徐虹;曹文婷;易承学;宋寅生;和佳鸳
目的 建立亲水作用色谱快速测定茶氨酸含量的方法,并应用于茶叶中茶氨酸的测定,为茶叶中茶氨酸的质量控制提供方法参考.方法 茶叶样品粉碎混匀后,经水溶液加热提取过滤后,上清液采用Phenomenex Luna NH2(250 mm×4.6 mm,5μm)亲水色谱柱分离,以乙腈∶水=70∶30为流动相洗脱,流速1.0 ml/min,柱温25℃,紫外检测波长为203 nm.根据保留时间定性,外标峰面积法定量.结果 茶氨酸的浓度与峰面积呈良好的线性相关性,相关系数r=0.9999,方法检测限为0.12 μg/ml,相对标准偏差RSD为0.46%(n=9);2个浓度水平的样品加标回收率在94%~ 104%之间.结论 本方法克服了传统反相液相色谱测定中使用离子对和衍生等方法的缺点,具有分离效果好、快速简易、平衡时间短、精密度和准确性高的特点,可用于茶叶中茶氨酸的质量控制方法.
作者:孙丽华;江月仙;鲁健章;郑秋岚;王茵 刊期: 2014年第23期
目的 调查2 390例妇科门诊就诊人群中妇女人乳头状瘤病毒(HPV)感染情况和核酸分型的分布特征.方法 采用PCR-反向点杂交基因芯片技术,对2009年-2013年来本院门诊就诊的2 390例妇女宫颈脱落细胞进行HPV基因分型检测,并对HPV感染阳性高危型人群进行液基薄层细胞学(TCT)检查.结果 2 390例HPV标本中阳性538例,总阳性检出率为22.51%,在538例HPV阳性标本中,单一感染者为431例,占80.11%,2种亚型感染者92例,占17.10%,3种亚型感染者15例,占2.79%,无4种及以上亚型感染;高危型感染率为22.09% (528/2 390),低危型感染率为5.52%(132/2 390).HPV亚型感染常见依次为HPV52、HPV58、HPV16,该人群未检出HPV39、HPV45、HPV73、HPV83.各年龄段HPV感染率随着年龄的增长呈逐渐上升趋势;感染高危型HPV人群宫颈上皮内瘤变发生率为3.07%,癌变发生率为1.02%.结论 本妇科门诊人群中HPV感染率较高,并以单一高危型为主,常见的是HPV52、HPV58、HPV16;结合TCT检查,可早发现、早预防、早治疗宫颈病变及癌变.
作者:余小定;陈盈盈;赵莹 刊期: 2014年第23期
目的 进行蚕丝-PLGA复合网状支架的力学强度检测及其与骨髓间充质干细胞的体外共培养.方法 采用纬编针织法制备蚕丝丝素-PLGA纤维复合网状支架,并进行力学强度测试.在网状支架上滴加Ⅰ型胶原并冷冻干燥,再用纤维连接蛋白表面修饰后,种植兔骨髓间充质干细胞进行体外共培养,观察细胞与支架复合生长情况.结果 蚕丝-PLGA网状支架宽约5 mm.支架的大载荷、抗拉强度、断点伸长率、弹性模量分别为(118.32±11.21)N、(52.90±5.03) MPa、49.79%±5.16%、(177.25±19.18) MPa.支架-MSCs复合物培养2 d的扫描电镜观察显示:MSCs细胞黏附于支架表面呈立体状生长,细胞呈梭形,增殖良好,并分泌基质.结论 蚕丝-PLGA复合网状支架具有良好的力学性能与细胞相容性,是一种较有潜力的组织工程韧带的支架材料.
作者:张科技;张文元;杨亚冬;李颖;房国坚 刊期: 2014年第23期
目的 应用BED-CEIA技术检测哨点血清,掌握江西省2011年-2013年重点人群人类免疫缺陷病毒Ⅰ型新发感染率.方法 收集全省2011年-2013年HIV哨点监测8个重点人群共131 562份血样,其中252份样本经免疫印迹法确证检测为阳性结果,该免疫印迹阳性血样应用BED-CEIA技术检测样本以区分新发感染与既往感染,利用公式I=[F×(365/W)×R]/[N+F×(365/W) ×R/2] ×100%估算该人群的HIV-1新发感染率.结果 2011年-2013年HIV哨点监测重点人群总体HIV-1感染率分别为:0.21%,0.23%,0.14%.新发感染主要发生在男男性行为人群(MSM),其新发感染率为高,2011年新发感染率为4.77%(1.46% ~ 8.07%),2012年为5.33%(2.63% ~8.03%),2013年为1.87%(0.49%~3.26%),其他人群均较低.结论 江西省男男性行为人群相对于其他人群的HIV-1新发感染率较高,该人群艾滋病流行形势相对严峻,应重新评估目前的干预策略,加大对该人群的干预力度.
