Osehamivir敏感,One-step RT-PCR-RFLP方法筛查新型甲型H1N1流感病毒Osehamivir耐药株简便可行.
作者:熊英;施勇;李健雄;龚甜;周珺;徐刚 刊期: 2014年第23期
目的 评价5个不同厂家自身抗体谱线性免疫印迹法(UA)试剂中的抗60 kD Ro/SSA IgG抗体项目的一致性及符合率.方法 收集本院54例自身免疫性疾病病人和10份2013年卫生部临检中心室间质评血清及30例健康人血清,同时使用酶联免疫吸附(ELISA)法和5个不同品牌LIA法试剂对血清中的抗60 kD Ro/SSA IgG抗体进行检测,比较5个不同品牌LIA法试剂检测60 kD Ro/SSA IgG抗体的一致性及总体符合率.结果 ELISA法试剂盒检测94例血清中阳性标本37例,阴性标本57例,同时进行的5种不同品牌LIA法抗核抗体谱试剂检测抗60 kD Ro/SSA IgG抗体结果的总体符合率均超过90%,吻合系数均>0.8,说明一致性很好,但5种品牌均出现不相一致的阳性和阴性.结论 LIA法的抗核抗体谱检测试剂盒在检测抗60 kD Ro/SSA IgG抗体项目中一致性很好,但检测结果可疑时应使用天然抗原包被的ELISA法试剂或双向扩散法进行复测.
作者:劳小斌;何懿;罗宇维;谭礼平;孙尔维 刊期: 2014年第23期
目的 评价Xpert结核分枝杆菌/利福平试验(Xpert MTB/RIF试验)检测儿童结核病及利福平耐药性的临床应用价值.方法 收集72例疑似结核病患儿痰标本,进行涂片镜检、固体培养、比例法药敏试验和Xpert MTB/RIF检测,分析Xpert MTB/RIF法检测痰中MTB及其耐药性的敏感度和特异度,与金标准进行一致性检验.结果 以固体培养结果作为金标准,Xpert MTB/RIF法检测痰标本MTB的敏感度和特异度分别为96.9%和87.5%,Xpert MTB/RIF和MTB固体培养具有较好的一致性(K=0.808);以比例法药敏试验结果作为金标准,Xpert MTB/RIF方法检测利福平耐药的敏感度和特异度分别为95.9%和93.9%,Xpert MTB/RIF和比例法药敏试验具有较好的一致性(K=0.831).结论 Xpert MTB/RIF法检测痰液标本的敏感度和特异性高,可为儿童结核病早期诊断及其利福平耐药情况提供及时的数据.
作者:周蕾;王海;朱明利 刊期: 2014年第23期
目的 探讨石墨炉原子吸收分光光度法测定尿中锰含量的方法.方法 通过原子吸收光谱仪的原子化和灰化,优化升温程序对基体改进剂的筛选,将佳的基体改进剂加入尿样后,调整石墨炉原子吸收分光光度仪测定的好状态,直接测定.结果 测定浓度在0 μg/L~15 μg/L范围内,方法的线性关系良好,相关系数r=0.9993,样品的加标回收率为85.9% ~90.7%,变异系数<10%,检出限为0.25μg/L~0.39 μg/L.结论 该方法具有操作简单、快速简便、灵敏度和准确度高的优点,适用于尿中锰含量的测定.
作者:黄文锋;陈创钦;杨桓照 刊期: 2014年第23期
临床微生物检验是一门重要的检验专业课程,其内容涵盖广泛,包括细菌、病毒、支原体、衣原体、螺旋体、真菌等;涉及技术繁多,囊括分子生物学技术、免疫学技术、生化技术、光镜及电镜技术等;研究范畴全面,既有微生物的生物学性状,又有微生物的耐药机制,还涉及部分基因工程内容[1].鉴于本学科特点,单纯依靠理论讲授难以保证学习效果.为此,各医学院校均对学生设置了专业实习教学.
作者:郭小兵;马俊芬;刘红春;张世杰;沈燕;明亮 刊期: 2014年第23期
目的 了解遵义市流感的流行特征及流行趋势,为制定流感的防控措施提供科学依据.方法 采集门诊流感样病例的咽拭子标本,采用real time PCR方法进行流感病毒核酸检测.结果 2013年共采集流感标本2 174份,检出346份阳性,总阳性率为15.92%.其中H1N1型226份,H3型88份,B-Yamagata型32份.2013年的1月-4月、11月-12月是遵义市的流感高峰期.结论 2013年流感阳性率15.92%.以新甲型H1N1为主要毒株,发病高峰为冬春季节.5岁~组人群是主要感染人群.
作者:何柳;朱琳;赵明伍;汪荣珊;田登菊 刊期: 2014年第23期
目的 利用MS-HRM技术建立Syk(L)基因启动子甲基化定量检测的方法,并探讨其甲基化程度与喉鳞癌临床病理参数的相关性.方法 提取48份喉鳞癌组织及20份癌旁正常喉黏膜组织DNA并进行甲基化修饰.用MS-HRM技术定量检测Syk(L)基因启动子甲基化水平,并分析评价其与喉鳞癌临床病理参数的相关性.结果 MS-HRM检测Syk(L)基因启动子甲基化结果为20份癌旁正常喉黏膜组织均位于0%区域;喉鳞癌组织中6份位于0%区域,8份位于0% ~ 30%区域,20份位于30%~70%区域,14份位于70%~100%区域.Syk(L)基因启动子甲基化水平与喉鳞癌临床分型差异无统计学意义(P>0.05),但与临床T分期、病理组织学分级、颈淋巴结转移差异有统计学意义(P<0.05),且Syk(L)甲基化水平随临床T分期及病理组织学分级增高而增高.结论 MS-HRM定量检测Syk(L)基因启动子甲基化有望成为喉鳞癌进展评估分子指标检测的有效手段.
作者:李志海;蔡志毅;金巧智;陈武兵;黄栋栋 刊期: 2014年第23期
目的 建立以6-甲基-2-硫代吡啶-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(MPT-NAG)为底物的液体型匀相速率法试剂测定NAG活性.方法 在含表面活性剂的柠檬酸缓冲液中,NAG催化MPT-NAG分解产生6-甲基-2巯基吡啶(MPT),用全自动生化分析仪监测340 nm处吸光度的变化速率,与标准液比较后计算出样本中NAG活性.结果 该法线性范围为0 U/L~ 380 U/L,平均回收率为98.8%;批内、批间相对标准差(RSD)分别为1.2%~ 3.3%和2.4%~3.9%;与参考方法相比的回归方程及相关系数分别为y=1.01x +0.24,r=0.9986.结论 用液体型MPT-NAG匀相速率法试剂测定NAG活性,具有快速、稳定、简便等优点,适合临床应用.
作者:方芳;连国军;赵长容;王文蔚;马美萍 刊期: 2014年第23期