丁云龙；雷永良；应国祥；付艳岚
目的 建立粪便中隐孢子虫的提取与检测技术,分析腹泻病人粪便中隐孢子虫的感染情况,为该病的诊断、防治提供科学依据.方法 选择经病原学检测已经确诊的5份隐孢子虫阳性和4份阴性粪便,分别采用FTA卡和商业化DNA抽提试剂盒抽提粪便样本中DNA,经荧光PCR法进行扩增,比较核酸提取效果;同时用直接涂片法、改良抗酸染色法及荧光PCR法对63例腹泻病人隐孢子虫感染情况进行粪样检测分析.结果 应用FTA卡抽提DNA效果优于应用商业化DNA抽提试剂盒抽提DNA.同时对63份腹泻病人粪便运用直接涂片法、改良抗酸染色法及荧光PCR法都未检出隐孢子虫.结论 应用FTA卡进行粪便样本中隐孢子虫DNA的抽提方法具有简单有效、快速灵敏、准确可靠等特点,可以应用于粪便中隐孢子虫的检测,同时可联合多种检测手段来提高腹泻病人原虫感染的检出率.
作者：黄达娜；唐屹君；李迎慧；阳帆；吴春利；李玥 刊期： 2014年第23期
目的 探讨男性不育患者生殖激素水平与精子质量的相关性.方法 3 108例男性不育患者按世界卫生标准进行精液常规分析,根据精液分析结果分为对照组(精液正常)和4个研究组:A组(弱精子症)、B组(少精子症)、C组(少弱精子症)、D组(严重少精子症).回顾性分析各组的生殖激素(FSH、LH、E2、PRL、T)水平.结果 4组的FSH和LH水平明显高于对照组(P＜0.05),T和E2水平与对照组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).A组、C组的PRL水平明显高于对照组(P＜0.01),B组、D组与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).D组的FSH水平增高者异常发生率高于其他各组(P＜0.05).结论 精子质量与多种血清性激素尤其是FSH异常密切相关,精液分析联合血清生殖激素检测为临床治疗男性不育提供了重要依据.
作者：王荣香；毛金观 刊期： 2014年第23期
目的 了解该地区发热呼吸道症候群细菌病原谱的构成.方法 对张掖市1家哨点医院自2013年1月-2013年12月符合发热呼吸道症候群监测病例定义的患者采集痰液标本,每月5份～6份,用多重聚合酶链反应(PCR)方法对肺炎链球菌(SP)、流感嗜血杆菌(HI)、军团菌(LP)、百日咳杆菌(BP)、肺炎衣原体(CT)、肺炎支原体(MP)6种呼吸道病原菌进行检测.结果 检测痰液标本63份,总阳性率为96.83％ (61/63),其中SP为29.51％(18/61)、SB +HI为65.57％ (40/61)、SB+ MP为4.92％ (3/61),未检出CT、LP及BP;全年均有发病,发病季节变化不明显;＜5岁儿童较多,阳性构成比为27.86％(17/61);男性、女性细菌感染阳性率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 张掖市发热呼吸道症候群细菌类病原主要为肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和肺炎支原体.
作者：王冬玲；于爱红 刊期： 2014年第23期
目的 分析2013年江西省甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶(NA)基因第275位氨基酸变异情况,掌握甲型H1N1流感病毒耐药特性,为甲型H1N1流感临床治疗和疾病控制提供参考.方法 收集江西省流感监测哨点医院采集的流感样病例的鼻咽拭子标本,采用狗肾传代细胞(MDCK)对标本进行病毒分离,对分离的31株新型甲型H1N1流感病毒进行核酸提取,采用一步法逆转录-聚合酶链反应(One-step RT-PCR)扩增病毒M基因部分片段,采用限制性内切酶片段长度多态性分析(RFLP)方法,分析扩增的部分NA基因第275位是否发生组氨酸(H)到酪氨酸(Y)的突变.结果 2013年江西省31株甲型H1 N1流感病毒NA基因第275位氨基酸均为组氨酸,未发生变异.结论 2013年31株毒株均对Osehamivir敏感,One-step RT-PCR-RFLP方法筛查新型甲型H1N1流感病毒Osehamivir耐药株简便可行.
