唐翼龙;易志强;廖清华;刘丽萍;靳廷丽;张娜
目的 建立亲水作用色谱快速测定茶氨酸含量的方法,并应用于茶叶中茶氨酸的测定,为茶叶中茶氨酸的质量控制提供方法参考.方法 茶叶样品粉碎混匀后,经水溶液加热提取过滤后,上清液采用Phenomenex Luna NH2(250 mm×4.6 mm,5μm)亲水色谱柱分离,以乙腈∶水=70∶30为流动相洗脱,流速1.0 ml/min,柱温25℃,紫外检测波长为203 nm.根据保留时间定性,外标峰面积法定量.结果 茶氨酸的浓度与峰面积呈良好的线性相关性,相关系数r=0.9999,方法检测限为0.12 μg/ml,相对标准偏差RSD为0.46%(n=9);2个浓度水平的样品加标回收率在94%~ 104%之间.结论 本方法克服了传统反相液相色谱测定中使用离子对和衍生等方法的缺点,具有分离效果好、快速简易、平衡时间短、精密度和准确性高的特点,可用于茶叶中茶氨酸的质量控制方法.
作者:孙丽华;江月仙;鲁健章;郑秋岚;王茵 刊期: 2014年第23期
临床微生物检验是一门重要的检验专业课程,其内容涵盖广泛,包括细菌、病毒、支原体、衣原体、螺旋体、真菌等;涉及技术繁多,囊括分子生物学技术、免疫学技术、生化技术、光镜及电镜技术等;研究范畴全面,既有微生物的生物学性状,又有微生物的耐药机制,还涉及部分基因工程内容[1].鉴于本学科特点,单纯依靠理论讲授难以保证学习效果.为此,各医学院校均对学生设置了专业实习教学.
作者:郭小兵;马俊芬;刘红春;张世杰;沈燕;明亮 刊期: 2014年第23期
目的 应用BED-CEIA技术检测哨点血清,掌握江西省2011年-2013年重点人群人类免疫缺陷病毒Ⅰ型新发感染率.方法 收集全省2011年-2013年HIV哨点监测8个重点人群共131 562份血样,其中252份样本经免疫印迹法确证检测为阳性结果,该免疫印迹阳性血样应用BED-CEIA技术检测样本以区分新发感染与既往感染,利用公式I=[F×(365/W)×R]/[N+F×(365/W) ×R/2] ×100%估算该人群的HIV-1新发感染率.结果 2011年-2013年HIV哨点监测重点人群总体HIV-1感染率分别为:0.21%,0.23%,0.14%.新发感染主要发生在男男性行为人群(MSM),其新发感染率为高,2011年新发感染率为4.77%(1.46% ~ 8.07%),2012年为5.33%(2.63% ~8.03%),2013年为1.87%(0.49%~3.26%),其他人群均较低.结论 江西省男男性行为人群相对于其他人群的HIV-1新发感染率较高,该人群艾滋病流行形势相对严峻,应重新评估目前的干预策略,加大对该人群的干预力度.
作者:唐翼龙;易志强;廖清华;刘丽萍;靳廷丽;张娜 刊期: 2014年第23期
目的 了解无锡市2013年流感流行特征与人群流感病毒抗体状况,为流感预防控制提供科学依据.方法 对2013年无锡市哨点医院送检的流感样病例,应用荧光PCR鉴定流感病毒型/亚型.采用红细胞凝集抑制实验对血清标本进行季H1、季H3、新H1 (2009)、BV和BY亚型抗体检测.结果 2013年共收到哨点医院送检流感样病例1 827份,核酸阳性124份,阳性率为6.79%.124例阳性病例中,男性患者为69例,女性患者为55例,男、女性别流感病毒感染率差异无统计学意义(X2=1.424,P=0.233),不同年龄组之间的差异有统计学意义(X2=66.226,P<0.05).人群流感抗体分析,不管是健康人群还是患者,都是季H3抗体阳性率高.结论 2013年无锡市主要以季H3和新H1 (2009)流行为主,2种毒株几乎全年都有流行.这2种毒株在人群中的免疫屏障已经形成,预计在下一个流行季不会引起大的流行.
