2-氯-4-硝基苯-β-D-半乳糖-麦芽二糖苷作底物测定淀粉酶总活性

张厚亮；张伟；帅真；张济愈；徐美宝

关键词：2-氯-4-硝基苯-β-D-半乳糖-麦芽二糖苷, 连续监测法, 淀粉酶

摘要：目的建立2-氯-4-硝基苯-β-D-半乳糖-麦芽二糖苷(GalG2-CNP)作底物测定淀粉酶的方法.方法用连续监测法对pH值,Km值及适底物浓度等反应条件进行实验研究,并对建立的方法进行评价.结果用双试剂连续监测法;试剂Ⅰ:含KSCN 200 mmol/L,CaCl2 6.7 mmol/L,NaCl 400 mmol/L;试剂Ⅱ:含GalG2-CNP 20 mmol/L;均用pH6.0 50 mmol/L MES缓冲液.线性范围达1200 U/L批内CV=2.77%,批间CV=3.56%,与参考方法(EPS-G7)有良好的相关性.结论本法操作简便,结果准确,可用于常规分析.

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部分Rh阴性汉族人RHD基因的多态性

随着分子生物学技术在血型研究方面的应用,不断发现RhD的多态性有着复杂的遗传背景,也发现RhD抗原阴性的群体中,部分人却携带RHD基因.我们采用PCR-SSP方法对血清学已经确定的23名RhD抗原阴性、2名RhDU型和2名RhD抗原阳性的汉族无亲缘关系的供血者进行了RHD基因检测,结果如下.

作者：王毅；石翠英；何路军；刘敬闪；张虹；赵志弘刊期： 2001年第05期
谷氨酸脱羧酶抗体测定的临床意义

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作者：孙红霞；黄慧；田浩明刊期： 2001年第05期
胃癌标本中细胞DNA含量及CD44S的观察和分析

分化抗原CD44是一种分布广泛的跨膜糖蛋白,参与细胞与细胞之间、细胞与间质之间的特异性粘附.本研究通过对胃癌标本及其胃粘膜细胞DNA和细胞周期各时相及标准型CD44(CD44S)的变化,以期发现胃癌标本细胞DNA、CD44S与胃癌患者细胞生物学行为的关系,指导临床诊治.

作者：邱莲女；周永列刊期： 2001年第05期
从血液及脑脊液中同时分离出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌

我室于2000年11月从30天龄,诊断为败血症、化脓性脑膜炎患儿血液及脑脊液同时分离出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)大肠埃希菌.报道如下.

作者：武素梅；刘波霞；马小平刊期： 2001年第05期
应用PCR-SSP进行HLA-AB基因分型及与血清学方法的比较

目的建立HLA I类基因分型技术并应用于骨髓配型.方法采用序列特异性聚合酶链反应(PCR-SSP)进行HLA-AB基因分型,并与HLA I类血清学分型(微量淋巴细胞毒试验)进行比较.结果运用PCR-SSP技术共对22例需骨髓移植的病人和48例供者进行基因分型,2例病人确认了HLA完全匹配的亲缘骨髓供者,其中1例已成功进行了骨髓移植;基因分型和血清分型比较,43例结果完全一致(61.4%),血清分型错误率高达38.6%(27/70).结论 PCR-SSP分型技术具有准确性高,简便快速等优点,将取代传统的血清学方法.

作者：戴宇东；孙启俊；张益红；孟钵；袁红刊期： 2001年第05期
PCR检测志贺菌和侵袭性大肠埃希菌的侵袭性质粒抗原H基因

目的建立一种志贺菌和侵袭性大肠埃希菌的PCR诊断方法.方法根据志贺菌和侵袭性大肠埃希菌的侵袭性质粒抗原H(ipaH)基因序列,设计一对引物,优化各种工作条件,建立一种PCR诊断方法.结果本法特异性好,敏感性可达10 CFU,整个实验过程在6～7 h内完成.结论建立的方法在理论和实际应用上都有优越性,可用于临床诊断.

