王玫;韩君
肠侵袭性大肠埃希菌(Enteroinvasive Escherichia coli,EIEC)具有侵袭性[1],主要侵犯较大儿童和成人[2],引起人类细菌性痢疾[3].该菌的生化反应很不典型[1].引起的痢疾样腹泻依然是全球性的公共卫生问题.可爆发流行或散发,亦可引起食物中毒(主要是O28ac)[1],由其引起的食物中毒时有报告,因而其病原学的诊断对该病的防治和流行病学调查有着十分重要的作用.
作者:包芳珍;方叶珍;徐丹戈;高海明;黄世旺 刊期: 2007年第04期
目的:利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术探讨O139群霍乱弧菌的分子分型方法.方法:用Sfi Ⅰ酶和Not Ⅰ酶切O139群霍乱弧菌染色体DNA,经脉冲场凝胶电泳进行片段分离.结果:14株O139群霍乱弧菌经Sfi Ⅰ酶切后电泳分离可得一个PFGE型,用Not Ⅰ酶切电泳可分为2个PFGE型.结论:脉冲场凝胶电泳技术分析O139群霍乱弧菌,分型发现微小差别有助于分析追踪疫情和来源.
作者:金春光;石优章;徐景野;郑剑 刊期: 2007年第04期
细菌学检验从标本的采集、保存、运送、以及在分离培养、鉴定、药敏试验、结果报告及检验过程中所使用的培养基、试剂、诊断血清、实验动物等各个环节都必须采取一系列质量控制.
作者:史玲 刊期: 2007年第04期
目的:建立饮料中8种人工合成色素日落黄、柠檬黄、苋菜红、胭脂红、赤藓红、诱惑红、酸性靛蓝和亮蓝的定性、定量分析方法.方法:饮料样品经加热驱除二氧化碳或乙醇后直接过膜进样,以甲醇+乙酸铵(0.02 mol/L,pH=4.0)为流动相,梯度淋洗分离,电喷雾(ESI)离子化,选择反应监测方式(SRM)定性和定量.结果:样品处理简单,定性、定量准确,检测灵敏度高,回收率98.2%~101.6%,RSD 0.3%~1.2%,相关系数0.9991~0.9999,检出限0.4~13 μg/L.结论:该方法简单、准确、灵敏,适用于饮料中这8种人工合成色素的确证和定量分析.
作者:李帮锐;冯家力;潘振球;王一红;李欣;丁力 刊期: 2007年第04期
目的:建立工作场所空气中甲氧滴滴涕的气相色谱测定方法.方法:玻璃纤维滤纸吸附空气中甲氧滴滴涕,用正己烷超声洗脱后毛细管气相色谱(ECD)测定.结果:该方法检出限为0.009 μg/ml,当标准溶液浓度为1~10 μg/ml时,相对标准偏差为2.9%~4.6%,测定范围为0.13~1.3 mg/m3,解析效率大于95%,采样效率>95%,样品在<4℃条件下至少可稳定保存7 d.结论:该方法适用于工作场所空气中甲氧滴滴涕的测定.
作者:夏俊鹏;吴飞;刘红亚 刊期: 2007年第04期
目的:应用酶联免疫法分别检测丙肝病毒核心抗原(HCV-cAg)和抗体(HCV-Ab),了解丙肝病毒核心抗原检测的意义.方法:采用军事医学科学院基础医学研究所研发并由湖南景达基因公司推出的商业化的HCV游离核心抗原试剂盒,对来自入院前或手术前筛查的180例临床样本和24例丙肝或疑似丙肝患者的血清样本进行HCV-cAg和HCV-Ab检测,阳性者用反转录多聚酶链反应(RT-RNA)证实.结果:180例筛查样本HCV-Ab均为阴性,HCV-cAg阳性2例,其中RT-RNA阳性1例;24例HCV-Ab阳性的样本检出HCV-cAg阳性12例,RT-RNA阳性14例.HCV-cAg与RT-RNA符合率为85.71%(12/14).结论:HCV核心抗原检出时间早于抗体,HCV-cAg检测试剂盒可作为HCV抗体检测的补充试剂,尤其对术前HCV筛查的患者联合应用更具有临床价值.
