学术投稿

乙肝患者血清中HBV cccDNA荧光定量检测方法的优化

江明凤;江培学;陈伟华

关键词:乙型肝炎病毒, cccDNA, 荧光定量PCR
摘要:目的:通过实验验证并建立一种用荧光定量PCR技术准确检测血清中HBV cccDNA的方法,同时能够消除HBV rcDNA非特异性扩增的干扰.方法:用两步法提取20例乙肝患者血清中的total HBV DNA,分别用荧光PCR试剂盒定量检测HBV DNA和cccDNA.然后通过质粒保护型的DNA酶对提取的DNA模板进行消化处理,使rcDNA得到一定程度的降解后,再分别进行HBV DNA和cccDNA的定量检测.结果:未经过酶消化处理直接定量cccDNA时存在一定的非特异性扩增.这种非特异性扩增在HBV DNA含量>106 copies/ml时比较明显,消化前后cccDNA定量值的对数平均相差1.94.经过酶消化后的定量cccDNA值基本消除了rcDNA非特异性扩增的干扰.结论:通过质粒保护型的DNA酶降解rcDNA后再进行cccDNA检测是一个方便可行的解决cccDNA准确定量问题的方法,非特异性干扰几乎可以完全消除.血清cccDNA与HBeAg及HBV-DNA有关,提示它可能也是HBV复制的血清标志.乙肝患者血清中cccDNA的含量与total HBV DNA含量成正相关.
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    作者:张冬民;贾桂华;丁勇莉;毛斐 刊期: 2010年第04期

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    作者:张雪茹 刊期: 2010年第04期

  • 乳粉检验中大肠菌群不确定度的评定

    测量不确定度是评定测量水平的指标,是判定测量结果质量的依据,一切测量结果都不可避免地具有不确定度,不确定度是由于测量误差的存在而导致被测量值不能肯定的程度,大肠菌群的检测也不例外.

    作者:徐淳行;郑丽芳 刊期: 2010年第04期

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    作者:秦绪珍;高学慧;徐二木;赵芳;齐志宏;邱玲 刊期: 2010年第04期

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    目的:本文运用不同前处理方法进行比较,解决国家标准方法[1]测定辣椒油中的酸价时,由于辣椒油中的色素存在而影响滴定终点的判断问题.方法:利用添加适量中性饱和食盐水及用活性碳吸附两种方法前处理后再按照国标法测定酸价,其结果与准确度和精密度都较高的自动电位滴定法相比较.结果:用添加中性饱和食盐水法和活性碳吸附法都可以清晰观察到滴定终点;辣椒油试样量在3~4 g,用添加中性饱和食盐水法与自动电位滴定法结果无统计学差异,结果准确;活性碳吸附法测定低浓度酸价的油脂相对偏差较大,高浓度的与自动电位滴定法无统计学差异.结论:对于深色油脂如辣椒油中的酸价首选自动电位滴定法,如没有自动电位滴定仪的基层单位,低浓度的可以用添加中性饱和食盐水方法,中、高浓度的可以用活性碳吸附法和添加中性饱和食盐水方法,两种方法都可以清晰地观察到滴定终点,结果精密度都较好,准确度较高.可以作为国标法中测定辣椒油中酸价的有效补充.

    作者:李兰芳;栾玉明;潘翊;陈若虹 刊期: 2010年第04期

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    目的:探索对Leifson细菌鞭毛染色方法的改进.方法:对染液、菌液、涂片、固定、染色、冲洗等操作进行改进.结果:菌体呈深红色,鞭毛呈浅红色,镜检涂片视野背景清晰,染色效果好.结论:改进方法简便、操作性好、实用性强.

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  • 杭州市三类面制品中铝含量的调查分析

    目的:用铬天青S分光光度法对杭州市内的三类面制品中铝含量进行调查分析.方法:对杭州市内的三类面制品进行采样,用干灰化法处理样品,测定其铝含量.结果:检测的三类面制品共88件,铝含量的合格率仅为20.4%(18/88).其中油条样品为58件,铝含量的合格率为3.4%(2/58);馒头样品为21件,铝含量的合格率为57.1%(12/21);发糕样品为9件,铝含量的合格率为44.4%(4/9).结论:样品经干灰化法处理后,无需考虑pH值影响,用铬天青S比色法测定,结果准确,杭州市油条、馒头、发糕这三类面制品含铝量超标严重,需要引起有关部门注意.

