学术投稿

浅谈临床微生物检验的实习教学

郭小兵;马俊芬;刘红春;张世杰;沈燕;明亮

关键词:临床微生物学检验, 实习, 教学
摘要:临床微生物检验是一门重要的检验专业课程,其内容涵盖广泛,包括细菌、病毒、支原体、衣原体、螺旋体、真菌等;涉及技术繁多,囊括分子生物学技术、免疫学技术、生化技术、光镜及电镜技术等;研究范畴全面,既有微生物的生物学性状,又有微生物的耐药机制,还涉及部分基因工程内容[1].鉴于本学科特点,单纯依靠理论讲授难以保证学习效果.为此,各医学院校均对学生设置了专业实习教学.
中国卫生检验杂志相关文献
  • 蚕丝-PLGA网状支架的力学强度检测及其与骨髓间充质干细胞共培养

    目的 进行蚕丝-PLGA复合网状支架的力学强度检测及其与骨髓间充质干细胞的体外共培养.方法 采用纬编针织法制备蚕丝丝素-PLGA纤维复合网状支架,并进行力学强度测试.在网状支架上滴加Ⅰ型胶原并冷冻干燥,再用纤维连接蛋白表面修饰后,种植兔骨髓间充质干细胞进行体外共培养,观察细胞与支架复合生长情况.结果 蚕丝-PLGA网状支架宽约5 mm.支架的大载荷、抗拉强度、断点伸长率、弹性模量分别为(118.32±11.21)N、(52.90±5.03) MPa、49.79%±5.16%、(177.25±19.18) MPa.支架-MSCs复合物培养2 d的扫描电镜观察显示:MSCs细胞黏附于支架表面呈立体状生长,细胞呈梭形,增殖良好,并分泌基质.结论 蚕丝-PLGA复合网状支架具有良好的力学性能与细胞相容性,是一种较有潜力的组织工程韧带的支架材料.

    作者:张科技;张文元;杨亚冬;李颖;房国坚 刊期: 2014年第23期

  • MS-HRM技术定量检测喉鳞癌Syk(L)基因启动子甲基化的方法及意义

    目的 利用MS-HRM技术建立Syk(L)基因启动子甲基化定量检测的方法,并探讨其甲基化程度与喉鳞癌临床病理参数的相关性.方法 提取48份喉鳞癌组织及20份癌旁正常喉黏膜组织DNA并进行甲基化修饰.用MS-HRM技术定量检测Syk(L)基因启动子甲基化水平,并分析评价其与喉鳞癌临床病理参数的相关性.结果 MS-HRM检测Syk(L)基因启动子甲基化结果为20份癌旁正常喉黏膜组织均位于0%区域;喉鳞癌组织中6份位于0%区域,8份位于0% ~ 30%区域,20份位于30%~70%区域,14份位于70%~100%区域.Syk(L)基因启动子甲基化水平与喉鳞癌临床分型差异无统计学意义(P>0.05),但与临床T分期、病理组织学分级、颈淋巴结转移差异有统计学意义(P<0.05),且Syk(L)甲基化水平随临床T分期及病理组织学分级增高而增高.结论 MS-HRM定量检测Syk(L)基因启动子甲基化有望成为喉鳞癌进展评估分子指标检测的有效手段.

    作者:李志海;蔡志毅;金巧智;陈武兵;黄栋栋 刊期: 2014年第23期

  • 肠道微生态对抗性淀粉的作用

    目的 探寻天然香蕉抗性淀粉在大鼠消化系统内被降解的规律.方法 以天然香蕉抗性淀粉为原料,以抗性淀粉的残留率为指标,在不同时间点,取大鼠的不同部位进行抗性淀粉残留量的检测,根据残留率的变化情况,推断抗性淀粉在大鼠消化道内被消化分解的规律.结果 在给大鼠喂食抗性淀粉后的20 min内,抗性淀粉还未到达大肠,胃和小肠内的抗性淀粉残留量基本为3 g;在喂食抗性淀粉80 min~ 90 min时,胃和小肠内均无抗性淀粉残留,而抗性淀粉在大肠内的残留量远远<3g;收集喂食抗性淀粉后360 min的粪便,测定其抗性淀粉的残留量为0.1213 g,已经被消化分解.结论 胃和小肠对抗性淀粉几乎没有消化作用,而大肠对抗性淀粉有很强的消化作用,抗性淀粉在大肠的微生态环境下能够被充分的降解和利用.