作者:索凤霜;李萍燕;康熙雄 刊期: 2007年第04期
目的:采用荧光定量-聚合酶链反应(FQ-PCR)法,检测麻疹病毒核酸,用以建立和推广一种敏感、特异、快速的麻疹检测新技术.方法:TaqMan特异性荧光标记探针法,进行特异性、敏感性和麻疹疑似患者临床标本的检测.结果:FQ-PCR法检测麻疹病毒核酸具有高度的特异性和敏感性,本次试验检测灵敏度达0.1 TCID50.在14份麻疹患者咽拭子标本中,有13份标本检出麻疹病毒核酸,从核酸提取至完成检测仅需3 h.结论:FQ-PCR法为麻疹病毒核酸检测提供了一种可靠的方法.
作者:姜明杰;甘云;梁勇;张振国;卢国际;王翠华;李彩云;王蒋丽 刊期: 2007年第04期
目的:为更好地开展食品安全性研究和预防控制食源性疾病的发生,了解衢州市食品中食源性致病菌的污染状况,初步确定可能被污染的高危食品,为食物中毒监测提供科学依据.方法:参考国家标准方法,采用进口CHROMagar显色培养基,对样本进行食源性致病菌的分离、生化鉴定.结果:2005年至2006年共检测食品样品223份,检出致病菌45株,总检出率20.2%;其中检出金黄色葡萄球菌11株,检出率为14.3%(11/77);其次为单增李斯特菌检出16株,检出率为7.17%(16/223);沙门菌检出16株,检出率为7.17%(16/223);副溶血性弧菌检出2株,检出率6.45%(2/31);未检出EHEC O157:H7.结论:衢州市居民主要消费食品存在食源性致病菌污染,其中生肉类食品、水产品和散装熟肉是主要污染食品品种.通过检测,为我市食品安全预警提供可靠数据.
作者:杨瑞军;金莞尔;张建民;王文英;于丽莉 刊期: 2007年第04期
目的:通过用霍乱弧菌不定期地对冰箱内保存的微量培养板进行测试,观察不同保存时间微量板对细菌检测结果的影响,探讨微量板佳保存时间.方法:采用霍乱弧菌常规培养法[1]与霍乱弧菌微量板培养法[2]平行实验,比较霍乱弧菌小检出浓度.结果:用两株菌作为测试菌,每月1次共做了6批实验,微量板长保存时间201 d.微量板培养法细菌小检出浓度为100~102 cfu/ml;常规培养法细菌小检出浓度为101~102 cfu/ml,两法对霍乱弧菌检测试验结果的敏感性较为一致.保存长达201 d的微量板未发现有培养基干裂、杂菌污染及颜色改变,并且也未影响检测结果.结论:微量培养板可以用于霍乱弧菌病原检测,结果证实微量板可在冰箱保存6个月以内使用.
作者:吴以华;徐景野;李岳良;王汀;刘捷 刊期: 2007年第04期
目的:利用针对嗜肺军团菌种特异性16S rRNA和军团菌致病基因-巨噬细胞感染增强因子(mip)序列探针原位分子杂交建立嗜肺军团菌的快速、特异性检验方法.方法:设计特异性针对嗜肺军团菌种特异性16S rRNA和mip探针,采用荧光素标记探针对采自西安市8家宾馆中央空调冷凝水、贮水池水各8份进行原位分子杂交,并且结合细菌分离、生化鉴定技术检验水样中嗜肺军团菌.结果:细菌分离鉴定表明2份冷凝水、5份贮水池水分离到可疑菌落,抗体凝集实验证实嗜肺军团菌血清Ⅰ型3份、Ⅴ、Ⅵ型各1份,2份阴性.实验周期约10~12 d;原位分子杂交显示16S rRNA、mip的探针杂交信号成堆分布于原虫细胞内,形如杆菌状,16S rRNA与mip的杂交信号存在完全双标记,但有少数mip的杂交信号不与16S rRNA共存,5株鉴定为嗜肺军团菌Ⅰ、Ⅴ、Ⅵ型的水样原虫中,经16S rRNA、mip探针杂交均为阳性,对2株非嗜肺军团菌水样原虫进行16S rRNA、mip的杂交结果均为阴性.实验周期约20 h.结论:结果表明该方法适用于对存在于原虫内致病性嗜肺军团菌进行检验,是种快速、特异性的致病性嗜肺军团菌检验方法.