作者:唐翼龙;易志强;廖清华;刘丽萍;靳廷丽;张娜 刊期: 2014年第23期
目的 了解抗艾滋病病毒治疗患儿病毒学失败者的耐药突变特点.方法 采集接受过高效抗病毒治疗患儿的血浆,对病毒载量≥1 000拷贝/ml者进行耐药基因型检测,将所得序列上传到斯坦福大学耐药数据库(http://hivdb.stanford.edu)进行对比分析.结果 发生病毒学失败的有66例患儿,其中38例患儿出现了耐药突变,耐药发生率为57.58% (38/66).逆转录酶抑制剂的耐药发生率(56.06%,37/66)明显高于蛋白酶抑制剂的耐药发生率(3.03%,2/66).结论 HIV-1耐药突变是导致治疗失败的主要原因,在艾滋患儿开始抗病毒治疗之前进行基因型耐药检测是必要的,可为制定适用的抗病毒治疗方案提供数据.
作者:马同锁;赵景茹 刊期: 2014年第23期
目的 了解该地区发热呼吸道症候群细菌病原谱的构成.方法 对张掖市1家哨点医院自2013年1月-2013年12月符合发热呼吸道症候群监测病例定义的患者采集痰液标本,每月5份~6份,用多重聚合酶链反应(PCR)方法对肺炎链球菌(SP)、流感嗜血杆菌(HI)、军团菌(LP)、百日咳杆菌(BP)、肺炎衣原体(CT)、肺炎支原体(MP)6种呼吸道病原菌进行检测.结果 检测痰液标本63份,总阳性率为96.83% (61/63),其中SP为29.51%(18/61)、SB +HI为65.57% (40/61)、SB+ MP为4.92% (3/61),未检出CT、LP及BP;全年均有发病,发病季节变化不明显;<5岁儿童较多,阳性构成比为27.86%(17/61);男性、女性细菌感染阳性率差异无统计学意义(P>0.05).结论 张掖市发热呼吸道症候群细菌类病原主要为肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和肺炎支原体.
作者:王冬玲;于爱红 刊期: 2014年第23期
目的 了解粮食农药速测卡的可靠性及实用性.方法 通过改良酶抑制法,采用速测卡对有机磷农药的低检出限进行试验,以及检测稻谷样品中有机磷农药残留情况,并与气相色谱法进行对比;同时对不同批次的速测卡进行比较试验.结果 速测卡对大部分有机磷农药的检出限比较低,灵敏度在0.01 mg/kg~ 2.0 mg/kg;对敌敌畏灵敏度高,可达到0.01 mg/kg;对乐果灵敏度较低,为2.0 mg/kg.检测样品时,速测卡与气相色谱法阴性符合率为99.5%,阳性符合率为84.6%.5个批次的速测卡显色结果基本一致,批次间重复性较好.结论 速测卡法具有快速、准确、方便、灵敏等特点,适用于粮食生产基地、粮食收购站、粮食仓库和稻米加工厂等单位现场的定性分析.
作者:谢俊平;陈威;卢新;陈嘉东;王亚军;吴文玲 刊期: 2014年第23期
目的 通过对病人骨髓小粒细胞进行分类计数,从而为再生障碍性贫血(简称再障)的诊断提供依据.方法 分别对65例再障病例、36例增生性贫血(简称增贫)病例、22例原发性血小板减少性紫癜(ITP)病例以及10例正常人对照组进行骨髓细胞涂片,每个病例各选取2张髓片在油镜下分类计数,将每组骨髓小粒出现率、每个骨髓小粒平均所含细胞数以及所含细胞种类进行比较.结果 4组病例骨髓小粒出现率差异无统计学意义,再障组每个骨髓小粒的平均细胞数明显低于增贫组及ITP组.再障组小粒非造血细胞比例显著高于其他3组(P<0.01),从细胞分类来看,组织嗜碱细胞、淋巴细胞和脂肪细胞增高尤为突出.结论 再障病人骨髓小粒以非造血细胞为主,这可以作为不典型再障的诊断依据,同时对再障病人骨髓小粒细胞成分的分析,可以为后续治疗方案的确定提供一定的参考.