    作者:黄闽燕;钟小伶;沈利明 刊期: 2010年第04期

  • 沈阳市一起学校群体性公共卫生突发事件调查分析

    学校学生集体发病所导致的突发公共卫生突发事件,对社会影响巨大,也特别受到卫生行政部门和教育主管部门的重视,杜绝在校学生集体性质突发公共卫生事件的发生和发生集体性质突发公共卫生事件的时候如何进行快速处理,快速准确查找原因排除隐患,已经是时刻面临的严峻课题,近年沈阳市某学校发生一起群体性公共卫生突发事件,该校共有3000多名学生,住宿制,分为小学部,初中部和高中部,陆续有400多名学生发病,随即学校第二天向卫生行政部门报告,卫生行政部门接到报告后,立即组织调查人员前往调查处理,现场情况是全校仅有一个学生食堂向全校学生供餐,统一有一个二次供水设施向全校供应自来水,头一天午餐后开始陆续有学生发病,第二天发病人数猛增,症状主要以腹泻、呕吐、发热为主,就诊诊断多为细菌性肠炎,经抗菌治疗,病情均得到控制,调查人员立即关闭了学校食堂(食堂在前一天已经关闭)和统一的二次供水设施,实行了行政控制,综合在校学生发病情况,初步判定是一起经粪口传播生物性污染导致的群体发病.

    作者:王磊石 刊期: 2010年第04期

  • 含铬、蜂胶奶粉对实验性糖尿病小鼠的降血糖作用

    目的:研究含铬、蜂胶奶粉对实验性糖尿病小鼠血糖的影响.方法:用四氧嘧啶建立糖尿病小鼠模型,依据血糖水平随机分为4组:低剂量组(0.5 g/kg)、中剂量组(1.0 g/kg)、高剂量组(3.0 g/kg)和模型对照组.另设正常对照组和高剂量组.连续灌胃30 d,测定血糖值.结果:3.0 g/kg剂量组空腹血糖、2 h血糖和血糖曲线下面积与模型对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);含铬、蜂胶奶粉对正常小鼠空腹血糖无明显影响.结论:在本实验条件下,含铬、蜂胶奶粉对实验性糖尿病小鼠的血糖有降低作用.

    作者:王亚东;王海玉;李立;张聪恪;张桂霞;张焱;刘翠娥 刊期: 2010年第04期

  • 离子色谱在食品检测中的应用新进展

    本文讨论了近年来离子色谱在食品分析中的发展,可以看到离子色谱分析物的范围不断扩大,样品介质日益复杂,对传统分析物的研究进一步深入;分离、检测手段不断丰富;样品前处理手段的相应改进;标准分析方法的逐步建立和分析目的的进一步多样化的发展趋势.

    作者:陈芳;龙军标;周金森 刊期: 2010年第04期

  • 52株肺炎链球菌临床分离株耐药情况分析

    目的:调查临床分离肺炎链球菌对常用抗菌药物的耐药状态,为临床用药提供依据.方法:2007~2008年间52株临床分离肺炎链球菌经VITKE-AMS-60全自动细菌鉴定仪GPI卡鉴定后,采用琼脂稀释法测定低抑菌浓度.结果:52株肺炎链球菌中,青霉素不敏感菌株32株,占61.5%,对头孢噻肟、头孢曲松有较好的敏感性,耐药率仅为21.2%和5.8%,而对头孢呋辛的耐药率则达50.0%.对红霉素、阿奇霉素、克林霉素高度耐药,均达92.3%,氯霉素的耐药率为15.4%,而对万古霉素和左氧氟沙星呈现高敏感性,敏感率分别达100%和98.1%.并且青霉素耐药菌株呈现多重耐药性比青霉素敏感株明显.结论:临床分离肺炎链球菌对万古霉素、左氧氟沙星敏感性高,对头孢噻肟、头孢曲松、头孢呋辛以及氯霉素比较敏感,对青霉素耐药率比较严重,而对红霉素、阿奇霉素和克林霉素普遍耐药.

    作者:徐丽慧;王贤军;王敏敏;董晓勤 刊期: 2010年第04期

  • 维生素E有效改善实验性慢性胰腺炎的病理形态

    目的:观察维生素E对实验性慢性胰腺炎的生化和病理形态影响.方法:SD大鼠共分6组,即模型组、维生素E组和各种对照组(乙醇对照组,含10%乙醇PBS胰管内注射;NS对照组,等体积Ns胰管内注射;假手术组,假手术,胰管内没有注射;正常对照组,没有手术的正常大鼠);维生素E组每日400 mg/kg体重灌胃,其余各组等体积生理盐水灌胃,治疗4周.处死大鼠后检测血浆维生素E和过氧化脂质水平、HE和胶原纤维染色观察胰腺病理改变.结果:血浆维生素E浓度在维生素E组明显高于模型组和各对照组(P<0.05),模型组与各对照组的差异没有统计学意义(P>0.05).血浆过氧化脂质在维生素E组明显低于模型组和各对照组(P<0.05),而各对照组又明显低于模型组(P<0.05).模型组大鼠胰腺腺泡细胞坏死、局灶萎缩、小叶内和小叶间广泛纤维化、伴炎症细胞浸润,符合人类慢性胰腺炎的病理特征.大鼠胰腺纤维化、腺泡萎缩和炎症细胞浸润在维生素E组明显减轻(P<0.05).结论:维生素E可以有效改善慢性胰腺炎大鼠的病理形态,缓解胰腺纤维化程度,提高血维生素E水平,降低过氧化脂质.

