方芳;曹建明;袁谦
穿孔素(Perforin)又称成孔蛋白(Pore-formingprotein,PFP),存在于激活的细胞毒T淋巴细胞(CTL)和自然杀伤(NK)细胞胞浆杀伤颗粒中[1],检测PFP表达细胞的数量可以判断个体细胞免疫功能,对疾病的诊断将有重要意义.本文报告利用入PFP特异性单克隆抗体建立免疫组化法,识别未培养的外周血淋巴细胞(PBL)中PFP的表达,同时还采用双重免疫酶组化染色法,研究PFP在CD3+的T淋巴细胞和CD56+的NK细胞中分布的情况.
作者:章金春;李芳秋;武建国 刊期: 2001年第06期
分离提取凋亡细胞对许多研究有重要意义,我们参考Martin等[1]的方法,建立了一种简便易行的非实体瘤凋亡细胞分离提取方法.
作者:何维敬;毕正;张建业 刊期: 2001年第06期
目的了解脱氧尿嘧啶核苷酸(dUTP)掺入量与尿苷酶(UDG)抗污染的关系.方法通过聚合酶链反应将50%dUTP和全dUTP掺入HCV cDNA,并观察UDG的抗污染效果.结果0.05U、0.1 U、0.2 U的UDG 37℃消化60min,PAGE检测可抗10-1~10-8 50%dU-DNA模板污染.0.1 U UDG 37℃10 min能抗10-6,20min~30 min可抗10-5,PAGE虽阴性,但DNA-EIA杂交A值0.617,仍为阳性;40min可抗10-3,未经杂交证实.37℃消化20min电泳检测可抗10-1~10-8全dU-DNA污染,DNA-ELA杂交A值在0.005~0.049均为阴性.结论本文研究结果证实,用50%dU-DNA为模板,37℃10~20min时,抗污染效果较差,需增加抗污染时间.应用全dU-DNA为模板时,可获得良好的抗污染效果.
作者:杜绍财;吴娟;张敏;刘峰;韩建德 刊期: 2001年第06期
碘-淀粉比色法中,碘标准液先配成50mmol/L贮存液,再在使用时配成5 mmol/L碘应用液.在使用过程中我们发现,由于碘易升华及氧化,配制的贮备液用塑料盖密封保存放置一段时间后整个试剂瓶有大量碘吸附和渗漏,且放置在碘贮备液周围的试剂亦受部分碘的污染.若改用密封性好的橡胶盖,则时间一长,橡胶膨化,碘浓度明显降低.购买的试剂盒也经常发现碘的渗漏及试剂盒外包装受碘的污染.我们将碘标准液配制方法略加改进,很好地解决了这个问题.
作者:方芳;曹建明;袁谦 刊期: 2001年第06期
五十年来,我国医院检验科建设已有长足的进步.目前,医学检验系大专生与本科生已成为检验科的基本力量,近年来,又有硕士与博士学位者参加进来,从业者素质起到翻天覆地的变化.实验方法从手工操作过渡到半自动与全自动化,但是管理工作跟不上,因此检验质量不尽人意.由于疏于管理,有些检验项目用全自动仪器测得结果不如用手工法.有人建议要学习国外大型医院实验室管理模式.是否没有人知道国外的管理模式?回答是否定的.每年都有相当数量检验人员出国,回来后写的访问报告内容大多是仪器设备与质量管理,极少谈国内外实验室管理模式的差异,国外如何落实质量管理的,这些事似乎属于我国检验界讨论的禁区(实为误区),所以访问回来只能说一些能说的事,这对我国检验科建设毫无益处.兹将本人观察到的一些情况作初步评论,并对在因特网上看到的国外资料联系国内实际,提出本人的看法.
