学术投稿

实时荧光定量RT-PCR和cDNA基因芯片方法分析食管癌组织中基因的表达

李沛;凌志强;杨洪艳;黄幼田;赵继敏;郑智敏;董子明

关键词:食管癌, 基因芯片, 基因表达谱, 实时逆转录多聚酶链反应
摘要:目的:采用实时荧光定量RT-PCR和cDNA基因芯片2种技术分析食管癌细胞基因表达的特征.方法:应用cDNA基因芯片筛选15例食管癌基因表达谱,用实时荧光定量RT-PCR验证其中16个基因的表达变化.结果:实时荧光定量RT-PCR和cDNA基因芯片技术对16个基因的检测结果一致,不仅变化方向相同,而且表达值非常接近.结论:cDNA基因芯片和实时荧光定量RT-PCR分析基因表达变化都是可信的,基因芯片筛选基因表达谱具有高通量大规模的特点,而实时荧光定量RT-PCR则适合单个基因表达变化的研究,两者互为补充和印证.
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    超声刀是一种用于腹腔镜下手术的全新手术工具,它集分离、止血、切割功能于一体,使手术更加快捷、安全[1].腹腔镜下巨大子宫肌瘤(直径>10 cm)剔除术由于肌瘤体积过大,术中出血较多,成为腹腔镜手术相对禁忌证[2].2003年1月至2005年10月,作者使用超声刀行腹腔镜下巨大子宫肌瘤剔除术37例,取得满意效果,现报道如下.

    作者:郭哲;王喜华 刊期: 2006年第05期

  • 食管鳞癌组织中MET原癌基因mRNA的表达

    目的:探讨食管鳞癌组织中原癌基因MET mRNA的表达.方法:应用实时荧光定量RT-PCR及基因芯片技术对15例食管鳞癌组织(高分化4例,中分化5例,低分化6例)和相应正常食管黏膜组织进行MET mRNA检测.结果:cDNA微阵列和实时荧光定量RT-PCR技术检测结果一致率达100%.15例食管鳞癌组织中有12例MET mRNA为上调表达.MET mRNA的表达与患者的年龄、性别、肿瘤的部位、大小、肿瘤进展程度等临床病理特征无关(P>0.05),但高、中分化食管癌组织MET mRNA表达水平与低分化组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论:MET原癌基因表达水平与食管鳞癌细胞分化相关.

    作者:李沛;凌志强;金戈;杨洪艳;马俊芬;黄幼田;董子明 刊期: 2006年第05期

  • 老年人慢性阻塞肺疾病不动杆菌感染20例临床分析

    不动杆菌是一种机会致病菌,可引起多种临床感染.作者对本院近5 a来收治的老年人慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)368例进行分析,确诊不动杆菌感染20例,占5.4%,现将临床及药敏试验结果报道如下.

    作者:明亮;谭伟丽;王丽华;蒋军广 刊期: 2006年第05期

  • 同种异体骨髓单个核细胞移植对大鼠急性心肌梗死后心室重构的影响

    目的:探讨大鼠同种异体骨髓单个核细胞(BM-MNCs)急性心肌梗死区内移植对左室重构的影响.方法:健康雄性Wistar大鼠32只,随机分为假手术组(8只)、对照组(12只)、移植组(12只).假手术组单纯开胸但不结扎冠状动脉;对照组和移植组用结扎冠状动脉左前降支的方法建立大鼠心肌梗死模型,分别将制备的培养基和同种异体BM-MNCs悬液心外膜下植入对照组和移植组梗死心肌周围.移植术后4周,超声心动图及血流动力学检查评价左室形态及左室功能,并观察梗死区心肌内移植的BM-MNCs及其周边组织的形态学特点.结果:移植术后4周,与假手术组相比,对照组及移植组左室收缩末期内径(LVEDs)、左室舒张末期内径(LVEDd)和左室舒张末压(LVEDP)均升高(P<0.01),左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、左室收缩压(LVSP)、左室压大上升速率(+dp/dtmax)和左室压大下降速率(-dp/dtmax)均降低(P<0.01).移植组LVEDs、LVEDd和LVEDP低于对照组(P<0.01),LVEF、LVFS、+dp/dtmax和-dp/dtmax高于对照组(P<0.01).免疫组织化学检查证实移植组心肌梗死区内有BrdU标记阳性的BM-MNCs移植细胞存活.结论:同种异体BM-MNCs移植可以减轻左室重构,改善急性心肌梗死后的心脏功能.

