学术投稿

液体型MPT-NAG匀相速率法试剂测定NAG活性

方芳;连国军;赵长容;王文蔚;马美萍

关键词:匀相法, N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶, 6-甲基-2-硫代吡啶-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷
摘要:目的 建立以6-甲基-2-硫代吡啶-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(MPT-NAG)为底物的液体型匀相速率法试剂测定NAG活性.方法 在含表面活性剂的柠檬酸缓冲液中,NAG催化MPT-NAG分解产生6-甲基-2巯基吡啶(MPT),用全自动生化分析仪监测340 nm处吸光度的变化速率,与标准液比较后计算出样本中NAG活性.结果 该法线性范围为0 U/L~ 380 U/L,平均回收率为98.8%;批内、批间相对标准差(RSD)分别为1.2%~ 3.3%和2.4%~3.9%;与参考方法相比的回归方程及相关系数分别为y=1.01x +0.24,r=0.9986.结论 用液体型MPT-NAG匀相速率法试剂测定NAG活性,具有快速、稳定、简便等优点,适合临床应用.
中国卫生检验杂志相关文献
  • 高效液相色谱法同时检测肉制品中9种合成色素

    目的 建立高效液相色谱法同时检测肉制品中柠檬黄、诱惑红、赤鲜红、亮蓝、靛蓝、胭脂红、红2G、日落黄、苋菜红等9种合成色素的方法.方法 肉样用1%高氯酸提取、离心,提取液经过聚酰胺/C18混合固相萃取柱净化,3ml无水乙醇-氨水溶液-水(7∶2∶1,V/V)溶液洗脱,洗脱液浓缩后进行反相液相色谱测定,甲醇-0.02 mol/L乙酸铵溶液梯度洗脱,二极管阵列检测器检测.结果 9种合成色素在1.0ug/ml~20.0 μg/ml范围内线性关系较好,相关系数r2>0.999,本方法肉制品中9种合成色素的检出限为0.1 mg/kg,定量限为0.4 mg/kg,回收率在86.0%~98.3%之间,相对标准偏差在1.03%~3.9%之间.结论 该方法简单、快速、准确,适用于肉制品中9种合成色素的同时检测.

    作者:王志园;谭莹;王天娇;倪竹南;马冰洁;吴平谷 刊期: 2014年第23期

  • 2013年无锡市流感病毒流行特征与人群流感抗体水平分析

    目的 了解无锡市2013年流感流行特征与人群流感病毒抗体状况,为流感预防控制提供科学依据.方法 对2013年无锡市哨点医院送检的流感样病例,应用荧光PCR鉴定流感病毒型/亚型.采用红细胞凝集抑制实验对血清标本进行季H1、季H3、新H1 (2009)、BV和BY亚型抗体检测.结果 2013年共收到哨点医院送检流感样病例1 827份,核酸阳性124份,阳性率为6.79%.124例阳性病例中,男性患者为69例,女性患者为55例,男、女性别流感病毒感染率差异无统计学意义(X2=1.424,P=0.233),不同年龄组之间的差异有统计学意义(X2=66.226,P<0.05).人群流感抗体分析,不管是健康人群还是患者,都是季H3抗体阳性率高.结论 2013年无锡市主要以季H3和新H1 (2009)流行为主,2种毒株几乎全年都有流行.这2种毒株在人群中的免疫屏障已经形成,预计在下一个流行季不会引起大的流行.

    作者:马广源;凌霞;鲍静;肖勇;吴家林;尤凤兴 刊期: 2014年第23期

  • 许昌市2011年-2013年流感监测及病毒流行特征分析

    目的 分析许昌市流行性感冒监测结果,了解流感流行特征及毒株的型别分布,为流感防控提供科学依据.方法 通过中国流感监测信息系统收集许昌市流感及流感样病例(IU)监测资料,对其流行病学、病原学进行分析.采用狗肾传代细胞(MDCD)对流感病毒进行培养,对分离到的毒株采用血凝抑制实验进行型别和亚型鉴定.结果 许昌市2011年-2013年ILI全年均有病例发生,ILI%呈上升趋势,就诊高峰出现在12月份至次年3月份;人群分布主要集中在≤15岁年龄组,占66.81% (24 915/37 291);在1 219份ILI标本中核酸阳性检出率为11.48%.77份核酸阳性标本中分离到流感病毒38株,病毒分离阳性率为49.35%.结论 许昌市流感病毒活动高峰在冬季和春季,流行有明显的季节性,甲3亚型和B型病毒为主要流行株,须加强监测与防控.