作者：熊英；施勇；李健雄；龚甜；周珺；徐刚 刊期： 2014年第23期
目的 建立一种超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)简单、快速的分析人尿液中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量的检测方法.方法 人尿样品经离心后,通过HLB固相萃取柱进行净化处理,采用5％的甲醇-水(含0.1％甲酸)作为色谱的分离条件,在MRM模式下采集8-OHdG(m/z=284.2＞ 168.2及m/z=284.2＞ 140.2)的信号,用外标法定量.结果 本文报道的检测方法具有较高的灵敏度,8-OHdG在线性范围0.1 ng/ml ～ 2.0 ng/ml内线性关系良好,相关系数为0.9995,定量下限为0.02 ng/ml,低、中、高3个加标水平的回收率为90.2％～103.7％,相对标准偏差为1.1％ ～6.8％.结论 该方法操作简便,与前人报道的检测结果一致,也可以应用于评价各种氧化因素引起的DNA氧化损伤.
作者：王丽英；杨立新；路杨；刘印平；秦振顺；常凤启 刊期： 2014年第23期
目的 建立一个能提高肠道蠕虫卵阳性检出率的漂浮集卵新法.方法 在原有的饱和盐水漂浮法基础上滴加汽油,瓶口上不盖载玻片,用细铁丝环取漂浮油膜置载玻片上,直接镜检寄生虫卵.结果 对282份门诊和住院病人大便标本的检测中,肠道蠕虫卵阳性检出率从0.35％提高到2.48％;对187份幼儿园小孩大便标本的检测中,肠道蠕虫卵阳性检出率从0％提高到3.21％;对216份小学生大便标本的检测中,肠道蠕虫卵阳性检出率从0.46％提高到3.24％.结论 新建立的大便漂浮集卵方法,液面油膜起到了稳定虫卵的作用,从而使肠道蠕虫卵阳性检出率有明显提高,且操作简便.
作者：吴寒 刊期： 2014年第23期
目的 了解遵义市流感的流行特征及流行趋势,为制定流感的防控措施提供科学依据.方法 采集门诊流感样病例的咽拭子标本,采用real time PCR方法进行流感病毒核酸检测.结果 2013年共采集流感标本2 174份,检出346份阳性,总阳性率为15.92％.其中H1N1型226份,H3型88份,B-Yamagata型32份.2013年的1月-4月、11月-12月是遵义市的流感高峰期.结论 2013年流感阳性率15.92％.以新甲型H1N1为主要毒株,发病高峰为冬春季节.5岁～组人群是主要感染人群.
作者：何柳；朱琳；赵明伍；汪荣珊；田登菊 刊期： 2014年第23期
临床微生物检验是一门重要的检验专业课程,其内容涵盖广泛,包括细菌、病毒、支原体、衣原体、螺旋体、真菌等;涉及技术繁多,囊括分子生物学技术、免疫学技术、生化技术、光镜及电镜技术等;研究范畴全面,既有微生物的生物学性状,又有微生物的耐药机制,还涉及部分基因工程内容[1].鉴于本学科特点,单纯依靠理论讲授难以保证学习效果.为此,各医学院校均对学生设置了专业实习教学.
作者：郭小兵；马俊芬；刘红春；张世杰；沈燕；明亮 刊期： 2014年第23期
目的 建立果蔬中多效唑的高效液相色谱(HPLC)快速检测方法.方法 对果蔬样品中的多效唑用乙腈提取,浓缩后用甲醇复溶,经QuEChERS试剂盒净化后用HPLC检测;以甲醇与水(65:35,wV)为流动相,ACCHROM UnitaryC18柱(150 mm ×4.6 mm,5μm)分离,二极管阵列检测器在222 nm波长处检测,外标法定量.结果 多效唑在0.40 μg/ml～20 μg/ml浓度范围内线性关系良好,相关系数r=0.9999;在0.08 mg/kg、0.20 mg/kg、0.50 mg/kg 3个浓度添加水平下,豆芽和草莓样本中的平均回收率分别为76.6％～ 84.5％和83.2％～ 89.2％,相对标准偏差(RSD)均≤4.95％;方法检出限为0.02 mg/kg,定量限为0.08 mg/kg.结论 利用QuEChERS试剂盒可以对果蔬样本进行有效净化,结合HPLC法可以满足果蔬中多效唑残留检测要求.该方法简便、快速、准确.
