童明庆
目的探讨膜微阵列技术检测细菌的可行性.方法在细菌的16S rRNA基因内设计了通用引物和特异性探针,将探针点在膜上制备微阵列,再与地高辛标记的DNA杂交,比较了随机引物标记法和PCR掺入标记法的灵敏度,探讨了硝酸纤维素膜和尼龙膜作基片的可行性,并比较了不同的固定条件和杂交条件下的杂交结果,以标准菌株DNA为样本,建立起微阵列技术.结果随机引物标记法和PCR掺入标记法的灵敏度均为0.1pg;尼龙膜较之硝酸纤维素膜可更好的结合寡核苷酸,经紫外线交联3 min,与杂交液3(5×SSC,5 g/L SDS,1%封闭剂)在55 ℃杂交结果好.标准菌株除结核杆菌、变形杆菌外,均能与其对应的特异探针杂交.结论利用膜微阵列技术检测细菌有快速、敏感、特异、无放射性污染的特点.
作者：刘毅；韩金祥；黄海南；梁浩；黄海燕 刊期： 2003年第04期
我们应用KX-21血液分析仪发现弥散性血管内凝血(DIC)患者的血小板计数仪器法和手工法结果有很大差异.现将7例DIC病人血小板计数结果列于表1.统计结果显示,仪器法计数明显高于手工法.
作者：贾得志 刊期： 2003年第04期
毒鼠强作为杀鼠剂使用已有约50年历史,它不但对啮齿类动物有剧烈的毒杀作用,而且对所有温血动物都有剧毒,中毒后死亡率极高,且无特效解毒剂.因误食毒鼠强引起人员中毒死亡的事件一再发生.由于外观与食盐、碱、面粉等极为相似,毒鼠强近年来也屡次成为犯罪分子首选毒物[1].本文拟就毒鼠强的理化性质、毒理学特点、中毒症状、救治措施及其检验方法作一概述.
作者：李克；武建国 刊期： 2003年第04期
细菌生物膜(bacterial biofilm,BBF)是相对于单个分散的浮游状态的细菌(planktonic cells)生存形式而言的一种独特的细菌生存形式.BBF的形成,是细菌抵抗外部环境不利因素尤其是消毒剂及抗菌药物杀伤的重要机制之一.BBF的发现已有悠久的历史.早在17世纪Antonj van Leeuwenhoek就从他自己牙齿上刮取菌斑生物膜(plaque biofilm),用他研制的那台原始的显微镜,观察形成微生物群落的animalculi(小动物).但直到1970年才发现细菌以生物膜存在的形式.
作者：武建国 刊期： 2003年第04期
读陈宏础教授<重视和加强显微镜下形态学检查>一文[临床检验杂志,2002,20(Suppl):110]后深有同感,这里谈些个人的经历和体会.
作者：黄肖耆 刊期： 2003年第04期
目的建立简便、快速、准确的方法检测血清胰弹性蛋白酶-I(pancreatic elastase-I,PE-I).方法选择高敏感底物琥珀酰-(L-丙氨酸)3对-硝基苯胺(Suc-Ala-3pNA),在405 nm处测定产物吸光度的变化,得出PE-I的活性.结果适底物浓度为5.0 mol/L,Km为0.46 mmol/L,适pH为8.0,批内CV 2.81%,批间CV 4.59%,线性可达300 U/L.30例健康体检者此酶活性为(13±3) U/L,26例临床已确诊轻型胰腺炎(单纯水肿型)和18例重型胰腺炎(出血坏死型)此酶活性分别为(78±31) U/L和(139±45)U/L,胰腺炎各组与对照组比较均有显著性差异(P＜0.01),单纯水肿型和出血坏死型胰腺炎比较有显著性差异(P＜0.01).PE-I诊断急性胰腺炎敏感性85%,特异性93%,阳性预期值94%,阴性预期值85%.结论该方法简便、快速、准确、灵敏,可用于自动化分析.