作者:马广源;凌霞;鲍静;肖勇;吴家林;尤凤兴 刊期: 2014年第23期
目的 了解遵义市流感的流行特征及流行趋势,为制定流感的防控措施提供科学依据.方法 采集门诊流感样病例的咽拭子标本,采用real time PCR方法进行流感病毒核酸检测.结果 2013年共采集流感标本2 174份,检出346份阳性,总阳性率为15.92%.其中H1N1型226份,H3型88份,B-Yamagata型32份.2013年的1月-4月、11月-12月是遵义市的流感高峰期.结论 2013年流感阳性率15.92%.以新甲型H1N1为主要毒株,发病高峰为冬春季节.5岁~组人群是主要感染人群.
作者:何柳;朱琳;赵明伍;汪荣珊;田登菊 刊期: 2014年第23期
目的 建立液液萃取毛细管柱气相色谱法同时测定生活饮用水中百菌清、溴氰菊酯、六氯苯等12种农药残留.方法 采用外标法定量,样品用正己烷萃取后浓缩,经HP-5毛细管色谱柱分离,电子捕获检测器检测,进样口温度为250℃,检测器温度为320℃,起始色谱柱温度为90℃(保持1 min),以30℃/min升至170℃(保持1min),再以8℃/min升至230℃,以2℃/min升至250℃,以3℃/min升至270℃(保持5 min),以5℃/min升至280℃(保持2 min).结果 12种目标化合物在0.01 μg/ml~0.4μg/ml浓度范围内线性关系良好,线性相关系数为0.9918~0.9995,方法的检出限为0.002μg/L~0.07 μg/L,低浓度和高浓度加标回收率分别为77.5%~ 93.8%及98.4%~113.4%,相对标准偏差(RSD,n=10)为6.9% ~8.4%.结论 液液萃取气相色谱法简便、灵敏、准确、稳定,能同时分析水样中多种痕量有机农药,满足了生活饮用水中农药残留检测需要.
作者:徐虹;曹文婷;易承学;宋寅生;和佳鸳 刊期: 2014年第23期
目的 探讨男性不育患者生殖激素水平与精子质量的相关性.方法 3 108例男性不育患者按世界卫生标准进行精液常规分析,根据精液分析结果分为对照组(精液正常)和4个研究组:A组(弱精子症)、B组(少精子症)、C组(少弱精子症)、D组(严重少精子症).回顾性分析各组的生殖激素(FSH、LH、E2、PRL、T)水平.结果 4组的FSH和LH水平明显高于对照组(P<0.05),T和E2水平与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05).A组、C组的PRL水平明显高于对照组(P<0.01),B组、D组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).D组的FSH水平增高者异常发生率高于其他各组(P<0.05).结论 精子质量与多种血清性激素尤其是FSH异常密切相关,精液分析联合血清生殖激素检测为临床治疗男性不育提供了重要依据.
作者:王荣香;毛金观 刊期: 2014年第23期
目的 了解抗艾滋病病毒治疗患儿病毒学失败者的耐药突变特点.方法 采集接受过高效抗病毒治疗患儿的血浆,对病毒载量≥1 000拷贝/ml者进行耐药基因型检测,将所得序列上传到斯坦福大学耐药数据库(http://hivdb.stanford.edu)进行对比分析.结果 发生病毒学失败的有66例患儿,其中38例患儿出现了耐药突变,耐药发生率为57.58% (38/66).逆转录酶抑制剂的耐药发生率(56.06%,37/66)明显高于蛋白酶抑制剂的耐药发生率(3.03%,2/66).结论 HIV-1耐药突变是导致治疗失败的主要原因,在艾滋患儿开始抗病毒治疗之前进行基因型耐药检测是必要的,可为制定适用的抗病毒治疗方案提供数据.