作者：谭莹；倪竹南；汤鋆；朱坚磐；姜维；王志园 刊期： 2014年第23期
目的 分析许昌市流行性感冒监测结果,了解流感流行特征及毒株的型别分布,为流感防控提供科学依据.方法 通过中国流感监测信息系统收集许昌市流感及流感样病例(IU)监测资料,对其流行病学、病原学进行分析.采用狗肾传代细胞(MDCD)对流感病毒进行培养,对分离到的毒株采用血凝抑制实验进行型别和亚型鉴定.结果 许昌市2011年-2013年ILI全年均有病例发生,ILI％呈上升趋势,就诊高峰出现在12月份至次年3月份;人群分布主要集中在≤15岁年龄组,占66.81％ (24 915/37 291);在1 219份ILI标本中核酸阳性检出率为11.48％.77份核酸阳性标本中分离到流感病毒38株,病毒分离阳性率为49.35％.结论 许昌市流感病毒活动高峰在冬季和春季,流行有明显的季节性,甲3亚型和B型病毒为主要流行株,须加强监测与防控.
作者：从克；夏晖 刊期： 2014年第23期
目的 建立香菇中二硫代氨基甲酸盐类(DTCs)农药残留量的测定方法.方法 采用L-半胱氨酸盐酸盐和EDTA-N％混合液进行提出,0.05 mol/L碘甲烷-氯仿-正己烷溶液萃取、衍生、浓缩,氨基小柱净化,C18柱分离,高效液相色谱-紫外检测器检测.结果 3类DTCs农药线性范围为0.25 mg/L～5.0 mg/L,相关系数r＞0.998,方法检出限和低检出浓度分别为:福美类(DMDs) 0.02 mg/L、0.015 mg/kg,代森类(EBDs) 0.04 mg/L、0.03 mg/kg,丙森类(PBDs)0.08 mg/L、0.06 mg/kg,平均加标回收率为77％ ～98％,相对标准偏差为2.2％～9.6％.结论 本方法对3类DTCs农药衍生物分离效果好,选择性强,不易产生假阳性,测定结果准确可靠,能满足对该类农药残留限量(MRLs)的检测要求.
作者：贺东霞 刊期： 2014年第23期
目的 了解肛周脓肿病原菌分布及主要病原菌的耐药性,以指导临床用药.方法 医院2012年-2013年收治242例肛周脓肿患者,于手术切开引流前抽取脓液,采用法国生物梅里埃ATB全自动细菌鉴定仪做需氧细菌鉴定,采用K-B法及MIC法进行药敏试验,并对结果进行统计分析.结果 162份标本分离病原菌91株,阳性率56.17％,全部为革兰阴性菌,大肠埃希菌77株,占84.62％,其中,产ESBLS菌14株,占大肠埃希菌的18.18％;克雷伯菌11株,占12.09％.大肠埃希菌对所有青霉素类及头孢硫脒耐药率达88％～ 96％;二三四代头孢耐药率为20％～42％;喹诺酮类、氨基糖苷类耐药率为22％ ～ 28％.克雷伯菌对所有青霉素类及头孢硫脒100％耐药.结论 肛周脓肿病原菌以肠杆菌科为主,且菌株的耐药率较高,产ESBLS菌检出占一定比例,临床应根据药敏结果合理选用或调整用药,控制耐药菌的产生和传播.
作者：王赛君；殷黎；杨云；刘超基 刊期： 2014年第23期
目的 观察妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘组织血管内皮生长因子(VEGF)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达情况,探讨两者在妊高征发病中的作用.方法 采用免疫组织化学EliVision法测定35例妊高征和40例正常产妇的胎盘组织VEGF和HIF-1α表达.结果 两者在滋养细胞、血管内皮细胞表达,绒毛间质细胞少量表达.VEGF表达强度轻度妊高征与对照组比较差异无统计学意义,而中度及重度妊高征胎盘与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);妊高征组胎盘HIF-1α的表达高于对照组(P＜0.05),且重度高于中度、中度高于轻度.结论 妊高征患者胎盘VEGF表达水平降低,而HIF-1 α的表达水平升高,均与病情的严重程度相关,共同参与了妊高征的发生和发展过程.