    作者:从克;夏晖 刊期: 2014年第23期

  • 2012年-2013年襄阳市农村饮水工程水质监测结果分析

    目的 了解襄阳市2012年-2013年农村饮水工程水质卫生现状,为政府部门改善农村饮水条件提供科学依据.方法 对2012年-2013年襄阳市农村饮水工程水质监测资料进行整理分析,水质评价按《生活饮用水卫生标准》(GB5749-2006)规定执行,在不考虑消毒指标情况下检测的所有指标全部合格的水样评为水质合格.结果 2012年共检测556份样品,合格率为34.89%;2013年共检测372份样品,合格率为35.22%.2012年、2013年检测合格率较低的指标均为微生物,分别为36.33%、37.37%.2012年-2013年襄阳市水质合格率没有明显提高,其中微生物指标合格率低的现象依然存在.结论 2012年-2013年襄阳市农村饮水工程水质存在安全隐患,微生物污染较严重,有关部门应当加强水源保护,完善水质净化、消毒工艺,落实消毒措施,确保农村居民饮水安全.

    作者:张金枝 刊期: 2014年第23期

  • One-step RT-PCR-RFLP方法筛查新型甲型H1N1流感病毒Oseltamivir耐药株

    目的 分析2013年江西省甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶(NA)基因第275位氨基酸变异情况,掌握甲型H1N1流感病毒耐药特性,为甲型H1N1流感临床治疗和疾病控制提供参考.方法 收集江西省流感监测哨点医院采集的流感样病例的鼻咽拭子标本,采用狗肾传代细胞(MDCK)对标本进行病毒分离,对分离的31株新型甲型H1N1流感病毒进行核酸提取,采用一步法逆转录-聚合酶链反应(One-step RT-PCR)扩增病毒M基因部分片段,采用限制性内切酶片段长度多态性分析(RFLP)方法,分析扩增的部分NA基因第275位是否发生组氨酸(H)到酪氨酸(Y)的突变.结果 2013年江西省31株甲型H1 N1流感病毒NA基因第275位氨基酸均为组氨酸,未发生变异.结论 2013年31株毒株均对Osehamivir敏感,One-step RT-PCR-RFLP方法筛查新型甲型H1N1流感病毒Osehamivir耐药株简便可行.

    作者:熊英;施勇;李健雄;龚甜;周珺;徐刚 刊期: 2014年第23期

  • 布鲁杆菌病3种血清学检测方法比较分析

    目的 通过比较虎红平板凝集试验(RBPT)、试管凝集试验(SAT)和胶体金免疫层析法(GICA)检测结果,客观评价3种方法对布鲁杆菌病诊断效率和价值.方法 采用虎红平板凝集试验、试管凝集试验和胶体金免疫层析法3种布鲁杆菌病血清学检测方法,对300位从事养殖、屠宰加工、皮毛贩运等重点职业人群进行检测,检测结果运用卡方检验进行统计分析.结果 运用3种检验方法对300位重点职业人群血清样本进行检测,RBPT法阳性血清25例、阴性血清275例;GICA法阳性血清24例、阴性血清276例;SAT法阳性血清21例、阴性血清279例,3种检验方法的阳性检出率间差异无统计学意义(P>0.05).结论 RBPT法、GICA法敏感性好,SAT法特异性高,在实际检测工作中应该把几种检验方法结合起来应用,并结合流行病学和临床体征来确诊布鲁杆菌病患者.