作者:杨运昌 刊期: 2001年第06期
淋病奈瑟菌的cppB基因(cryptic plasmid B)通常位于隐蔽性质粒上,其功能不清,96%的淋病奈瑟菌含有此质粒,其它奈瑟菌不含此质粒.cppB基因可表达一段23 ku的蛋白质,对其蛋白质的功能研究,一方面可寻找一种特异的诊断试剂,另一方面也为淋病奈瑟菌致病的复杂机理研究提供依据.本文用基因工程技术对淋病奈瑟菌cppB基因进行克隆,为进一步研究蛋白质功能提供基础.
作者:倪培华;吴洁敏;王丹艺;应雅韵 刊期: 2001年第06期
目的制备抗人甘露聚糖结合凝集素单克隆抗体及建立应用方法.方法用亲和层析法自人血清中提取甘露聚糖结合凝集素(MBL),免疫Balb/c小鼠,通过细胞融合的方法,得到3株稳定分泌抗人MBL单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株.建立检测MBL的EIJSA.结果本组mAb识别相对分子质量(Mr)为31 000的MBL分子,与MBL作用后可明显抑制MBL-甘露聚糖复合物的抗补体效应.用ELISA检测186例健康人血清中MBL水平为2.69±1.58 mg/L.结论成功地获得了抗MBL的mAb并用于建立ELISA.
作者:王艾丽;张颖;李保仝;武建国 刊期: 2001年第06期
蹇某,女,32岁,献血员,2000年8月4日在做ABO定型时发现正定型为B型,反定型无法确定,查询无输血史,经血型血清学检查,发现蹇某血清中含IgM抗-P1,现报告如下.
作者:何永勋 刊期: 2001年第06期
抗原与抗体的特异结合,主要是基于抗原和抗体分子结构及立体构型的互补,以及由多种因素造成二者分子间引力参与下发生的可逆性免疫反应.现行的固相免疫测定中,都是依据上述原理而设计,其与传统的“液相”血清学试验本质区别是有一个预先将抗原或抗体固相到载体表面的步骤,抗原-抗体结合反应由液态环境转移到了固相载体表面进行.
作者:虞伟;顾宁;武建国 刊期: 2001年第06期
目的测定60例冠状动脉造影患者血清总同型半胱氨酸水平,探讨其对冠心病的临床意义.方法将60例冠脉造影患者分为冠心病组(狭窄程度≥50%)31例,与非冠心病组(狭窄程度<50%)29例,其中冠心病组统计病变累及支数,并按冠脉狭窄程度分级得出冠脉狭窄程度记分(CSS).用酶免分析法分别测定两组的血清总同型半胱氨酸(tHcy)浓度并进行比较.将tHcy水平与性别、年龄、收缩压、冠心病病变累及支数及冠脉狭窄程度记分等采用多元回归进行分析.结果冠心病组患者血清tHcy浓度(17.8±7.1μmol/L)显著高于非冠心病组(10.0±5.8μmol/L).多元回归分析表明:非冠心病组tHcy增高与收缩压的相关性强;冠心病组tHcy增高与病变累及支数及冠脉狭窄程度记分成正相关.结论高同型半胱氨酸血症是冠状动脉粥样硬化性心脏病的危险因子,且其升高水平冠脉病变累及支数及狭窄程度呈正相关.
作者:冒海蕾;王惠民;李小华;苏伟;荀鹏程;刘才旺 刊期: 2001年第06期
微柱(管)凝胶试验(Microtubes Gel Test)与凝聚胺试验是九十年代先后进入国内实验室并用于交叉配血的新方法[1,2].目前,微柱/管凝胶技术在一些先进国家已成为常规的红细胞血型血清学检测技术[3].而凝聚胺用于不完全抗体的测定与鉴定以及交叉配血等血清学试验也已在国内迅速推广使用.该方法简便、时间短、结果明显[4].