作者：钱小泉；施赛欧；张旻岚；徐虹；张品南 刊期： 2014年第23期
目的 探讨石墨炉原子吸收分光光度法测定尿中锰含量的方法.方法 通过原子吸收光谱仪的原子化和灰化,优化升温程序对基体改进剂的筛选,将佳的基体改进剂加入尿样后,调整石墨炉原子吸收分光光度仪测定的好状态,直接测定.结果 测定浓度在0 μg/L～15 μg/L范围内,方法的线性关系良好,相关系数r＝0.9993,样品的加标回收率为85.9％ ～90.7％,变异系数＜10％,检出限为0.25μg/L～0.39 μg/L.结论 该方法具有操作简单、快速简便、灵敏度和准确度高的优点,适用于尿中锰含量的测定.
作者：黄文锋；陈创钦；杨桓照 刊期： 2014年第23期
目的 了解袋泡茶剂保健食品铅和砷的浸出率,并初步估计人群摄入量,评估其安全性.方法 将来自于商场、超市、药店等不同销售场所及厂家送检的25种袋泡茶剂,按照产品标识规定的食用方法,取1袋固体原样用80℃去离子水分2次浸提,每次80 ml浸提30 min,合并浸出液.按照GB5009.12-2010、GB/T5009.11-2003检测袋泡茶剂及其浸提液中铅和砷含量,用产品中铅、砷含量与产品标识的食用量和浸出率相乘计算铅和砷的摄入量.采用联合国粮农组织和世界卫生组织保健食品添加剂联合专家委员会推荐的,暂定每周耐受摄入量(PTWI)值评价铅摄入的安全性.结果 袋泡茶剂保健食品铅的浸出率为1.82％ ～ 42.94％,平均值为11.18％;砷为6.91％～68.95％,平均值为32.41％.茶液铅对于PTWI平均贡献率为0.43％,砷为0.87％.结论 食用袋泡茶型保健食品中铅、砷的摄入量不会对人体造成危害.
作者：李春雨；赵耀；张炎；孙鑫贵；沙博郁；王正 刊期： 2014年第23期
目的 探讨病毒癌基因HPV E6/E7联合液基薄层细胞(TCT)在宫颈病变诊断中的应用价值.方法 将2 085例患者同时进行HPV E6/E7 mRNA及TCT检测,TCT异常者再进行阴道镜下活检,以病理组织学诊断为金标准,并分析其结果.结果 TCT检测异常者171例,检出率为8.2％,且随着宫颈病变程度增加,HPV E6/E7 mRNA拷贝数也升高,按TBS报告系统分组,每相邻2组间差异有统计学意义(P＜0.05).TCT(+)且HPV E6/E7 mRNA(-)组45例,病理阳性31例,符合率为68.9％;TCT(+)且HPV E6/E7 mRNA(+)组126例,病理检查结果阳性115例,阳性符合率为91.3％,2组的病理阳性符合率差异有统计学意义(P＜0.01).结论 HPV E6/E7 mRNA联合TCT检测与病理检查的阳性符合率明显高于单纯TCT检测的阳性率,从而大大提高了宫颈癌前病变和宫颈癌的检出率,并更能直观反映病毒癌基因的表达活性.因此,HPV E6/E7 mRNA检测可作为高危型HPV感染的妇女进行风险评估、宫颈癌筛查及宫颈癌术后病情观察,具有重要的临床应用价值.