    作者:范媛媛;宁萍;何太喜;谭梅青;杨公明 刊期: 2014年第23期

  • 男性不育患者精子质量与生殖激素关系的研究

    目的 探讨男性不育患者生殖激素水平与精子质量的相关性.方法 3 108例男性不育患者按世界卫生标准进行精液常规分析,根据精液分析结果分为对照组(精液正常)和4个研究组:A组(弱精子症)、B组(少精子症)、C组(少弱精子症)、D组(严重少精子症).回顾性分析各组的生殖激素(FSH、LH、E2、PRL、T)水平.结果 4组的FSH和LH水平明显高于对照组(P<0.05),T和E2水平与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05).A组、C组的PRL水平明显高于对照组(P<0.01),B组、D组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).D组的FSH水平增高者异常发生率高于其他各组(P<0.05).结论 精子质量与多种血清性激素尤其是FSH异常密切相关,精液分析联合血清生殖激素检测为临床治疗男性不育提供了重要依据.

    作者:王荣香;毛金观 刊期: 2014年第23期

  • 细菌鉴定仪、显色培养基与mecA基因扩增法鉴定MRSA比较

    目的 比较全自动细菌鉴定仪、显色培养基与mecA基因扩增3种方法鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的差异.方法 对临床连续收集的66株金黄色葡萄球菌(S.au),使用VITEK全自动细菌鉴定仪、科玛嘉显色培养基和mecA基因PCR扩增方法检测MRSA,对结果进行统计分析.结果 66株S.au中3种方法检测到MRSA分别为14株(21.21%)、12株(18.18%)和17株(25.76%).3种检测方法对MRSA检出率差异无统计学意义,P>0.05.所有全自动细菌鉴定仪和科玛嘉显色培养鉴定为MRSA菌株都扩增到了mecA基因.结论 全自动细菌鉴定仪、显色培养基和mecA基因扩增3种方法检测MRSA结果差异无统计学意义,但是全自动细菌鉴定仪和显色培养基方法可能会产生漏检,mecA基因检测的方法应该进一步得到推广.

    作者:刘国栋;何秀娟;王劲;于礼;肖潇;佟颖 刊期: 2014年第23期

  • 2012年-2013年襄阳市农村饮水工程水质监测结果分析

    目的 了解襄阳市2012年-2013年农村饮水工程水质卫生现状,为政府部门改善农村饮水条件提供科学依据.方法 对2012年-2013年襄阳市农村饮水工程水质监测资料进行整理分析,水质评价按《生活饮用水卫生标准》(GB5749-2006)规定执行,在不考虑消毒指标情况下检测的所有指标全部合格的水样评为水质合格.结果 2012年共检测556份样品,合格率为34.89%;2013年共检测372份样品,合格率为35.22%.2012年、2013年检测合格率较低的指标均为微生物,分别为36.33%、37.37%.2012年-2013年襄阳市水质合格率没有明显提高,其中微生物指标合格率低的现象依然存在.结论 2012年-2013年襄阳市农村饮水工程水质存在安全隐患,微生物污染较严重,有关部门应当加强水源保护,完善水质净化、消毒工艺,落实消毒措施,确保农村居民饮水安全.

