学术投稿

细菌鉴定仪、显色培养基与mecA基因扩增法鉴定MRSA比较

刘国栋;何秀娟;王劲;于礼;肖潇;佟颖

关键词:MRSA鉴定, 全自动细菌鉴定仪, 显色培养基, mecA基因扩增
摘要:目的 比较全自动细菌鉴定仪、显色培养基与mecA基因扩增3种方法鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的差异.方法 对临床连续收集的66株金黄色葡萄球菌(S.au),使用VITEK全自动细菌鉴定仪、科玛嘉显色培养基和mecA基因PCR扩增方法检测MRSA,对结果进行统计分析.结果 66株S.au中3种方法检测到MRSA分别为14株(21.21%)、12株(18.18%)和17株(25.76%).3种检测方法对MRSA检出率差异无统计学意义,P>0.05.所有全自动细菌鉴定仪和科玛嘉显色培养鉴定为MRSA菌株都扩增到了mecA基因.结论 全自动细菌鉴定仪、显色培养基和mecA基因扩增3种方法检测MRSA结果差异无统计学意义,但是全自动细菌鉴定仪和显色培养基方法可能会产生漏检,mecA基因检测的方法应该进一步得到推广.
中国卫生检验杂志相关文献
  • MS-HRM技术定量检测喉鳞癌Syk(L)基因启动子甲基化的方法及意义

    目的 利用MS-HRM技术建立Syk(L)基因启动子甲基化定量检测的方法,并探讨其甲基化程度与喉鳞癌临床病理参数的相关性.方法 提取48份喉鳞癌组织及20份癌旁正常喉黏膜组织DNA并进行甲基化修饰.用MS-HRM技术定量检测Syk(L)基因启动子甲基化水平,并分析评价其与喉鳞癌临床病理参数的相关性.结果 MS-HRM检测Syk(L)基因启动子甲基化结果为20份癌旁正常喉黏膜组织均位于0%区域;喉鳞癌组织中6份位于0%区域,8份位于0% ~ 30%区域,20份位于30%~70%区域,14份位于70%~100%区域.Syk(L)基因启动子甲基化水平与喉鳞癌临床分型差异无统计学意义(P>0.05),但与临床T分期、病理组织学分级、颈淋巴结转移差异有统计学意义(P<0.05),且Syk(L)甲基化水平随临床T分期及病理组织学分级增高而增高.结论 MS-HRM定量检测Syk(L)基因启动子甲基化有望成为喉鳞癌进展评估分子指标检测的有效手段.

    作者:李志海;蔡志毅;金巧智;陈武兵;黄栋栋 刊期: 2014年第23期

  • 衢州地区宫颈病变女性感染人乳头状瘤病毒分布特点的研究

    目的 研究衢州地区708例宫颈病变女性感染各亚型人乳头状瘤病毒(HPV)的概率,探讨单一感染、双重感染、多重复合感染等感染机会分布情况.方法 采用PCR体外扩增和DNA反向点杂交相结合的DNA芯片技术检测宫颈脱落细胞HPV亚型,按不同分组统计分析708例宫颈病变女性感染不同亚型人乳头状瘤病毒(HPV)的机会.结果 708例感染标本检出各亚型阳性点数为1 001次,单一亚型感染占71.13%,双重感染占24.18%以及多重复合占4.70%,其中不同亚型在各感染机会中占所有阳性点位的比例为:高危型分别占49.05%、18.88%、4.00%,低危型分别占22.08%、5.29%、0.70%.高危型和低危型HPV感染机会的差异具有统计学意义.各种感染机会在不同年龄段分布比例不同,31岁~40岁年龄段单一亚型感染比例高(47.60%),比例差异均有统计学意义(X2=256.29,P<0.005).结论 HPV感染机会具有明显的亚型和年龄分布异质性,混合感染比例不容忽视,提示使用HPV预防性疫苗应同时考虑各亚型的感染机会和年龄因素.

