学术投稿

实时荧光聚合酶链反应检测粪便标本中的金黄色葡萄球菌肠毒素A、D

张红河;范建中;董晓勤;张卫英;王贤军;陈瑜

关键词:金黄色葡萄球菌, 肠毒素, 聚合酶链反应
摘要:目的:建立一种快速、准确、特异、定量检测金黄色葡萄球菌及其肠毒素A、D的方法并探讨肠毒素在食物中毒引起腹泻中的意义.方法:选择femB、SEA和SED基因分别作为金黄色葡萄球菌菌株、肠毒素A、肠毒素D的靶序列,设计合成引物和探针;收集食物中毒导致腹泻患者粪便标本487份,并对其进行检测分析.结果:采用荧光聚合酶链反应检测金黄色葡萄球菌和肠毒素A的灵敏度为1.0×102拷贝,而检测肠毒素D的灵敏度为1.0×103拷贝;487份粪便标本中检出金黄色葡萄球菌femB基因72例(14.8%),检出产肠毒素A菌株为11例(15.3%,11/72),产肠毒素D菌株为9例(12.5%,9/72),同时产肠毒素A、D菌株1例(1.4%,1/72).结论:应用Taqman探针实时荧光PCR技术能够快速、准确检测金黄色葡萄球菌及其肠毒素,适合于大样本筛查.
中国卫生检验杂志相关文献
  • 饮用水中微囊藻毒素快速检测方法的应用研究

    目的:探讨快速检测方法(ELISA)检测饮用水中微囊藻毒素的实用性和优越性.方法:按要求采集农村集中式水厂源水,同时用HPLC法和ELISA法双盲测定,比较结果;选择微囊藻毒素高、中、低3种不同浓度的水体,分别加入不同浓度的微囊藻毒素标准用ELISA法各进行6次测定,统计出相应的回收率及相对标准偏差.结果:ELISA法检测饮用水中微囊藻毒素准确度及精密度较理想,与HPLC法比较,无显著性差异(P>0.05).结论:ELISA法实用、准确、简便、快速,适合大批量样品的测定.

    作者:余天莉;蒲朝文;何军 刊期: 2007年第02期

  • 惠城区部分市售食品的微生物学质量调查

    目的:了解惠城区市售食品的卫生状况.方法:于2005年1月~5月对惠城区6类食品进行了菌落总数、大肠菌群数和肠道致病菌的检测.结果:6类食品(饮料、凉拌菜、糕点、灌肠类、酱卤肉类、果脯)的超标率分别为7.70%、47.06%、13.34%、11.11%、40.00%、6.25%.除饮料和果脯外其余食品均检出致病菌,检出率为6.12%.结论:凉拌类和酱卤肉类食品的污染较严重,建议有关部门采取有效措施,加强食品卫生的监督管理,以保障食品安全.

    作者:毛露甜;王绍芬;曾伟;陈蔡国;梁锦灿;杜梅 刊期: 2007年第02期

  • 2001~2005年荆门市纯净水微生物检测结果分析

    目的:为了解纯净水产品质量.方法:作者对2001~2005年415份纯净水按GB/T4789检测方法进行检测.结果:致病菌、大肠菌群合格率为100%;菌落总数合格率为81.4%;霉菌、酵母菌74.9%,合格率低.结论:要进一步对纯净水加强监督检测,以确保消费者身体健康.

    作者:阮先成;王红 刊期: 2007年第02期

  • HPLC法测定保健食品中酪蛋白磷酸肽

    目的:建立保健食品中酪蛋白磷酸肽的高效液相色谱测定方法.方法:样品经处理后,采用不同比例的乙腈、0.1%醋酸溶液梯度洗脱,用带有紫外检测器的高效液相色谱仪测定.结果:方法检测限为10 μg/ml,相对标准偏差为3.2%,回收率为91%~103%.结论:本方法前处理简便、检测灵敏度高,适用于保健食品钙片中酪蛋白磷酸肽含量的测定.

    作者:田随安;张向兵;李永利 刊期: 2007年第02期

  • HPLC法测保健品中红景天甙

    目的:建立快速测定保健品中红景天甙的液相色谱测定方法.方法:准确称取样品0.1~0.5 g,经甲醇超声提取处理,定容,过0.45 μm滤膜.滤液10 μl进HPLC分析.色谱条件:Agilent C18柱(4.6×250 mm,5 μm),流动相:甲醇-0.25 mol/L磷酸二氢钾水溶液(20:80,pH 5.8),流速1.0 ml/min,柱温40℃,测定波长220 nm.结果:红景天甙不同水平的样品回收率为91.2%~104.2%.RSD均小于5.4%.红景天甙标准溶液浓度0~200 mg/L,与峰面积呈良好线性关系,相关系数为0.9994,检出限为:0.10 mg/L.结论:方法简便快速、准确可靠,可有效监控保健品的质量,防止不法商贩制造假冒伪劣产品.该体系还可同时测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠,减少了实验步骤,节省了时间,适于实际工作需要.

