李彬;徐冬梅;陈丽珠
目的:分析沈阳市流感病毒的流行特点及其优势株的情况.方法:采集2005年~2009年冬春流行季哨点医院的流感样病例咽拭子,以MDCK细胞进行流感病毒的分离,根据CPE和HA方法鉴定流感病毒的存在,阳性毒株以HI和RT-PCR方法进行分型鉴定.结果:2005~2009年四个监测周期共采集流感样病例咽拭子样本783份,分离到流感病毒161株,总分离率为20.6%.其中A1型(H1N1)62株(38.5%)、A3型(H3N2)71株(44.1%)、B型(Yamagata系和victoria系)28株(17.4%).3种型别的毒株在5~岁和15~岁年龄组分离率高(34.9%,31.7%),但A3亚型在0~组所占比例高(46.5%).11月~次年1月为我市流感流行的冬高峰.结论:近年沈阳地区同时存在3种型别流感毒株流行,每年优势株明显不同,前一年监测周期的优势株在下一个周期中可被其他型别抑制甚至取代,2009~2010年监测周期中应密切关注A3(H3N2)亚型和SWH1N1亚型流感毒株的活动情况,加强学校人群的监测,及时发现流感病毒新变异株.
作者:王冰;陈建平;王迎春;刘建敏;刘娜;侯元;李继耀;李欣 刊期: 2010年第04期
目的:高效液相色谱法同时测定食品中苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ.方法:样品经萃取、浓缩后,用C18柱分离,二极管阵列检测器定性、定量.结果:该方法苏丹红的线性范围均为0.125~20.0 μg/ml,检出限为4.4~9.1 μg/kg,辣椒粉的加标回收率为98.1%~105%.结论:该方法较灵敏,准确,可用于食品中苏丹红的常规检测.
作者:姚进文;冯新昌 刊期: 2010年第04期
目的:降低精炼植物油核酸检测的假阴性率,提高检测准确度.方法:以来源于不同油料作物的植物油为材料,比较不同长度及不同拷贝数的扩增目标片段对精炼食用植物油PCR检测结果的影响.结果:在14个精炼食用植物油样品中,10个样品检出RBCL基因的150 bp片段,5个样品检出RBCL基因的433 bp片段,10个样品检出atpF-atpH基因的115 bp片段,所有样品都未检出atpF-atpH基因的658 bp片段.在7个大豆来源的样品中,多拷贝的叶绿体RBCL及atpF-atpH基因分别在4个和3个样品中被检出,而单拷贝的Lectin基因片段只在1个样品中被检出.对于5个玉米来源的样品,也得到类似结果.结论:对于精炼植物油,植物叶绿体RBCL及atpF-atpH基因的200 bp以下片段的扩增阳性率明显高于200bp以上长片段;多拷贝目标片段的扩增阳性率明显高于单拷贝或少拷贝目标片段的扩增阳性率,PCR抑制质控的设置可有效降低精炼植物油核酸检测的假阴性率.
作者:杨冬燕;邓汉超;杨永存;张海龙;林建荣;邓平建 刊期: 2010年第04期
目的:探讨胰岛素水平在多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清中的变化及其对PCOS患者雄激素产生的影响.方法:用化学发光酶免疫分析法、放射免疫分析法对32例PCOS患者和30例正常对照(排卵正常,无怀孕妇女)血清中胰岛素(In)、血糖(Glu)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、催乳素(PRL)、雌二醇(E2)、睾酮(T)进行检测.结果:根据胰岛素抵抗指数(IR),将32例PCOS患者分成胰岛素抵抗组(PCOS-IR)和非胰岛素抵抗组(PCOS-NIR).PCOS-IR组血清中胰岛素水平高于PCOS-NIR组(P<0.05),且PCOS-IR组的胰岛素水平与睾酮呈正相关(r=0.87,P<0.05).结论:胰岛素对PCOS-IR患者雄激素的产生具有一定影响.
作者:王彩虹;丁鸿燕 刊期: 2010年第04期
目的:了解目前武汉市市售水产品中孔雀石绿残留情况.方法:分别在上半年的6月份和下半年的10月份各采样75件,依据GB/T 20361-2006,利用高效液相色谱法检测孔雀石绿.结果:上半年的孔雀石绿检出率为8.0%,下半年的孔雀石绿没有检出.结论:孔雀石绿的残留情况可能与季节有关.