    作者:朱庆文;杨红斌;余晓 刊期: 2014年第23期

  • 双重PCR鉴别牛、羊肉掺假

    目的 建立可同时检测羊肉中掺入的猪、马、牛、鸭成分中的任意2种,及牛肉中掺入的猪、马、鸭成分中任意2种的双重PCR检测体系.方法 配制掺入猪、马、牛、鸭源性成分的模拟掺假羊肉样品及掺入猪、马、鸭源性成分的模拟掺假牛肉样品,每个成分的掺假比例为10%.筛选特异性强、敏感度高的猪、马、牛、鸭物种特异性基因,优化反应体系,建立了针对猪、牛、马、鸭两两配对的双重PCR检测体系.结果 无论是模拟牛肉掺假样品,还是模拟羊肉掺假样品,所有掺入的低价肉品成分都被准确检出,且无非特异扩增条带.结论 本研究建立的双重PCR检测体系,可以敏感、特异、准确的检出牛羊肉制品中的猪、牛、马、鸭成分.

    作者:杨冬燕;杨永存;李浩;杨小柯;邓平建 刊期: 2014年第23期

  • 主动外排泵系统qacA/B、杀白细胞素与耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性的研究

    目的 研究主动外排泵系统qacA/B和杀白细胞素(PVL)在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)中的流行现状和对MRSA耐药性的影响.方法 PCR扩增qacA/B基因和PVL基因;运用琼脂稀释法检测消毒剂和抗生素的小抑菌浓度;把MRSA分为4组:在1株MRSA中,qacA/B基因和PVL基因均阳性为第1组(No.1),仅qacA/B阳性为第2组(No.2),仅PVL基因阳性为第3组(No.3),qacA/B基因和PVL基因均阴性为第4组(No.4),采用卡方检验分析数据.结果 qacA/B基因和PVL基因的检出率分别为34.00%(68株)和28.00%(56株),其中No.1、No.2和No.3分别为35株(17.50%)、33株(16.50%)和21株(10.50%);消佳净(1.00 g/L)、碘伏(1.00 g/L)、苯扎溴胺(1.00 g/L)、阿米卡星、环丙沙星、利福平在No.1的耐药率明显高于No.4(P <0.05),这种情况同样存在于No.2与No.4、No.2与No.3、No.1与No.3中.结论 MRSA对消毒剂和阿米卡星等抗生素产生的耐药性与主动外排泵系统qacA/B有关系,而与PVL均无相关性.

    作者:郭震;张燕莲;陈传;徐株锦;谢文熙;刘军 刊期: 2014年第23期

  • Xpert结核分枝杆菌/利福平试验快速诊断儿童结核病及其耐药性的研究

    目的 评价Xpert结核分枝杆菌/利福平试验(Xpert MTB/RIF试验)检测儿童结核病及利福平耐药性的临床应用价值.方法 收集72例疑似结核病患儿痰标本,进行涂片镜检、固体培养、比例法药敏试验和Xpert MTB/RIF检测,分析Xpert MTB/RIF法检测痰中MTB及其耐药性的敏感度和特异度,与金标准进行一致性检验.结果 以固体培养结果作为金标准,Xpert MTB/RIF法检测痰标本MTB的敏感度和特异度分别为96.9%和87.5%,Xpert MTB/RIF和MTB固体培养具有较好的一致性(K=0.808);以比例法药敏试验结果作为金标准,Xpert MTB/RIF方法检测利福平耐药的敏感度和特异度分别为95.9%和93.9%,Xpert MTB/RIF和比例法药敏试验具有较好的一致性(K=0.831).结论 Xpert MTB/RIF法检测痰液标本的敏感度和特异性高,可为儿童结核病早期诊断及其利福平耐药情况提供及时的数据.

    作者:周蕾;王海;朱明利 刊期: 2014年第23期

  • 布鲁杆菌病3种血清学检测方法比较分析

    目的 通过比较虎红平板凝集试验(RBPT)、试管凝集试验(SAT)和胶体金免疫层析法(GICA)检测结果,客观评价3种方法对布鲁杆菌病诊断效率和价值.方法 采用虎红平板凝集试验、试管凝集试验和胶体金免疫层析法3种布鲁杆菌病血清学检测方法,对300位从事养殖、屠宰加工、皮毛贩运等重点职业人群进行检测,检测结果运用卡方检验进行统计分析.结果 运用3种检验方法对300位重点职业人群血清样本进行检测,RBPT法阳性血清25例、阴性血清275例;GICA法阳性血清24例、阴性血清276例;SAT法阳性血清21例、阴性血清279例,3种检验方法的阳性检出率间差异无统计学意义(P>0.05).结论 RBPT法、GICA法敏感性好,SAT法特异性高,在实际检测工作中应该把几种检验方法结合起来应用,并结合流行病学和临床体征来确诊布鲁杆菌病患者.