    作者:张金枝 刊期: 2014年第23期

  • 2种染色方法查找痰中结核杆菌的比较

    目的 评价发光二极管荧光染色法(简称LED法)与萋-尼氏抗酸染色法(简称Z-N法)查找痰中结核杆菌的差异.方法 对1 168份痰标本分别进行萋-尼氏抗酸染色和荧光染色检测,比较2种方法检查结核杆菌的阳性检出率、读片时间、褪色速度等方面的差异.结果 LED法检测结果与Z-N法检测结果的符合率为99.1%,二者差异无统计学意义(P>0.05),另有11份用Z-N法染色检测为阴性的标本其荧光染色检测为阳性,表明荧光染色检测方法具有更高的灵敏度,LED法的读片时间明显短于Z-N法.结论 LED法具有读片时间短、灵敏度较高、操作步骤简单等特点,在基层痰检室对肺结核患者的发现具有一定优势,适合在临床推广.

    作者:曾希鹏;张小芬;陈烨 刊期: 2014年第23期

  • 肛周脓肿病原菌分布及耐药性分析

    目的 了解肛周脓肿病原菌分布及主要病原菌的耐药性,以指导临床用药.方法 医院2012年-2013年收治242例肛周脓肿患者,于手术切开引流前抽取脓液,采用法国生物梅里埃ATB全自动细菌鉴定仪做需氧细菌鉴定,采用K-B法及MIC法进行药敏试验,并对结果进行统计分析.结果 162份标本分离病原菌91株,阳性率56.17%,全部为革兰阴性菌,大肠埃希菌77株,占84.62%,其中,产ESBLS菌14株,占大肠埃希菌的18.18%;克雷伯菌11株,占12.09%.大肠埃希菌对所有青霉素类及头孢硫脒耐药率达88%~ 96%;二三四代头孢耐药率为20%~42%;喹诺酮类、氨基糖苷类耐药率为22% ~ 28%.克雷伯菌对所有青霉素类及头孢硫脒100%耐药.结论 肛周脓肿病原菌以肠杆菌科为主,且菌株的耐药率较高,产ESBLS菌检出占一定比例,临床应根据药敏结果合理选用或调整用药,控制耐药菌的产生和传播.

    作者:王赛君;殷黎;杨云;刘超基 刊期: 2014年第23期

  • 袋泡茶剂保健食品铅、砷浸出率和人群摄入量研究

    目的 了解袋泡茶剂保健食品铅和砷的浸出率,并初步估计人群摄入量,评估其安全性.方法 将来自于商场、超市、药店等不同销售场所及厂家送检的25种袋泡茶剂,按照产品标识规定的食用方法,取1袋固体原样用80℃去离子水分2次浸提,每次80 ml浸提30 min,合并浸出液.按照GB5009.12-2010、GB/T5009.11-2003检测袋泡茶剂及其浸提液中铅和砷含量,用产品中铅、砷含量与产品标识的食用量和浸出率相乘计算铅和砷的摄入量.采用联合国粮农组织和世界卫生组织保健食品添加剂联合专家委员会推荐的,暂定每周耐受摄入量(PTWI)值评价铅摄入的安全性.结果 袋泡茶剂保健食品铅的浸出率为1.82% ~ 42.94%,平均值为11.18%;砷为6.91%~68.95%,平均值为32.41%.茶液铅对于PTWI平均贡献率为0.43%,砷为0.87%.结论 食用袋泡茶型保健食品中铅、砷的摄入量不会对人体造成危害.

    作者:李春雨;赵耀;张炎;孙鑫贵;沙博郁;王正 刊期: 2014年第23期

  • 北京市西城区2013年麻疹病毒H1基因型的流行情况分析

    目的 为了加强麻疹病毒基因型的监测,2013年北京市开展了麻疹病毒的核酸检测.方法 采用荧光PCR方法进行病毒核酸鉴定,然后对于核酸阳性标本进行RT-PCR(Reverse Transcription PCR,RT-PCR)扩增,扩增产物进行测序及序列比对分析.结果 2013年北京市西城区共采集麻疹疑似病例为41例,获得RT-PCR产物21例,经过序列分析比对,有16例为H1基因型.本研究获得的16例H1基因型的麻疹病毒基因片段序列与世界卫生组织H基因型代表株MVi/Hunan.CHN/0.93/7/H1,在基因亲缘性关系树上同属一个分支,核苷酸同源性为97.1%~ 97.6%,氨基酸同源性为95.3% ~ 98.0%.结论 2013年北京市麻疹病例明显增多,以本土基因型病例为主,进一步加强麻疹病例控制和预防,对于实现消除麻疹的计划具有重要意义.