作者:肖永华 刊期: 2010年第04期
目的:通过实验验证并建立一种用荧光定量PCR技术准确检测血清中HBV cccDNA的方法,同时能够消除HBV rcDNA非特异性扩增的干扰.方法:用两步法提取20例乙肝患者血清中的total HBV DNA,分别用荧光PCR试剂盒定量检测HBV DNA和cccDNA.然后通过质粒保护型的DNA酶对提取的DNA模板进行消化处理,使rcDNA得到一定程度的降解后,再分别进行HBV DNA和cccDNA的定量检测.结果:未经过酶消化处理直接定量cccDNA时存在一定的非特异性扩增.这种非特异性扩增在HBV DNA含量>106 copies/ml时比较明显,消化前后cccDNA定量值的对数平均相差1.94.经过酶消化后的定量cccDNA值基本消除了rcDNA非特异性扩增的干扰.结论:通过质粒保护型的DNA酶降解rcDNA后再进行cccDNA检测是一个方便可行的解决cccDNA准确定量问题的方法,非特异性干扰几乎可以完全消除.血清cccDNA与HBeAg及HBV-DNA有关,提示它可能也是HBV复制的血清标志.乙肝患者血清中cccDNA的含量与total HBV DNA含量成正相关.
作者:江明凤;江培学;陈伟华 刊期: 2010年第04期
目的:建立猪苓复合多糖含量的测定方法.方法:采用苯酚-硫酸分光光度法测定猪苓复合多糖中多糖的含量,并对其佳反应条件进行了实验.结果:该方法显示葡萄糖在0.0080~0.064 g/L范围内,葡萄糖质量浓度与吸光度具有良好的线性关系.其平均回收率为98.01%,相对标准偏差(RSD)值为2.17%.结论:该方法精密度高、重现性好,可用于猪苓复合多糖的含量测定.
作者:乔丽华;贾小燕;刘萍;阎素青 刊期: 2010年第04期
目的:检测HBeAg阴性慢性乙型肝炎抗病毒治疗患者血清中乙型肝炎病毒外膜大分子表面抗原蛋白(Hepatitis B Virus Large Surface Protein,LHBs)、前Sl抗原(PreS1 Ag)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和HBV DNA水平,探讨HBV DNA与LHBs、PreS1 Ag、ALT的关系,LHBs水平对HBV复制状态的判定和对临床抗病毒治疗的指导意义.方法:对60例接受抗病毒治疗的HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者.定期采集患者血清标本,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测LHBs和PreS1 Ag,速率法测定ALT,用实时荧光定量PCR法检测HBV DNA.结果:抗病毒治疗0,9、12个月,LHBs阳性率与HBV DNA阳性率差异无统计学意义(P>0.05),均显著高于PreS1 Ag阳性率;LHBs含量与HBV DNA拷贝数对数呈正相关性,相关系数r=0.825;LHBs OD值和HBV DNA拷贝数随抗病毒治疗时间的延长同步下降.结论:血清LHBs是一个操作简便的能反映体内HBV复制水平,抗病毒治疗过程中和HBV DNA同步下降,可用于判断HBV复制程度和用于指导抗病毒治疗的敏感指标.
作者:赵碎娟;孙根妹;郑明波 刊期: 2010年第04期
目的:通过对Sysmex SF-3000和XE-2100血细胞分析仪进行比对和偏倚评估,探讨两检测系统间测定结果的一致程度和差异大小.方法:按照美国实验室标准化委员会(NCCLS)EP9-A2文件要求,以SF-3000为比较方法,XE-2100为实验方法,分别测定不同浓度水平患者当日血清共40例的自细胞、血红蛋白、红细胞比容、血小板,计算两法回归方程和相关系数,以美国临床实验室改进法案修正案(CLIA'88)中能力验证对检测项目的分析质量要求的可接受范围的1/2为标准,在不同医学决定水平判断不同检测系统的偏倚,评估结果之间的可比性.结果:Sysmex SF-3000和XE-2100血细胞分析仪测定结果具较好的一致性,预期偏倚可接受.结论:当使用两个以上检测系统检测同一项目时,应进行方法比对和偏倚评估,判断其临床可接受性能,确保测定结果的可比性,本实验室两台血细胞分析仪间测定结果能满足临床需要.