    作者:董文杰;解英波 刊期: 2014年第23期

  • 粪便中隐孢子虫的提取与检测方法的建立

    目的 建立粪便中隐孢子虫的提取与检测技术,分析腹泻病人粪便中隐孢子虫的感染情况,为该病的诊断、防治提供科学依据.方法 选择经病原学检测已经确诊的5份隐孢子虫阳性和4份阴性粪便,分别采用FTA卡和商业化DNA抽提试剂盒抽提粪便样本中DNA,经荧光PCR法进行扩增,比较核酸提取效果;同时用直接涂片法、改良抗酸染色法及荧光PCR法对63例腹泻病人隐孢子虫感染情况进行粪样检测分析.结果 应用FTA卡抽提DNA效果优于应用商业化DNA抽提试剂盒抽提DNA.同时对63份腹泻病人粪便运用直接涂片法、改良抗酸染色法及荧光PCR法都未检出隐孢子虫.结论 应用FTA卡进行粪便样本中隐孢子虫DNA的抽提方法具有简单有效、快速灵敏、准确可靠等特点,可以应用于粪便中隐孢子虫的检测,同时可联合多种检测手段来提高腹泻病人原虫感染的检出率.

    作者:黄达娜;唐屹君;李迎慧;阳帆;吴春利;李玥 刊期: 2014年第23期

  • 清远市某工业区农村饮用水重金属健康风险评价

    目的 监测清远市某工业区农村饮用水中A1、As、Se、Cd、Sb、Pb 6种重金属含量并评价其健康风险.方法 在清远市某工业区选择104个水井作为监测对象,检测重金属含量;按《生活饮用水卫生标准》GB5749-2006进行评价,并采用美国环境保护署健康风险评价模型评价其致癌风险与非致癌风险.结果 通过饮用水途径所致健康风险中,非致癌物和致癌物所致风险都低于国际辐射防护委员会(ICRP)推荐的,污染物所致健康危害的个人致癌风险可接受大值(5.00×10-5/a),其中致癌物引起的年均风险As(1.42×10-6/a)> Cd(8.24× 10-8/a),非致癌物引起的年均风险A1(1.20×10-8/a)> Pb(5.41×10-9/a)> Se(1.77×10-10/a) >Sb(6.76×10-n/a).结论 清远市某工业区农村饮用水中重金属存在一定健康风险,As为产生健康风险的主要污染物,应优先考虑防治.

    作者:何健飞;王国彬;赖婧 刊期: 2014年第23期

  • 增菌液及增菌时间对空肠弯曲菌检测率的影响

    目的 了解不同增菌液、不同增菌时间对空肠弯曲菌检测结果的影响,摸索空肠弯曲菌分离鉴定的优化条件.方法 对多重PCR检测阳性的样品参照GB/T 4789.9-2008提供的方法分离鉴定空肠弯曲菌,比较不同增菌液、不同增菌时间检测空肠弯曲菌的结果差异.结果 300份样品在布氏肉汤和改良布氏肉汤及添加5%新生牛血清的布氏肉汤和改良布氏肉汤中,经24 h增菌对空肠弯曲菌的检出率分别为9.67%、15.00%、15.00%、16.67%;经48 h增菌的检测率分别为9.00%、13.67%和14.00%、14.33%.增菌48 h的检出率较24h有下降趋势.结论 添加5%新生牛血清的布氏肉汤、改良布氏肉汤较适合作为空肠弯曲菌分离鉴定的增菌液,增菌时间以24h较为适宜.

    作者:熊海平;张伟;许海燕;汤敏 刊期: 2014年第23期

  • 抗HIV-1治疗后病毒学失败患儿的耐药基因型分析

    目的 了解抗艾滋病病毒治疗患儿病毒学失败者的耐药突变特点.方法 采集接受过高效抗病毒治疗患儿的血浆,对病毒载量≥1 000拷贝/ml者进行耐药基因型检测,将所得序列上传到斯坦福大学耐药数据库(http://hivdb.stanford.edu)进行对比分析.结果 发生病毒学失败的有66例患儿,其中38例患儿出现了耐药突变,耐药发生率为57.58% (38/66).逆转录酶抑制剂的耐药发生率(56.06%,37/66)明显高于蛋白酶抑制剂的耐药发生率(3.03%,2/66).结论 HIV-1耐药突变是导致治疗失败的主要原因,在艾滋患儿开始抗病毒治疗之前进行基因型耐药检测是必要的,可为制定适用的抗病毒治疗方案提供数据.