作者:杨利;王凤仁 刊期: 2014年第23期
目的 了解抗日战争期间丽水地区细菌战幸存者鼠疫耶尔森菌和炭疽杆菌感染情况.方法 鼠疫感染幸存者血清通过间接血凝法检测鼠疫F1抗体.炭疽感染幸存者创口涂抹物通过荧光定量PCR法和胶体金法检测炭疽杆菌抗原.结果 106份鼠疫感染幸存者血清鼠疫F1抗体阳性9份,滴度均≥1∶32,滴度高为1∶512,阳性率为8.49%,均通过间接血凝抑制试验验证.16份炭疽患者创口涂抹物标本2种检测方法结果均为阴性.结论 鼠疫感染幸存者血清中F1抗体阳性,说明感染鼠疫后患者体内产生的抗体可长时间或终身存在.炭疽感染幸存者患皮肤炭疽,百治不愈,创口暂时无传染性,不会对当地居民构成较大的传染性危害.
作者:叶碧峰;王晓光;雷永良;柳付明;陈秀英 刊期: 2014年第23期
目的 建立高效液相色谱法同时检测肉制品中柠檬黄、诱惑红、赤鲜红、亮蓝、靛蓝、胭脂红、红2G、日落黄、苋菜红等9种合成色素的方法.方法 肉样用1%高氯酸提取、离心,提取液经过聚酰胺/C18混合固相萃取柱净化,3ml无水乙醇-氨水溶液-水(7∶2∶1,V/V)溶液洗脱,洗脱液浓缩后进行反相液相色谱测定,甲醇-0.02 mol/L乙酸铵溶液梯度洗脱,二极管阵列检测器检测.结果 9种合成色素在1.0ug/ml~20.0 μg/ml范围内线性关系较好,相关系数r2>0.999,本方法肉制品中9种合成色素的检出限为0.1 mg/kg,定量限为0.4 mg/kg,回收率在86.0%~98.3%之间,相对标准偏差在1.03%~3.9%之间.结论 该方法简单、快速、准确,适用于肉制品中9种合成色素的同时检测.
作者:王志园;谭莹;王天娇;倪竹南;马冰洁;吴平谷 刊期: 2014年第23期
目的 研究衢州地区708例宫颈病变女性感染各亚型人乳头状瘤病毒(HPV)的概率,探讨单一感染、双重感染、多重复合感染等感染机会分布情况.方法 采用PCR体外扩增和DNA反向点杂交相结合的DNA芯片技术检测宫颈脱落细胞HPV亚型,按不同分组统计分析708例宫颈病变女性感染不同亚型人乳头状瘤病毒(HPV)的机会.结果 708例感染标本检出各亚型阳性点数为1 001次,单一亚型感染占71.13%,双重感染占24.18%以及多重复合占4.70%,其中不同亚型在各感染机会中占所有阳性点位的比例为:高危型分别占49.05%、18.88%、4.00%,低危型分别占22.08%、5.29%、0.70%.高危型和低危型HPV感染机会的差异具有统计学意义.各种感染机会在不同年龄段分布比例不同,31岁~40岁年龄段单一亚型感染比例高(47.60%),比例差异均有统计学意义(X2=256.29,P<0.005).结论 HPV感染机会具有明显的亚型和年龄分布异质性,混合感染比例不容忽视,提示使用HPV预防性疫苗应同时考虑各亚型的感染机会和年龄因素.
作者:朱庆文;杨红斌;余晓 刊期: 2014年第23期
目的 建立以6-甲基-2-硫代吡啶-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(MPT-NAG)为底物的液体型匀相速率法试剂测定NAG活性.方法 在含表面活性剂的柠檬酸缓冲液中,NAG催化MPT-NAG分解产生6-甲基-2巯基吡啶(MPT),用全自动生化分析仪监测340 nm处吸光度的变化速率,与标准液比较后计算出样本中NAG活性.结果 该法线性范围为0 U/L~ 380 U/L,平均回收率为98.8%;批内、批间相对标准差(RSD)分别为1.2%~ 3.3%和2.4%~3.9%;与参考方法相比的回归方程及相关系数分别为y=1.01x +0.24,r=0.9986.结论 用液体型MPT-NAG匀相速率法试剂测定NAG活性,具有快速、稳定、简便等优点,适合临床应用.