作者:黄慧 刊期: 2010年第04期
目的:探讨二氧化氯消毒技术在农村饮用水消毒中应用的可行性和优势.方法:分析目前我国农村地区主要使用的二氧化氯发生技术及其各自优缺点,比较了二氧化氯消毒与常用消毒方式的成本.结果:二氧化氯消毒技术在农村饮用水消毒中具有明显的优势,使用过程中应根据实地需求选择合适的发生器类型,严格控制操作条件,降低消毒副产物.结论:二氧化氯消毒技术具有明显的性价比优势,采用合理的管理模式和应用正确适合的操作方法,将在农村饮用水消毒中具有更广阔的应用前景.
作者:岳银铃;鄂学礼;凌波;张岚 刊期: 2010年第04期
目的:建立食品中的抗氧化剂特丁基对苯二酚(TBHQ)的HPLC-UV测定方法.方法:选择HPLC-UV法测定食品中抗氧化剂特丁基对苯二酚(TBHQ)的理想条件,并测定食品中抗氧化剂特丁基对苯二酚(TBHQ)的含量及加标回收率,作方法学论证.结果:特丁基对苯二酚(TBHQ)在0.1~20.0 mg/L范围内线性关系良好,相关系数r=0.9998.低检出限为0.1 mg/L,测定结果相对标准偏差为0.7%(n=6),样品中TBHQ加标回收率为90.0%~91.1%.结论:该方法简单、快捷、准确、可靠,适合基层检验机构成批量样品检测.
作者:郝媛媛;丁轶聪;张岩岩 刊期: 2010年第04期
目的:探讨乙型肝炎患者病毒核酸载量与血清乙型肝炎病毒外膜大蛋白(HBV-LP)含量的关系.方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和实时荧光定量PCR法分别检测307例乙型肝炎患者血清的HBV-LP、HBV-M和HBVDNA,并进行相关性分析.结果:307例乙型肝炎患者血清中HBV-LP含量与HBV DNA拷贝数变化相一致,两者呈正相关(r=0.943);在131份HBeAg阳性血清中,HBV DNA与HBV-LP的阳性率分别为95.42%和93.89%,两者差异无显著性(P>0.05);在176份HBeAg阴性血清中,HBV DNA与HBV-LP的阳性率分别为46.02%和56.25%,两者差异无显著性(P>0.05).结论:血清HBV-LP水平能反映HBV感染者体内HBV复制程度,其灵敏度高于HBeAg,可作为判断HBV复制新的血清学指标.
作者:李小永;温怀凯;陶洪群;张信良;余坚 刊期: 2010年第04期
目的:通过流行病学调查和实验室病原学检测,进一步了解本次食物中毒的原因.方法:参照GB/T 4789-2008,WS 271-2007,WS287-2008,WS/T 9-1996方法[1],分别对剩余食物,食物加工环节涂抹物及粪便肛拭进行病原学检测.结果:采集26份标本,其中4份剩余食物标本中检出副溶血性弧菌2株,20份粪便肛拭标本中检出副溶血性弧菌5株,2份食物加工环节涂抹物未检出副溶血性弧菌,检出率为29%.
作者:高克勇;何剑锋;叶金奶 刊期: 2010年第04期
目的:建立同时测定保健食品中有机硒和无机硒含量的方法.方法:用硝酸-高氯酸混合酸体系将样品中的有机硒氧化成无机硒后测定总硒含鼍,同时用酸提取样品中的无机硒,再通过差减法获得有机硒的含量.结果:经回收实验和实际样品检测,方法的回收率为95.0%~105.6%,RSD为2.5%~4.9%.结论:该方法线性范围宽,相关性好,精密度和准确度好,可操作性强,应用范围广,具有较高的实用价值.
作者:卢岚;鲁兵;王春娥 刊期: 2010年第04期
测量不确定度是评定测量水平的指标,是判定测量结果质量的依据,一切测量结果都不可避免地具有不确定度,不确定度是由于测量误差的存在而导致被测量值不能肯定的程度,大肠菌群的检测也不例外.
作者:徐淳行;郑丽芳 刊期: 2010年第04期
目的:对某企业食堂发生的一起食物中毒事件进行病原菌的检测.方法:参照GB/T4789-2003、<全国临床检验操作规程>第三版、<霍乱防治手册>第五版方法对病人肛拭进行病原学检测.结果:13份标本中12份检出布利丹沙门菌.结论:本次食物中毒是由布利丹沙门菌感染引起.