    作者:文君;缪红;王鲜俊;彭喜雨 刊期: 2007年第02期

  • 重庆市9 528例体检人群脂代谢特点及脂代谢异常的临床研究

    目的:探讨重庆市体检人群脂代谢水平和脂代谢异常状况及影响因素.方法:将调查对象按性别和年龄分组,分析14 918例健康体检人中进行了血脂检查的9 528例人群的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)四项血脂指标,比较不同年龄段及男女间脂代谢水平和各类脂代谢异常的发生率,采用多因素Logistic回归分析脂代谢异常与性别、年龄、体重指数(BMI)、血压和血糖(GLU)的相关性.结果:9 528例健康体检人群中脂代谢异常数为3853(40.4%),高TG2504(26.3%)、高TCl901(20.0%)、高LDL-C1573(16.5%)、低HDL-C383(4.0%),其中一项指标异常1978(51.3%)、两项指标异常1260(32.7%)、三项指标异常597(15.5%)、四项指标均异常18(0.5%);高TC、高TG和高LDL-C发生率随着年龄的增加而明显增高,而70~年龄段各项脂代谢水平和高TG和高LDL-C有降低的趋势;男性体检人群脂代谢水平和脂代谢异常率明显高于女性(P<0.001).性别、年龄、BMI、血压和GLU五项因素均对TG和LDL-C异常发生率有显著影响;影响TC代谢的因素是年龄、血压和GLU;性别、BMI和GLU对低HDL-C发生率也有显著影响.结论:脂代谢异常在重庆市体检人群中发生率较高,应加强对高危人群的定期体检,通过控制体重、血压、血糖等与脂代谢异常的相关因素而利于对脂代谢异常疾病的防治.

    作者:郑隽;王永红;王继红;李启富;谢友红;谢微波;邓学洁;刘正淑 刊期: 2007年第02期

  • 全血铅测定的前处理优化与质控检测

    目的:通过质控样品的检测验证优化后全血铅检测方法的精密度和准确度.方法:全血标本经10%硝酸酸化,与基体改进剂同时进样,采用石墨炉原子化器原子化和Zeman效应背景校正,测量吸收峰面积,通过标准工作曲线得出血铅值,同时检测全血标本和质控样品.结果:优化后的处理条件检测质控样品结果满意.结论:本实验中对血铅检测条件的优化合理.

    作者:张宜明;俞锡林;丁华 刊期: 2007年第02期

  • 137名中老年旅行者血脂水平调查分析

    目的:了解中老年旅行者的血脂水平,为有关疾病的早期预防提供科学依据.方法:于2005年分别对137名55~80岁的中老年旅行者进行血清血脂4项(总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇)检测.结果:血脂异常总检出率为58.3%;男、女性总胆固醇升高检出率分别为6.6%和11.6%,女性高于男性;甘油三酯升高检出率分别为21.6%和10.3%,男性高于女性;低密度脂蛋白胆固醇升高检出率分别为51.6%和64.9%,女性高于男性.结论:通过保健体检对血脂水平异常的中老年旅行者尤其是更年期妇女给予正确的防治知识,有利于预防或减少心血管疾病的发生,提高中老年旅行者晚年的生活质量.

    作者:谭华 刊期: 2007年第02期

  • 火焰原子吸收光谱法测定水质中低含量铜的质量控制

    水中铜的检验方法首选原子吸收分光光度法,直接测定时仅限于较高浓度的含量(>0.2 mg/L)[1],对于低含量铜的检测则必须通过APDC-MIBK络合萃取后才能满足实验要求,而络合萃取法操作较繁琐,且燃烧有机溶剂MIBK造成实验室污染,对工作人员有一定危害.为了减少样品处理过程的环节,节约试剂,提高效率,本文采用简单的酸浓缩法测定质控水样中低含量铜,取得准确可靠的结果,变异系数为0.48%,回收率为98.9%~101.0%,现报告如下.

    作者:欧阳云 刊期: 2007年第02期

  • 农村分散式供水水质的研究阶段性成果报告

    目的:了解农村分散式供水水质情况,为实施农村改水提供科学依据.方法:按照《生活饮用水检验规范》(2001)检验方法对吴川市农村分散式供水水样进行分析检测.结果:2005年至2006年共检验了114份水样,合格27份,合格率23.68%.其中大口井(浅层地下水)水样28份,合格4份,合格率14.28%.深井水样49份,合格18份,合格率36.73%.手压泵井水样27份,合格5份,合格率18.52%.其它水样10份,全部不合格.结论:吴川市分散式供水水质合格率低,主要为偏酸性和水质铁、锰超标问题.