    作者:张晶波;崔京辉;王永全;李爱华;陈维新;陈萌 刊期: 2014年第23期

  • 妊娠高血压综合征患者胎盘组织中VEGF、HIF-1α的表达及意义

    目的 观察妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘组织血管内皮生长因子(VEGF)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达情况,探讨两者在妊高征发病中的作用.方法 采用免疫组织化学EliVision法测定35例妊高征和40例正常产妇的胎盘组织VEGF和HIF-1α表达.结果 两者在滋养细胞、血管内皮细胞表达,绒毛间质细胞少量表达.VEGF表达强度轻度妊高征与对照组比较差异无统计学意义,而中度及重度妊高征胎盘与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);妊高征组胎盘HIF-1α的表达高于对照组(P<0.05),且重度高于中度、中度高于轻度.结论 妊高征患者胎盘VEGF表达水平降低,而HIF-1 α的表达水平升高,均与病情的严重程度相关,共同参与了妊高征的发生和发展过程.

    作者:钱小泉;施赛欧;张旻岚;徐虹;张品南 刊期: 2014年第23期

  • 遵义市2013年流感监测结果分析

    目的 了解遵义市流感的流行特征及流行趋势,为制定流感的防控措施提供科学依据.方法 采集门诊流感样病例的咽拭子标本,采用real time PCR方法进行流感病毒核酸检测.结果 2013年共采集流感标本2 174份,检出346份阳性,总阳性率为15.92%.其中H1N1型226份,H3型88份,B-Yamagata型32份.2013年的1月-4月、11月-12月是遵义市的流感高峰期.结论 2013年流感阳性率15.92%.以新甲型H1N1为主要毒株,发病高峰为冬春季节.5岁~组人群是主要感染人群.

    作者:何柳;朱琳;赵明伍;汪荣珊;田登菊 刊期: 2014年第23期

  • 亲水作用色谱法测定茶叶中茶氨酸的方法学研究

    目的 建立亲水作用色谱快速测定茶氨酸含量的方法,并应用于茶叶中茶氨酸的测定,为茶叶中茶氨酸的质量控制提供方法参考.方法 茶叶样品粉碎混匀后,经水溶液加热提取过滤后,上清液采用Phenomenex Luna NH2(250 mm×4.6 mm,5μm)亲水色谱柱分离,以乙腈∶水=70∶30为流动相洗脱,流速1.0 ml/min,柱温25℃,紫外检测波长为203 nm.根据保留时间定性,外标峰面积法定量.结果 茶氨酸的浓度与峰面积呈良好的线性相关性,相关系数r=0.9999,方法检测限为0.12 μg/ml,相对标准偏差RSD为0.46%(n=9);2个浓度水平的样品加标回收率在94%~ 104%之间.结论 本方法克服了传统反相液相色谱测定中使用离子对和衍生等方法的缺点,具有分离效果好、快速简易、平衡时间短、精密度和准确性高的特点,可用于茶叶中茶氨酸的质量控制方法.