作者：杨春梅；王福元；刘小云；李家恒刊期： 2001年第05期
t-PSA为4.0～10.0 ng/ml时f-PSA百分率对前列腺疾病的鉴别诊断价值

目的为了明确游离前列腺特异性抗原(f-PSA)百分率鉴别t-PSA在4.0～10.0 ng/ml范围前列腺增生(BPH)和前列腺癌(PCa)的临床价值及确定f-PSA百分率异常的截断点.方法采用放射免疫分析法,检测t-PSA在4.0～10.0 ng/ml范围46例PCa和71例BPH患者血清t-PSA和f-PSA,并计算f-PSA百分率,同时比较不同水平f-PSA百分率的截断点对PCa诊断的价值.结果 t-PSA在4.0～10.0 ng/ml范围内,BPH组和PCa组的f-PSA百分率有极显著性差异(P<0.01),而t-PSA差异无显著意义(P＞0.05).以f-PSA百分率<15%作为PCa诊断的截断点,其敏感性,特异性,阳性预测值,实验有效率分别为84.8%,88.7%,82.9%,87.2%.结论用f-PSA百分率鉴别t-PSA在4.0～10.0ng/ml范围的PCa和BPH,具有较大的鉴别诊断意义.建议临床上以f-PSA百分率<15%作为PCa诊断的截断点,能大幅度地提高t-PSA测试的特异性和PCa的检出率,减少或避免不必要的前列腺活检.

作者：谢克俭；潘芙蓉；管瑜刊期： 2001年第05期
从急性肾衰病人血液及脓液中同时分离出新型隐球菌1例

Cryptococcus neoformans(新型隐球菌)为隐球菌属中的主要致病菌,该菌主要经呼吸道侵入人体,在肺部引起轻度炎症.当机体免疫力下降时,向全身蔓延.我们从一名急性肾衰患者的血液及脓液中同时分离出该菌.现报告如下.

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CD19和CD56与t(8;21)急性髓细胞白血病的相关性分析

CD19、CD56多表达在t(8;21)(q22;q22)M2白血病细胞上,而形成了一组具有特殊生物学意义的白血病亚型[1,2].我院自1995年～2000年5月共诊治了48例急性髓细胞白血病(简称AML)M2亚型的患者,现将其分化抗原CD19、CD56的表达与t(8;21)的关系报道如下:

作者：张文艺；刘瑞萍；王冬侠；扬淑莲；王继亮；阎金玉；李达；梁冰刊期： 2001年第05期
胰岛素自身免疫综合征可导致胰岛素测定假阴性

胰岛素自身免疫综合征(IAS)是临床极少见的疾病,它是在遗传免疫缺陷的基础上加上某种诱因而起病[1].此病特征是空腹或餐后低血糖及胰岛素自身抗体的出现[2].我们发现一例IAS患者,经检测血糖1.39 mmol/L,胰岛素自身抗体强阳性,胰岛素水平均为＜5 mIU/L,C肽＞3.96 pmol/L.胰岛素测定值很低,难以解释低血糖发生的原因.作者认为可能是血液中存在的高浓度胰岛素抗体干扰了竞争法放射免疫分析,为此采取如下方法进行分析,现报告如下.

作者：林向阳；郑景晨；史梅；王忠永；陈晓东刊期： 2001年第05期
耐万古霉素肠球菌表型检测及基因分型

目的研究对万古霉素耐药或中介的肠球菌株的表型和基因型,以了解本院耐万古霉素肠球菌(VRE)的流行状况,指导临床合理用药.方法收集200株临床分离的肠球菌株,用琼脂筛选法筛选VRE,并分别用E test和多重PCR检测和分析对万古霉素耐药或中介肠球菌株的表型和基因型.结果共检出10株对万古霉素耐药或中介的肠球菌株,其中5株为天然耐万古霉素肠球菌.基因型分析的结果为1株van A型,4株van C1型,3株van C2型,2株基因型不明.结论已发现5株VRE(1株VAN A型),提示临床上须合理使用抗生素,以防止VRE等多重耐药细菌的爆发流行.