    作者:吴翠萍;段青嫜;林翠娟 刊期: 2007年第02期

  • 顶空-气相色谱/质谱联用法检测饮用水中的氯仿和四氯化碳

    目的:自来水厂消毒工艺过程中产生的氯仿、四氯化碳对人的健康有严重的危害,需建立灵敏度高的检测方法监测饮用水中的氯仿和四氯化碳.方法:建立了顶空采样用质谱作为检测器并采用选择离子监测的方法检测饮用水中的氯仿和四氯化碳.结果:氯仿和四氯化碳浓度在0~80 μg/L范围内,线性较好,相关系数分别为0.9993和0.9991;氯仿的低检出浓度为0.05 μg/L,四氯化碳的低检出浓度为0.03 μg/L,跟国标方法相比降低了两个数量级,灵敏度大大提高.结论:实验表明本方法操作简单,准确度和精密度较高均符合检测要求,回收率范围93.6%~106.4%,RSD为5.0%~7.5%之间.

    作者:任红波 刊期: 2007年第02期

  • 基体改进剂石墨炉原子吸收光谱法直接测定尿中的铅

    测定尿铅的方法有双硫腙分光光度法、电位溶出仪法、火焰原子吸收法、石墨炉原子吸收法.双硫腙分光光度法需要硝酸-高氯酸消化,在操作过程中,酸雾、有机溶剂、氰化钾等影响着操作人员的健康,而所用的玻璃仪器较多,用硝酸浸泡后,驱铅是否干净还是个未知数,试剂中铅的含量也严重影响着测定结果.电位溶出仪法有时由于电极的原因结果相对不是很稳定.而本文采用了加入基体改进剂,将尿液进行适当的稀释后,直接用石墨炉原子吸收光谱仪来测定,样品用量少,操作简单,灵敏度高,结果准确,并大大地提高了工作效率.

    作者:钱国英;李纲 刊期: 2007年第02期

  • 山东省2003~2005年艾滋病确认实验室检测指标分析

    目的:分析山东省艾滋病实验室检测的有关指标及相关资料,为艾滋病防治提供依据.方法:采用EXECL数据库和SPSS11.5统计软件对山东省2003~2005年艾滋病实验室检测数据和网络直报个案资料进行整理、分析.结果:2003~2005年我省累计报告艾滋病病毒(HIV)感染者703例,其中外来人员376例,占总数的53.5%.结论:应进一步加强艾滋病检测实验室网络建设,积极组织有针对性的HIV抗体专项调查工作,尤其是加强对流动人口、外来妇女的监测,尽快发现HIV感染者,有效遏制艾滋病的传播.

    作者:王同展;尤向东;吕翠霞;苏生利;傅继华;林琳;林彬;孙晓光 刊期: 2007年第02期

  • 鸡蛋中甲硝唑残留的液相色谱-串联质谱检测方法研究

    目的:建立液相色谱-串联质谱法快速检测鸡蛋中甲硝唑的残留量.方法:采用乙腈提取鸡蛋样品中的甲硝唑以及内标替硝唑,以Diamonsil C18色谱柱分离,液相色谱-电喷雾串联质谱法测定,采用正离子方式,选择反应监测.结果:采用空白鸡蛋基质制作标准工作曲线,鸡蛋中甲硝唑检测的线性范围为0.05~25 μg/kg,定量检测限为0.05 μg/kg(S/N=15).3个添加水平的平均回收率在98.1%~107%范围内,相对标准偏差在14%以下.结论:本法快速、灵敏、准确,可实现鸡蛋中甲硝唑残留的痕量检测.

    作者:权伍英;栾燕;谷晶;李晶 刊期: 2007年第02期

  • 海水产品副溶血性弧菌污染定量检测分析

    目的:为了掌握副溶血性弧菌在海水产品中污染情况,以不同季节,定量检测副溶血性弧菌在海水产品中污染程度的动态变化,提出有效的控制措施,减少食物中毒的发生.方法:根据不同季节,从不同的农贸市场采取鱼类、虾类标本;采用MPN法进行副溶血性弧菌定量检测;并完成分离菌株血清型和毒力基因的检测.结果:副溶血性弧菌在海水产品中的污染有明显的季节性,并且与我省的细菌性食物中毒的发生季节基本一致;副溶血性弧菌的血清型分布以O4/O5/O1/O11血清型为主;海产品分离株,其携带TDH基因明显低于食物中毒标本中分离株.结论:通过检测分析,得出副溶菌在鱼虾等海产品中的污染具有明显的季节性,虾和鱼的污染密度也有差别(x2=12.40;P<0.05).而且检测的两类海产品中,高污染量的副溶菌对食品安全存在高风险.加强对TDH阳性副溶菌的检测,是控制副溶菌食物中毒发生的重要方面.