    作者:宋燕华;夏勇;傅剑云;董向毅;杜勤;陆新良 刊期: 2010年第04期

  • 凝结芽孢杆菌PCR快速检测方法研究

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    作者:刘云国;刘帅帅;周福通;杨大伟;王建广 刊期: 2010年第04期

  • 河北省2004~2008年流感病原学监测分析

    目的:分析河北省2004~2008年流行性感冒(流感)流行特点和流感病毒优势毒株的情况,为流感防治提供科学依据.方法:在流感流行季节,采集流感样病例(Influenza Like Illness,ILI)咽拭子标本,用MDCK(Madin Darby Canine Kidney)细胞培养分离流感病毒,经血凝抑制(Hemasslutination Inhibition,HI)试验鉴定病毒型别.结果:2004年10月一2008年3月共采集ILI咽拭子标本3179份,分离到流感病毒288株,血清学鉴定结果A(H1N1)亚型78株,占27.08%,A(H3N2)亚型113株,占39.24%,B-Victoria系36株,占12.50%,B-Yamagata系61株,占21.18%.在2004~2005年流行期和2006~2007年流行期均以A(H3N2)亚型流感病毒占优势;2005~2006年流行期以A(H1N1)亚型流感病毒占优势;2007~2008年流行期优势流行株为B-Yamagata系流感病毒.除2005~2006年流行期外,我省流感病毒流行高峰期均在1月份.结论:河北省流感病毒流行有明显季节性,1月为发病高峰,感染人群中流感毒株A(H1N1)、A(H3N2)亚型和B-Victoria、B-Yamagata系交替出现,流行优势毒株不断发生变化.

    作者:彭世强;刘艳芳;韩光跃;高伟;齐顺祥 刊期: 2010年第04期

  • 肝硬化患者院内感染病原菌及耐药分析

    目的:研究肝硬化患者院内感染的主要病原菌及药敏情况.方法:对解放军第302医院2005年12月到2008年12月有关肝硬化患者院内感染的临床资料进行回顾性分析.结果:1686例次院内感染革兰阴性菌为主,发生率高为大肠埃希菌,约占所有菌株的31.8%,对多种抗生素耐药,其次为肺炎克雷伯菌,占12.3%;革兰阳性菌中表皮葡萄球菌占4.9%,金黄色葡萄球菌占4.0%;真菌中白色念珠菌常见,占9.9%.结论:大肠埃希菌是肝硬化患者院内感染的主要病原菌,且对多种抗生素耐药.

    作者:孔华丽;庄英杰;杨静;文萃荣;聂为民;姜天俊;张秀;赫兢 刊期: 2010年第04期

  • 2009年白银市碘缺乏病高危地区学龄儿童尿碘结果分析

    目的:了解白银市碘缺乏病高危地区学龄儿童尿碘水平.方法:在5个县区监测点随机抽取15所小学的8~10岁儿童1060例进行尿样检测.结果:白银碘缺乏病高危地区8~10岁儿童尿碘中位数(MUI)为188.3 μg/L,儿童缺碘率为26.4%,适宜占64.6%,摄入过量为9.0%.结论:白银市碘缺乏病高危地区部分儿童仍处于碘缺乏状态,应提高碘盐覆盖率,继续科学补碘.

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    目的:为艾滋病检测筛查实验室更加规范的运行,掌握实验室人员的健康监护状况,建立本地区的检验人员健康监护档案.方法:对宿迁市14家实验室50名检验人员进行了问卷调查和血清学检测.结果:宿迁市艾滋病实验室检测人员每年进行健康监护的42人,没有的8人.经市筛查中心实验室检测,其中HIV抗体检测阴性50人,阳性0人.HBsAg阴性50人,阳性0人.HCV抗体阴性50人,阳性0人.结论:宿迁市艾滋病实验室检验人员健康监护资料不全,各实验室检验人员本底血清检测项目不全,必须加大管理力度,强化健康监护意识.

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    作者:张清杰 刊期: 2010年第04期

中国卫生检验杂志

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