    作者:董文杰;解英波 刊期: 2014年第23期

  • 2013年张掖市发热呼吸道症候群细菌多重PCR检测结果分析

    目的 了解该地区发热呼吸道症候群细菌病原谱的构成.方法 对张掖市1家哨点医院自2013年1月-2013年12月符合发热呼吸道症候群监测病例定义的患者采集痰液标本,每月5份~6份,用多重聚合酶链反应(PCR)方法对肺炎链球菌(SP)、流感嗜血杆菌(HI)、军团菌(LP)、百日咳杆菌(BP)、肺炎衣原体(CT)、肺炎支原体(MP)6种呼吸道病原菌进行检测.结果 检测痰液标本63份,总阳性率为96.83% (61/63),其中SP为29.51%(18/61)、SB +HI为65.57% (40/61)、SB+ MP为4.92% (3/61),未检出CT、LP及BP;全年均有发病,发病季节变化不明显;<5岁儿童较多,阳性构成比为27.86%(17/61);男性、女性细菌感染阳性率差异无统计学意义(P>0.05).结论 张掖市发热呼吸道症候群细菌类病原主要为肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和肺炎支原体.

    作者:王冬玲;于爱红 刊期: 2014年第23期

  • 合成革水性与溶剂型聚氨酯树脂对作业场所空气质量影响比较

    目的 目前聚氨酯(PU)合成革的生产采用溶剂型的生产系统为主,随着环保法规和人们环保意识的加强,水性PU合成革技术成为该领域的研究热点.了解2种不同性质PU树脂对作业场所空气质量影响,掌握涉及二甲基甲酰胺(DMF)企业的职业危害程度,为提出有效的防护建议提供科学依据.方法 对作业场所空气中DMF浓度进行监测比较.结果 10家企业总的合格率接近60.4%,其中水性PU树脂合格率为88.3%,溶剂型PU树脂合格率为32.5%.说明作业场所空气中DMF超标严重,以湿法涂台尤甚.结论 水性PU树脂的技术要求与工艺流程比较高,价格也比溶剂型PU树脂贵30%,建议加强工艺改革,降低成本,大限度地使用水性PU树脂替代溶剂型PU树脂.

    作者:丁云龙;雷永良;应国祥;付艳岚 刊期: 2014年第23期

  • 大便漂浮集卵新法

    目的 建立一个能提高肠道蠕虫卵阳性检出率的漂浮集卵新法.方法 在原有的饱和盐水漂浮法基础上滴加汽油,瓶口上不盖载玻片,用细铁丝环取漂浮油膜置载玻片上,直接镜检寄生虫卵.结果 对282份门诊和住院病人大便标本的检测中,肠道蠕虫卵阳性检出率从0.35%提高到2.48%;对187份幼儿园小孩大便标本的检测中,肠道蠕虫卵阳性检出率从0%提高到3.21%;对216份小学生大便标本的检测中,肠道蠕虫卵阳性检出率从0.46%提高到3.24%.结论 新建立的大便漂浮集卵方法,液面油膜起到了稳定虫卵的作用,从而使肠道蠕虫卵阳性检出率有明显提高,且操作简便.

    作者:吴寒 刊期: 2014年第23期

  • 细菌鉴定仪、显色培养基与mecA基因扩增法鉴定MRSA比较

    目的 比较全自动细菌鉴定仪、显色培养基与mecA基因扩增3种方法鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的差异.方法 对临床连续收集的66株金黄色葡萄球菌(S.au),使用VITEK全自动细菌鉴定仪、科玛嘉显色培养基和mecA基因PCR扩增方法检测MRSA,对结果进行统计分析.结果 66株S.au中3种方法检测到MRSA分别为14株(21.21%)、12株(18.18%)和17株(25.76%).3种检测方法对MRSA检出率差异无统计学意义,P>0.05.所有全自动细菌鉴定仪和科玛嘉显色培养鉴定为MRSA菌株都扩增到了mecA基因.结论 全自动细菌鉴定仪、显色培养基和mecA基因扩增3种方法检测MRSA结果差异无统计学意义,但是全自动细菌鉴定仪和显色培养基方法可能会产生漏检,mecA基因检测的方法应该进一步得到推广.