作者:李岳良 刊期: 2010年第04期
目的:建立居室空气中甲醛的品红亚硫酸测定法.方法:用水为吸收液采集样品,甲醛与品红亚硫酸溶液反应后,遇硫酸生成蓝色化合物的特性进行定量分析.结果:甲醛浓度在0~2 mg/ml范围内具有良好的线性关系(r=0.9999),检出限为0.010 g/ml,样品加标回收率为97.0%~99.8%.结论:该方法不需加热,特异性好,灵敏度高,易于推广.
作者:胡亚奇;高丽红;毛斐 刊期: 2010年第04期
目的:采用细胞核酸释放剂(Cell nucleic releaser,CNR),建立在同一PCR扩增管内同时进行细胞核酸提取和荧光PCR扩增的白细胞HBV DNA检测技术.方法:白细胞的处理:新鲜抗凝(EI)TA-Na2)全血0.2 ml,破碎红细胞,用生理盐水洗涤四次,弃净残液,加20 μl白细胞温化剂制备成白细胞悬液.白细胞HBV DNA核酸提取与扩增:取3 μl的CNR和等量的白细胞悬液在PCR扩增管底轻轻吹打混匀,覆盖30 μl无菌石蜡油,37℃,60 s→99℃,7 min→37℃,30 s,直接加入已配制荧光PCR反应液,3000 g/min离心1 min,进行实时荧光定量PCR扩增.采用QiaGen的核酸提取方法作为对照.选择144例血清HBV DNA检测结果大于104IU/ml和131例血清无HBV DNA检出的乙肝患者标本为研究对象,20例非乙肝患者全白细胞作为特异性研究标本.结果:采用融红细胞的方法分离白细胞和CNR分离核酸,无白细胞和核酸丢失之嫌,可对全白细胞内的HBV DNA进行准确定量,该方法具有较好的灵敏性和重复性.与QiaGen核酸提取方法相关性良好(r=0.96),144例血清HBV DNA大于104IU/ml的乙肝患者其白细胞全部大于100 IU/ml,131例血清HBV DNA阴性的乙肝患者有56例(42.7%)白细胞HBV DNA大于100 IU/ml.结论:基于CNR核酸提取方法的全白细胞HBV DNA定量技术,操作简单、且具有较好的敏感性和重复性,可作为研究白细胞内HBV DNA临床意义的检测手段.
作者:李永利;廖华芳;王雪飞;刘立明;王海滨 刊期: 2010年第04期
目的:了解外科重症监护病房(SICU)细菌流行及耐药情况,为临床合理使用抗菌药物提供依据.方法:用WHO推荐的WHONET5.4统计软件进行分析.结果:在SICU中感染的细菌以革兰阴性杆菌为主,占60.7%:主要是大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌;革兰阳性球菌占35.7%:以金黄色葡萄球菌、肠球菌以及凝围酶阴性葡萄球菌为主要分离菌;念珠菌占3.7%.大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌ESBLs检出率分别为63.3%和48.1%.葡萄球菌MRSA、MRCNS检出率为75.0%和68.9%.E试验表明产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌株对第三、四代头孢菌素、环丙沙星的MIC50较高,且出现2株亚胺培南和美罗培南中介的肺炎克雷伯菌;非产ESBLs菌株对第三代、四代头孢菌素及含酶抑制剂β-内酰胺类抗菌素耐药率均<10%;鲍曼不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦及阿米卡星的敏感率分别是85.3%和76.0%;铜绿假单胞菌对哌拉西林/他唑巴坦的敏感率为87.1%、头孢他啶75.1%、阿米卡星71.7%、头孢哌酮/舒巴坦64.5%;葡萄球菌对万古霉素和替考拉宁敏感率为100%,对其他抗菌药物高度耐药;肠球菌中检出2株耐万古霉素的屎肠球菌.结论:SICU中耐药现象严重,尤其是铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗菌素的耐药以及耐万古霉素肠球菌的流行值得关注.需加强SICU病原菌及耐药性监测,为临床合理使用抗菌药物提供参考依据.
作者:冯羡菊;张燕;曾利;徐岷 刊期: 2010年第04期
目的:建立测定苹果中代森锰锌的气相色谱法.方法:代森锰锌在加热条件下,反应生成二硫化碳,用气相色谱进行测定.结果:线性范围为0.00~5.00 μg,加标回收率为93.8%~104.7%,相对标准偏差为3.9%.结论:方法简单、快速、结果准确可靠,适合苹果中代森锰锌的检测分析.
作者:田映 刊期: 2010年第04期