作者:吴守芝;汪宗江;李恒新;黄河清;张锋 刊期: 2007年第04期
目的:探讨巨泌乳素测定在高泌乳素血症诊断中的价值.方法:对我院门诊106例高泌乳素血症患者及正常体检者98例的血清进行泌乳素值测定,血清经聚乙二醇(PEG)沉淀后再次测定其泌乳素值,并对两结果进行比较.结果:在高泌乳素血症患者血清中,巨泌乳素的检出率为18.9%(20/106),正常对照组中巨泌乳素的检出率为1%(1/98),两者存在显著性差异(P<0.001).单体泌乳素组血清经PEG处理前后的PRL含量无显著性差异(P>0.05),而含有巨泌乳素的血清处理前后的PRL含量有显著性差异(P<0.001).结论:巨泌乳素是造成高泌乳素血症的常见原因,用PEG沉淀法筛查巨泌乳素是一种有效和实用的方法.在PRL增高的标本中,应用PEG法常规筛查巨泌乳素对提高高泌乳素血症的诊断准确性有重要的临床价值.
作者:吴颖 刊期: 2007年第04期
近年来,顶空固相微萃取(HS-SPME)、微波-顶空固相微萃取(MA-HS-SPME)、超声波法、加速溶剂萃取(ASE)技术、凝胶渗透色谱(GPC)、气相色谱(GC)、高分辨气相色谱-高分辨双聚焦磁式质谱联用仪(HRGC-HRMS)、高分辨质谱(HRMS)、气相色谱/离子阱质谱(GC-ITMS)、气相色谱-质谱联用(GC-MS-MS)、重组有绿色荧光蛋白(GFP)和荧光素酶(Luc)报告基因法、电化学法、分子活化分析、海洋海绵皂等传统技术和新仪器、新方法在PCBs的检测中得到应用.
作者:边归国 刊期: 2007年第04期
目的:建立通用H点标准加入法快速测定保健食品中的原花青素方法.方法:利用样品及加标样品的200~350 nm扫描光谱,直接用matlab软件编制的通用H点标准加入法计算原花青素浓度.结果:样品测定的相对标准偏差在2.05%~9.60%之间,且方法与经典铁铵盐催化比色法比较无显著性差异.结论:方法简便、快捷、节省试剂,适用于保健食品中原花青素的快速测定.
作者:郑波;张克荣;李梦龙 刊期: 2007年第04期
目的:建立测定啤酒中微量甲醛的新方法.方法:在酸性条件下将溶解于啤酒中的游离甲醛随水蒸出,与乙酰丙酮作用,生成稳定的黄色化合物2,5-二乙酰基-1,4-二氢卢剔啶,在414 nm处测吸光度,即可得到啤酒中甲醛含量.结果:测定微量甲醛的线性范围为0.0~2.4 μg/ml,样品加标回收率98.4%~100.9%.结论:该法简便,灵敏度高,重现性好,适合啤酒中甲醛的测定.
