纪苑;邹月春;赵李霞
目的:探索一个定量分析蛋白质的新方法.方法:研究发现在pH 2.5左右的B-R缓冲溶液中,鸡冠花红与血清蛋白质在室温下能迅速结合形成玫瑰红色复合物,该复合物在585 nm处有正吸收峰,在520 nm处有负吸收峰.研究了反应佳条件,建立了蛋白质-鸡冠花红双峰双波长光度法测定蛋白质.结果:所测蛋白质在75~400 mg/ml与摩尔吸光度有良好线形关系;用于人血清样品中总蛋白的测定,所得结果满意,回收率在97.62%~100.53%.结论:本方法快速、简便、准确度高、选择性好,生物体液中大部分常见物质均不产生干扰.
作者:王颖臻;曹秋娥;丁中涛 刊期: 2006年第03期
本市自2001年所辖某县检出过一例出血性大肠埃希菌(EHEC,O157)以来,多年未再检出过一例致泻大肠埃希菌.今年,在10月份的一起食物中毒标本中检出一例血清型为O164:K?的侵袭性大肠埃希菌(EIEC).经多次试验确认该菌在培养特性、生化反应上与其它EIEC有不同之处,现将检验过程和体会叙述如下.
作者:燕勇;沈志英;王恒辉 刊期: 2006年第03期
目的:调查研究浙江省食品铅镉的污染水平状况.方法:于2003年对7个监测点15类673份食品进行铅、镉污染状况监测.结果:我省被检食品符合国家标准的有616份,占91.39%.符合CAC标准的有553份,合格率为92.73%(经标化).铅含量较高的食品为茶叶、皮蛋、软体类、叶菜类,平均值分别是2.35、1.84、0.339、0.26 mg/kg;食品中镉含量符合国家标准的有535份,合格率为83.9%,符合CAC标准的样品有548份,合格率为85.3%(经标化).镉含量较高的食品是猪肾、甲壳类、软体类、海产鱼,平均含量为1.637、0.346、0.285、0.159 mg/kg.结论:提示我省海产品、猪肾、茶叶受铅镉污染较重,应引起各级政府部门的重视.
作者:俞莎;沈向红;汤鋆;于村;应英;李海涛 刊期: 2006年第03期
目的:建立保健食品中同时测定两种结构形式洛伐他汀含量的方法.方法:用高效液相色谱法同时测定含保健食品中两种结构形式洛伐他汀的含量.结果:方法线性范围为:0.500~0.025μg,低检出限为0.001μg,总分析时间11min.洛伐他汀平均保留时间:闭环型9.632 min,开环型8.682 min.4种浓度的平均回收率为:97.77%.结论:高效液相色谱法同时测定洛伐他汀浓度稳定、可靠、简便,适用于保健食品的分析.
作者:廖一民;向世学 刊期: 2006年第03期
目的:合成固相时间分辨荧光免疫分析螯合剂的中间体-4,4'-二溴-6,6'二甲基2,2'-二吡啶.方法:根据自行设计的合成路线,以2-氨基6-甲基吡啶为原料,经重氮化、乌尔曼偶联合成6,6'-二甲基-2,2'-二吡啶,再经氧化、硝化、溴化、脱氧等合成4,4'-二溴-6,6'二甲基2,2'-二吡啶.结果:经元素分析、红外光谱,核磁共振波谱等方法证明:成功的合成了4,4'-二溴-6,6'二甲基2,2'-二吡啶.结论:通过自行设计路线完成了4,4'-二溴-6,6'二甲基2,2'-二吡啶的合成,为固相时间分辨荧光免疫分析的应用提供了有价值的中间体和制备方法.
作者:郭淑英;潘利华;曲晓春;孔令艳;关铭 刊期: 2006年第03期
目的:构建胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因修饰的神经干细胞(NSCs),用于神经系统疾病的治疗.方法:通过酶切和连接的方法构建IGF-1基因重组逆转录病毒载体pLXSN-IGF-1,转染包装细胞获得病毒液,测滴度后感染从胎龄14 d的SD大鼠全脑中分离出的神经干细胞(NSCs),在转基因NSC中检测IGF-1基因的表达,观察转基因对NSCs增殖的影响.结果:酶切及序列分析证实逆转录病毒载体pLXSN-IGF-1构建正确,NSCs转基因后能检测到IGF-1基因表达,且仍然保持着未分化状态,能够自我更新以及具有多向分化潜能,并且生长速率加快.结论:成功构建了转IGF-1基因神经干细胞.