    作者:马同锁;赵景茹 刊期: 2014年第23期

  • 主动外排泵系统qacA/B、杀白细胞素与耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性的研究

    目的 研究主动外排泵系统qacA/B和杀白细胞素(PVL)在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)中的流行现状和对MRSA耐药性的影响.方法 PCR扩增qacA/B基因和PVL基因;运用琼脂稀释法检测消毒剂和抗生素的小抑菌浓度;把MRSA分为4组:在1株MRSA中,qacA/B基因和PVL基因均阳性为第1组(No.1),仅qacA/B阳性为第2组(No.2),仅PVL基因阳性为第3组(No.3),qacA/B基因和PVL基因均阴性为第4组(No.4),采用卡方检验分析数据.结果 qacA/B基因和PVL基因的检出率分别为34.00%(68株)和28.00%(56株),其中No.1、No.2和No.3分别为35株(17.50%)、33株(16.50%)和21株(10.50%);消佳净(1.00 g/L)、碘伏(1.00 g/L)、苯扎溴胺(1.00 g/L)、阿米卡星、环丙沙星、利福平在No.1的耐药率明显高于No.4(P <0.05),这种情况同样存在于No.2与No.4、No.2与No.3、No.1与No.3中.结论 MRSA对消毒剂和阿米卡星等抗生素产生的耐药性与主动外排泵系统qacA/B有关系,而与PVL均无相关性.

    作者:郭震;张燕莲;陈传;徐株锦;谢文熙;刘军 刊期: 2014年第23期

  • BED-CEIA技术在江西省艾滋病监测重点人群HIV-1新发感染率估算中的应用

    目的 应用BED-CEIA技术检测哨点血清,掌握江西省2011年-2013年重点人群人类免疫缺陷病毒Ⅰ型新发感染率.方法 收集全省2011年-2013年HIV哨点监测8个重点人群共131 562份血样,其中252份样本经免疫印迹法确证检测为阳性结果,该免疫印迹阳性血样应用BED-CEIA技术检测样本以区分新发感染与既往感染,利用公式I=[F×(365/W)×R]/[N+F×(365/W) ×R/2] ×100%估算该人群的HIV-1新发感染率.结果 2011年-2013年HIV哨点监测重点人群总体HIV-1感染率分别为:0.21%,0.23%,0.14%.新发感染主要发生在男男性行为人群(MSM),其新发感染率为高,2011年新发感染率为4.77%(1.46% ~ 8.07%),2012年为5.33%(2.63% ~8.03%),2013年为1.87%(0.49%~3.26%),其他人群均较低.结论 江西省男男性行为人群相对于其他人群的HIV-1新发感染率较高,该人群艾滋病流行形势相对严峻,应重新评估目前的干预策略,加大对该人群的干预力度.

    作者:唐翼龙;易志强;廖清华;刘丽萍;靳廷丽;张娜 刊期: 2014年第23期

  • 改良酶抑制法快速检测稻谷中有机磷农药残留

    目的 了解粮食农药速测卡的可靠性及实用性.方法 通过改良酶抑制法,采用速测卡对有机磷农药的低检出限进行试验,以及检测稻谷样品中有机磷农药残留情况,并与气相色谱法进行对比;同时对不同批次的速测卡进行比较试验.结果 速测卡对大部分有机磷农药的检出限比较低,灵敏度在0.01 mg/kg~ 2.0 mg/kg;对敌敌畏灵敏度高,可达到0.01 mg/kg;对乐果灵敏度较低,为2.0 mg/kg.检测样品时,速测卡与气相色谱法阴性符合率为99.5%,阳性符合率为84.6%.5个批次的速测卡显色结果基本一致,批次间重复性较好.结论 速测卡法具有快速、准确、方便、灵敏等特点,适用于粮食生产基地、粮食收购站、粮食仓库和稻米加工厂等单位现场的定性分析.