    作者:孙丽华;江月仙;鲁健章;郑秋岚;王茵 刊期: 2014年第23期

  • 丽水历史细菌战幸存者病原检测分析

    目的 了解抗日战争期间丽水地区细菌战幸存者鼠疫耶尔森菌和炭疽杆菌感染情况.方法 鼠疫感染幸存者血清通过间接血凝法检测鼠疫F1抗体.炭疽感染幸存者创口涂抹物通过荧光定量PCR法和胶体金法检测炭疽杆菌抗原.结果 106份鼠疫感染幸存者血清鼠疫F1抗体阳性9份,滴度均≥1∶32,滴度高为1∶512,阳性率为8.49%,均通过间接血凝抑制试验验证.16份炭疽患者创口涂抹物标本2种检测方法结果均为阴性.结论 鼠疫感染幸存者血清中F1抗体阳性,说明感染鼠疫后患者体内产生的抗体可长时间或终身存在.炭疽感染幸存者患皮肤炭疽,百治不愈,创口暂时无传染性,不会对当地居民构成较大的传染性危害.

    作者:叶碧峰;王晓光;雷永良;柳付明;陈秀英 刊期: 2014年第23期

  • 布鲁杆菌病3种血清学检测方法比较分析

    目的 通过比较虎红平板凝集试验(RBPT)、试管凝集试验(SAT)和胶体金免疫层析法(GICA)检测结果,客观评价3种方法对布鲁杆菌病诊断效率和价值.方法 采用虎红平板凝集试验、试管凝集试验和胶体金免疫层析法3种布鲁杆菌病血清学检测方法,对300位从事养殖、屠宰加工、皮毛贩运等重点职业人群进行检测,检测结果运用卡方检验进行统计分析.结果 运用3种检验方法对300位重点职业人群血清样本进行检测,RBPT法阳性血清25例、阴性血清275例;GICA法阳性血清24例、阴性血清276例;SAT法阳性血清21例、阴性血清279例,3种检验方法的阳性检出率间差异无统计学意义(P>0.05).结论 RBPT法、GICA法敏感性好,SAT法特异性高,在实际检测工作中应该把几种检验方法结合起来应用,并结合流行病学和临床体征来确诊布鲁杆菌病患者.

    作者:董文杰;解英波 刊期: 2014年第23期

  • 肾病患者尿培养阳性菌种分布及耐药性分析

    目的 分析本院近一年多以来肾病患者和泌尿系感染者的尿培养菌分布和耐药情况,为临床合理用药提供依据.方法 采用回顾性查询,对2011年1月1日-2012年3月31日肾病中心和泌尿外科病区送检分离的菌株分析研究.结果 共分离73例致病菌,其中革兰阴性杆菌56例(76.7%),以大肠埃希菌为主,共计41例(56.16%),各种革兰阴性杆菌检出率差异具有统计学意义(X2=72,P<0.05);革兰阳性球菌13例(17.8%),以肠球菌为主,共计6例(8.22%),各种革兰阳性球菌检出率差异具有统计学意义(X2=42,P<0.05);真菌4例(5.5%).革兰阴性杆菌耐药率低的是亚胺培南,高的是氨苄西林,各种抗生素耐药率差异具有统计学意义(X2 =251.82,P<0.05);革兰阳性球菌中耐药率低的是万古霉素,高的是克林霉素,各种抗生素耐药率差异具有统计学意义(X2=186.89,P<0.05).结论 尿培养对肾病患者极为重要,关系到临床用药和治疗方案的选择,应引起临床足够的重视.

    作者:陈松楠;李姝华;菅强;胡金川 刊期: 2014年第23期

  • 柱前衍生-HPLC法测定香菇中二硫代氨基甲酸盐类农药残留量

    目的 建立香菇中二硫代氨基甲酸盐类(DTCs)农药残留量的测定方法.方法 采用L-半胱氨酸盐酸盐和EDTA-N%混合液进行提出,0.05 mol/L碘甲烷-氯仿-正己烷溶液萃取、衍生、浓缩,氨基小柱净化,C18柱分离,高效液相色谱-紫外检测器检测.结果 3类DTCs农药线性范围为0.25 mg/L~5.0 mg/L,相关系数r>0.998,方法检出限和低检出浓度分别为:福美类(DMDs) 0.02 mg/L、0.015 mg/kg,代森类(EBDs) 0.04 mg/L、0.03 mg/kg,丙森类(PBDs)0.08 mg/L、0.06 mg/kg,平均加标回收率为77% ~98%,相对标准偏差为2.2%~9.6%.结论 本方法对3类DTCs农药衍生物分离效果好,选择性强,不易产生假阳性,测定结果准确可靠,能满足对该类农药残留限量(MRLs)的检测要求.