作者:张旭;藏卫东;胡婵丽 刊期: 2006年第03期
目的:了解衢州市市售食品中食源性致病菌的污染状况,防止食源性疾病的发生.方法:采集市区菜场、大型超市以及奶牛场的生猪肉、生牛肉、生禽肉、水产品、非包装熟肉制品、生蔬菜、生牛奶等七类食品343份进行了沙门菌、大肠杆菌O157:H7、产单核李斯特菌检测.非包装熟肉制品和生牛奶共91份加测金黄色葡萄球菌,水产品45份加测副溶血性弧菌.结果:共检出致病菌79株,总检出率为23.0%.其中沙门菌检出29株,检出率为8.4%,李斯特菌检出28株,检出率为8.2%,O157:H7检出1株,检出率为0.3%,金黄色葡萄球菌检出21株,检出率为23.1%,副溶血性弧菌未检出.结论:我市市售食品中食源性致病菌的污染状况比较严重,提醒有关部门应当加强对肉类屠宰加工行业以及经营销售生肉行业的卫生监督,尽量减少食源性致病菌的交叉污染;同时要做好卫生知识的宣传教育工作,防止食源性疾病的发生.
作者:金莞尔;陈卫国;张建民 刊期: 2006年第03期
目的:应用引物P289、P290对诺瓦克样病毒进行快速RT-PCR检测,为疾病预防控制提供准确可靠的实验数据.方法:从17份病人粪便、4份病人肛拭子、10份健康人粪便中提取核酸RNA,采用Takara的One Step RNA PCR Kit进行RT-PCR,对产物电泳,紫外灯下观测结果,同时用R-biopharm AG公司的ELISA试剂检测,比较结果,评价RT-PCR的特异性和灵敏度.结果:RT-PCR检测有10份病人粪便、2份肛拭子阳性,健康人标本全为阴性,ELISA检测有5份病人粪便、3份健康人粪便阳性,4份病人肛拭阴性.结论:用引物P289、P290对诺瓦克样病毒进行RT-PCR,特异性好,灵敏度高,结果准确可靠,ELISA试剂特异性、灵敏度不理想,有假阳性,难以为疾病预防控制提供准确可靠的实验数据.
作者:谭翰清 刊期: 2006年第03期
目的:建立固相萃取HPLC法测定豆芽中4-氯苯氧乙酸钠残留的检测方法.方法:豆芽样品经稀碱提取后,用50%的H3PO4溶液调至酸性,经Oasis(R)HLB柱富集,甲醇洗脱.以甲醇+0.01 mol/L磷酸盐缓冲液(40+60)为流动相,采用ZORBAX SB C18柱(250 mm×4.6 mm×5 μm)分离,UV 228 nm检测,外标法定量.结果:豆芽中4-氯苯氧乙酸钠的线性范围在0.20~6.0 mg/L,回收率在92.0%~95.0%,RSD均小于6%,低定量检出限为0.04mg/kg.结论:该方法具有快速、灵敏、简便、准确等优点,能满足实际工作的需要.
作者:李小平;蒋经伟;范建中;金米聪;姚浔平 刊期: 2006年第03期
目的:建立针对乳制品中乳糖的直接比色测定方法.方法:乳制品经蛋白沉淀澄清后,无蛋白滤液中的乳糖在苯酚、氢氧化钠、苦味酸和亚硫酸氢钠作用下生成桔红色的络合物,该络合物在520 nm处有大吸收峰,与标准系列比较定量.结果:乳糖在0.0~0.10 mg/ml范围内与吸光度呈良好线性关系,相对标准偏差<5%,加标平均回收率范围为96.8%~101.3%.结论:本方法简便快速,准确可靠,适用于乳制品中乳糖的快速测定.