作者：朱广博；孙静；刘静 刊期： 2003年第04期
目的探讨血清可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)和可溶性内皮细胞白细胞粘附分子1(sELAM-1)的检测在大肠癌患者中的临床意义.方法采用双抗体夹心ELISA法检测40例大肠癌、25例大肠良性病变及20例健康体检者血清sICAM-1和sELAM-1水平,并比较大肠癌患者术前、术后,转移、无转移sICAM-1和sELAM-1水平变化.结果大肠癌患者血清sICAM-1和sELAM-1水平明显高于良性病变患者及正常人(P＜0.01);大肠癌患者术后血清sICAM-1和sELAM-1水平较术前明显下降(P＜0.05);有转移的大肠癌患者血清sICAM-1水平高于无转移的患者(P＜0.01),而sELAM-1水平相差无显著性(P＞0.05).结论血清sICAM-1 和sELAM-1水平与大肠癌的发生、发展密切相关,可作为大肠癌新的检测指标之一.
作者：陈瀑；张宏宇 刊期： 2003年第04期
目的建立含有铜绿假单胞菌外毒素A基因DNA片段的克隆株.方法根据已报道的序列设计铜绿假单胞菌外毒素A基因的特异引物,用PCR方法从标本扩增出预期大小的DNA片段,并将该片段纯化后与T载体连接,转化到大肠埃希菌,筛选出含有插入片段的克隆.结果阳性克隆株经DNA序列测定,证实与已报道的铜绿假单胞菌外毒素A基因DNA序列,在399个碱基中仅有3个碱基不同,但编码的氨基酸完全一致.结论成功构建含有铜绿假单胞菌外毒素A基因的克隆,为大量制备探针和用PCR方法检测铜绿假单胞菌提供了基础.
作者：孙月庭；张方东；谭红；甘秋玲；刘燕 刊期： 2003年第04期
笔者遇到1例polybrene法配血不合,检查发现为因妊娠而产生的抗c免疫性抗体,从而避免了相关输血反应的发生.现报道如下.
作者：刘毅；薛敏；王玲；王娜 刊期： 2003年第04期
目的建立一种丙型肝炎病毒型特异性PCR基因分型方法.方法对47份血液透析患者HCV RNA阳性的标本,用5′非编码区(5′-NCR)1、2、3、1b型特异性引物,进行逆转录巢式PCR扩增分型.结果 47份HCV RNA样本43例可以分型;优势株为1b亚型,1b及1b相关型占总样本数的87.23%(41/47);7例为混合感染,占可分型数的16.27%(7/43).结论本组血液透析患者感染的HCV基因型的分布可能与地区流行及医源性传播有关,其同源性有待核苷酸序列分析加以印证.
作者：李丽；张建琼；夏梅；孟继鸿 刊期： 2003年第04期
目的观察胃癌病人外周血TH1/TH2细胞及其细胞因子水平的变化,为肿瘤的免疫治疗提供实验依据.方法应用ELISPOT法检测TH1/TH2细胞,ELISA法检测细胞因子.结果胃癌病人TH1细胞及其细胞因子降低,TH2细胞及其细胞因子升高,TH1/TH2比值降低.正常人外周血单个核细胞加IL-12和抗IL-4单抗组,TH1细胞阳性率增加,TH2细胞阳性率降低,TH1/TH2比值升高;加IL-4和抗IFN-γ单抗组TH1细胞阳性率降低,TH2细胞阳性率升高,TH1/TH2比值降低(P＜0.05).结论胃癌病人TH1细胞受抑制,TH2细胞亢进,导致机体的抗肿瘤免疫应答受抑制.利用IL-12诱导TH1细胞的增殖,有可能恢复TH1/TH2平衡.
作者：王长印；邹雄；车至香；浦淑英；尚旭明 刊期： 2003年第04期
为监测同一标本在不同血液分析仪器间的差异,实现科内检验结果统一,我们用同一测定物对3台血液分析仪于常规标本检测中每天随时进行比对监测,计算其结果偏差.结果各台血液分析仪偏差均小于卫生部临检中心制定的允许误差范围,出现偏差的次数和偏差值大小均为:Hb＜RBC＜HCT＜WBC＜PLT,其中STKS血液分析仪较为满意.现介绍如下.