    作者:刘国栋;何秀娟;王劲;于礼;肖潇;佟颖 刊期: 2014年第23期

  • 亲水作用色谱法测定茶叶中茶氨酸的方法学研究

    目的 建立亲水作用色谱快速测定茶氨酸含量的方法,并应用于茶叶中茶氨酸的测定,为茶叶中茶氨酸的质量控制提供方法参考.方法 茶叶样品粉碎混匀后,经水溶液加热提取过滤后,上清液采用Phenomenex Luna NH2(250 mm×4.6 mm,5μm)亲水色谱柱分离,以乙腈∶水=70∶30为流动相洗脱,流速1.0 ml/min,柱温25℃,紫外检测波长为203 nm.根据保留时间定性,外标峰面积法定量.结果 茶氨酸的浓度与峰面积呈良好的线性相关性,相关系数r=0.9999,方法检测限为0.12 μg/ml,相对标准偏差RSD为0.46%(n=9);2个浓度水平的样品加标回收率在94%~ 104%之间.结论 本方法克服了传统反相液相色谱测定中使用离子对和衍生等方法的缺点,具有分离效果好、快速简易、平衡时间短、精密度和准确性高的特点,可用于茶叶中茶氨酸的质量控制方法.

    作者:孙丽华;江月仙;鲁健章;郑秋岚;王茵 刊期: 2014年第23期

  • 液体型MPT-NAG匀相速率法试剂测定NAG活性

    目的 建立以6-甲基-2-硫代吡啶-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(MPT-NAG)为底物的液体型匀相速率法试剂测定NAG活性.方法 在含表面活性剂的柠檬酸缓冲液中,NAG催化MPT-NAG分解产生6-甲基-2巯基吡啶(MPT),用全自动生化分析仪监测340 nm处吸光度的变化速率,与标准液比较后计算出样本中NAG活性.结果 该法线性范围为0 U/L~ 380 U/L,平均回收率为98.8%;批内、批间相对标准差(RSD)分别为1.2%~ 3.3%和2.4%~3.9%;与参考方法相比的回归方程及相关系数分别为y=1.01x +0.24,r=0.9986.结论 用液体型MPT-NAG匀相速率法试剂测定NAG活性,具有快速、稳定、简便等优点,适合临床应用.

    作者:方芳;连国军;赵长容;王文蔚;马美萍 刊期: 2014年第23期

  • 北京市西城区2013年麻疹病毒H1基因型的流行情况分析

    目的 为了加强麻疹病毒基因型的监测,2013年北京市开展了麻疹病毒的核酸检测.方法 采用荧光PCR方法进行病毒核酸鉴定,然后对于核酸阳性标本进行RT-PCR(Reverse Transcription PCR,RT-PCR)扩增,扩增产物进行测序及序列比对分析.结果 2013年北京市西城区共采集麻疹疑似病例为41例,获得RT-PCR产物21例,经过序列分析比对,有16例为H1基因型.本研究获得的16例H1基因型的麻疹病毒基因片段序列与世界卫生组织H基因型代表株MVi/Hunan.CHN/0.93/7/H1,在基因亲缘性关系树上同属一个分支,核苷酸同源性为97.1%~ 97.6%,氨基酸同源性为95.3% ~ 98.0%.结论 2013年北京市麻疹病例明显增多,以本土基因型病例为主,进一步加强麻疹病例控制和预防,对于实现消除麻疹的计划具有重要意义.