作者:樊宏;陈强 刊期: 2006年第03期
2005年8月28日,九江市某酒店发生了一起食物中毒,经流行病学调查、实验室检查证实为致病性大肠埃希菌和副溶血弧菌引起,调查分析结果如下:
作者:熊艳森;张春芳;杜艳红;钟微;张景荣 刊期: 2006年第03期
目的:分析泌尿系统感染中大肠埃希菌Ⅰ类整合子的流行情况和分子特征.方法:应用全自动细菌分析仪Microscan WalkAway40和纸片扩散法,对40株大肠埃希菌进行抗生素敏感性测定,PCR扩增细菌总DNA上的Ⅰ类整合子,对扩增产物进行测序,并分析其中的基因盒,利用脉冲场电泳(PFGE)对菌株进行分子分型.结果:22株细菌含有Ⅰ类整合子,整合子大小为1 000、1 200、1 700和3 000 bp,22株细菌各含1~2个整合子.1 000 bp整合子含基因盒aadA1,1 200 bp整合子含基因盒dfr1-OFRx,1 700 bp整合子含基因盒dfr17-aadA5,3 000 bp整合子两端分别含基因盒aadB、cmlA1,40株细菌被分为不同的基因型,在不同基因型菌株中发现了相同的整合子.结论:整合子在泌尿系统感染大肠埃希中广泛存在,整合子是介导细菌耐药性的重要分子机制,基因分型结果提示整合子在细菌种内水平传播.
作者:刘衡川;扈庆华;兰全学;石晓路;何建凡;王冰 刊期: 2006年第03期
目的:建立测定保健食品中大豆异黄酮含量的高效液相色谱法.方法:通过对流动相的优选,以甲醇:水=3:2为流动相,使染料木素、大豆苷元、大豆甙、染料木甙4种大豆异黄酮主要成分达到较好的分离效果,可分别测定4种成分含量及以此4种成分为主要成分的保健食品中大豆异黄酮含量.结果:方法的低检出浓度分别为大豆甙1.9μg/ml、染料木甙1.2μg/ml、大豆苷元1.0μg/ml、染料木素0.8μg/ml;标准曲线线性范围分别为1.9~100μg/ml、1.2~100μg/ml、1.0~170μg/ml、0.8~140μg/ml;方法平均回收率分别为99.1%、98.5%、97.5%、98.8%;相对标准偏差均<10%.结论:建立的方法可准确、快速的测定大豆异黄酮的含量.
作者:王岙;于文海;杨明远;白梅;张丽薇;姜楠 刊期: 2006年第03期
目的:在对自来水中痕量有机污染物检测的基础上研究其对人体健康的潜在危害.方法:采集某市3个自来水厂出厂水(A、B、C)和对照水样(D),XAD-2树脂富集自来水样中的痕量有机物,气相色谱/质谱(GC/MS)联用法检测分析;鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames试验)检测其致突变性.结果:在选定的条件下,本次试验累计检出痕量有机物335种,其中EPA(美国环保署)优先污染物10余种,致癌、致畸、致突变20余种.A水厂出厂水在第一次Ames试验中TA98和TA100在不加S9时呈阳性(MR>2);A、B、C水厂出厂水在第二次试验中呈可疑阳性(±),存在剂量反应关系.对照水样Ames试验结果为阴性.结论:GC/MS联用分析、Ames试验联合运用是研究水中有机污染物致突变性的有效方法.
作者:顾涛;杨叶梅;朱凤鸣;周俊杰;邹学贤 刊期: 2006年第03期
目的:采用大口径毛细柱气相色谱法测定饮用水及水源水中的七氯.方法:样品以二氯甲烷萃取后于KD浓缩器中浓缩,用正己烷定容.用GC-ECD检测七氯的含量.结果:本法线性范围为0.02~1.00mg/L,低检出浓度为0.007μg/L,加标回收率为83.4%~97.0%,相对标准偏差为2.1%~5.8%.结论:本法操作简单,灵敏度高,线性范围宽,不失为一种较好的测定方法.
作者:张丽薇;刘万山;张冠英;白梅;姜楠 刊期: 2006年第03期
目的:研究志贺菌对氟喹诺酮的耐药机制及其流行状况.方法:对氟喹诺酮耐药志贺菌的gyrA基因和parC基因进行扩增、测序,查找突变点;用重复基因外回文序列-聚合酶链式反应(REP-PCR)对志贺菌进行基因分型.结果:两株耐氟喹诺酮的菌株都存在gyrA基因87位Asp(GAC)→Asn(AAC)和177位Gly(GGT)→Ser(AGT)的点突变,一株另有120位Met(ATG)→Leu(CTG)、203位Ile(ATC)→Leu(CTC)、204位Ser(AGC)→Thr(ACC)和205位Ile(ATF)→Leu(CTY)的点突变,另一株还有204位Ser(AGC)→Ile(AAC)的点突变.除87位点突变外,其余突变位点均未见报道.parC基因未发现点突变.REP-PCR基因分型结果提示16株宋内志贺菌有7种指纹图谱,12株福氏志贺菌有两种指纹图谱.结论:两株志贺菌对氟喹诺酮耐药是由gyrA基因点突变所致,耐药表型对突变的类型有一定的预见性,但耐药程度与突变频率的相关性不确定.2004年夏秋季武汉地区散发流行的志贺菌有相同或相似的克隆,血清型单一的宋内志贺菌存在基因多样性,福氏志贺菌中f2a比f4c的遗传多样性高.REP-PCR是一种快捷有效的基因分型法,可用于志贺菌同源性分析及暴发流行时的追根溯源.