作者：应春妹；项明洁；倪语星刊期： 2001年第05期
多重耐药性溶血不动杆菌致病人术后感染1例

Acinetobacter(不动杆菌属)是一种机会致病菌,常存在于人体皮肤、呼吸道、消化道等部位,在机体抵抗力低下时可致病.近年来,临床标本中分离的不动杆菌日益增多,但均以A. baumanii(鲍曼不动杆菌)、A. calcoacetricus(醋酸钙不动杆菌)以及A. lwoffi(洛菲不动杆菌)为多,A.haemolytus(溶血不动杆菌)且多重耐药者较少见,故报道如下.

作者：袁秀梅；吴玲；万宏刊期： 2001年第05期
肝硬化患者肝移植后丙型肝炎的复发

丙型肝炎(HC)患者肝移植后HCV的再感染,其自然病程、转归及影响因素复杂多样[1,2].丙肝复发后,多数发展为慢性活动性肝炎,甚至肝硬化,导致移植失败[3,4].早期诊断和及时治疗,有可能延缓病情发展.我们利用FQ-PCR检测异体肝移植患者血清中HCV RNA水平,结果如下.

作者：段继惠；黄繁嫱；王欣；李代红刊期： 2001年第05期
血清维生素A微量荧光测定法的改进及应用

为使血清维生素A(VA)微量荧光测定法适用于大规模调查,我们在美国疾病控制中心(CDC)健康和营养监测(NHANES)实验室Sowell Anne博士指导下,改进了该方法并将其用于我国14省8 669名学前儿童的血清VA测定.

作者：谈藏文；马官福；刘春燕；蒋竞雄刊期： 2001年第05期
超广谱β-内酰胺酶耐药菌株质粒谱分析

目的研究新生儿病房中产生超广谱β-内酰胺酶(extend spectrum β-lactamase,ESBLs)细菌株的流行情况.方法对1999年1～9月新生儿病房住院患儿的痰、脓、脐分泌物、咽拭子、血流及病区常用器具进行培养及药敏试验.选取33株2～3月流行期间的ESBLs菌进行质粒提取和质粒谱分析.结果有6组相同的质粒带,其百分率分别为45.4%、15.2%、9%、9%、12.1%、9%.新生儿病房暖箱水箱中的ESBLs菌为45.4%质粒带组,成为引起本次爆发流行株.结论调查ESBLs耐药菌株的流行在控制医院感染中可能具有重要意义.

作者：刘岚；刘昌林；卢仲毅；龚曼子；胡怡刊期： 2001年第05期
心肌梗死患者血清脂蛋白氧化易感性及高密度脂蛋白氧化抑制能力分析

目的了解心肌梗死存活患者(MIS)血清脂蛋白氧化易感性以及高密度脂蛋白(HDL)对低密度脂蛋白(LDL)氧化抑制能力的变化.方法采用密度梯度超速离心分离33例MIS患者的血清脂蛋白组分(VLDL,LDL,HDL),用A234 nm光吸收鉴定脂蛋白氧化易感性,硫代巴比妥酸值(TBARS)分析脂蛋白脂质过氧化程度,并与正常人(44例)进行了比较.结果 MIS患者VLDL、LDL组分脂质过氧化程度明显高于正常人(P<0.01),氧化延滞时间明显缩短(P<0.001),HDL组分对LDL氧化抑制能力显著降低(P<0.01).结论 MIS患者VLDL,LDL组分氧化易感性增加,HDL抗氧化能力受损,可能与其动脉粥样硬化的发生发展有关.