作者:方芳;连国军;赵长容;王文蔚;马美萍 刊期: 2014年第23期
目的 了解无锡市2013年流感流行特征与人群流感病毒抗体状况,为流感预防控制提供科学依据.方法 对2013年无锡市哨点医院送检的流感样病例,应用荧光PCR鉴定流感病毒型/亚型.采用红细胞凝集抑制实验对血清标本进行季H1、季H3、新H1 (2009)、BV和BY亚型抗体检测.结果 2013年共收到哨点医院送检流感样病例1 827份,核酸阳性124份,阳性率为6.79%.124例阳性病例中,男性患者为69例,女性患者为55例,男、女性别流感病毒感染率差异无统计学意义(X2=1.424,P=0.233),不同年龄组之间的差异有统计学意义(X2=66.226,P<0.05).人群流感抗体分析,不管是健康人群还是患者,都是季H3抗体阳性率高.结论 2013年无锡市主要以季H3和新H1 (2009)流行为主,2种毒株几乎全年都有流行.这2种毒株在人群中的免疫屏障已经形成,预计在下一个流行季不会引起大的流行.
作者:马广源;凌霞;鲍静;肖勇;吴家林;尤凤兴 刊期: 2014年第23期
目的 了解元江县人群麻疹抗体水平状况,为控制和制订消除麻疹策略提供科学依据.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对361人检测麻疹IgG抗体.结果 麻疹抗体阳性率为96.95%,抗体平均浓度(GMC)为3 078.04 mIU/ml.不同性别人群麻疹抗体阳性率差异无统计学意义(X2=0.7,P>0.05);不同地区人群麻疹抗体阳性率及GMC差异有统计学意义(X2=10.5,P<0.05,F=15.284,P<0.05);不同年龄组麻疹抗体阳性率及GMC差异有统计学意义(X2 =36.3,P<0.05,F=2.469,P<0.05).结论 元江县健康人群麻疹抗体水平较高,虽能形成有效的免疫屏障,但应提高8月龄儿童首针接种及时率.
作者:周燕华;端海涛;潘海燕;张玫;王启英;李勇三 刊期: 2014年第23期
目的 建立保健食品中α--硫辛酸的测定方法.方法 采用高效液相色谱法(HPLC),样品用流动相超声提取20 min,色谱柱:ODS-2HYPERSIL(4.60 mm×250 mm,5μm);流动相:0.125%(磷酸氢二钾+磷酸二氢钾,用磷酸调pH=3.5)+甲醇=35 +65(V/V);流量:1.0 ml/min,检测波长:215 nm.结果 硫辛酸在40 ng~4 000 ng范围内呈现良好的线性关系,相关系数为0.999997,检出限为2 ng,精密度试验RSD为0.53%(n=6);当样品添加浓度为5.33 g/100 g~22.7 g/100 g时,回收率为98.1% ~ 102%.结论 该方法操作简便、快速、可靠、重现性好,有效排除了杂质的干扰,可作为保健食品中α-硫辛酸的质量控制监测手段.
作者:甘宾宾;刘培杰;曾永芳 刊期: 2014年第23期
目的 研究主动外排泵系统qacA/B和杀白细胞素(PVL)在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)中的流行现状和对MRSA耐药性的影响.方法 PCR扩增qacA/B基因和PVL基因;运用琼脂稀释法检测消毒剂和抗生素的小抑菌浓度;把MRSA分为4组:在1株MRSA中,qacA/B基因和PVL基因均阳性为第1组(No.1),仅qacA/B阳性为第2组(No.2),仅PVL基因阳性为第3组(No.3),qacA/B基因和PVL基因均阴性为第4组(No.4),采用卡方检验分析数据.结果 qacA/B基因和PVL基因的检出率分别为34.00%(68株)和28.00%(56株),其中No.1、No.2和No.3分别为35株(17.50%)、33株(16.50%)和21株(10.50%);消佳净(1.00 g/L)、碘伏(1.00 g/L)、苯扎溴胺(1.00 g/L)、阿米卡星、环丙沙星、利福平在No.1的耐药率明显高于No.4(P <0.05),这种情况同样存在于No.2与No.4、No.2与No.3、No.1与No.3中.结论 MRSA对消毒剂和阿米卡星等抗生素产生的耐药性与主动外排泵系统qacA/B有关系,而与PVL均无相关性.