    作者:贺东霞 刊期: 2014年第23期

  • 双重PCR鉴别牛、羊肉掺假

    目的 建立可同时检测羊肉中掺入的猪、马、牛、鸭成分中的任意2种,及牛肉中掺入的猪、马、鸭成分中任意2种的双重PCR检测体系.方法 配制掺入猪、马、牛、鸭源性成分的模拟掺假羊肉样品及掺入猪、马、鸭源性成分的模拟掺假牛肉样品,每个成分的掺假比例为10%.筛选特异性强、敏感度高的猪、马、牛、鸭物种特异性基因,优化反应体系,建立了针对猪、牛、马、鸭两两配对的双重PCR检测体系.结果 无论是模拟牛肉掺假样品,还是模拟羊肉掺假样品,所有掺入的低价肉品成分都被准确检出,且无非特异扩增条带.结论 本研究建立的双重PCR检测体系,可以敏感、特异、准确的检出牛羊肉制品中的猪、牛、马、鸭成分.

    作者:杨冬燕;杨永存;李浩;杨小柯;邓平建 刊期: 2014年第23期

  • 一起沙门菌食物中毒的检测与溯源分析

    目的 对一起沙门菌引起食物中毒的病原菌检测及溯源分型进行分析.方法 对中毒事件中采集的患者标本和剩余食物,采用GB4789.4-2010方法分离沙门菌,分离到的13株沙门菌进一步鉴定培养,应用H9812作为脉冲场凝胶分子量标准,限制性内切酶XbaI消化酶切后进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型.结果 从食物中毒样品中,5份可疑食品花生分离出2株雷根特沙门菌(血清型为O3.10∶Hf,g);患者粪便和呕吐物15份,分离出11株雷根特沙门菌.挑选3株菌株进行脉冲场凝胶电泳分型,条带基本一致,说明同起食物中毒分离到的沙门菌具有相同的指纹图谱.结论 这起食物中毒是由雷根特沙门菌引起的,PFGE是一种非常有效的分子分型方法,可应用于食物中毒溯源分析及分子流行病学研究.

    作者:刘玉霞;陈旭;李红叶;美丽克;左迪晓雪 刊期: 2014年第23期

  • 液液萃取气相色谱法测定饮用水中百菌清等12种农药残留

    目的 建立液液萃取毛细管柱气相色谱法同时测定生活饮用水中百菌清、溴氰菊酯、六氯苯等12种农药残留.方法 采用外标法定量,样品用正己烷萃取后浓缩,经HP-5毛细管色谱柱分离,电子捕获检测器检测,进样口温度为250℃,检测器温度为320℃,起始色谱柱温度为90℃(保持1 min),以30℃/min升至170℃(保持1min),再以8℃/min升至230℃,以2℃/min升至250℃,以3℃/min升至270℃(保持5 min),以5℃/min升至280℃(保持2 min).结果 12种目标化合物在0.01 μg/ml~0.4μg/ml浓度范围内线性关系良好,线性相关系数为0.9918~0.9995,方法的检出限为0.002μg/L~0.07 μg/L,低浓度和高浓度加标回收率分别为77.5%~ 93.8%及98.4%~113.4%,相对标准偏差(RSD,n=10)为6.9% ~8.4%.结论 液液萃取气相色谱法简便、灵敏、准确、稳定,能同时分析水样中多种痕量有机农药,满足了生活饮用水中农药残留检测需要.

    作者:徐虹;曹文婷;易承学;宋寅生;和佳鸳 刊期: 2014年第23期

中国卫生检验杂志

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主管:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会