作者：张春妮；万瑛；许跃龙；庄一义刊期： 2001年第05期
MTT-半固体培养基测定细菌动力的研究

目的制成一种容易测定细菌动力的半固体培养基.方法根据Difco动力试验培养基配方,降低琼脂浓度,加入MTT代替TTC.培养基组成为10.0g Tryptose,5.0g NaCl,3.5g agar,1000.0 ml蒸馏水,高压灭菌后,冷却至50℃～60℃.无菌加入1.5 ml滤器除菌的10 g/L MTT水溶液.分装无菌管.结果有动力菌株沿着穿刺线扩散,形成蓝色云雾状,而无动力菌株在穿刺线上生长只形成蓝线,蓝线周围培养基保持澄清.检测了123株菌,鞭毛染色证实94株有鞭毛、29株无鞭毛;有鞭毛的菌株中,90株菌培养10～18 h动力阳性,其余4株大肠埃希菌培养24h动力阳性,但这4株菌应用Difco动力试验培养基需诱导传代才获得阳性结果.除此4株外,还有9株用Difco动力培养基需培养48 h才阳性.结论 MTT半固体培养基为测定细菌动力适培养基.

作者：谷海瀛；张慧云；符惠群；王旭明；莫成锦刊期： 2001年第05期
酶循环法及其在酶法分析中的应用

由于酶法测定的特异性好,检测简便,反应温和,无污染,且灵敏度较高(10～100 μmol/L),已能满足体液中大部分物质的测定,因此在临床化学测定中已广为应用.随着临床化学的发展,体液中某些微量物质的准确测定逐渐显得重要.酶循环法是利用酶的底物特异性来放大靶物质(被测物)的测定方法.此法仅循环靶物质,减少了样品中存在的其它物质对测定的干扰,因此不需要对样品进行预处理或对靶物质的提取,而且该法不需要专门的设备,是一种前景广阔的测定技术.日本旭化成(Asahi Chemical)公司发展了这一技术,笔者参考旭化成公司的有关资料[1～3],将这一技术介绍给国内同道.

作者：杨昌国；许叶刊期： 2001年第05期
2-氯-4-硝基苯-β-D-半乳糖-麦芽二糖苷作底物测定淀粉酶总活性

目的建立2-氯-4-硝基苯-β-D-半乳糖-麦芽二糖苷(GalG2-CNP)作底物测定淀粉酶的方法.方法用连续监测法对pH值,Km值及适底物浓度等反应条件进行实验研究,并对建立的方法进行评价.结果用双试剂连续监测法;试剂Ⅰ:含KSCN 200 mmol/L,CaCl2 6.7 mmol/L,NaCl 400 mmol/L;试剂Ⅱ:含GalG2-CNP 20 mmol/L;均用pH6.0 50 mmol/L MES缓冲液.线性范围达1200 U/L批内CV=2.77%,批间CV=3.56%,与参考方法(EPS-G7)有良好的相关性.结论本法操作简便,结果准确,可用于常规分析.

作者：张厚亮；张伟；帅真；张济愈；徐美宝刊期： 2001年第05期
P系统及红细胞糖苷脂集合

P血型系统是由Landsteiner与Levine(1927)以人红细胞注射家兔免疫而发现[1].引起P系统命名混淆的原因有:(1)由Landsteiner及Levine(1927)发现的抗原现在称为P1而不是P,而且P1是P血型系统中唯一的抗原;(有关天然抗-P1引起配血不合及定型困难,国内文献屡有报道[7-8].郭倩雯[9]报道1例抗-P1抗体引起配血不合,是由于母亲P1阴性,父亲P1阳性,患儿在出生前3月时,输注父亲血三次,每次30 ml,每次间隔一周而引起.方春富等[10]报告一例IgM抗-P1引起配血不合,由右肺包囊破裂并感染,右肝包虫囊肿所引起.病人血型P2,直接抗球蛋白试验阴性,抗体鉴定病人血清与4份P1红细胞17℃NS法凝集4+,吸收后血清凝集强度减弱为1+,放散液2+.37℃ 30 min出现溶血.这是由于P1物质也见存在于多种寄生虫组织,如包生绦虫囊肿液,牛肝吸虫以及华支睾吸虫等.

作者：张莉尼；陈忠刊期： 2001年第05期