作者:马同锁;赵景茹 刊期: 2014年第23期
目的 评价5个不同厂家自身抗体谱线性免疫印迹法(UA)试剂中的抗60 kD Ro/SSA IgG抗体项目的一致性及符合率.方法 收集本院54例自身免疫性疾病病人和10份2013年卫生部临检中心室间质评血清及30例健康人血清,同时使用酶联免疫吸附(ELISA)法和5个不同品牌LIA法试剂对血清中的抗60 kD Ro/SSA IgG抗体进行检测,比较5个不同品牌LIA法试剂检测60 kD Ro/SSA IgG抗体的一致性及总体符合率.结果 ELISA法试剂盒检测94例血清中阳性标本37例,阴性标本57例,同时进行的5种不同品牌LIA法抗核抗体谱试剂检测抗60 kD Ro/SSA IgG抗体结果的总体符合率均超过90%,吻合系数均>0.8,说明一致性很好,但5种品牌均出现不相一致的阳性和阴性.结论 LIA法的抗核抗体谱检测试剂盒在检测抗60 kD Ro/SSA IgG抗体项目中一致性很好,但检测结果可疑时应使用天然抗原包被的ELISA法试剂或双向扩散法进行复测.
作者:劳小斌;何懿;罗宇维;谭礼平;孙尔维 刊期: 2014年第23期
目的 研究主动外排泵系统qacA/B和杀白细胞素(PVL)在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)中的流行现状和对MRSA耐药性的影响.方法 PCR扩增qacA/B基因和PVL基因;运用琼脂稀释法检测消毒剂和抗生素的小抑菌浓度;把MRSA分为4组:在1株MRSA中,qacA/B基因和PVL基因均阳性为第1组(No.1),仅qacA/B阳性为第2组(No.2),仅PVL基因阳性为第3组(No.3),qacA/B基因和PVL基因均阴性为第4组(No.4),采用卡方检验分析数据.结果 qacA/B基因和PVL基因的检出率分别为34.00%(68株)和28.00%(56株),其中No.1、No.2和No.3分别为35株(17.50%)、33株(16.50%)和21株(10.50%);消佳净(1.00 g/L)、碘伏(1.00 g/L)、苯扎溴胺(1.00 g/L)、阿米卡星、环丙沙星、利福平在No.1的耐药率明显高于No.4(P <0.05),这种情况同样存在于No.2与No.4、No.2与No.3、No.1与No.3中.结论 MRSA对消毒剂和阿米卡星等抗生素产生的耐药性与主动外排泵系统qacA/B有关系,而与PVL均无相关性.
作者:郭震;张燕莲;陈传;徐株锦;谢文熙;刘军 刊期: 2014年第23期
目的 评价Xpert结核分枝杆菌/利福平试验(Xpert MTB/RIF试验)检测儿童结核病及利福平耐药性的临床应用价值.方法 收集72例疑似结核病患儿痰标本,进行涂片镜检、固体培养、比例法药敏试验和Xpert MTB/RIF检测,分析Xpert MTB/RIF法检测痰中MTB及其耐药性的敏感度和特异度,与金标准进行一致性检验.结果 以固体培养结果作为金标准,Xpert MTB/RIF法检测痰标本MTB的敏感度和特异度分别为96.9%和87.5%,Xpert MTB/RIF和MTB固体培养具有较好的一致性(K=0.808);以比例法药敏试验结果作为金标准,Xpert MTB/RIF方法检测利福平耐药的敏感度和特异度分别为95.9%和93.9%,Xpert MTB/RIF和比例法药敏试验具有较好的一致性(K=0.831).结论 Xpert MTB/RIF法检测痰液标本的敏感度和特异性高,可为儿童结核病早期诊断及其利福平耐药情况提供及时的数据.
作者:周蕾;王海;朱明利 刊期: 2014年第23期
目的 建立可同时检测羊肉中掺入的猪、马、牛、鸭成分中的任意2种,及牛肉中掺入的猪、马、鸭成分中任意2种的双重PCR检测体系.方法 配制掺入猪、马、牛、鸭源性成分的模拟掺假羊肉样品及掺入猪、马、鸭源性成分的模拟掺假牛肉样品,每个成分的掺假比例为10%.筛选特异性强、敏感度高的猪、马、牛、鸭物种特异性基因,优化反应体系,建立了针对猪、牛、马、鸭两两配对的双重PCR检测体系.结果 无论是模拟牛肉掺假样品,还是模拟羊肉掺假样品,所有掺入的低价肉品成分都被准确检出,且无非特异扩增条带.结论 本研究建立的双重PCR检测体系,可以敏感、特异、准确的检出牛羊肉制品中的猪、牛、马、鸭成分.