    作者:程苏云;张俊彦;王赞信;童贵忠;孟真 刊期: 2007年第02期

  • 80 562名从业人员血清梅毒抗体检测分析

    目的:了解我市1995~2005年间从业人员的梅毒感染情况.方法:采用快速环状卡片测试方法(RPR)和梅毒螺旋体血球凝集试验(TPPA)对80 562例从业人员进行血清梅毒抗体检测分析.结果:梅毒抗体阳性306例,阳性率37.98/万,其中男性83例,女性223例,以娱乐业从业人员阳性率高为50.47/万.结论:我市从业人员梅毒感染从1995~2002年呈逐年上升趋势,2003至2005年有所回落,阳性率同1998年持平.

    作者:朱国良;平国华;周伟艳;朱旦蓉;姚漫红 刊期: 2007年第02期

  • 2006年杭州市麻疹病毒分离株N和H序列分析

    目的:分析杭州市2006年杭州麻疹病毒分离株N与H核酸序列变异情况.方法:用RT-PCR对6个临床急性期麻疹病人的咽拭子标本及其麻疹病毒分离株的(Vero-slam细胞培养)扩增核蛋白(N)和血凝素蛋白(H)基因片段,并对本次分离株的核酸序列与近期分离株和疫苗株进行对比.结果:从标本中直接检测N片段基因的结果与细胞培养病毒的结果完全相符.本次分离株N片段基因与分离株浙江CHN/9.05/7、浙江CHN/02/2相似性分别为98.96%、96.04%,与疫苗株Shanghai-191、Changchun-47相似性均为94.58%;分离代表株H基因片段与分离株浙江CHN/02/2、浙江CHN/9.05/7相似性分别为99.59%、99.07%,与疫苗株Shanghai-191、Changchun-47相似性分别为95.14%、95.04%.结论:RT-PCR直接从标本中检测相关基因片段可作为分子病毒学研究的方法,但经细胞培养增殖后效果更好.麻疹病毒尽管遗传稳定,但还是存在着变异.

    作者:黄志成;濮小英;祝水芬;于新芬 刊期: 2007年第02期

  • 2005年广东省健康人群流脑免疫水平和带菌状况调查

    目的:了解我省健康人群流脑带菌状况和免疫水平,预测流脑发病的趋势,为流脑的防控提供依据.方法:按照中国疾病预防控制中心的要求并结合广东省的实际情况开展流脑监测工作.选择广州市番禺区、茂名化州市、韶关乐昌市、东莞市及汕头市潮阳区作为流脑监测点.各监测点按广东省流脑监测方案要求采集市内0~、5~、10~、15~、25~、35~及45岁以上共7个年龄组人群的咽拭子及静脉血,分别进行健康人群带菌调查及人群抗体水平检测.结果:广东省健康人群A群流脑IgG抗体的总阳性率为78.9%(675/856),C群流脑IgG抗体的总阳性率为23.7%(203/856);健康人群脑膜炎奈瑟氏菌(简称Nm)的带菌率为0.65%(7/1077).健康人带菌以B群Nm为主.结论:广东省不同年龄组健康人群A群流脑IgG抗体的阳性率维持在较高水平,而Nm的带菌率也很低,提示大部分人对A群流脑有免疫作用.但我省健康人群C群IgG抗体水平较低,一旦有传染源传人,易引起局部暴发流行.

    作者:刘美真;杨华可;廖国东;黄忠生;徐亮;邓小玲;谭海玲;陈经雕;宋铁 刊期: 2007年第02期

  • 浅析ISO/IEC17025:2005

    2005年5月15日,国际标准化组织(ISO)和国际电工委员会(IEC)联合发布了ISO/IEC17025:2005《检测和校准实验室能力的通用要求》,取代ISO/IEC17025:1999.CNAL依据等同采用ISO/IEC17025:2005原则,于2005年9月1日正式颁布实施《检测和校准实验室认可准则》(CNAL/AC01:2005),取代CNAL/AC01:2003《检测和校准实验室认可准则》(等同ISO/IEC17025:1999).

    作者:张镝;周颖 刊期: 2007年第02期

  • 过硫酸铵消化法测定尿碘质控样分析

    碘是人体必须的微量元素之一,缺乏会导致碘缺乏病的发生.尿碘水平是监测和评价人群或个体碘营养状况的重要指标之一,可以反映机体内碘的水平,是诊断和监测碘缺乏病的一个重要依据[1].通过尿碘质控对发现和分析实验中出现误差的原因,准确测定尿碘含量具有重要的意义.我们采用修订的尿中碘的过硫酸铵消化-砷铈催化分光光度测定方法[2],进行外质控样的分析测定,取得了较好的成绩.

    作者:吕荣春;董永涛;朱桂爱 刊期: 2007年第02期

中国卫生检验杂志

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主管:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会