    作者:侯剑峰;法宪恩;张蕾;张瑞成 刊期: 2006年第05期

  • 食物过敏患儿十二指肠黏膜组织内IL-4和IL-5 mRNA的表达

    目的:探讨食物过敏患儿十二指肠黏膜组织内IL-4和IL-5 mRNA的表达.方法:取18例食物过敏患儿和16例胃镜检查正常儿童(对照组)十二指肠黏膜活检组织,进行病理检查,并采用RT-PCR检测其中IL-4和IL-5mRNA的表达.常规生化方法检测血清IgE水平.结果:食物过敏患儿十二指肠黏膜组织内IL-4、IL-5 mRNA水平及血清IgE水平高于对照组(P<0.05);食物过敏患儿十二指肠黏膜组织内IL-4、IL-5 mRNA水平与血清IgE水平呈正相关(r分别为0.674、0.586,P均<0.05),而与肠黏膜组织的炎症程度无相关性.结论:食物过敏反应可诱导肠黏膜内免疫细胞分泌IL-4和IL-5,并协同刺激局部IgE的分泌.

    作者:张春景;靳静;刘占举 刊期: 2006年第05期

  • 小剂量琥乙红霉素治疗新生儿喂养不耐受32例

    新生儿喂养不耐受常见的临床表现为呕吐、喂哺困难、奶量不足、胃潴留、腹胀等,常影响患儿生长发育,而完全静脉营养价格较贵,且易导致肠黏膜萎缩及乳糖酶缺乏[1].作者应用小剂量琥乙红霉素胃管内注入治疗新生儿喂养不耐受疗效较好,现总结如下.

    作者:袁焕珍;孙君轶;张永军 刊期: 2006年第05期

  • 非小细胞肺癌组织中C-erbB-2蛋白的表达

    目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中C-erbB-2蛋白的表达.方法:应用免疫组化SP法检测10例正常肺组织和42例NSCLC组织(腺癌20例,鳞癌22例;有淋巴结转移19例;分化程度Ⅰ级12例,Ⅱ级19例;Ⅲ级11例)中C-erbB-2蛋白的表达状况.结果:42例NSCLC组织中,C-erbB-2蛋白的阳性表达率47.6%(20/42)高于正常肺组织的0/10(P<0.05).腺癌组织中C-erbB-2蛋白的阳性表达率65.0%(13/20)高于鳞癌的31.8%(7/22)(P<0.05).C-erbB-2蛋白表达率与NSCLC组织学分级呈正相关,有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者(P均<0.05).结论:C-erbB-2蛋白的检测对NSCLC患者的诊治和预后评估有积极意义.

    作者:刘萍;田薇薇;梁冰 刊期: 2006年第05期

  • 狼疮性肾炎肾组织中环氧合酶-2的表达

    目的:探讨环氧合酶-2(COX-2)与狼疮性肾炎(LN)的关系.方法:肾脏穿刺获得LN肾组织标本25例,其中LNⅡ6例,LNⅢa 7例,LNⅣa12例;以肾脏肿瘤摘除后远离肿瘤的正常肾组织6例作对照.应用免疫组化PV法检测2组肾组织中COX-2的表达.结果:正常肾组织中COX-2主要表达于致密斑、髓质间质细胞、肾血管的内皮细胞、平滑肌细胞;LN组织中,除上述部位外,肾小球的系膜区、足突细胞、肾小管间质组织中亦有COX-2的表达.LN肾组织中的COX-2蛋白表达较正常肾组织明显升高(P<0.01),且随着LN肾组织病理损害程度的加重,COX-2的表达增加(P<0.01).结论:COX-2可能参与LN的发生、发展.

    作者:郑朝晖;赵占正;刘升云;刘章锁 刊期: 2006年第05期

  • 人脑胶质瘤组织中PTEN与VEGF的表达

    目的:检测人胶质瘤组织中PTEN、VEGF的表达,分析其与胶质瘤血管形成和肿瘤分化的关系.方法:应用免疫组织化学SP法检测52例胶质瘤(Ⅰ级15例,Ⅱ级19例,Ⅲ级11例,Ⅳ级7例)组织中PTEN和VEGF蛋白阳性表达情况.结果:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤组织中PTEN蛋白阳性表达率分别为13/15、14/19、4/11和2/7,Ⅰ、Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级组织比较,差异有统计学意义(x2=10.78,P=0.009);VEGF蛋白阳性表达率分别为3/15、5/19、6/11和6/7,Ⅰ、Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级组织比较,差异有统计学意义(x2=9.26,P=0.002).胶质瘤组织中PTEN与VEGF表达呈负相关(rs=-0.385,P=0.005).结论:PTEN低表达和VEGF高表达与胶质瘤分化程度有关.