作者:杨冬燕;杨永存;李浩;杨小柯;邓平建 刊期: 2014年第23期
目的 分析许昌市流行性感冒监测结果,了解流感流行特征及毒株的型别分布,为流感防控提供科学依据.方法 通过中国流感监测信息系统收集许昌市流感及流感样病例(IU)监测资料,对其流行病学、病原学进行分析.采用狗肾传代细胞(MDCD)对流感病毒进行培养,对分离到的毒株采用血凝抑制实验进行型别和亚型鉴定.结果 许昌市2011年-2013年ILI全年均有病例发生,ILI%呈上升趋势,就诊高峰出现在12月份至次年3月份;人群分布主要集中在≤15岁年龄组,占66.81% (24 915/37 291);在1 219份ILI标本中核酸阳性检出率为11.48%.77份核酸阳性标本中分离到流感病毒38株,病毒分离阳性率为49.35%.结论 许昌市流感病毒活动高峰在冬季和春季,流行有明显的季节性,甲3亚型和B型病毒为主要流行株,须加强监测与防控.
作者:从克;夏晖 刊期: 2014年第23期
目的 了解元江县人群麻疹抗体水平状况,为控制和制订消除麻疹策略提供科学依据.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对361人检测麻疹IgG抗体.结果 麻疹抗体阳性率为96.95%,抗体平均浓度(GMC)为3 078.04 mIU/ml.不同性别人群麻疹抗体阳性率差异无统计学意义(X2=0.7,P>0.05);不同地区人群麻疹抗体阳性率及GMC差异有统计学意义(X2=10.5,P<0.05,F=15.284,P<0.05);不同年龄组麻疹抗体阳性率及GMC差异有统计学意义(X2 =36.3,P<0.05,F=2.469,P<0.05).结论 元江县健康人群麻疹抗体水平较高,虽能形成有效的免疫屏障,但应提高8月龄儿童首针接种及时率.
作者:周燕华;端海涛;潘海燕;张玫;王启英;李勇三 刊期: 2014年第23期
目的 探讨石墨炉原子吸收分光光度法测定尿中锰含量的方法.方法 通过原子吸收光谱仪的原子化和灰化,优化升温程序对基体改进剂的筛选,将佳的基体改进剂加入尿样后,调整石墨炉原子吸收分光光度仪测定的好状态,直接测定.结果 测定浓度在0 μg/L~15 μg/L范围内,方法的线性关系良好,相关系数r=0.9993,样品的加标回收率为85.9% ~90.7%,变异系数<10%,检出限为0.25μg/L~0.39 μg/L.结论 该方法具有操作简单、快速简便、灵敏度和准确度高的优点,适用于尿中锰含量的测定.
作者:黄文锋;陈创钦;杨桓照 刊期: 2014年第23期
目的 进行蚕丝-PLGA复合网状支架的力学强度检测及其与骨髓间充质干细胞的体外共培养.方法 采用纬编针织法制备蚕丝丝素-PLGA纤维复合网状支架,并进行力学强度测试.在网状支架上滴加Ⅰ型胶原并冷冻干燥,再用纤维连接蛋白表面修饰后,种植兔骨髓间充质干细胞进行体外共培养,观察细胞与支架复合生长情况.结果 蚕丝-PLGA网状支架宽约5 mm.支架的大载荷、抗拉强度、断点伸长率、弹性模量分别为(118.32±11.21)N、(52.90±5.03) MPa、49.79%±5.16%、(177.25±19.18) MPa.支架-MSCs复合物培养2 d的扫描电镜观察显示:MSCs细胞黏附于支架表面呈立体状生长,细胞呈梭形,增殖良好,并分泌基质.结论 蚕丝-PLGA复合网状支架具有良好的力学性能与细胞相容性,是一种较有潜力的组织工程韧带的支架材料.