    作者:谢俊平;陈威;卢新;陈嘉东;王亚军;吴文玲 刊期: 2014年第23期

  • 液体型MPT-NAG匀相速率法试剂测定NAG活性

    目的 建立以6-甲基-2-硫代吡啶-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(MPT-NAG)为底物的液体型匀相速率法试剂测定NAG活性.方法 在含表面活性剂的柠檬酸缓冲液中,NAG催化MPT-NAG分解产生6-甲基-2巯基吡啶(MPT),用全自动生化分析仪监测340 nm处吸光度的变化速率,与标准液比较后计算出样本中NAG活性.结果 该法线性范围为0 U/L~ 380 U/L,平均回收率为98.8%;批内、批间相对标准差(RSD)分别为1.2%~ 3.3%和2.4%~3.9%;与参考方法相比的回归方程及相关系数分别为y=1.01x +0.24,r=0.9986.结论 用液体型MPT-NAG匀相速率法试剂测定NAG活性,具有快速、稳定、简便等优点,适合临床应用.

    作者:方芳;连国军;赵长容;王文蔚;马美萍 刊期: 2014年第23期

  • 妊娠高血压综合征患者胎盘组织中VEGF、HIF-1α的表达及意义

    目的 观察妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘组织血管内皮生长因子(VEGF)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达情况,探讨两者在妊高征发病中的作用.方法 采用免疫组织化学EliVision法测定35例妊高征和40例正常产妇的胎盘组织VEGF和HIF-1α表达.结果 两者在滋养细胞、血管内皮细胞表达,绒毛间质细胞少量表达.VEGF表达强度轻度妊高征与对照组比较差异无统计学意义,而中度及重度妊高征胎盘与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);妊高征组胎盘HIF-1α的表达高于对照组(P<0.05),且重度高于中度、中度高于轻度.结论 妊高征患者胎盘VEGF表达水平降低,而HIF-1 α的表达水平升高,均与病情的严重程度相关,共同参与了妊高征的发生和发展过程.

    作者:钱小泉;施赛欧;张旻岚;徐虹;张品南 刊期: 2014年第23期

  • 双重PCR鉴别牛、羊肉掺假

    目的 建立可同时检测羊肉中掺入的猪、马、牛、鸭成分中的任意2种,及牛肉中掺入的猪、马、鸭成分中任意2种的双重PCR检测体系.方法 配制掺入猪、马、牛、鸭源性成分的模拟掺假羊肉样品及掺入猪、马、鸭源性成分的模拟掺假牛肉样品,每个成分的掺假比例为10%.筛选特异性强、敏感度高的猪、马、牛、鸭物种特异性基因,优化反应体系,建立了针对猪、牛、马、鸭两两配对的双重PCR检测体系.结果 无论是模拟牛肉掺假样品,还是模拟羊肉掺假样品,所有掺入的低价肉品成分都被准确检出,且无非特异扩增条带.结论 本研究建立的双重PCR检测体系,可以敏感、特异、准确的检出牛羊肉制品中的猪、牛、马、鸭成分.

    作者:杨冬燕;杨永存;李浩;杨小柯;邓平建 刊期: 2014年第23期

  • 大便漂浮集卵新法

    目的 建立一个能提高肠道蠕虫卵阳性检出率的漂浮集卵新法.方法 在原有的饱和盐水漂浮法基础上滴加汽油,瓶口上不盖载玻片,用细铁丝环取漂浮油膜置载玻片上,直接镜检寄生虫卵.结果 对282份门诊和住院病人大便标本的检测中,肠道蠕虫卵阳性检出率从0.35%提高到2.48%;对187份幼儿园小孩大便标本的检测中,肠道蠕虫卵阳性检出率从0%提高到3.21%;对216份小学生大便标本的检测中,肠道蠕虫卵阳性检出率从0.46%提高到3.24%.结论 新建立的大便漂浮集卵方法,液面油膜起到了稳定虫卵的作用,从而使肠道蠕虫卵阳性检出率有明显提高,且操作简便.