    作者:倪峰;李红伟;杨波 刊期: 2006年第05期

  • 食管鳞癌组织中血管内皮生长因子mRNA的表达

    目的:探讨食管癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平与肿瘤侵袭和转移的关系.方法:应用实时荧光定量RT-PCR及基因芯片技术对15例食管鳞癌组织和相应正常食管黏膜组织进行VEGF mRNA检测.结果:15例食管鳞癌组织中有8例VEGF mRNA上调表达,其平均表达水平,cDNA微阵列和实时荧光定量RT-PCR检测结果分别为(3.82±0.75)和(4.11±0.89);VEGF mRNA的表达与食管癌患者的年龄、性别、肿瘤的部位、大 小、形状、病理分化程度等临床病理特征无关,与临床分期、远处转移有关.结论:VEGF在食管癌浸润和转移过程中发挥重要作用,检测肿瘤组织中VEGF mRNA水平对预测食管癌的侵袭和转移具有重要的临床意义.

    作者:李沛;凌志强;杨洪艳;赵明耀;黄幼田;马俊芬;董子明 刊期: 2006年第05期

  • PTCD加胆管内支架置入合并三维适形放射治疗晚期胆管癌11例

    晚期胆管癌手术治疗难度大,切除率低,仅为15%~64.1%[1],且预后较差,术后复发率高,未行外科治疗的患者平均生存时间仅为3个月[2].本院2002年10月至2004年11月,采用经皮经肝胆管穿刺引流术(percutaneous transhepatic cholangiography and drainage,PTCD)加胆管内置入支架并三维适形放疗技术治疗不能手术的晚期胆管癌11例,疗效满意,报道如下.

    作者:葛红;郭晨阳;叶柯;胡洪涛;黎海亮 刊期: 2006年第05期

  • 罗哌卡因联合芬太尼自控分娩镇痛对第二产程的影响

    硬脊膜外阻滞无痛分娩(LEA)是目前应用广泛的无痛分娩方法之一.由病人自控的硬膜外麻醉(patient controlled epidural analgesia,PCEA)是否会对LEA有负面影响,长期以来一直争论不休,尤其是否会延长第二产程是争论的焦点之一[1].作者观察了罗哌卡因PCEA分娩镇痛对第二产程的影响,报道如下.

    作者:王璐;王锐;贾艳霞 刊期: 2006年第05期

  • 实时荧光定量RT-PCR和cDNA基因芯片方法分析食管癌组织中基因的表达

    目的:采用实时荧光定量RT-PCR和cDNA基因芯片2种技术分析食管癌细胞基因表达的特征.方法:应用cDNA基因芯片筛选15例食管癌基因表达谱,用实时荧光定量RT-PCR验证其中16个基因的表达变化.结果:实时荧光定量RT-PCR和cDNA基因芯片技术对16个基因的检测结果一致,不仅变化方向相同,而且表达值非常接近.结论:cDNA基因芯片和实时荧光定量RT-PCR分析基因表达变化都是可信的,基因芯片筛选基因表达谱具有高通量大规模的特点,而实时荧光定量RT-PCR则适合单个基因表达变化的研究,两者互为补充和印证.

    作者:李沛;凌志强;杨洪艳;黄幼田;赵继敏;郑智敏;董子明 刊期: 2006年第05期

  • 宫颈癌伴输尿管梗阻19例治疗体会

    输尿管梗阻导致的肾功能衰竭是晚期宫颈癌患者的主要并发症之一[1].1995年4月至2004年12月,作者共收治宫颈癌引起的输尿管梗阻19例,报道如下.