作者:郭震;张燕莲;陈传;徐株锦;谢文熙;刘军 刊期: 2014年第23期
目的 建立果蔬中多效唑的高效液相色谱(HPLC)快速检测方法.方法 对果蔬样品中的多效唑用乙腈提取,浓缩后用甲醇复溶,经QuEChERS试剂盒净化后用HPLC检测;以甲醇与水(65:35,wV)为流动相,ACCHROM UnitaryC18柱(150 mm ×4.6 mm,5μm)分离,二极管阵列检测器在222 nm波长处检测,外标法定量.结果 多效唑在0.40 μg/ml~20 μg/ml浓度范围内线性关系良好,相关系数r=0.9999;在0.08 mg/kg、0.20 mg/kg、0.50 mg/kg 3个浓度添加水平下,豆芽和草莓样本中的平均回收率分别为76.6%~ 84.5%和83.2%~ 89.2%,相对标准偏差(RSD)均≤4.95%;方法检出限为0.02 mg/kg,定量限为0.08 mg/kg.结论 利用QuEChERS试剂盒可以对果蔬样本进行有效净化,结合HPLC法可以满足果蔬中多效唑残留检测要求.该方法简便、快速、准确.
作者:谭莹;倪竹南;汤鋆;朱坚磐;姜维;王志园 刊期: 2014年第23期
目的 观察妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘组织血管内皮生长因子(VEGF)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达情况,探讨两者在妊高征发病中的作用.方法 采用免疫组织化学EliVision法测定35例妊高征和40例正常产妇的胎盘组织VEGF和HIF-1α表达.结果 两者在滋养细胞、血管内皮细胞表达,绒毛间质细胞少量表达.VEGF表达强度轻度妊高征与对照组比较差异无统计学意义,而中度及重度妊高征胎盘与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);妊高征组胎盘HIF-1α的表达高于对照组(P<0.05),且重度高于中度、中度高于轻度.结论 妊高征患者胎盘VEGF表达水平降低,而HIF-1 α的表达水平升高,均与病情的严重程度相关,共同参与了妊高征的发生和发展过程.
作者:钱小泉;施赛欧;张旻岚;徐虹;张品南 刊期: 2014年第23期
目的 建立固相萃取-高效液相色谱法测定食品中2-(4-甲氧基苯氧基)-丙酸钠的分析方法.方法 样品采用氨水溶液(1∶9,V/V)溶解后固相萃取净化,在Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm×5μm)上,以甲醇/磷酸溶液(1∶1,V/V,pH =3.0)为流动相进行分离,紫外224 nm波长检测,外标法定量.结果 2-(4-甲氧基苯氧基)-丙酸钠在0.50 mg/L~ 50.0 mg/L范围内具有良好的线性关系(相关系数r=0.9995),回收率为87.4% ~ 99.0%,RSD<5.0%,定量检出限为1.0 mg/kg.结论 该方法具有前处理简单、重现性好的优点,能满足实际工作的需要.
作者:马建明;龚文杰;邬晨阳;徐毅 刊期: 2014年第23期
目的 探讨高尔基体蛋白73(GP73)与RASSF1A基因启动子区甲基化对原发性肝癌(HCC)的诊断价值.方法 选择2012年8月-2014年2月在浙江省宁波市第六医院住院的80例肝癌患者、40例肝硬化、30例健康体检者,采用酶联免疫法(ELISA)检测血清中GP73含量,甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)检测血清中RASSF1A基因启动子区甲基化情况,ROC曲线分析GP73对HCC的佳诊断点,并对单一及组合(GP73+ RASSF1A)方式的敏感度、特异度进行比较.结果 肝癌组、肝硬化组、健康体检组血清GP73平均浓度为278.3 μg/L、187.3 μg/L、46.8 μg/L(F =6.85,P<0.05);RASSF1A基因甲基化检出率分别为65%(52/80)、20%(8/40)、3.3% (1/30)(x2=44.1,P<0.05);GP73诊断肝癌的ROC曲线下面积为0.852,P<0.05,取GP73为122.02 ug/L为佳诊断分界点;GP73诊断HCC的灵敏度高于RASSF1A基因甲基化,GP73诊断HCC的特异度低于RASSF1A基因甲基化,GP73与RASSF1A基因甲基化并联诊断HCC的敏感度与单项GP73相比,差异具有统计学意义(X2=4.12,P<0.05),两项指标并联诊断HCC的特异度与单项RASSF1A甲基化比较,差异无统计学意义(X2=0.31,P>0.05).结论 GP73并联RASSF1A基因甲基化检测对诊断HCC的敏感度较高,具有一定的筛查能力.
作者:李宇宁;汪永强 刊期: 2014年第23期