作者:王梁平;彭道波;赵晖;张彦 刊期: 2001年第06期
美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)规定用K-B法进行复方新诺明(SMZco)药敏试验之前,首先用MH肉汤增菌6h,以去除分离培养基中胸腺嘧啶核苷对SMZco的影响.我们对临床分离的148株致病菌,在进行SMZco药敏试验时,采用直接法(用MH和LB两种培养基检测)和增菌后用MH培养基检测,对试验结果进行比较,报告如下.
作者:张小卫;邵海枫;李珍大;王卫萍 刊期: 2001年第06期
传统的肥达和外裴试验,操作繁琐,试剂用量大,观察结果有一定困难,较易产生误差.本文介绍一种将菌液染色后进行的快速微量凝集试验.
作者:段兴同;葛成明;程思;罗娟 刊期: 2001年第06期
急、慢性根管内感染为口腔常见病之一,研究表明此病以需氧菌和厌氧菌混合感染为多见。本研究主要对急性和慢性根管内厌氧菌感染种属进行比较,报告了检出率较高的细菌及其优势菌。
作者:刘彦平 刊期: 2001年第06期
Helicobacter pylori(幽门螺杆菌),Hp是引起慢性胃炎和消化性溃疡的重要病原菌.为探讨新的诊断方法我们开展了粪便HP-DNA荧光检测工作,现将结果总结如下.
作者:曹光华;蒋玉红;张忠国;梁洪刚 刊期: 2001年第06期
乳酸脱氢酶同工酶X(LDHx)是乳酸脱氢酶中与IDH1-5不同的另一种特殊类型的同工酶.自Goldberg[1]于1963年在多种哺乳动物,鸟类睾丸组织和精子中发现LDHx以来,由于其与性成熟和生育过程的密切关系,引起了国内外学者的极大兴趣.现就有关LDHx的化学、生物学、分子生物学、免疫学性质及其临床检测意义研究的进展简要综述如下.
作者:李明 刊期: 2001年第06期
我们对肺癌患者进行了恶性肿瘤特异性生长因子(Tu-mor Supplied Group of Factors,TSGF)及癌胚抗原(CEA)检测[1],并对结果同临床诊断试验进行对比分析,报告如下.
作者:潘宇红;孙钧铭;陈永伟;肖华龙 刊期: 2001年第06期
人抗小鼠抗体(HAMA)对免疫实验特别是夹心法和竞争法有影响,能引起假阳性和假阴性结果,美国药物和食品管理局(FDA)建议,在体外诊断产品中都要考虑到样品中存在的人抗鼠抗体可能对实验有干扰.
作者:黄学文;赵琪 刊期: 2001年第06期
目的利用沉淀煮沸裂解法提取HBV核酸,探讨不同的临床标本和贮存条件对荧光定量PCR法测定乙型肝炎病毒核酸(HBV-NDA)结果的影响,为临床标本的收集和贮存提供依据.方法按不同要求收集特定的临床标本,用本实验室使用的HBV-DNA提取方法提取DNA模板,再用荧光实时定量PCR法检测HBV-DNA的含量.结果经EDTA、中等含量肝素、枸橼酸钠抗凝血浆标本与相应血清标本测定HBV-DNA的含量无显著性差别均(P>0.05),但高浓度肝素(1000U/ml)抗凝管结果显著降低(F值为25.96;P<0.05);溶血、高血脂标本、标本反复冻融、血浆(清)标本在室温下短期贮存(48h内)对HBV-DNA含量均无明显影响(P>0.05).结论用本实验室使用的HBV-DNA提取方法,可使抗凝剂及其它PCR反应抑制物质对HBV-DNA测定结果影响降到低,从而使临床无污染标本一般均可接受.
作者:陶志华;谢耀盛;周武;陈晓东 刊期: 2001年第06期
近年来,在工作中遇到HBeAg与抗HBe同时阳性(简称双阳)特殊模式,为了探讨这一现象,对我院336例血清标本中发现的双阳标本17例,采用美国雅培配套试剂及仪器进行复核,现将结果报告如下.
作者:王火生;韩红星;徐六妹;周伯平 刊期: 2001年第06期