作者:张科技;张文元;杨亚冬;李颖;房国坚 刊期: 2014年第23期
目的 建立保健食品中α--硫辛酸的测定方法.方法 采用高效液相色谱法(HPLC),样品用流动相超声提取20 min,色谱柱:ODS-2HYPERSIL(4.60 mm×250 mm,5μm);流动相:0.125%(磷酸氢二钾+磷酸二氢钾,用磷酸调pH=3.5)+甲醇=35 +65(V/V);流量:1.0 ml/min,检测波长:215 nm.结果 硫辛酸在40 ng~4 000 ng范围内呈现良好的线性关系,相关系数为0.999997,检出限为2 ng,精密度试验RSD为0.53%(n=6);当样品添加浓度为5.33 g/100 g~22.7 g/100 g时,回收率为98.1% ~ 102%.结论 该方法操作简便、快速、可靠、重现性好,有效排除了杂质的干扰,可作为保健食品中α-硫辛酸的质量控制监测手段.
作者:甘宾宾;刘培杰;曾永芳 刊期: 2014年第23期
目的 通过比较虎红平板凝集试验(RBPT)、试管凝集试验(SAT)和胶体金免疫层析法(GICA)检测结果,客观评价3种方法对布鲁杆菌病诊断效率和价值.方法 采用虎红平板凝集试验、试管凝集试验和胶体金免疫层析法3种布鲁杆菌病血清学检测方法,对300位从事养殖、屠宰加工、皮毛贩运等重点职业人群进行检测,检测结果运用卡方检验进行统计分析.结果 运用3种检验方法对300位重点职业人群血清样本进行检测,RBPT法阳性血清25例、阴性血清275例;GICA法阳性血清24例、阴性血清276例;SAT法阳性血清21例、阴性血清279例,3种检验方法的阳性检出率间差异无统计学意义(P>0.05).结论 RBPT法、GICA法敏感性好,SAT法特异性高,在实际检测工作中应该把几种检验方法结合起来应用,并结合流行病学和临床体征来确诊布鲁杆菌病患者.
作者:董文杰;解英波 刊期: 2014年第23期
目的 探讨高尔基体蛋白73(GP73)与RASSF1A基因启动子区甲基化对原发性肝癌(HCC)的诊断价值.方法 选择2012年8月-2014年2月在浙江省宁波市第六医院住院的80例肝癌患者、40例肝硬化、30例健康体检者,采用酶联免疫法(ELISA)检测血清中GP73含量,甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)检测血清中RASSF1A基因启动子区甲基化情况,ROC曲线分析GP73对HCC的佳诊断点,并对单一及组合(GP73+ RASSF1A)方式的敏感度、特异度进行比较.结果 肝癌组、肝硬化组、健康体检组血清GP73平均浓度为278.3 μg/L、187.3 μg/L、46.8 μg/L(F =6.85,P<0.05);RASSF1A基因甲基化检出率分别为65%(52/80)、20%(8/40)、3.3% (1/30)(x2=44.1,P<0.05);GP73诊断肝癌的ROC曲线下面积为0.852,P<0.05,取GP73为122.02 ug/L为佳诊断分界点;GP73诊断HCC的灵敏度高于RASSF1A基因甲基化,GP73诊断HCC的特异度低于RASSF1A基因甲基化,GP73与RASSF1A基因甲基化并联诊断HCC的敏感度与单项GP73相比,差异具有统计学意义(X2=4.12,P<0.05),两项指标并联诊断HCC的特异度与单项RASSF1A甲基化比较,差异无统计学意义(X2=0.31,P>0.05).结论 GP73并联RASSF1A基因甲基化检测对诊断HCC的敏感度较高,具有一定的筛查能力.
作者:李宇宁;汪永强 刊期: 2014年第23期
目的 建立以6-甲基-2-硫代吡啶-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(MPT-NAG)为底物的液体型匀相速率法试剂测定NAG活性.方法 在含表面活性剂的柠檬酸缓冲液中,NAG催化MPT-NAG分解产生6-甲基-2巯基吡啶(MPT),用全自动生化分析仪监测340 nm处吸光度的变化速率,与标准液比较后计算出样本中NAG活性.结果 该法线性范围为0 U/L~ 380 U/L,平均回收率为98.8%;批内、批间相对标准差(RSD)分别为1.2%~ 3.3%和2.4%~3.9%;与参考方法相比的回归方程及相关系数分别为y=1.01x +0.24,r=0.9986.结论 用液体型MPT-NAG匀相速率法试剂测定NAG活性,具有快速、稳定、简便等优点,适合临床应用.
作者:方芳;连国军;赵长容;王文蔚;马美萍 刊期: 2014年第23期