作者：应香岚；赵湘婉；吴晨曦；文小凤；王玲玲 刊期： 2014年第23期
目的 建立亲水作用色谱快速测定茶氨酸含量的方法,并应用于茶叶中茶氨酸的测定,为茶叶中茶氨酸的质量控制提供方法参考.方法 茶叶样品粉碎混匀后,经水溶液加热提取过滤后,上清液采用Phenomenex Luna NH2(250 mm×4.6 mm,5μm)亲水色谱柱分离,以乙腈∶水=70∶30为流动相洗脱,流速1.0 ml/min,柱温25℃,紫外检测波长为203 nm.根据保留时间定性,外标峰面积法定量.结果 茶氨酸的浓度与峰面积呈良好的线性相关性,相关系数r=0.9999,方法检测限为0.12 μg/ml,相对标准偏差RSD为0.46％(n=9);2个浓度水平的样品加标回收率在94％～ 104％之间.结论 本方法克服了传统反相液相色谱测定中使用离子对和衍生等方法的缺点,具有分离效果好、快速简易、平衡时间短、精密度和准确性高的特点,可用于茶叶中茶氨酸的质量控制方法.
作者：孙丽华；江月仙；鲁健章；郑秋岚；王茵 刊期： 2014年第23期
目的 建立高效液相色谱法同时检测肉制品中柠檬黄、诱惑红、赤鲜红、亮蓝、靛蓝、胭脂红、红2G、日落黄、苋菜红等9种合成色素的方法.方法 肉样用1％高氯酸提取、离心,提取液经过聚酰胺/C18混合固相萃取柱净化,3ml无水乙醇-氨水溶液-水(7∶2∶1,V/V)溶液洗脱,洗脱液浓缩后进行反相液相色谱测定,甲醇-0.02 mol/L乙酸铵溶液梯度洗脱,二极管阵列检测器检测.结果 9种合成色素在1.0ug/ml～20.0 μg/ml范围内线性关系较好,相关系数r2＞0.999,本方法肉制品中9种合成色素的检出限为0.1 mg/kg,定量限为0.4 mg/kg,回收率在86.0％～98.3％之间,相对标准偏差在1.03％～3.9％之间.结论 该方法简单、快速、准确,适用于肉制品中9种合成色素的同时检测.
作者：王志园；谭莹；王天娇；倪竹南；马冰洁；吴平谷 刊期： 2014年第23期
目的 比较全自动细菌鉴定仪、显色培养基与mecA基因扩增3种方法鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的差异.方法 对临床连续收集的66株金黄色葡萄球菌(S.au),使用VITEK全自动细菌鉴定仪、科玛嘉显色培养基和mecA基因PCR扩增方法检测MRSA,对结果进行统计分析.结果 66株S.au中3种方法检测到MRSA分别为14株(21.21％)、12株(18.18％)和17株(25.76％).3种检测方法对MRSA检出率差异无统计学意义,P＞0.05.所有全自动细菌鉴定仪和科玛嘉显色培养鉴定为MRSA菌株都扩增到了mecA基因.结论 全自动细菌鉴定仪、显色培养基和mecA基因扩增3种方法检测MRSA结果差异无统计学意义,但是全自动细菌鉴定仪和显色培养基方法可能会产生漏检,mecA基因检测的方法应该进一步得到推广.
作者：刘国栋；何秀娟；王劲；于礼；肖潇；佟颖 刊期： 2014年第23期
目的 了解抗日战争期间丽水地区细菌战幸存者鼠疫耶尔森菌和炭疽杆菌感染情况.方法 鼠疫感染幸存者血清通过间接血凝法检测鼠疫F1抗体.炭疽感染幸存者创口涂抹物通过荧光定量PCR法和胶体金法检测炭疽杆菌抗原.结果 106份鼠疫感染幸存者血清鼠疫F1抗体阳性9份,滴度均≥1∶32,滴度高为1∶512,阳性率为8.49％,均通过间接血凝抑制试验验证.16份炭疽患者创口涂抹物标本2种检测方法结果均为阴性.结论 鼠疫感染幸存者血清中F1抗体阳性,说明感染鼠疫后患者体内产生的抗体可长时间或终身存在.炭疽感染幸存者患皮肤炭疽,百治不愈,创口暂时无传染性,不会对当地居民构成较大的传染性危害.
作者：叶碧峰；王晓光；雷永良；柳付明；陈秀英 刊期： 2014年第23期
中国卫生检验杂志
主管:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
主办：中华预防医学会