作者：黄惠芳；周志英；程振螽 刊期： 2003年第04期
耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(Methicillin resistant coagulase-negative Staphylococcus,MRCoNS)是医院感染的重要病原菌,青霉素等β-内酰胺类抗生素对之临床无效.MRCoNS耐β-内酰胺类抗生素的主要机制是产生低亲和力的新型青霉素结合蛋白PBP2a,该蛋白由mecA基因编码.本文对PBP2a筛选法[1]与PCR检测mecA基因的方法进行比较,评价其可靠性和临床应用价值,以寻找适合医院实验室检测MRCoNS的简单而可靠的方法.
作者：陈维贤；张莉萍；叶耀红；李兴禄 刊期： 2003年第04期
笔者经过多年临床工作实践,探索出一种易于制备良好血涂片的改良方法,现介绍如下.
作者：韩梅；张洁；杨洪彩 刊期： 2003年第04期
胸腔积液(胸液)是胸膜炎常见的临床体征之一.我们检测胸液中腺苷脱氨酶(ADA)和γ-干扰素(IFN-γ)以鉴别积液性质,报告如下.
作者：王新宁；刘正华 刊期： 2003年第04期
菌群失调所致的肠道疾病逐年上升.而应用新鲜粪便染色快速检测细菌的量及杆菌、球菌比,是及早制定针对性治疗方案的一个有效依据.现将145例腹泻患者粪便染色镜检细菌的结果报告如下.
作者：陈嵘；管琳；朱江；雷玲 刊期： 2003年第04期
目的建立比色测定血清酸性α-醋酸萘酯酶总活性的方法.方法用α-醋酸萘酯为底物,在37℃、pH6.2的酸性环境中经酶水解产生α-萘酚,然后与重氮试剂固蓝B偶联反应显色测定.结果适pH 6.0～6.4,底物浓度为2 mmol/L,吸收峰波长为520 nm,线性范围0～2 500 U/L,酶促反应时间为20 min,显色反应时间为20 min,显色稳定时间为20 min,批内、批间变异系数分别为2.67%和5.1%.血红蛋白1 g/L和胆红素172 μmol/L无干扰.枸橼酸钠、草酸盐、肝素、EDTA-K2常用浓度无抑制,氟化钠可抑制该酶活性.标本2～8 ℃冰箱保存7 d结果无变化.正常参考值(n=100)为(1 645±378.5)U/L(±1.96s).结论该方法简便实用,适于各级实验室开展,可作为评价肝细胞变性坏死、肝纤维化、肝脏合成功能异常的一项新的血清学指标.
作者：周玉贵；王传芳；陆晓云；金勇；刘昌元 刊期： 2003年第04期
金属β-内酰胺酶(metallo-β-lactamase,M-β-L)按Bush分类,属于3型酶[1],不仅能水解各种β-内酰胺类抗生素,且能水解碳青霉烯类.由于目前的ESBL菌感染的治疗以碳青霉烯类抗生素为首选,临床上出现了一些亚胺培南耐药菌,给治疗带来困难.为建立一种快速简便检测M-β-L的方法,我们对国外介绍的检测法进行了摸索和探讨,现报告如下.
作者：文怡；周毓敏；赵旺胜 刊期： 2003年第04期
我们从1例解脲支原体感染所致非淋菌性尿道炎的女性阴道分泌物中,分离培养出念珠地丝菌(G.candidum),报告如下.
作者：李华信；马周建；杜美华 刊期： 2003年第04期
逆转录聚合酶链反应-微孔板反向杂交法检测丙型肝炎病毒核酸(HCV-RNA)影响因素较多.本实验室通过对室温和低温条件下抽提HCV-RNA及不同杂交温育方式检测扩增产物的试验,探讨其对检测结果的影响.
作者：赵铁军；杨军；段德新；缬英芳 刊期： 2003年第04期
临床检验杂志
主管:江苏省卫生厅
主办：江苏省医学会