作者:熊小莉;陈尚伟 刊期: 2007年第04期
微生物检验,在感染性疾病及相关病患的预防、诊断治疗中起着越来越重要的作用,近几年SARS、猪链、禽流感等传染性疾病的流行,更加警示我们要不断提高微生物的检验技术水平.为了保障检验结果的精确性和准确性,日常工作中我们要注意开展质量控制,包括室间质量控制和室内质量控制.室间质量控制是各地实验室之间进行质量控制的一种方式,也是上一级实验室对各实验室进行质量管理的手段.参加由各省临床检验中心或卫生部临床检验中心组织的室间质控,会遇见一些平时罕见或未见过的菌株,通过质控检验对它们的生长条件、菌落形态、染色、镜下、形态等有了较深的感性认识.日后工作中倘若再遇见这些菌将不再会漏检.室间质控是建立在一个较好的室内质控基础上的,做好室内质控直接关系到日常检验工作的质量.室内质控主要包括以下几个方面:人员、实验室前的质量控制、标本接种前的质量控制、培养基的质量控制、染色液及染色方法质量控制、常用仪器的质量控制、发报告前的质量控制.为了保证检验结果准确无误,应对分析前、分析中、分析后3个阶段实行全面质量管理.具体要求如下:
作者:齐春华;王文平 刊期: 2007年第04期
目的:建立碳化-酸溶消解法测定板栗中的铅、镉含量的方法.方法:先用硝酸消解板栗果肉及果皮中易溶解的部分,蒸干,然后在约400℃碳化使大分子裂解,形成小分子或碳残渣,再用硝酸,双氧水消解成透明溶液.用石墨炉光谱法测定板栗中铅、镉的含量.结果:铅、镉的平均回收率为98.9%、103.5%;RSD<5.3%.结论:该方法简便、快速、安全,消化完全且干扰小,测定结果可靠.
作者:吴瑶庆;孟昭荣 刊期: 2007年第04期
目的:探讨慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者的基因异常.方法:用两种序列特异性探针D13S272(13q14.3)、ATM(11q23),一种着丝粒探针,以间期荧光原位杂交技术(FISH)选择性的对28例CLL进行检测,并和常规细胞遗传学检测结果比较.结果:常规细胞遗传学方法检出10例有克隆性染色体异常,其中5例检出+12,仅一例检出13q-,其余均为未涉及13q-、11q-的异常.两种位点特异性探针检出12例(44%)异常,del(13q14.3)9例,del(11q23)7例.12号着丝粒探针检出6例有+12,而且D13S272(13q14.3)、ATM(11q23)缺失常发生在常规检测正常的核型.3种探针异常检出率为57%(16/28).结论:FISH技术可以检测出常规细胞遗传学方法无法检出的较小片段缺失,因此,位点特异性FISH是检测CLL患者基因异常的有效手段.
作者:李倩;杜兵;杨军军;刘国君;季抗挺 刊期: 2007年第04期
目的:随着检验医学、信息技术的不断发展和实验室大型检验设备的引进,LIS系统和HIS系统的无缝连接,已经成为医学实验室重要的组成部分.方法:通过对传统检验工作模式和LIS与HIS系统连接工作模式进行对比.结果:以科学合理的检验流程为基础,以无纸化工作模式为载体的信息体系,更能够全面保证检验质量,提高实验室自动化程度,优化检验流程,降低差错率.结论:LIS系统与HIS系统的应用,对医院科学化、规范化、人性化的管理,对提高医疗服务质量有着非常重要的意义.
作者:吴燕丹 刊期: 2007年第04期
目的:建立毛细管柱气相色谱法测定食品中的甜蜜素的方法.方法:采用适当的样品处理方法,应用弱极性的HP-1毛细管柱取代填充柱检测食品样品中的甜蜜素.结果:在佳分析条件下,样品中的甜蜜素经酯化后在0.50~3.00 mg/ml浓度范围内有良好的线性(r=0.9998),回收率为94.1%~97.6%,相对标准偏差3.0%~4.9%.结论:相对于国家标准方法推荐的填充柱,毛细管柱的柱效高,通用性好,结果更易重复,是食品中甜蜜素检测的另一选择.
作者:周华 刊期: 2007年第04期
目的:建立石墨炉原子吸收分光光度法测定尿中锰的方法.方法:用硝酸-高氯酸混酸消化尿液,应用石墨炉原子吸收技术,硝酸镁作为基体改进剂,测定尿中锰.结果:方法的检出限为0.06 μg/L,相对标准偏差为2.6%~4.0%,回收率为94.2%~107.5%.结论:石墨炉原子吸收分光光度法可用于尿中锰的测定.具有灵敏度高、检出限低、干扰少等特点.
作者:李亚峰;高全成;马进 刊期: 2007年第04期