    作者:王继征;李鹏;孙文淇;杨立新;张洪波 刊期: 2006年第05期

  • 水样预处理法分离溶藻细菌效果观察

    目的:探讨如何从水华期采集的水样中有效地分离溶解蓝藻的细菌.方法:从富营养化池塘中采集表层水样,采集的水样分3等份,分别进行如下处理:①经0.8 μm纤维滤膜过滤处理.②0.22 μm纤维滤膜过滤,氯仿剧烈震荡处理5 min.③103.42 kPa、121.5℃条件下灭菌20 min.将3种处理水样分别与液体培养供试蓝藻共培养,通过溶藻试验、富集培养和平板划线法筛选溶藻细菌.结果:筛选出7株能够抑制供试蓝藻生长或者溶解供试蓝藻的细菌.结论:本方法能有效地分离溶藻细菌,值得推广.

    作者:李永欣;韩绍印;席宇;吴刚;赵以军 刊期: 2006年第05期

  • 三维DSA栓塞治疗脑动脉瘤32例

    脑动脉瘤(cerebral aneurysm,CA)破裂是自发性蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)的主要原因.以往,DSA是诊断CA的金标准,但由于血管重叠和位置关系,有时会发生漏诊.近来,随着三维DSA的应用,CA的检出率和栓塞治疗成功率越来越高[1,2].2004年11月至2005年6月,作者采用Philips Alleura型三维DSA系统诊治SAH患者40例,报道如下.

    作者:翟水亭;宗登伟;李天晓;曹会存;王子亮;白卫星;孟艳丽 刊期: 2006年第05期

  • 食管鳞癌分化相关基因表达谱及其染色体精确定位

    目的:探讨染色体异常与食管鳞癌分化的相关性.方法:通过cDNA基因芯片分析15例食管鳞癌细胞基因表达谱,结合临床病理资料筛选食管癌分化相关基因,并在染色体上精确定位.结果:与食管鳞癌分化直接相关的基因有16条,包括MET,KRT4,EGFR,KRT13,CSK,EGR1,CCND1,EPHA2,CEACAM1,PTPN2,HSPBP1,CDKN1B,BCL2L2,SDC1,CDH1,CTNNA1;主要集中在染色体1p,2p,5q,7p,7q,11q,12p,12q,14q,15q,16q,17q,18p,19q.结论:食管鳞癌发生和演变涉及多条染色体异常的积累.

    作者:李沛;凌志强;杨洪艳;黄幼田;赵明耀;马俊芬;董子明 刊期: 2006年第05期

  • 立体定向置管引流术治疗丘脑、基底节区脑出血60例

    脑出血,特别是部位较深的丘脑、基底节区(包括尾状核、豆状核等)血肿,手术创伤大,预后欠佳[1].2003年3月至2004年6月,作者采用立体定向置管尿激酶注入溶解引流血肿方法治疗丘脑、基底节区脑出血60例,疗效满意,报道如下.

    作者:胡炜;张士中;王献文 刊期: 2006年第05期

  • 慢性粒细胞白血病患者树突状细胞抗原加工递呈和迁移功能观察

    目的:研究细胞因子体外联合诱导培养的慢性粒细胞白血病(CML)患者树突状细胞(DCs)的表型和抗原递呈、分泌和迁移功能的变化.方法:分离CML患者(CML组)和健康志愿者(正常组)外周血单个核细胞(PMNCs),经培养获取贴壁细胞,将CML组和正常组的贴壁细胞及K562细胞用细胞因子rhGM-CSF、rhIL-4、TNF-α体外诱导10 d后,流式细胞仪检测细胞的免疫表型;培养5 d后,用ELISA检测细胞的内吞功能;应用混合淋巴细胞培养分析3组DCs对静息T细胞的免疫刺激活性.结果:正常组、CML组、K562组DCs的特异性标志CD83和共刺激分子标记CD80和CD86以及CD11和HLA-DR的表达差异无统计学意义(P>0.05);DCs的抗原吞噬、迁移能力和对T细胞的免疫刺激活性,CML组和K562组之间差异无统计学意义(P>0.05),CML组和正常组间差异有统计学意义(P<0.05).结论:CML患者DCs的免疫表型和正常人相似,但其抗原捕获、递呈和迁移功能有缺陷.

    作者:张琳;周健;胡杰英 刊期: 2006年第05期

  • 新生儿缺氧缺血性脑病合并心肌损害96例疗效观察

    1998年2月至2004年12月,分别采用复方丹参与纳络酮治疗新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)合并心肌损害,疗效较好,现将结果报道如下.

    作者:李世林 刊期: 2006年第05期

郑州大学学报(医学版)杂志

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