    作者:吴寒 刊期: 2014年第23期

  • 宁德市部分市售食品重金属污染状况监测分析

    目的 了解宁德市2013年各类食品中重金属污染现状,为宁德市食品安全监管提供科学依据.方法 从宁德市超市和农贸市场有代表性的随机抽取各类食品样品,按照国家标准检测样品中的铅、镉、汞含量.结果 共检测10类样品223份,其中肝脏中的铅合格率仅为29%,大米中的铅合格率为67%,藻类、食用菌、奶粉中的铅合格率在80%~95%之间,其他种类中的铅合格率均为100%;大米、猪肉、藻类和食用菌中的镉合格率在85%~95%之间,其他种类中的镉合格率均为100%;蔬菜、食用菌的汞合格率在80%~ 90%之间,其他种类中的汞合格率均为100%.结论 宁德部分市售食品受到不同程度的重金属污染,相关部门应高度重视大米、肝脏中的铅污染并加强对藻类、蔬菜、食用菌及奶粉的卫生监督管理.

    作者:邱汉泉;刘伟 刊期: 2014年第23期

  • 肾病患者尿培养阳性菌种分布及耐药性分析

    目的 分析本院近一年多以来肾病患者和泌尿系感染者的尿培养菌分布和耐药情况,为临床合理用药提供依据.方法 采用回顾性查询,对2011年1月1日-2012年3月31日肾病中心和泌尿外科病区送检分离的菌株分析研究.结果 共分离73例致病菌,其中革兰阴性杆菌56例(76.7%),以大肠埃希菌为主,共计41例(56.16%),各种革兰阴性杆菌检出率差异具有统计学意义(X2=72,P<0.05);革兰阳性球菌13例(17.8%),以肠球菌为主,共计6例(8.22%),各种革兰阳性球菌检出率差异具有统计学意义(X2=42,P<0.05);真菌4例(5.5%).革兰阴性杆菌耐药率低的是亚胺培南,高的是氨苄西林,各种抗生素耐药率差异具有统计学意义(X2 =251.82,P<0.05);革兰阳性球菌中耐药率低的是万古霉素,高的是克林霉素,各种抗生素耐药率差异具有统计学意义(X2=186.89,P<0.05).结论 尿培养对肾病患者极为重要,关系到临床用药和治疗方案的选择,应引起临床足够的重视.

    作者:陈松楠;李姝华;菅强;胡金川 刊期: 2014年第23期

  • 肛周脓肿病原菌分布及耐药性分析

    目的 了解肛周脓肿病原菌分布及主要病原菌的耐药性,以指导临床用药.方法 医院2012年-2013年收治242例肛周脓肿患者,于手术切开引流前抽取脓液,采用法国生物梅里埃ATB全自动细菌鉴定仪做需氧细菌鉴定,采用K-B法及MIC法进行药敏试验,并对结果进行统计分析.结果 162份标本分离病原菌91株,阳性率56.17%,全部为革兰阴性菌,大肠埃希菌77株,占84.62%,其中,产ESBLS菌14株,占大肠埃希菌的18.18%;克雷伯菌11株,占12.09%.大肠埃希菌对所有青霉素类及头孢硫脒耐药率达88%~ 96%;二三四代头孢耐药率为20%~42%;喹诺酮类、氨基糖苷类耐药率为22% ~ 28%.克雷伯菌对所有青霉素类及头孢硫脒100%耐药.结论 肛周脓肿病原菌以肠杆菌科为主,且菌株的耐药率较高,产ESBLS菌检出占一定比例,临床应根据药敏结果合理选用或调整用药,控制耐药菌的产生和传播.

    作者:王赛君;殷黎;杨云;刘超基 刊期: 2014年第23期

中国卫生检验杂志

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主管:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会