作者:游升荣;孙自镛;陈晶 刊期: 2006年第03期
目的:本文建立碳化-酸溶消解法测定鹌鹑蛋清、鹌鹑蛋黄中的微量元素.方法:先用硝酸消解鹌鹑蛋清、鹌鹑蛋黄中易溶解的部分,蒸干,然后约在400℃碳化,使大分子裂解形成小分子或碳残渣,再用硝酸,双氧水消解成透明溶液.用此法消解鹌鹑蛋清、鹌鹑蛋黄,用原子吸收分光光度法对鹌鹑蛋清,鹌鹑蛋黄中的6种微量元素进行测定.结果:各元素的回收率在96.2%~103.7%之间.RSD<5.4%.结论:该方法简便、快速、安全,消化完全且干扰小,是高蛋白食品微量元素较为理想的测定方法.
作者:吴瑶庆;洪哲 刊期: 2006年第03期
目的:了解昌平区托幼机构消毒工作状况,提高相关单位消毒质量,做好防病工作,保护入托儿童身体健康.方法:对昌平区2002~2005年托幼机构检测结果进行回顾性分析.结果:2002~2005年对全区托幼机构采样2 503件,合格率为83.10%,2003年合格率高为91.11%,其余3年合格率分别为2002年85.23%,2004年、2005合格率均为80.40%.不同检测项目中空气、物体表面、餐饮合格率分别为83.19%、89.08%、87.31%.工作人员手合格率较低52.38%差别有统计学意义.公、私立托幼机构检测合格率分别为82.28%、84.08%差别没有统计学意义.结论:昌平区托幼机构消毒工作质量总体较好,但也存在一些问题如空气消毒各年合格率波动较大、部分工作人员不注意手的消毒等.
作者:贺洪国 刊期: 2006年第03期
目的:了解山东省不同年代、不同地区收集的霍乱菌株携带的毒力基因情况、分布特点和变迁.方法:应用分子杂交、PCR技术对霍乱弧菌的CTX基因元件中的ctxA、zot基因,VPI毒力岛中的tcpA、tcpH、aldA、toxT、acfB基因,TLC因子中的cri、orf2-3基因,RTX基因簇中的rtxA、rtxC,以及toxR基因进行了检测.结果:用原位杂交检测,180株霍乱弧菌中有168株携带CTX遗传单元中的ctxA、zot、RS1基因,阳性率均为93.33%,表现出高度的一致性.用打点杂交检测不同时期的28株O1群霍乱弧菌,所有被检菌都具有ToxR、RTX相关基因,在1980~1987年间分离的O1群霍乱弧菌流行株中,有92.86%携带编码TLC因子的基因,而1994~2000年间分离的流行株菌株中编码TLC因子的基因携带率仅有7.14%.Southern杂交结果显示,48株O1群霍乱弧菌可产生大小为9.4kb和6.5kb左右的两条ctxA杂交带,用zot基因探针进行杂交,11株O1群霍乱弧菌可产生与ctxA杂交带同样大小的条带.1株O139霍乱弧菌具有检测的所有毒力基因,但其ctxA(zot)杂交带与O1群霍乱弧菌有差异.结论:目前已知的霍乱弧菌毒力基因在山东省分离到的菌株中有广泛的分布,并且随时间的推移而发生变迁.
作者:杨彬;孙启华;崔树玉;王国永;毕振强 刊期: 2006年第03期
近年来,条件致病性真菌感染,特别是深部真菌病的发病率和死亡率呈明显上升趋势,已日益受到医学界的重视.Silva等在智利的13家医院从130名病人的血液和其他无菌部位采集了标本并进行侵袭性真菌感染(IFI)的检测,其中79人(占61%)被感染,白色念珠菌占40.8%[1].据美国国家医院内感染监视中心(NNIS)资料显示:90年代住院患者深部真菌感染率为80年代的1.9倍,其中念珠菌占78.3%[2].在美国,念珠菌引起的医源性血液系统感染占第4位[3].
作者:高峰;陈建魁;尹秀云 刊期: 2006年第03期