    作者:张晶波;崔京辉;王永全;李爱华;陈维新;陈萌 刊期: 2014年第23期

  • 增菌液及增菌时间对空肠弯曲菌检测率的影响

    目的 了解不同增菌液、不同增菌时间对空肠弯曲菌检测结果的影响,摸索空肠弯曲菌分离鉴定的优化条件.方法 对多重PCR检测阳性的样品参照GB/T 4789.9-2008提供的方法分离鉴定空肠弯曲菌,比较不同增菌液、不同增菌时间检测空肠弯曲菌的结果差异.结果 300份样品在布氏肉汤和改良布氏肉汤及添加5%新生牛血清的布氏肉汤和改良布氏肉汤中,经24 h增菌对空肠弯曲菌的检出率分别为9.67%、15.00%、15.00%、16.67%;经48 h增菌的检测率分别为9.00%、13.67%和14.00%、14.33%.增菌48 h的检出率较24h有下降趋势.结论 添加5%新生牛血清的布氏肉汤、改良布氏肉汤较适合作为空肠弯曲菌分离鉴定的增菌液,增菌时间以24h较为适宜.

    作者:熊海平;张伟;许海燕;汤敏 刊期: 2014年第23期

  • 一起沙门菌食物中毒的检测与溯源分析

    目的 对一起沙门菌引起食物中毒的病原菌检测及溯源分型进行分析.方法 对中毒事件中采集的患者标本和剩余食物,采用GB4789.4-2010方法分离沙门菌,分离到的13株沙门菌进一步鉴定培养,应用H9812作为脉冲场凝胶分子量标准,限制性内切酶XbaI消化酶切后进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型.结果 从食物中毒样品中,5份可疑食品花生分离出2株雷根特沙门菌(血清型为O3.10∶Hf,g);患者粪便和呕吐物15份,分离出11株雷根特沙门菌.挑选3株菌株进行脉冲场凝胶电泳分型,条带基本一致,说明同起食物中毒分离到的沙门菌具有相同的指纹图谱.结论 这起食物中毒是由雷根特沙门菌引起的,PFGE是一种非常有效的分子分型方法,可应用于食物中毒溯源分析及分子流行病学研究.

    作者:刘玉霞;陈旭;李红叶;美丽克;左迪晓雪 刊期: 2014年第23期

  • 2013年无锡市流感病毒流行特征与人群流感抗体水平分析

    目的 了解无锡市2013年流感流行特征与人群流感病毒抗体状况,为流感预防控制提供科学依据.方法 对2013年无锡市哨点医院送检的流感样病例,应用荧光PCR鉴定流感病毒型/亚型.采用红细胞凝集抑制实验对血清标本进行季H1、季H3、新H1 (2009)、BV和BY亚型抗体检测.结果 2013年共收到哨点医院送检流感样病例1 827份,核酸阳性124份,阳性率为6.79%.124例阳性病例中,男性患者为69例,女性患者为55例,男、女性别流感病毒感染率差异无统计学意义(X2=1.424,P=0.233),不同年龄组之间的差异有统计学意义(X2=66.226,P<0.05).人群流感抗体分析,不管是健康人群还是患者,都是季H3抗体阳性率高.结论 2013年无锡市主要以季H3和新H1 (2009)流行为主,2种毒株几乎全年都有流行.这2种毒株在人群中的免疫屏障已经形成,预计在下一个流行季不会引起大的流行.

    作者:马广源;凌霞;鲍静;肖勇;吴家林;尤凤兴 刊期: 2014年第23期

  • 液液萃取气相色谱法测定饮用水中百菌清等12种农药残留

    目的 建立液液萃取毛细管柱气相色谱法同时测定生活饮用水中百菌清、溴氰菊酯、六氯苯等12种农药残留.方法 采用外标法定量,样品用正己烷萃取后浓缩,经HP-5毛细管色谱柱分离,电子捕获检测器检测,进样口温度为250℃,检测器温度为320℃,起始色谱柱温度为90℃(保持1 min),以30℃/min升至170℃(保持1min),再以8℃/min升至230℃,以2℃/min升至250℃,以3℃/min升至270℃(保持5 min),以5℃/min升至280℃(保持2 min).结果 12种目标化合物在0.01 μg/ml~0.4μg/ml浓度范围内线性关系良好,线性相关系数为0.9918~0.9995,方法的检出限为0.002μg/L~0.07 μg/L,低浓度和高浓度加标回收率分别为77.5%~ 93.8%及98.4%~113.4%,相对标准偏差(RSD,n=10)为6.9% ~8.4%.结论 液液萃取气相色谱法简便、灵敏、准确、稳定,能同时分析水样中多种痕量有机农药,满足了生活饮用水中农药残留检测需要.

    作者:徐虹;曹文婷;易承学;宋寅生;和佳鸳 刊期: 2014年第23期

  • 胃幽门螺杆菌感染情况诊断中快速尿素酶试验检测应用的价值

    目的 探讨胃幽门螺杆菌(Hp)感染情况诊断中快速尿素酶试验(RUT)检测应用的价值.方法 从本院消化内科2010年5月-2013年5月收治的住院患者中,随机选择100例进行研究,分为2组,分别予以快速尿素酶试验检测和14C尿素呼气试验(14C-UBT)检查.观察记录2组的检查结果,并进行比较.结果 经统计,100例患者中,经RUT检测Hp阳性率为86.0%,同时经14C-UBT检测Hp阳性率为60.0%.2种方法的阳性检出情况比较差异有统计学意义(X2=8.57,P<0.05,).2组在消化性溃疡和慢性胃炎、十二指肠炎阳性检出率方面差异均有统计学意义(X2=19.82,x2=21.25,均P<0.05);但在急性糜烂出血性胃炎和胃食管反流病,以及胃癌和胃息肉的阳性检出率方面差异均无统计学意义(X2=2.72,X2 =5.13,X2=5.28,X2 =4.11,均P>0.05).结论 快速尿素酶试验用于检测胃幽门螺杆菌感染情况具有较高的应用价值,且操作简单,值得临床大力推广应用.

    作者:王翔军;任永强;王新花 刊期: 2014年第23期

  • 许昌市2011年-2013年流感监测及病毒流行特征分析

    目的 分析许昌市流行性感冒监测结果,了解流感流行特征及毒株的型别分布,为流感防控提供科学依据.方法 通过中国流感监测信息系统收集许昌市流感及流感样病例(IU)监测资料,对其流行病学、病原学进行分析.采用狗肾传代细胞(MDCD)对流感病毒进行培养,对分离到的毒株采用血凝抑制实验进行型别和亚型鉴定.结果 许昌市2011年-2013年ILI全年均有病例发生,ILI%呈上升趋势,就诊高峰出现在12月份至次年3月份;人群分布主要集中在≤15岁年龄组,占66.81% (24 915/37 291);在1 219份ILI标本中核酸阳性检出率为11.48%.77份核酸阳性标本中分离到流感病毒38株,病毒分离阳性率为49.35%.结论 许昌市流感病毒活动高峰在冬季和春季,流行有明显的季节性,甲3亚型和B型病毒为主要流行株,须加强监测与防控.

    作者:从克;夏晖 刊期: 2014年第23期

  • 蚕丝-PLGA网状支架的力学强度检测及其与骨髓间充质干细胞共培养

    目的 进行蚕丝-PLGA复合网状支架的力学强度检测及其与骨髓间充质干细胞的体外共培养.方法 采用纬编针织法制备蚕丝丝素-PLGA纤维复合网状支架,并进行力学强度测试.在网状支架上滴加Ⅰ型胶原并冷冻干燥,再用纤维连接蛋白表面修饰后,种植兔骨髓间充质干细胞进行体外共培养,观察细胞与支架复合生长情况.结果 蚕丝-PLGA网状支架宽约5 mm.支架的大载荷、抗拉强度、断点伸长率、弹性模量分别为(118.32±11.21)N、(52.90±5.03) MPa、49.79%±5.16%、(177.25±19.18) MPa.支架-MSCs复合物培养2 d的扫描电镜观察显示:MSCs细胞黏附于支架表面呈立体状生长,细胞呈梭形,增殖良好,并分泌基质.结论 蚕丝-PLGA复合网状支架具有良好的力学性能与细胞相容性,是一种较有潜力的组织工程韧带的支架材料.

    作者:张科技;张文元;杨亚冬;李颖;房国坚 刊期: 2014年第23期

中国卫生检验杂志

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主管:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会